印度梨形孢對鐵皮石斛種子萌發(fā)和原球莖生長的影響

許鳳來，朱志炎，何勇，田志宏

印度梨形孢對鐵皮石斛種子萌發(fā)和原球莖生長的影響

許鳳來，朱志炎，何勇，田志宏*

(長江大學生命科學學院，湖北 荊州 434025)

為探究印度梨形孢()對鐵皮石斛()種子萌發(fā)和原球莖生長的影響，在鐵皮石斛種子離體培養(yǎng)和原球莖生長階段分別接種印度梨形孢，對其形態(tài)發(fā)育特征和生理特性進行研究。結果表明，接種印度梨形孢的鐵皮石斛種子的起始萌發(fā)時間提前，接種印度梨形孢的鐵皮石斛原球莖的株高、鮮質量、干質量、葉片數(shù)、葉長、葉寬、根數(shù)、根長等都高于對照。在接種60 d的種子萌發(fā)率為68.8%，高于對照(28.6%)；在接種80 d的鐵皮石斛原球莖的葉綠素a、葉綠素b、總葉綠素含量顯著高于對照，葉綠素a/b小于對照，凈光合速率、氣孔導度、蒸騰速率均高于對照，藥用多糖含量顯著高于對照。因此，接種印度梨形孢能促進鐵皮石斛種子萌發(fā)和原球莖的生長，提高鐵皮石斛的品質和產量。

鐵皮石斛；印度梨形孢；種子；萌發(fā)；原球莖；生長

目前，藥用石斛屬()植物有40多種,其中鐵皮石斛()是栽培面積最大的種類, 其干燥莖是珍貴的藥材，素有“藥中黃金”之稱[1]。鐵皮石斛含有多糖、芪類、聯(lián)芐類、生物堿等化學成分, 多糖具有調節(jié)免疫力和調節(jié)肝細胞活性的藥理作用,生物堿具有抗氧化、抗癌和神經(jīng)保護的藥理作用，其他化合物具有抗氧化、抗癌和提高免疫力的藥理作用[2–3]。鐵皮石斛具有益胃生津、滋陰清熱、明目強身等功效[1]，其提取物具有抑制肝癌細胞增殖、生津改善干燥癥、促進頭發(fā)生長等多種藥用價值[4–6]。

印度梨形孢()是一種根部內生真菌，可定殖多個厚垣孢子于多種植物的根系中，促進植物的生長和發(fā)育，增強植物對脅迫的抵抗力，提高作物產量。其可縮短水稻()、玉米()、煙草()等種子的萌發(fā)時間，同時明顯提高種子的萌發(fā)率和生長速率[7]，對甘蔗()、辣椒()、甘藍()、向日葵()、番茄()、吊蘭()等有明顯促進生長的作用[8–9]，也能促進紋瓣蘭()的生長和增加假馬齒莧()的生物量[10–11]。印度梨形孢能促進蘭科幼苗的生長[12]，但尚未有提高蘭科種子萌發(fā)率的報道。鑒于印度梨形孢對植物種子萌發(fā)和幼苗生長發(fā)育的作用，我們推測印度梨形孢可能對鐵皮石斛種子萌發(fā)和原球莖生長產生積極影響，以期后續(xù)能推進印度梨形孢生物菌肥的研發(fā)，提高鐵皮石斛的品質和產量。

1 材料和方法

1.1 材料

鐵皮石斛()種子和原球莖由江蘇同人生物科技有限公司牟永花女士惠贈，為來自浙江省雁蕩山地方種選育的‘同人1號’品種; 印度梨形孢()菌種由德國耶拿大學Ralf Oelmüller教授和臺灣大學葉開溫教授惠贈，本實驗室保存，在PDA培養(yǎng)基上活化待用。

1.2 方法

培養(yǎng)基 鐵皮石斛種子萌發(fā)培養(yǎng)基為MS+ 10 g/L香蕉粉+8 g/L瓊脂；原球莖生長培養(yǎng)基為1/2MS+100 g/L馬鈴薯+8 g/L瓊脂，pH均調至5.8。

種子萌發(fā)試驗 將無菌的鐵皮石斛種子放置到MS液體培養(yǎng)基(無糖)中，充分搖勻，制作成種子懸浮液，浸泡30 min，吸取1 000L均勻播種于鋪有無菌濾紙的萌發(fā)培養(yǎng)基上。用接種器取邊緣活力強的印度梨形孢菌絲體，在培養(yǎng)基中間添加3 mm帶有印度梨形孢的瓊脂塊，對照為同樣大小的不含印度梨形孢的PDA瓊脂塊。每處理20個培養(yǎng)皿, 3次重復。鐵皮石斛種子萌發(fā)階段劃分參照吳慧鳳等[13]的方法。

