環(huán)狀RNA與結(jié)直腸癌相關(guān)性研究進(jìn)展

李 軒， 榮寶海， 解廣東， 張曉雙， 趙 微， 周永坤

結(jié)直腸癌是臨床上常見惡性腫瘤之一,據(jù)世界衛(wèi)生組織調(diào)查,結(jié)直腸癌在各類惡性腫瘤的發(fā)病率高居第3位[1]。I期、Ⅱ期結(jié)直腸癌檢出后5年生存率分別為91%和82%，癌細(xì)胞擴(kuò)散到臨近器官及淋巴組織后5年生存率降至70%以下，癌細(xì)胞播散到遠(yuǎn)處器官的5年生存率下降至12%，然而早期患者的檢出率不足40%[2]，因此，尋找一種更早的、更確切的結(jié)直腸癌篩查方法已成一個(gè)亟待解決的任務(wù)。

環(huán)狀RNA（Circular RNA，circRNA）作為一種新型的RNA分子，以共價(jià)閉合環(huán)結(jié)構(gòu)存在，與傳統(tǒng)線性RNA相比沒(méi)有5’端的帽子結(jié)構(gòu)和3’端 poly(A)尾巴[3]，這種特有的結(jié)構(gòu)具有高穩(wěn)定性的特點(diǎn)，使其能夠抵抗RNA外切酶的水解作用，在細(xì)胞中能夠持續(xù)穩(wěn)定表達(dá)[4]。CircRNA在腫瘤中能特異性表達(dá)，發(fā)揮癌基因或抑制癌基因的作用，與腫瘤的原發(fā)灶生長(zhǎng)、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、分期等密切相關(guān)[5]。因此circRNA有成為結(jié)直腸腫瘤早期診斷的生物標(biāo)記物的潛力，并有希望成為結(jié)直腸癌新的治療靶點(diǎn)。

1953—2018，中國(guó)石化第五建設(shè)公司（以下簡(jiǎn)稱五建）已經(jīng)走過(guò)65年的發(fā)展歷程。65年風(fēng)雨，五建經(jīng)歷了工程建設(shè)市場(chǎng)的起起伏伏，經(jīng)歷了從服務(wù)一地到服務(wù)全國(guó)的經(jīng)營(yíng)戰(zhàn)略變革，經(jīng)歷了從國(guó)內(nèi)市場(chǎng)走向海外市場(chǎng)的重重考驗(yàn)。

1 環(huán)狀RNA的生物特性

CircRNA的生物特性主要有以下幾個(gè)方面：（1）穩(wěn)定性。circRNA以共價(jià)閉合環(huán)結(jié)構(gòu)存在，沒(méi)有帽子和尾巴結(jié)構(gòu)。這種特有的結(jié)構(gòu)具有高穩(wěn)定性的特點(diǎn)，使circRNA能夠抵抗RNA外切酶的水解作用，與其他類型的RNA相比，circRNA在細(xì)胞中能夠持續(xù)穩(wěn)定表達(dá)。（2）多樣性。CircRNA種類繁多，廣泛存在于真核細(xì)胞中，在人類成纖維細(xì)胞中通過(guò)高通量測(cè)序技術(shù)檢測(cè)到超過(guò)25000種circRNA，某些情況下circRNA的表達(dá)甚至超過(guò)其相應(yīng)線性mRNA的10倍以上[6]。（3）保守性。多數(shù)circRNA中的序列在進(jìn)化上是保守的，研究人員不僅探明哺乳動(dòng)物的circRNA序列具有保守性，而且在進(jìn)化較遠(yuǎn)的果蠅上保守性也得到了證實(shí)[7]。（4）特異性。同一種circRNA在不同時(shí)期或者不同組織中的表達(dá)可以存在很大差異，同樣在疾病和非疾病組織中的表達(dá)有顯著不同[8]。例如DOCK1基因的circRNA于乳腺癌細(xì)胞系Mcf7中呈現(xiàn)高表達(dá)，但在肝癌細(xì)胞系Hep G2和肺癌細(xì)胞系A(chǔ)549中卻表達(dá)極低[9]。因此CircRNA的特異性是運(yùn)用于臨床疾病診斷標(biāo)志物的基礎(chǔ)。

