探討抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體（ANCA）檢測在ANCA相關(guān)疾病中的臨床價值

曹春園 楊萍 王芳

摘要：目的 研究分析抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體（ANCA）檢測在ANCA相關(guān)疾病中的臨床價值。方法 選取2019年1月至2021年6月期間本院收治的ANCA相關(guān)疾病患者212例，抽選同期52例健康志愿者，對全體研究對象的血清ANCA進(jìn)行檢測?？怪行粤＜?xì)胞胞漿抗體（ANCA）檢測在ANCA相關(guān)疾病中的檢測陽性率。結(jié)果 健康志愿者組均未檢測出ANCA，WG、SLE、未分類性血管炎、腎病綜合征、急性腎炎、慢性腎炎患者的ANCA檢測陽性率均顯著高于健康志愿者組（P<0.05）。結(jié)論 抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體（ANCA）檢測在ANCA相關(guān)疾病中具有重要的參考價值，有利于為ANCA相關(guān)疾病治療和預(yù)后評價提供支持。ANCA作為一種具體的診斷篩查參考指標(biāo)，對疾病的診斷和治療以及預(yù)后評價方面都具有重要的價值。

關(guān)鍵詞：抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體;病情診斷;ANCA;腎小球疾病;預(yù)后評價

【中圖分類號】R446 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A 【文章編號】1673-9026（2021）15--02

抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體（ANCA）是一種針對中性粒細(xì)胞胞漿成分以及單核細(xì)胞溶酶體所形成的一組自身抗體，對其研究過程當(dāng)中發(fā)現(xiàn)ANCA和WG（韋格納肉芽腫）、MPA（顯微鏡下多血管炎）、CSS（變應(yīng)性肉芽腫血管炎）之間存在一定的關(guān)聯(lián)性，將其視為抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體相關(guān)性小血管炎。ANCA，特異性PR3抗體和抗MPO抗體的檢測已成為原發(fā)性小血管炎的敏感特異的血清學(xué)檢測項目。近些年來，相關(guān)方面的分析已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，我國存在的一些原發(fā)性小血管炎并不十分罕見[1]。ANCA本身是一組系統(tǒng)性壞死性血管炎的血清學(xué)標(biāo)志抗體，能夠用于對血管炎的診斷以及分類和后續(xù)的評估工作。除此之外，ANCA也會在一些腎小球疾病中被發(fā)現(xiàn)，ANCA陽性的腎小球疾病在臨床病理方面的表現(xiàn)相對來說會比較嚴(yán)重，患者的病情進(jìn)展極快，因此通過對ANCA在腎小球疾病中的實際發(fā)生情況進(jìn)行相對應(yīng)的分析具有臨床價值，本文對此進(jìn)行探討。

1資料和方法

1.1一般資料

選取2019年1月至2021年6月期間本院收治的ANCA相關(guān)疾病患者212例，抽選同期52例健康志愿者，ANCA相關(guān)疾病患者中有9例為WG（韋格納肉芽腫），20例SLE（系統(tǒng)性紅斑狼瘡），12例未分類性血管炎，85例腎病綜合征，42例急性腎炎，44例慢性腎炎。

1.2方法

ANCA檢測試劑盒采用德國歐蒙公司生產(chǎn)，儀器使用EURO Pattern全自動熒光判斷系統(tǒng)。對全體研究對象的靜脈血采集2ml，以3500r/min離心10分鐘分離血清，檢測方式為間接免疫熒光法[2]。

1.3統(tǒng)計學(xué)方法

使用SPSS24.0軟件分析處理數(shù)據(jù)，計量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，兩兩比較采用獨立樣本t檢驗;計數(shù)資料采用n（%）表示，組間比較采用x2檢驗。P<0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

健康志愿者組均未檢測出ANCA，WG、SLE、未分類性血管炎、腎病綜合征、急性腎炎、慢性腎炎患者的ANCA檢測陽性率均顯著高于健康志愿者組（P<0.05）。詳細(xì)情況見表1。

