裸腳菇0612-9活性物質(zhì)對柑橘青、綠霉病的生防效果及其誘導(dǎo)抗性

何 甜，崔朝宇，鄭先能，龍昊知，霍光華

（江西農(nóng)業(yè)大學(xué) 江西省菌物資源保護(hù)與利用重點實驗室，江西 南昌 330045）

意大利青霉（Penicillium italicum）和指狀青霉（Penicillium digitatum）引起的柑橘青、綠霉病是柑橘采后的兩種主要病害，30%～50%的柑橘腐爛由這兩種病害造成[1]。盡管人們已經(jīng)采取多種防治措施，但青、綠霉病害依舊給柑橘產(chǎn)業(yè)帶來了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失[2]。近年來，生物防治以其顯著的抑菌效果和環(huán)保低毒的特點成為一種極具前景的果蔬采后病害防治手段[3]，主要包括微生物拮抗、天然生物活性物質(zhì)抑制、誘導(dǎo)抗性等措施[4]。近年來，關(guān)于果蔬采后生物防治的研究已有諸多報道，范三紅等[5]發(fā)現(xiàn)洋蔥伯克氏菌（Burkholderia contaminans）B-1可通過誘導(dǎo)葡萄果實內(nèi)苯丙氨酸解氨酶（phenylalanine ammonialyase，PAL）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）等防御酶的表達(dá)顯著降低‘玫瑰香’葡萄灰霉病發(fā)病率；張岳等[6]研究發(fā)現(xiàn)2 株淺白酵母對柑橘青霉病菌菌絲具有抑制效果，隨后進(jìn)行果實防治實驗，結(jié)果發(fā)現(xiàn)其對柑橘果實具有顯著的防治作用。盡管目前已發(fā)掘出許多類型具有生防應(yīng)用潛力的拮抗微生物，但這些拮抗微生物商業(yè)化應(yīng)用仍存在防效不穩(wěn)定、持效期短等諸多問題[7]。因此發(fā)掘并利用拮抗微生物次生代謝產(chǎn)物顯得尤為重要。大型真菌因其物種繁多、資源豐富，且可食用、藥用的種類多達(dá)數(shù)千種，被認(rèn)為是有廣闊開發(fā)應(yīng)用前景的一類資源。近年來，研究者們從靈芝屬、小皮傘屬等真菌中分離鑒定出多種具有抑菌活性的次級代謝產(chǎn)物[8-10]，為新型環(huán)境友好型生防藥劑的開發(fā)提供了豐富的先導(dǎo)化合物。

在柑橘采后青綠霉病害生物防治中，通過外源誘導(dǎo)因子誘導(dǎo)柑橘自身抗性來減少柑橘采后腐爛的研究成為熱點[11]，譚艷等[12]發(fā)現(xiàn)寡雄腐酶發(fā)酵液不僅能顯著抑制青、綠霉菌絲生長，同時能通過提高柑橘果皮中的過氧化物酶（peroxidase，POD）等酶活性來增強果實抗性；Luo Yang等[13]采用膜醭畢赤酵母處理柑橘，結(jié)果發(fā)現(xiàn)該拮抗菌既能通過快速占據(jù)柑橘表面營養(yǎng)和空間抑制青綠霉病原菌生長，同時能誘導(dǎo)增強柑橘果皮中的POD、PAL、幾丁質(zhì)酶等酶的活性從而提高果實抗病能力。本課題組前期從南昌梅嶺采集一株野生裸腳菇屬菌（Gymnopussp.0612-9）[14]，經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，其發(fā)酵液粗提物可有效抑制柑橘青、綠霉菌菌絲生長[15]。本研究以‘南豐’蜜桔為實驗材料，用裸腳菇0612-9發(fā)酵液粗提物（extract of the fermentation broth ofGymnopussp.0612-9，GSFE）對柑橘果實進(jìn)行處理后并人工接種意大利青霉和指狀青霉，研究其對柑橘采后青綠霉病的防治效果及對柑橘果實抗病性的誘導(dǎo)作用，為開發(fā)新型柑橘采后病害生物防治藥劑提供參考。