2 環(huán)狀RNA的生物學(xué)功能

2.1 競(jìng)爭(zhēng)的內(nèi)源性 RNA或miRNA海綿作為內(nèi)源性RNA, circRNA內(nèi)部含有相關(guān)miRNA的應(yīng)答元件，可以通過(guò)miRNA結(jié)合位點(diǎn)的競(jìng)爭(zhēng)來(lái)負(fù)性調(diào)控miRNA的活動(dòng)[10]。例如人類circRNA-7和Y染色體性別決定區(qū)(sexdetermining region of the Y, SRY)就經(jīng)典的體現(xiàn)了miRNA海綿效應(yīng)。Hansen等[11]研究發(fā)現(xiàn)小鼠的性別特異性基因sty circRNA可以競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合miR-138來(lái)調(diào)控其表達(dá)水平。同樣，circHIPK3作為miR-124海綿，能有效抑制miR-124在癌細(xì)胞中的功能，從而促進(jìn)癌細(xì)胞的增殖[12]。

基于合法性的一般理論，社會(huì)組織在社區(qū)治理中的合法性應(yīng)由社區(qū)治理的制度環(huán)境和利益相關(guān)者界定。借助Scott的規(guī)制合法性、規(guī)范合法性、認(rèn)知合法性三分法，在社區(qū)治理中社會(huì)組織的三種合法性應(yīng)當(dāng)分別有不同的表現(xiàn)形式(見表1)?；鶎诱块T、社區(qū)自治主體(社區(qū)居委會(huì))、社區(qū)其他治理主體和社區(qū)居民都是重要的利益相關(guān)者。社會(huì)組織需要通過(guò)得到這些主體以及這些主體之間長(zhǎng)期作用形成的環(huán)境的接納、認(rèn)可，獲得合法性，包括認(rèn)可其作為社區(qū)治理主體資格與地位、認(rèn)同其行動(dòng)和作用等方面。社會(huì)組織在社區(qū)治理中的合法化過(guò)程圍繞這些被認(rèn)可的結(jié)果展開行動(dòng)。

2.4 翻譯蛋白質(zhì)或多肽 大多數(shù)反向剪接產(chǎn)生的circRNA主要存在于細(xì)胞質(zhì)中，線性mRNA翻譯通常需要5'端帽子和3'端poly（A）尾巴的結(jié)構(gòu)來(lái)保持穩(wěn)定。circRNA通常情況下不被認(rèn)為具有翻譯功能。但Chen 等[15]研究發(fā)現(xiàn)若circRNA具有內(nèi)部核糖體進(jìn)入位點(diǎn)（Internal ribosome entry site, IRES）時(shí)，就可以在細(xì)胞中啟動(dòng)翻譯功能，通過(guò)測(cè)試部分人工合成的circRNA，發(fā)現(xiàn)其含有IRES，說(shuō)明這些circRNA很可能有編碼蛋白質(zhì)的功能。這種方式可以提供更多的多肽序列，并且因?yàn)楹颂求w不需要與RNA模板重復(fù)結(jié)合，因此還可以提高多肽的產(chǎn)量[16]。角質(zhì)細(xì)胞瘤中，circ-FBXW7能夠編碼產(chǎn)生蛋白，盡管circ-FBXW7及其編碼的蛋白表達(dá)水平較低，但其蛋白能夠抑制惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖和細(xì)胞的周期進(jìn)展[17]。CircRNA的翻譯以及在腫瘤組織中的調(diào)控作用極有可能為circRNA的研究提供新的思路。