3討論

ANCA是存在于系統(tǒng)性血管炎患者中的一類自身抗體，其抗原是多形核粒細(xì)胞（PMN）和單核細(xì)胞的胞漿成份。近些年來，相關(guān)方面的專業(yè)人員對ANCA和靶抗原的具體性質(zhì)以及相關(guān)疾病之間存在的關(guān)聯(lián)性進(jìn)行了相對應(yīng)的分析，同時也對致病的原理以及具體的疾病檢測方法進(jìn)行了更深層次的理解。實際中，ANCA本身體現(xiàn)出能夠激活嗜中性粒細(xì)胞的作用，使細(xì)胞釋放其中存在的一些蛋白水解酶、髓過氧化物酶以及其他的一些氧自由基，從而能夠使患者的血管內(nèi)皮細(xì)胞受到相對應(yīng)的損傷[3]。這些抗原能夠和相對應(yīng)的一些抗體結(jié)合，共同產(chǎn)生一種免疫復(fù)合物，使患者的補體系統(tǒng)得以激活，從而加重患者內(nèi)皮細(xì)胞的進(jìn)一步破壞，參與到血管炎的發(fā)病過程中促進(jìn)患者發(fā)病。因此，ANCA檢測能夠用于診斷原發(fā)性小血管炎。

隨著對ANCA的深入研究和檢測方法的提高，ANCA相關(guān)系統(tǒng)性血管炎的發(fā)病率較以前有所提高，年發(fā)病率為30/100萬，伴發(fā)急性腎衰約5%～6%[5]?？筆R3和抗MPO陽性的血管炎有相似的臨床和組織學(xué)特點，如上、下呼吸道損害，腎損害，單神經(jīng)炎和多神經(jīng)炎等。有學(xué)者將抗PR3和抗MPO在AASV中陽性率的分布進(jìn)行比較，研究證實大部分WG病人抗PR3陽性，NCGN病人中絕大多數(shù)抗MPO陽性，MPA病人中二者的陽性率基本相同。越來越多的資料顯示，二者在臨床表現(xiàn)、組織病理學(xué)、病理生理學(xué)方面存在顯著差異。

間接熒光免疫法是檢測ANCA的參考方法或者標(biāo)準(zhǔn)方法，至今也是最常用的經(jīng)典方法。歐蒙公司生產(chǎn)的使用固定劑乙醇和甲醛，乙醇作為固定抗原片來進(jìn)行試驗，表現(xiàn)為陽性時，中性粒細(xì)胞胞漿內(nèi)可以看到胞漿型抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體C-ANCA或者核周型抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體P-ANCA的熒光顆粒[4]。前者抗體通常會在胞漿內(nèi)呈現(xiàn)顆粒狀的排布，主要的靶抗原是蛋白酶3，而后者在細(xì)胞核的周圍主要是呈線條狀的分布，主要的靶抗原是髓過氧化物酶，除此之外還存在彈力蛋白酶以及組蛋白酶和乳鐵蛋白等物質(zhì)。此法是區(qū)分c-ANCA和p-ANCA的基礎(chǔ)，有較高敏感性，可半定量，但測定的是總ANCA，不能準(zhǔn)確區(qū)分靶抗原，需特異性的檢測方法作為補充。為提高對疾病診斷的特異性，檢測時應(yīng)注意以下問題[6]。第一，檢測ANCA，一般建議同時做IIF初篩和相關(guān)靶抗原的確認(rèn)實驗，以提高ANCA的臨床應(yīng)用價值，不做單獨初篩或單獨確認(rèn)實驗，以免降低對疾病診斷的特異性。第二，不能僅檢測抗PR3和MPO兩種特異性抗體，而不進(jìn)行IIF初篩，這樣容易限制ANCA對疾病診斷的特異性。