1 材料與方法

1.1 菌株、材料與試劑

裸腳菇0612-9、意大利青霉和指狀青霉保藏于江西省菌物資源保護(hù)與利用重點實驗室。

‘南豐’蜜桔購自撫州市南豐縣一管理良好的果園，選擇大小基本一致、無損傷痕跡、無病蟲害侵染的果實用于實驗。

30%過氧化氫、硫代巴比妥酸、濃鹽酸、核黃素、Tween-80、福林-酚、甲醇、乙酸乙酯、二氯氧鋯、愈創(chuàng)木酚、甲硫氨酸、次氯酸鈉、亞油酸鈉、β-巰基乙醇、沒食子酸、L-苯丙氨酸、三氯乙酸、氮藍(lán)四唑、十二水合磷酸氫二鈉、二水合磷酸二氫鈉、硼酸、硼砂、蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品、聚乙烯吡咯烷酮等均為國產(chǎn)分析純。

1.2 儀器與設(shè)備

YXQ-LS-50A立式壓力蒸汽滅菌鍋 上海博迅實業(yè)有限公司；SW-CJ-2G雙人單面凈化工作臺 蘇州凈化設(shè)備有限公司；Tu-1900雙光束紫外-可見分光光度計 北京普析通用儀器有限公司；JW-3022HR高速冷凍離心機安徽嘉文儀器裝備有限公司；RE-52AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上海亞榮生化儀器廠；SHP-250FE智能生化培養(yǎng)箱上海三發(fā)科學(xué)儀器有限公司。

1.3 方法

1.3.1 GSFE的制備

參照花紀(jì)等[16]的方法制備GSFE。裸腳菇0612-9發(fā)酵液經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓濃縮5 倍后，加入等量的乙酸乙酯進(jìn)行超聲萃取；分離乙酸乙酯相，有機相旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)干后即為GSFE。粗提物稱量后溶解于無水甲醇中，4 ℃條件下保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.2 菌種的活化及孢子懸浮液制備

在無菌條件下，挑取意大利青霉或指狀青霉菌絲接于馬鈴薯葡萄糖瓊脂（potato dextrose agar，PDA）培養(yǎng)基上，于28 ℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)7 d，用含體積分?jǐn)?shù)0.1% Tween-80的無菌蒸餾水洗下病原菌分生孢子，隨后配制成濃度為1×107CFU/mL的孢子懸浮液。

1.3.3 樣品處理

‘南豐’蜜桔果實用體積分?jǐn)?shù)2%次氯酸鈉溶液浸泡2～3 min，無菌蒸餾水沖洗4～5 次，自然晾干，果實腰部用無菌打孔器形成統(tǒng)一大小的傷口（直徑3 mm、深2 mm）。在傷口中分別加入20 μL質(zhì)量濃度為0（對照，含體積分?jǐn)?shù)1%甲醇的無菌蒸餾水）和0.25、0.55、5.50 mg/mL的GSFE（含體積分?jǐn)?shù)1%甲醇），待藥液完全吸收后，分別接入20 μL病原菌孢子懸浮液，處理后的果實置于墊有吸水紙的保鮮盒中（相對濕度85%～95%），置于25 ℃下貯藏。每天測定病斑直徑和發(fā)病率，取果實病斑周圍1 cm處果皮組織進(jìn)行各項誘導(dǎo)抗性相關(guān)指標(biāo)測定。每個處理40 個果實，重復(fù)3 次。

1.3.4 指標(biāo)測定

1.3.4.1 發(fā)病率及病情指數(shù)測定

采用十字交叉法測定病斑直徑，以病斑直徑不小于0.5 mm為發(fā)病。病情分級標(biāo)準(zhǔn)參考Droby等[17]的方法，分別按式（1）、（2）計算果實發(fā)病率及病情指數(shù)。

1.3.4.2 防御酶活力的測定

POD活力測定：POD粗酶液的提取及活力測定參照曹建康等[18]的方法，以每分鐘酶促反應(yīng)在470 nm波長處的吸光度增加0.1為1 個POD活力單位（U），重復(fù)3 次。

SOD活力測定：粗酶液的提取方法同POD，采用氮藍(lán)四唑光還原法[18]測定SOD活力，并略改動。3 mL反應(yīng)體系按照V（0.05 mol/L pH 7.8磷酸鹽緩沖液）∶V（130 mmol/L甲硫氨酸溶液）∶V（750 μmol/L氮藍(lán)四唑溶液）∶V（1 mmol/L乙二胺四乙酸二鈉溶液）∶V（蒸餾水）∶V（30 μmol/L核黃素溶液）＝1.5∶0.3∶0.3∶0.3∶0.25∶0.3比例混合，反應(yīng)管加入0.05 mL粗酶液，對照管加入等量0.05 mol/L pH 7.8磷酸鹽緩沖液，于560 nm波長處測定吸光度，以每分鐘抑制50%氮藍(lán)四唑光還原反應(yīng)為一個SOD活力單位（U）。重復(fù)3 次。