2.3 調(diào)控親代基因的表達(dá) CircRNA可以調(diào)節(jié)親代基因組的轉(zhuǎn)錄。雖然大多數(shù)circRNA位于細(xì)胞質(zhì)中，但有部分circRNA如ElciRNA(外顯子-內(nèi)含子circRNA)基本位于真核細(xì)胞的細(xì)胞核內(nèi)，在轉(zhuǎn)錄水平上有發(fā)揮作用的傾向。Li[14]等人發(fā)現(xiàn)約20%的ElciRNAs保留內(nèi)含子，使得這一亞類的circRNA更為獨(dú)特，同時(shí)具有ElciRNA和ciRNA（內(nèi)含子circRNA）的功能。ElciRNA定位于細(xì)胞核內(nèi)，與U1小核糖核蛋白（small nuclear ribonucleoprotein particle, snRNP）相互作用來(lái)促使其親本基因的轉(zhuǎn)錄，通過(guò)ElciRNA與U1snRNA的RNA-RNA特異作用，增強(qiáng)親代基因的順式表達(dá)；另外，有一部分ElciRNA在細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄位點(diǎn)之外的區(qū)域聚集，提示這部分ElciRNA可能通過(guò)反式作用方式調(diào)控轉(zhuǎn)錄。

3.1 環(huán)狀RNA成為結(jié)直腸癌診斷標(biāo)志物 Lin等[19]將健康組與結(jié)直腸癌患者組血漿中三種circRNA（circ-CCDC66,circ-ABCC1，circ-STIL）對(duì)比發(fā)現(xiàn)，結(jié)直腸癌患者的三種circRNA水平顯著降低，且三種circRNA的ROC曲線下面積（AUC）為0.780，高于癌胚抗原（CEA）、糖類抗原（CA19-9）等傳統(tǒng)蛋白質(zhì)生物標(biāo)志物。將circRNA與CEA、CA19-9聯(lián)合應(yīng)用，可以調(diào)高結(jié)直腸腫瘤的診斷能力（AUC=0.855）。此外結(jié)腸腺瘤、腺瘤性息肉等癌前病變的血漿circ-CCDC66, circ-ABCC1水平降低，為結(jié)直腸癌的更早期診斷提供了可能，同時(shí)三個(gè)circRNA小組提高了CEA陰性和CA19-9陰性的結(jié)直腸腫瘤的診斷能力。Wang等[20]發(fā)現(xiàn)circ_001988的表達(dá)與結(jié)直腸癌的分化及神經(jīng)浸潤(rùn)相關(guān)（P＜0.05），并且circ_001988的ROC曲線下面積為0.788，表明circ_001988很可能成為結(jié)直腸癌的新型診斷標(biāo)志物。這些研究表明環(huán)狀RNA在結(jié)直腸癌的早期監(jiān)測(cè)篩查方面的潛力，通過(guò)與傳統(tǒng)蛋白質(zhì)生物標(biāo)志物結(jié)合，提高了診斷的特異性和準(zhǔn)確性。

3 環(huán)狀RNA與結(jié)直腸癌相關(guān)性

3.4 環(huán)狀RNA調(diào)控結(jié)直腸癌細(xì)胞微環(huán)境 Zhang等[35]研究表明缺氧可以刺激癌癥的轉(zhuǎn)移，缺氧與缺氧誘導(dǎo)因子（hypoxia-inducible factor, HIF）家族的表達(dá)有關(guān)，缺氧時(shí)HIF可促進(jìn)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）分泌，VEGF促進(jìn)心血管網(wǎng)絡(luò)的生成，進(jìn)而為癌細(xì)胞提供氧氣與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)[36]，從而促進(jìn)了癌癥的EMT。缺氧環(huán)境下T淋巴細(xì)胞的毒性作用被削弱，減輕了T淋巴細(xì)胞抑制癌癥轉(zhuǎn)移并誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡的作用[37]。Dang等[38]發(fā)現(xiàn)Cric-001072可以通過(guò)調(diào)控miRNA-186/HIF-1α通路來(lái)影響血管內(nèi)皮細(xì)胞的遷徙，從而推動(dòng)癌癥的轉(zhuǎn)移。環(huán)狀RNA可以通過(guò)影響癌細(xì)胞的缺氧環(huán)境來(lái)調(diào)控癌癥的EMT。