本文的研究中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，健康的患者沒有檢測出ANCA，同時這種情況會在其他的疾病患者中呈現(xiàn)不同程度的顯示。這就表示ANCA在臨床方面能夠用于對相關(guān)疾病的診斷以及病情的判斷和療效以及預(yù)后評估等多個方面的重要指標(biāo)。WG患者在具體的治療過程中病程的進(jìn)展情況相對來說會比較快，導(dǎo)致其呼吸功能以及腎功能方面存在障礙，因此其預(yù)后就會比較差[7]。本文的研究分析，發(fā)現(xiàn)WG患者的ANCA陽性率相對來說會比較高，因此ANCA檢測能夠提高該種疾病的診斷率，可能患者的腎和肺功能病變方面還未出現(xiàn)嚴(yán)重影響，但ANCA檢測已出現(xiàn)異常，有利于該病的早期診斷。ANCA在具體的應(yīng)用過程中，除了對WG比較敏感，同時也會對其他的一些自身免疫性疾病敏感，包括腎病綜合征以及其他的一些腎小球疾病等。在臨床醫(yī)學(xué)方面，SLE是一種多系統(tǒng)損害癥狀的慢性系統(tǒng)性自身免疫疾病，能夠?qū)е禄颊叩母鞑糠窒到y(tǒng)以及器官都受到相對應(yīng)的影響，繼發(fā)性狼瘡腎炎的發(fā)病率會比較高，導(dǎo)致患者腎衰竭而死亡。本文的研究中分析發(fā)現(xiàn)，在一部分SLE患者的ANCA檢測環(huán)節(jié)會表現(xiàn)出陽性，而SLE本身的病理情況是血管炎，這就表示ANCA可能會參與SLE血管炎方面的發(fā)病。因此進(jìn)一步研究ANCA和SLE的關(guān)系，能夠在一定程度上了解血管炎的具體發(fā)病機制。ANCA定性分析方式能夠幫助患者的病情活動及預(yù)后判斷更加有效，采取有效的干預(yù)措施提高患者的生存率。本文的研究中分析發(fā)現(xiàn)，腎小球疾病的患者基于ANCA檢測方面的陽性率也會比較高，ANCA陽性腎小球疾病是近些年來發(fā)現(xiàn)存在的一種綜合表現(xiàn)，其各種病理表現(xiàn)都會比較嚴(yán)重，患者的病情進(jìn)展比較快，會導(dǎo)致患者腎衰竭，ANCA陽性疾病的患者通常預(yù)后情況會比較差，生存率會比較低，通過對腎小球疾病患者進(jìn)行ANCA的檢測，進(jìn)行早期篩查，早期干預(yù)，體現(xiàn)其重要的價值，為疾病的治療及預(yù)后奠定良好的基礎(chǔ)。

除上述內(nèi)容以外，我們也結(jié)合了其他學(xué)者的研究[8]，進(jìn)行了ANCA的研究。中性粒細(xì)胞受到抗原刺激之后，細(xì)胞中的α顆?？舍尫诺鞍姿饷?、彈性蛋白酶等等，最終會刺激機體產(chǎn)生ANCA。ANCA與靶抗原結(jié)合后，會形成免疫復(fù)合物，最終對內(nèi)皮細(xì)胞的破壞強隊增加，也參與到了血管炎的發(fā)病過程中。在ANCA檢測下可以提高對多項疾病的診斷率，且在病變尚未對肺部、腎功能造成嚴(yán)重影響的時候有所體現(xiàn)，對于疾病的早期診斷意義重大。此外，ANCA的敏感性高，對于其他自身免疫性疾病均有較高的診斷。例如SLE屬于多系統(tǒng)損害的慢性系統(tǒng)性和累及到多個器官和系統(tǒng)，最常見的部位則是腎部。通過對患者進(jìn)行ANCA的檢測，可以發(fā)現(xiàn)ANCA參與到SLE血管炎過程，并且可以闡明ANCA血管炎的發(fā)病機制。總體來看，ANCA可以作為重要的指標(biāo)對ANCA相關(guān)疾病進(jìn)行診斷、治療以及預(yù)后評估，具有重要價值。