PAL活力測定：稱取0.5 g果皮組織，加入10 mL預(yù)冷的0.05 mol/L pH 8.8硼酸緩沖液（含1 g/100 mL聚乙烯吡咯烷酮、5 mmol/Lβ-巰基乙醇），冰浴研磨后，于4 ℃、10 000 r/min條件下離心20 min，取上清液作為粗酶液測定相應(yīng)酶活力。參照Assis等[19]的方法測定PAL活力，以每小時酶促反應(yīng)體系在290 nm波長處吸光度增加0.01為一個PAL活力單位（U），重復(fù)3 次。

以上酶活力單位均為U/g，結(jié)果以鮮質(zhì)量表示。

1.3.4.3 脂氧合酶活力測定

稱取0.5 g果皮組織，參照曹建康等[18]的方法提取粗酶液并測定脂氧合酶（lipoxygenase，LOX）活力，以每分鐘吸光度在234 nm波長處變化1為一個LOX活力單位，結(jié)果以鮮質(zhì)量表示，單位為U/g，重復(fù)3 次。

1.3.4.4 丙二醛含量的測定

丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量參照曹建康等[18]的方法測定。

1.3.4.5 總酚和類黃酮含量測定

準(zhǔn)確稱取0.5 g果皮組織，加入8 mL預(yù)冷的體積分?jǐn)?shù)80%甲醇溶液，充分研磨，于4 ℃條件下提取24 h，然后4 ℃、10 000 r/min條件下離心20 min，取上清液備用。分別參考Assis[19]、康旭珍[20]等的方法測定樣品中總酚和類黃酮的含量。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

原始數(shù)據(jù)利用Microsoft Excel 2016軟件進(jìn)行整理及統(tǒng)計分析，采用DPS 7.05軟件進(jìn)行單因素方差分析，差異顯著性分析采用Duncan's新復(fù)極差法，P＜0.05為差異顯著；采用GraphPad Prism 8軟件作圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 GSFE對‘南豐’蜜桔采后青、綠霉病發(fā)病率及病情指數(shù)的影響

圖1 GSFE對柑橘采后青、綠霉病發(fā)病率（A）和病情指數(shù)（B）的影響Fig.1 Effect of GSFE on incidence rate (A) and disease index (B) of green and blue molds in post-harvest citrus fruit

如圖1 A1、B1所示，處理后的第6 天，對照組果實青霉病發(fā)病率達(dá)（9 8±2）%，病情指數(shù)為（54.8±1.7）%；而GSFE質(zhì)量濃度為0.25、0.55、5.5 0 m g/m L 的處理組果實青霉病發(fā)病率分別為（6 2±2）%、（5 8±2）%和（5 0±2）%，病情指數(shù)分別為（19.6±0.4）%、（12.0±0.8）%和（10.0±0.4）%。各GSFE處理組果實青霉病發(fā)病率、病情指數(shù)均顯著低于對照組（P＜0.05），其中質(zhì)量濃度為5.50 mg/mL的GSFE處理對抑制病斑擴(kuò)展及控制采后青霉病感染的效果更佳。

如圖1A2、B2所示，貯藏后第6天，對照組果實綠霉病發(fā)病率高達(dá)100%，病情指數(shù)為（54.8±2.0）%，而不同GSFE質(zhì)量濃度處理組的發(fā)病率及病情指數(shù)均顯著低于對照組（P＜0.05）。

上述結(jié)果說明經(jīng)GSFE處理對‘南豐’蜜桔意大利青霉和指狀青霉均有較好的抑制效果，并能夠有效控制病斑的擴(kuò)展。此外，高質(zhì)量濃度的GSFE對‘南豐’蜜桔采后青、綠霉病控制效果更佳。