2.2 生成RNA蛋白復(fù)合物來(lái)調(diào)節(jié)RBP RNA結(jié)合蛋白（RNA Binding Protein，RBP）是RNA在調(diào)節(jié)代謝過(guò)程中產(chǎn)生的,其涉及基因轉(zhuǎn)錄翻譯等重要過(guò)程。CircRNA可與RBP直接結(jié)合形成RNA蛋白復(fù)合物對(duì)RBP起調(diào)節(jié)作用，形成多種特異性的circRNA,進(jìn)而影響相關(guān)蛋白，發(fā)揮調(diào)節(jié)作用。剪接因子MBL（muscleblind-like）是一種RBP，在果蠅與人類中都可以結(jié)合其親本基因的第2外顯子，促使其環(huán)化形成circMbl，circMbl同時(shí)能與MBL結(jié)合來(lái)降低MBL的豐度，從而減少circMbl的生成[13]。

以上circRNA生物學(xué)特性，提示我們circRNA可能在轉(zhuǎn)錄或者轉(zhuǎn)錄后水平發(fā)揮作用，通過(guò)編碼蛋白質(zhì)或者調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄來(lái)發(fā)揮其生物學(xué)功能，參與結(jié)直腸腫瘤的發(fā)生發(fā)展、增殖轉(zhuǎn)移等過(guò)程。

3.2 環(huán)狀RNA與結(jié)直腸癌的發(fā)生 Circ-0024717在試驗(yàn)中被證實(shí)在結(jié)直腸癌中的表達(dá)下調(diào)，并與TNM分期和患者的總體生存率顯著相關(guān)。Circ-0024717的過(guò)表達(dá)可以明顯抑制結(jié)直腸癌細(xì)胞的增殖和集落的形成，并在體外誘導(dǎo)細(xì)胞停滯在G0/G1期。并且circ-0024717能通過(guò)上調(diào)細(xì)胞周期抑制蛋白P16的表達(dá)來(lái)抑制結(jié)直腸腫瘤的生長(zhǎng)與增殖[21]。Circ-0067835來(lái)自于3號(hào)染色體上的IFT80，又稱為circ-IFT80。Feng等[22]研究58例結(jié)直腸癌中circ_IFT80的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)circ-IFT80在結(jié)直腸癌的血清外泌體、結(jié)直腸癌組織和結(jié)直腸中細(xì)胞系中顯著上調(diào)。通過(guò)熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)證實(shí)，circ-IFT80、HOB7與miR-1236-3P負(fù)相關(guān)，circ-IFT80與HOXB7呈正相關(guān)共同促進(jìn)結(jié)直腸癌的發(fā)展[23]?？梢娊Y(jié)直腸癌細(xì)胞的發(fā)生和生長(zhǎng)與環(huán)狀RNA密切相關(guān)。

使用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS 21.0中導(dǎo)入本次數(shù)據(jù)進(jìn)行處理和分析,以(±s)表示計(jì)量資料,組內(nèi)比較和組間比較分別用配對(duì)樣t和獨(dú)立樣本t檢驗(yàn),計(jì)數(shù)資料以x2檢驗(yàn),當(dāng)P<0.05時(shí),存在明顯差異,統(tǒng)計(jì)學(xué)具有意義。