值得一提的是，ANCA陽性患者可以來自于不同的科室，包括風(fēng)濕免疫科，肺病科，腎內(nèi)科等等。腎內(nèi)科ANCA患者的陽性率高，主要是由于與壞死性新月體腎炎以及腎小球壞死等疾病相關(guān)。此外，ANCA陽性還可見于炎癥性腸炎，甲亢等疾病的患者。隨著人們對ANCA研究的深入，關(guān)于其對疾病的鑒別診斷和預(yù)后分析也受到了醫(yī)學(xué)界的重視，但是ANCA無特異性，故而在臨床中需要結(jié)合患者病癥表現(xiàn)以及實驗室檢查結(jié)果進(jìn)行切實判斷。目前ANCA已成為系統(tǒng)性血管炎的敏感血清學(xué)診斷工具，ANCA已成為研究系統(tǒng)性血管炎的熱門課題。

ANCA相關(guān)系統(tǒng)性血管炎的發(fā)病機制較為復(fù)雜，涉及到ANCA、致炎因子、內(nèi)皮細(xì)胞及其它免疫效應(yīng)細(xì)胞的相互作用，目前對ANCA的致病作用研究較為深入。1991年Ludemann提出ANCN介導(dǎo)的血管損傷模型，其主要內(nèi)容為：①細(xì)胞因子，如IL-8、IL-1和TNF等刺激中性粒細(xì)胞，細(xì)胞漿內(nèi)PR3、MPO等抗原物質(zhì)相互作用，致中性粒細(xì)胞脫顆粒，釋放PR3、MPO、HLE等，導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞損傷，引起血管火。ANCA在AAVS中的致病作用，其證據(jù)主要來自于臨床和體外試驗，已有充足的體外實驗證明ANCA是有害的，但ANCA是血管發(fā)生損傷的初始原因還是第二因素，目前尚未定論。

總體來說，本文的研究中涉及到的疾病相關(guān)臨床表現(xiàn)會比較復(fù)雜，容易會產(chǎn)生誤診、漏診的情況，ANCA作為一種具體的診斷篩查參考指標(biāo)，對其的診斷和治療以及預(yù)后評價方面都具有重要的價值。

參考文獻(xiàn)：

[1] 云宗金， 徐鵬程， 宋斌，等. 抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體相關(guān)性肥厚性硬脊膜炎1例報告并文獻(xiàn)復(fù)習(xí)[J]. 中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志， 2019， 252（08）：68-71.

[2] 劉在栓， 劉雨欣， 胡靜，等. 抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體熒光模型與其抗體譜對應(yīng)關(guān)系[J]. 檢驗醫(yī)學(xué)與臨床， 2019， 16（14）：26-29.

[3] 王美娥， 胡朝軍， 李萍，等. 血清ANCA和GAB不同類型抗體檢測在潰瘍性結(jié)腸炎中的臨床應(yīng)用[J]. 臨床檢驗雜志， 2020， 038（001）：73-75.

[4] 劉玉鵬， 宣依依， 趙震，等. 抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體相關(guān)性血管炎合并肺間質(zhì)病變患者血清KL-6水平分析[J]. 河南醫(yī)學(xué)研究， 2019， 28（07）：1165-1168.

[5] 陳樂，何焱玲.抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體在抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體相關(guān)血管炎中的作用機制新進(jìn)展[J].國際免疫學(xué)雜志，2018，41（1）：94-99.

[6] 安曉寧，陳永熙.單核-巨噬細(xì)胞在抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體相關(guān)性血管炎中作用的研究進(jìn)展[J].上海交通大學(xué)學(xué)報（醫(yī)學(xué)版），2020，40（1）：123-127.

[7] 何浩，楊惠琴，鄒榮等.潑尼松與黃芪注射液聯(lián)合治療對系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體陽性檢出率的改善作用[J].實用醫(yī)學(xué)雜志，2021，37（11）：1481-1484.

[8] 喻慎儀，黃琴，任昊等.抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體相關(guān)性血管炎神經(jīng)系統(tǒng)病變的研究進(jìn)展[J].廣東醫(yī)學(xué)，2019，40（2）：159-162.