2.2 GSFE處理對‘南豐’蜜桔果皮防御相關(guān)酶活力的影響

為進(jìn)一步明確GSFE對采后青、綠霉病的防治機理，對GSFE是否存在誘導(dǎo)抗性活力進(jìn)行研究。由圖2A1可知，當(dāng)‘南豐’蜜桔果實損傷接種P.italicum時，在整個貯藏過程中，不同質(zhì)量濃度GSFE處理組和對照組‘南豐’蜜桔果皮的POD活力總體變化趨勢均表現(xiàn)為先升高后降低，但不同質(zhì)量濃度GSFE處理組果皮的POD活力更強，均顯著高于對照組（P＜0.05）。在處理第4天時，GSFE質(zhì)量濃度為0.55、5.50 mg/mL的處理組果皮POD活力達(dá)到峰值。

圖2 GSFE對損傷接種‘南豐’蜜桔果皮防御酶活力的影響Fig.2 Effect of GSFE on defense-related enzyme activities in the peel of wounded ‘Nanfeng' citrus

由圖2 A2可知，當(dāng)‘南豐’蜜桔果實損傷接種P.digitatum時，在貯藏2～3 d期間，各處理組‘南豐’蜜桔果皮POD活力升高，第3天時各處理組果皮POD活力達(dá)到峰值，不同質(zhì)量濃度GSFE處理組果皮POD活力與對照組果皮差異顯著（P＜0.05）。在貯藏的3～5 d，各處理組果皮的POD活力出現(xiàn)波動下降，但不同質(zhì)量濃度GSFE處理組果皮POD活力仍顯著高于對照組果皮（P＜0.05）。

由圖2B1可知，經(jīng)GSFE誘導(dǎo)后，損傷接種P.italicum的‘南豐’蜜桔果皮SOD活力總體呈先上升后下降趨勢，整個貯藏過程中，不同質(zhì)量濃度GSFE處理組果皮的SOD活力均顯著高于對照組（P＜0.05），其中GSFE質(zhì)量濃度為5.50 mg/mL的處理組果皮的SOD活力整體上顯著高于GSFE質(zhì)量濃度為0.25、0.55 mg/mL的處理組（P＜0.05）。處理后第4天，各實驗組果皮SOD活力達(dá)到峰值。

由圖2B2可知，損傷接種P.digitatum的‘南豐’蜜桔果皮SOD活力在接種后的貯藏過程中呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢，其中對照組果皮SOD活力變化相對平緩。在貯藏第3天，GSFE質(zhì)量濃度為0.25、5.50 mg/mL的處理組果皮SOD活力均達(dá)到峰值，分別是此時對照組的1.22 倍和1.87 倍（P＜0.05）；GSFE質(zhì)量濃度為0.55 mg/mL的處理組果皮SOD活力在第4天達(dá)到峰值，是此時對照組的1.65 倍（P＜0.05）。

由圖2C1可知，整個貯藏期損傷接種P.italicum的‘南豐’蜜桔各處理組果皮PAL活力總體呈先升高后下降的趨勢，不同質(zhì)量濃度GSFE處理組果皮的PAL活力高于對照組。第2天時，GSFE質(zhì)量濃度為0.55、5.50 mg/mL的處理組PAL活力分別達(dá)到峰值且顯著高于對照組（P＜0.05）。

如圖2C2所示，損傷接種P.digitatum的‘南豐’蜜桔果實經(jīng)GSFE誘導(dǎo)后，其果皮PAL活力先上升后下降，且整體上均顯著高于對照組（P＜0.05）；在貯藏過程中，對照組柑橘果皮PAL活力變化保持相對平緩，在處理第2天時，GSFE質(zhì)量濃度為0.55、5.50 mg/mL的處理組果皮PAL活力分別達(dá)到峰值，且顯著高于對照組果皮的活力（P＜0.05）。

綜上，不同質(zhì)量濃度GSFE均能夠誘導(dǎo)損傷接種病原菌的‘南豐’蜜桔果皮防御酶POD、SOD、PAL活力顯著升高，其中以GSFE質(zhì)量濃度為5.50 mg/mL的誘導(dǎo)效果最佳。

2.3 GSFE對‘南豐’蜜桔果皮膜脂過氧化的影響

圖3 GSFE對損傷接種‘南豐’蜜桔果皮MDA含量（A）和LOX活力（B）的影響Fig.3 Effect of GSFE on MDA content (A) and LOX activity (B) in the peel of wounded ‘Nanfeng' citrus