3.3 環(huán)狀RNA與結(jié)直腸癌的增殖轉(zhuǎn)移 Xie等[24]發(fā)現(xiàn)circ-001569能夠抑制結(jié)直腸癌的細(xì)胞增殖和侵襲。Circ-001569作為海綿與miR-145結(jié)合并抑制其轉(zhuǎn)錄，上調(diào)miR-145靶點(diǎn)即FMNL2的表達(dá)，F(xiàn)MNL2能夠促進(jìn)結(jié)直腸癌細(xì)胞的增殖、轉(zhuǎn)移、侵襲和上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化。Circ-0026344被證實(shí)與大腸癌的增殖侵襲、上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）顯著相關(guān)[25]，circ-0026344的下調(diào)促進(jìn)了miR-183，miR-183的高表達(dá)被證實(shí)與結(jié)直腸癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、高pTNM分期和腫瘤復(fù)發(fā)相關(guān)[26]。CCL20和CXCL8被證實(shí)協(xié)同誘導(dǎo)結(jié)直腸癌的轉(zhuǎn)移與EMT[27-28]，并降低circ-0026344的表達(dá)，而circ-0026344的過(guò)表達(dá)則會(huì)抑制CCL20和CXCL8協(xié)同誘導(dǎo)作用。circ-0001178[29]高表達(dá)的結(jié)直腸癌患者更容易出現(xiàn)轉(zhuǎn)移，研究顯示circ-0001178通過(guò)海綿化miR-382、miR-587、miR-616上調(diào)ZEB1來(lái)促進(jìn)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化[30]，從而推動(dòng)腫瘤的轉(zhuǎn)移擴(kuò)散。另外ZEB1會(huì)通過(guò)與circ-0001178啟動(dòng)子區(qū)結(jié)合增加circ-0001178的表達(dá)。Pei等[31]采用雙熒光素酶報(bào)告法與RIP法證實(shí)circ-0000218在結(jié)直腸癌中呈現(xiàn)高表達(dá)，circ-0000218通過(guò)海綿化miR-139-3P上調(diào)RAB1A促進(jìn)結(jié)直腸癌的發(fā)展[32-33]。Circ-0000218的高表達(dá)明顯促進(jìn)TNM分期，抑制circ-0000218時(shí)則相反。Wang等[34]發(fā)現(xiàn)circ-0000567的表達(dá)水平在結(jié)直腸癌組織和結(jié)直腸細(xì)胞系中明顯下調(diào)，circ-0000567的降低與結(jié)直腸腫瘤的大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、TNM分期呈負(fù)相關(guān)。此外，在體外試驗(yàn)中敲除cir-0000567基因后促進(jìn)了結(jié)直腸腫瘤的增殖與轉(zhuǎn)移。結(jié)直腸癌的增殖轉(zhuǎn)移與環(huán)狀RNA關(guān)系密切，環(huán)狀RNA通過(guò)circRNA-miRNA-mRNA軸來(lái)控制結(jié)直腸癌細(xì)胞的增殖轉(zhuǎn)移，可以作為控制結(jié)直腸癌細(xì)胞功能的手段，為環(huán)狀RNA在結(jié)直腸癌治療方面提供了新的研究思路。

翻轉(zhuǎn)課堂的教學(xué)效率提高，課堂富余時(shí)間較多，使我們可以根據(jù)教學(xué)內(nèi)容多設(shè)計(jì)一些練習(xí)放到課內(nèi).作業(yè)設(shè)計(jì)一般要求在25分鐘左右，以近年來(lái)的高考真題與模擬試題為主，有一定的坡度.

近期邵婧嫻[18]等利用circRNA芯片得出結(jié)直腸癌組織與對(duì)應(yīng)癌旁組織circRNA表達(dá)譜變化，研究結(jié)果表明差異表達(dá)2倍以上的circRNA共有892條，腫瘤組織相對(duì)高表達(dá)的有412條，低表達(dá)的有480條，其中降低10倍以上差異的有6條，升高10倍以上差異的有40條?？梢奵ircRNA在結(jié)直腸腫瘤領(lǐng)域的研究大有潛力。

