董曉茜，鄢長(zhǎng)余，姜范成，陳賀△

（1 遼寧省中醫(yī)藥研究院，遼寧 沈陽;2 大連市檢驗(yàn)檢測(cè)認(rèn)證技術(shù)服務(wù)中心，遼寧 大連）

0 引言

止痢寧片原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)收載于《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》中藥成方制劑第二冊(cè)。處方由穿心蓮、木香、苦參三味藥材組成，具有清熱祛濕、行氣止痛的作用，臨床用于腸炎、痢疾[1]。原標(biāo)準(zhǔn)中只涉及到了性狀、檢查項(xiàng)，對(duì)于產(chǎn)品的質(zhì)量無法有效把控。薄層色譜鑒別以其良好的操作性、重現(xiàn)性、專屬性在藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中越來越受到重視，二萜內(nèi)酯類為穿心蓮藥材的主要有效成分，其中以穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯為主，木香藥材中的主要成分同樣為萜類內(nèi)酯，以木香烴內(nèi)酯和去氫木香內(nèi)酯為主，生物堿為苦參的主要有效成分，以苦參堿和氧化苦參堿為主。因此本文選擇上述幾種化合物為指標(biāo)性成分，參考《中國藥典》2015 年版一部[2]及相關(guān)文獻(xiàn)建立了穿心蓮、木香、苦參的薄層鑒別方法，以期為止痢寧片的質(zhì)量控制提供科學(xué)依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 儀器

SartoriusBP211D 型電子天平；雙槽薄層層析缸；HH-4型數(shù)顯恒溫水浴鍋。

1.2 試劑與試藥

穿心蓮（批號(hào)：121082-201706）、脫水穿心蓮內(nèi)酯（批號(hào)：110854-201710）、木 香（批 號(hào)：120921-201309）、木香烴內(nèi)酯（批號(hào)：111524-201509）、去氫木香內(nèi)酯（批號(hào)：111525-201510）、苦 參（批 號(hào)：121019-201708）、苦 參堿（批號(hào)：110805-200508）等對(duì)照品和對(duì)照藥材均購自中國食品藥品檢定研究院。其他所用試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 穿心蓮 [3-7]

取本品，研細(xì)，取約0.5g，準(zhǔn)確稱重，放入具塞錐形瓶?jī)?nèi)，將50ml 甲醇加入其中，對(duì)重量進(jìn)行測(cè)定，超聲處理（功率250W，頻率70kHz）40min，再稱定重量，減失掉的重量以甲醇來補(bǔ)足，搖勻，濾過，濃縮至約5ml，加于中性氧化鋁柱（100-200 目，3g，內(nèi)徑為1.5cm）上，用甲醇20ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，往殘?jiān)屑尤?ml 甲醇使之溶解，作為供試品溶液。另取穿心蓮對(duì)照藥材0.5g，加入30ml 甲醇，進(jìn)行20min 的超聲處理，自“加于中性氧化鋁柱……”起，同法制成對(duì)照藥材溶液。再取脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品，加甲醇制成每1ml 含1mg 的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法（通則0502）試驗(yàn)，分別吸取對(duì)照藥材溶液和對(duì)照品溶液各5μl、供試品溶液10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254 薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇（4 ∶3 ∶0.4）為展開劑，展開，取出，晾干，放在紫外光燈（254nm）下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性溶液無干擾。

2.2 木香 [8-10]

取木香對(duì)照藥材0.5g，加甲醇30ml，進(jìn)行20min 的超聲處理，濾過，濾液蒸干，將2ml 甲醇加入殘?jiān)惺怪芙?，作為?duì)照藥材溶液。再取木香烴內(nèi)酯對(duì)照品、去氫木香內(nèi)酯對(duì)照品，分別加甲醇制成每1ml 各含1mg 的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法（通則0502）試驗(yàn)，分別吸取鑒別供試品溶液10μl 及上述對(duì)照藥材溶液和對(duì)照品溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G 薄層板上，以環(huán)己烷-甲酸乙酯-甲酸（15 ∶5 ∶1）的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，于105℃下進(jìn)行加熱處理，直到斑點(diǎn)能夠清楚的顯色，在日光下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性溶液無干擾。

2.3 苦參[11-16]

取本品1 片，研細(xì)，放入具塞錐形瓶?jī)?nèi)，加入0.5ml 濃氨試液、30ml 三氯甲烷，加熱回流30min，放冷，濾過，蒸干濾液，將2ml 甲醇加入殘?jiān)惺怪芙?，作為供試品溶液。取苦參?duì)照藥材0.5g，以同一方法制作對(duì)照藥材溶液。再取苦參堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml 含1mg 的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法（通則0502）試驗(yàn)，分別吸取對(duì)照品溶液5μl、對(duì)照藥材溶液和供試品溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一用2%氫氧化鈉溶液制備的硅膠G 薄層板上，以甲苯-丙酮-甲醇（8 ∶3 ∶0.5）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以碘化鉍鉀試液。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。

3 討論

止痢寧片為2015 年國家藥品標(biāo)準(zhǔn)提高項(xiàng)目品種，共16 家生產(chǎn)企業(yè)，共搜集7 家生產(chǎn)企業(yè)共16 批次樣品。通過對(duì)16 批樣品及陰性樣品的檢驗(yàn)，結(jié)果陰性均無干擾，斑點(diǎn)顯色清晰。試驗(yàn)中對(duì)比了青島譜科分離材料有限公司、青島海洋化工有限公司、上海盛亞化工有限公司3 個(gè)生產(chǎn)廠家的薄層板，以及3 種品牌中性氧化鋁去除雜質(zhì)的效果，并考察了不同溫度、不同濕度條件下斑點(diǎn)的顯色情況，證實(shí)所建立方法專屬性強(qiáng)、操作簡(jiǎn)便，可以有效的控制產(chǎn)品的質(zhì)量[17-20]。

建立方法過程中，由于在穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品和氧化苦參堿對(duì)照品相應(yīng)的位置上，斑點(diǎn)不清晰，故未將以上兩種對(duì)照品列入標(biāo)準(zhǔn)[21,22]。