如圖3 A1所示，在整個貯藏過程中，損傷接種P.italicum后的GSFE處理組果皮MDA含量相比對照組變化較為平緩。其中，對照組及GSFE質(zhì)量濃度為0.25 mg/mL的處理組在第4天時達(dá)到峰值，而GSFE質(zhì)量濃度為0.55、5.50 mg/mL的處理組果實MDA含量變化則趨于平緩，且與對照組差異顯著（P＜0.05）。由圖3A2可知，損傷接種P.digitatum的‘南豐’蜜桔果實經(jīng)GSFE處理后，GSFE質(zhì)量濃度為0.55、5.50 mg/mL的處理組果皮MDA含量均處于較低水平，在整個貯藏過程中變化趨勢平緩，與對照組差異顯著（P＜0.05）；對照組及GSFE質(zhì)量濃度為0.25 mg/mL的處理組果皮MDA含量在第3天顯著高于GSFE質(zhì)量濃度為0.55、5.50 mg/mL的處理組（P＜0.05）。以上結(jié)果說明損傷接種后的‘南豐’蜜桔果實經(jīng)GSFE處理后，其果皮內(nèi)MDA含量會更趨于穩(wěn)定。

如圖3B1、B2所示，在整個貯藏過程中，各處理組的‘南豐’蜜桔果皮的LOX活力均呈先升高后降低的趨勢。損傷接種P.italicum后，對照組果皮LOX活力整體顯著高于GSFE質(zhì)量濃度為5.50 mg/mL的處理組（P＜0.05），說明經(jīng)高質(zhì)量濃度GSFE處理后，果皮內(nèi)LOX活力會受到顯著抑制。接種P.digitatum后第3天，對照組果皮LOX活力達(dá)到峰值，而不同GSFE質(zhì)量濃度處理組果皮LOX活力均在第4天達(dá)到峰值，且明顯低于對照組峰值。因此，GSFE能夠抑制‘南豐’蜜桔果實皮內(nèi)LOX活力升高。

2.4 GSFE對‘南豐’蜜桔果皮類黃酮和總酚含量的影響

圖4 GSFE對損傷接種‘南豐’蜜桔果皮類黃酮（A）和總酚（B）含量的影響Fig.4 Effect of GSFE on total flavonoid (A) and total phenolic (B)contents in the peel of wounded ‘Nanfeng' citrus

由圖4 A1可知，在整個貯藏過程中，損傷接種P.italicum的‘南豐’蜜桔果皮中類黃酮含量均呈增加趨勢，對照組與GSFE質(zhì)量濃度為0.25 mg/mL的處理組果皮內(nèi)類黃酮含量基本無顯著差異。GSFE質(zhì)量濃度為0.55、5.50 mg/mL的處理組果皮內(nèi)類黃酮含量在第5天達(dá)到峰值，顯著高于對照組（P＜0.05）。由圖4A2可知，損傷接種P.digitatum的‘南豐’蜜桔各處理組果皮內(nèi)類黃酮含量也均呈增加趨勢，且隨時間延長，不同質(zhì)量濃度GSFE處理組與對照組果皮類黃酮含量差異變大，在處理后的第6天，GSFE處理組果皮內(nèi)類黃酮含量最高，顯著高于對照組（P＜0.05）。

如圖4B1所示，整個貯藏過程中，接種P.italicum的對照組與GSFE質(zhì)量濃度為0.25 mg/mL的處理組‘南豐’蜜桔果皮內(nèi)總酚含量變化平緩。在處理后第6天，GSFE質(zhì)量濃度為5.50 mg/mL的處理組果皮內(nèi)總酚含量達(dá)到最高值并顯著高于其他組（P＜0.05）。由圖4B2可知，在損傷接種P.digitatum后，所有處理組的‘南豐’蜜桔果皮總酚含量均呈先降低后升高的趨勢，且在貯藏過程中均高于對照組，在處理后第4天，不同質(zhì)量濃度GSFE處理組果皮內(nèi)總酚含量與對照組差異顯著（P＜0.05）。說明GSFE可促進(jìn)‘南豐’蜜桔果皮內(nèi)酚類物質(zhì)的合成，從而提高自身抗病性。