3.5 環(huán)狀RNA有望成為結(jié)直腸癌治療靶點(diǎn) Circ-ITGA7是由ITGA7的外顯子4反向剪接衍生出的一種新circRNA，其對(duì)應(yīng)的線性ITGA7通過(guò)線性剪切而成[39]。Li等[40]通過(guò)實(shí)驗(yàn)研究證明circ-ITGA7在結(jié)直腸癌組織和細(xì)胞系中均顯著下調(diào)，且表達(dá)水平的降低與結(jié)直腸癌生長(zhǎng)相關(guān)，circ-ITGA7與ITGA7的表達(dá)可以抑制結(jié)直腸細(xì)胞的生長(zhǎng)與轉(zhuǎn)移。Circ-ITGA7或ITGA7的下調(diào)促進(jìn)了結(jié)直腸腫瘤細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)移。Circ-ITGA7通過(guò)與miR-370-3p競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合，從而促使ITGA7的轉(zhuǎn)錄，Yang等[41]還發(fā)現(xiàn)Circ-ITGA7可以海綿miR-3187-3p進(jìn)而上調(diào)ASXL1，以此來(lái)抑制結(jié)直腸癌細(xì)胞的增殖與轉(zhuǎn)移，提示Circ-ITGA7可以成為結(jié)直腸癌的潛在治療靶點(diǎn)。Wu等[42]證實(shí)Circ-ZNF609和Gli-1在結(jié)直腸癌中的表達(dá)顯著上調(diào)，miR-150明顯下調(diào)。通過(guò)相關(guān)性分析法得出circ-ZNF609與Gli-1呈正相關(guān)，miR-150與circ-ZNF609和Gli-1呈負(fù)相關(guān)。并且下調(diào)的circ-ZNF609抑制人結(jié)直腸癌細(xì)胞（HCT116）的轉(zhuǎn)移，敲除circ-ZNF609后通過(guò)miR-150過(guò)度表達(dá)從而降低Gli-1并抑制癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移[43-44]，為結(jié)直腸癌靶向治療研究提供了思路。Li等[45]通過(guò)實(shí)驗(yàn)測(cè)定88例結(jié)直腸癌組織和細(xì)胞系發(fā)現(xiàn)其中circ-FMN2的表達(dá)明顯上調(diào)，circ-FMN2基因敲除后抑制了癌細(xì)胞的增殖和遷徙,證明circ-FMN2有望成為新型治療靶點(diǎn)。敲除部分環(huán)狀RNA已被證實(shí)可以影響癌癥的進(jìn)展，為進(jìn)一步研究新型靶向藥提供了理論依據(jù)，成為結(jié)直腸癌基因治療的新突破。

3.6 環(huán)狀RNA預(yù)測(cè)結(jié)直腸癌術(shù)后復(fù)發(fā) 有數(shù)據(jù)顯示，約有20%至30%的結(jié)直腸癌患者術(shù)后出現(xiàn)腫瘤復(fù)發(fā),從而導(dǎo)致患者生存率下降[46]。對(duì)結(jié)直腸癌患者進(jìn)行準(zhǔn)確的風(fēng)險(xiǎn)分析是術(shù)后治療決策的關(guān)鍵。目前常用臨床病理分期來(lái)判斷患者術(shù)后復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)，然而這種方法并不充分[47]。CicrRNA具有進(jìn)化保守、組織特異性表達(dá)、比線性miRNA更穩(wěn)定的特點(diǎn)[48-49]。已被證實(shí)可以作為結(jié)直腸癌的新型診斷標(biāo)志物[50-52]。Ju等[53]對(duì)667例結(jié)腸癌患者術(shù)后冰凍組織RNA序列進(jìn)行分析，分析術(shù)后復(fù)發(fā)性結(jié)直腸癌患者和術(shù)后無(wú)復(fù)發(fā)性結(jié)直腸癌患者的circRNA表達(dá)差異，發(fā)現(xiàn)了circ-0122319、circ-0087391、circ-0079480及circ-0008039四組RNA能夠可靠預(yù)測(cè)結(jié)直腸癌的術(shù)后復(fù)發(fā)。我們可通過(guò)以上四組環(huán)狀RNA來(lái)區(qū)分結(jié)直腸癌術(shù)后患者復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)的高低，以便對(duì)患者進(jìn)行精細(xì)化治療。