3 討 論

POD、SOD和PAL是植物體內(nèi)酶促防御系統(tǒng)的重要保護(hù)酶，這些防御酶活力的提高可誘導(dǎo)植物形成木質(zhì)素，加固加厚植物細(xì)胞壁，防止病原菌入侵；同時能夠減少細(xì)胞內(nèi)活性氧的積累，以防御自由基及活性氧對細(xì)胞膜的損傷，從而對植物起到保護(hù)作用[21-23]。誘導(dǎo)劑茉莉酸甲酯處理番茄及葡萄果實能使果實PAL、POD、SOD等防御酶活力增強，從而增強果實抗病能力、減少果實在貯藏過程中的腐爛率[22,24]。本實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)，GSFE能夠?qū)Ω涕俟し烙富盍Ξa(chǎn)生誘導(dǎo)作用，經(jīng)GSFE處理后的‘南豐’蜜桔果皮內(nèi)POD、SOD和PAL活力均高于對照組。推測GSFE誘導(dǎo)抗性機制之一是通過誘導(dǎo)‘南豐’蜜桔果皮內(nèi)防御酶系的啟動，增強果體清除活性氧能力及合成植保素等抗性物質(zhì)合成，從而加強果實對病原菌的防御能力。

柑橘果皮中酚類和類黃酮等物質(zhì)同樣具有抗氧化活性和清除自由基的能力[25]。水楊酸處理蘋果后，其誘導(dǎo)了蘋果果實總酚、類黃酮的積累，提高了果實對灰霉病的抑制作用[26]；楊藝琳等[27]同樣發(fā)現(xiàn)，總酚含量及抗病相關(guān)酶活力提高與葡萄果實抗灰霉病能力呈正相關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)GSFE處理后，與對照組相比，‘南豐’蜜桔果皮內(nèi)類黃酮和總酚含量也顯著升高，表明GSFE可促進(jìn)果皮內(nèi)酚類及類黃酮物質(zhì)的積累，以增強其果實抗病能力。MDA作為膜脂過氧化的產(chǎn)物之一，其含量變化情況可間接反映果實內(nèi)細(xì)胞受損情況[28]，此外，果皮內(nèi)LOX活力強弱也是反映細(xì)胞是否受損的指標(biāo)之一。它們均與細(xì)胞活性氧代謝密切相關(guān)，而植物活性氧清除由其防御酶系及酚類等非酶促抗氧化物質(zhì)共同承擔(dān)[29]。陳玉環(huán)等[30]研究發(fā)現(xiàn)肉桂醛處理‘新余’蜜橘后，提高了果體防御酶活性，增強了果體對意大利青霉的抵御能力，同時有效減緩了柑橘果實內(nèi)MDA的積累，起到保護(hù)柑橘膜脂的作用。Liu Ruiling等[31]研究發(fā)現(xiàn)萊陽梨貯藏品質(zhì)的降低與MDA積累及果實LOX活力升高密切相關(guān)，1-甲基環(huán)丙烯處理梨果實，可增強果實抗性相關(guān)酶活力，提高果實清除自由基能力，以降低氧化損傷引起的膜損傷，從而增強梨果實耐貯性。在本研究中，對GSFE處理后‘南豐’蜜桔果皮內(nèi)MDA含量及LOX活力的變化進(jìn)行了定量分析。結(jié)果顯示，與對照組相比，GSFE處理組‘南豐’蜜桔果皮內(nèi)MDA積累及LOX活力升高速率均受到抑制。這一結(jié)果表明GSFE能夠有效抑制‘南豐’蜜桔果皮內(nèi)LOX活力升高并減少MDA的積累，進(jìn)而減弱病原菌對果實的損傷。

植物體內(nèi)具有多種防御病原菌侵害的機制，其中，誘導(dǎo)抗性機制是植物體內(nèi)一種重要且復(fù)雜的防御機制[32]。研究表明，一些外源激發(fā)因子可誘導(dǎo)植物產(chǎn)生全株獲得性抗病性，這一過程通過催化增強相關(guān)防御酶系活性及相關(guān)病程蛋白表達(dá)，從而有效延緩病原菌侵染。目前，生物類激發(fā)因子主要是一些拮抗菌[11]，而GSFE作為柑橘采后抗病性誘發(fā)劑鮮見報道。

綜上，GSFE不僅可以直接抑制柑橘如‘南豐’蜜桔采后青、綠霉病害，而且可以誘導(dǎo)病原宿主柑橘增強相關(guān)抗性酶活力，提高抗氧化物質(zhì)如黃酮、總酚物質(zhì)的含量，減緩其膜脂過氧化進(jìn)程等途徑增強抗病能力，從而抑制柑橘病斑擴(kuò)增，減少發(fā)病率及病情指數(shù)，達(dá)到柑橘采后防腐保鮮的效果。