CGA可以在多個(gè)場(chǎng)所進(jìn)行，由于目的及人群不同，往往評(píng)估的側(cè)重點(diǎn)、量表的種類和評(píng)估干預(yù)的流程有所不同。根據(jù)不同的場(chǎng)所，分為針對(duì)綜合醫(yī)院住院患者的CGA（老年急性醫(yī)療單元、老年醫(yī)學(xué)評(píng)估和管理單元、老年康復(fù)單元），出院時(shí)的轉(zhuǎn)診醫(yī)療CGA、社區(qū)居家管理CGA和老年綜合評(píng)估門診（geriatric evaluation and management clinic，GEM-clinic）。CGA應(yīng)用于老年人連續(xù)醫(yī)療的各個(gè)環(huán)節(jié)，衰弱、失能、共病老年患者獲益最大［4］。

3.7 環(huán)狀RNA與結(jié)直腸癌的預(yù)后 有研究顯示結(jié)直腸癌組織和細(xì)胞系中circ-0136666呈顯著高表達(dá)，circ-0136666的高表達(dá)還與結(jié)直腸癌患者的總體生存率低相關(guān)[54]。Hsiao等[55]發(fā)現(xiàn)circ-CCDC66在結(jié)直腸癌和息肉中的表達(dá)明顯上調(diào)，實(shí)驗(yàn)證明結(jié)直腸癌細(xì)胞中circ-CCDDC66通過(guò)調(diào)控多個(gè)癌基因參與細(xì)胞增殖、侵襲等多個(gè)病理過(guò)程，且與結(jié)直腸癌的不良預(yù)后相關(guān)。因此，環(huán)狀RNA可以更精確地預(yù)測(cè)患者的總體生存率及預(yù)后。

4 展望

近年來(lái)大量circRNA的發(fā)現(xiàn)，已成為分子生物學(xué)的研究重點(diǎn)。目前circRNA研究還沒(méi)有一套規(guī)范的體系，部分circRNA有些混亂。此外現(xiàn)有的circRNA作用機(jī)制假說(shuō)也比較局限，多數(shù)研究將circRNA的作用機(jī)制歸納為circRNA-miRNA-mRNA軸[56-58]，這種假說(shuō)尚未被證實(shí)適用于大多數(shù)RNA。已有研究證實(shí)circRNA參與了結(jié)直腸腫瘤的增殖轉(zhuǎn)移以及化療藥物耐藥[59-60]，相信隨著circRNA對(duì)腫瘤影響機(jī)制的進(jìn)一步闡明，circRNA將極有可能成為新的結(jié)直腸癌癥治療靶點(diǎn)，為開發(fā)新型高效的抗腫瘤藥物的治療提供方向和思路。臨床診斷方面circRNA擁有極高的研究?jī)r(jià)值。因其獨(dú)特的閉合環(huán)狀結(jié)構(gòu)，可以抵抗核酸外切酶的降解作用，在體液中有更穩(wěn)定的性能，在唾液、血漿、尿液以及外泌體中都能穩(wěn)定存在[61-63]，并且具有組織特異性表達(dá)的功能，日后有可能代替CEA、CA19-9成為新型腫瘤診斷標(biāo)志物[64]。隨著circRNA與腫瘤影響機(jī)制的進(jìn)一步研究，將會(huì)有更多在結(jié)直腸癌的差異表達(dá)circRNA被發(fā)現(xiàn)?？梢灶A(yù)見的是隨著circRNA的高通量測(cè)序和生物芯片技術(shù)的普及與發(fā)展，circRNA未來(lái)會(huì)從實(shí)用性和經(jīng)濟(jì)性上被人們認(rèn)可,在腫瘤的早期診斷和精準(zhǔn)治療上造福人類。