種子萌發(fā)階段劃分 鐵皮石斛種子在萌發(fā)培養(yǎng)基上吸水膨脹，種皮透明，完整，為階段0; 30 d左右進入階段1，種胚膨大，轉綠；60 d左右進入階段2，種子突破種皮，種子開始萌發(fā)；出現(xiàn)原生組織為階段3；長出第1片葉為階段4；長出第2片葉為階段5 (圖1)。

原球莖生長 每個培養(yǎng)瓶里放置6個原球莖,呈圓形排列。在培養(yǎng)基中間添加3 mm帶有印度梨形孢的瓊脂塊，對照為同樣大小的不含印度梨形孢的PDA瓊脂塊。每處理60個培養(yǎng)瓶，3次重復。

圖1 鐵皮石斛種子萌發(fā)過程。A: 階段0; B: 階段1; C: 階段2; D: 階段3; E: 階段4; F: 階段5。

1.3 印度梨形孢定殖觀察

隨機選取處于第2階段鐵皮石斛種子，先用無菌水沖洗3次，用10% KOH浸泡16 h，再用無菌水沖洗3次，再用1% HCl浸泡30 min，然后用0.05%臺盼藍染色7~10 min后用無菌水沖洗3次。在顯微鏡下觀察印度梨形孢是否定殖，使用正置顯微鏡拍照。

印度梨形孢與鐵皮石斛原球莖共培養(yǎng)7、10、15 d時隨機選取原球莖，用無菌水沖洗3次，徒手縱切成厚度為0.05~0.1 cm的小片。取生長40 d的原球莖的根，用無菌水洗滌3次，徒手縱切根系成長1 cm，厚度0.05~0.1 cm的小段，用上述方法處理后觀察印度梨形孢在原球莖階段的定殖情況。

1.4 生理指標的測定

取鐵皮石斛與印度梨形孢共生的種子在體式顯微鏡下統(tǒng)計萌發(fā)率。最早萌發(fā)時間參照Stewart等的方法[14]，參照周雨等的方法[15]，以階段3為萌發(fā)標準，隨機取3個視野統(tǒng)計萌發(fā)率。原球莖接種印度梨形孢80 d時，分別測定株高、鮮質量、干質量、葉片數(shù)、葉長、葉寬、根數(shù)和根長，取9個原球莖統(tǒng)計生物量，重復3次。

原球莖接種印度梨形孢80 d時，選擇從下往上第2、3葉片測定葉綠素含量，用紫外可見分光光度計在663和645 nm波長下測定吸光度，參照Arnon的公式計算[16]。接種印度梨形孢80 d的早上9:00- 11:00，使用Li-6400便捷式光合測定儀，選擇從下往上第3片葉測定凈光合速率、氣孔導度、蒸騰速率，PFD設定為1 000mol/(m2·s)，溫度(25±1)℃，CO2濃度(390±10)L/L，每組測定3株，3次重復。接種印度梨形孢80 d時取原球莖的莖，采用超聲提取水溶性多糖，用苯酚-硫酸方法測定多糖含量[17]。

2 結果和分析

2.1 對種子萌發(fā)的影響

從圖2可見，印度梨形孢處理的鐵皮石斛種子起始萌發(fā)時間約22 d，對照約60 d。接種印度梨形孢的種子發(fā)育形成的原球莖更綠、更大，生長速度較快；對照種子發(fā)育形成的原球莖偏小, 顏色偏黃，生長速度較慢。接種印度梨形孢22 d的鐵皮石斛種子萌發(fā)率約為31.8%，接種60 d的萌發(fā)率約為68.8%，而對照僅為28.6%。這表明印度梨形孢處理的種子萌發(fā)提前了約38 d，萌發(fā)率提高了40.2%。

圖2 印度梨形孢對鐵皮石斛種子萌發(fā)的影響

2.2 對原球莖生長和葉綠素含量的影響

與對照相比，接種印度梨形孢的鐵皮石斛原球莖的株高、鮮質量、干質量、葉片數(shù)、葉長、葉寬、根數(shù)和根長均有提高(表1)，且隨接種時間延長持續(xù)促進原球莖生長(圖3)。接種80 d的原球莖葉綠素含量比對照高(表2)，葉綠素a/b則小于對照, 這表明葉片中的葉綠素a、葉綠素b含量比對照的更穩(wěn)定。

表1 接種印度梨形孢80 d的鐵皮石斛原球莖的生長特性

*:<0.05; **:<0.01。下表同。

*:<0.05; **:<0.01. The same is following Tables.

表2 接種印度梨形孢80 d的鐵皮石斛原球莖葉綠素含量

圖3 印度梨形孢接種對鐵皮石斛原球莖生長的影響。A: 20 d; B: 40 d; C: 60 d; D: 80 d。

2.3 對原球莖葉片光合特性和多糖的影響

接種印度梨形孢80 d的鐵皮石斛原球莖葉片的光合性能和多糖含量均有提高(表3)，接種印度梨形孢的原球莖葉片凈光合速率比對照顯著提高了59.47%，其多糖含量是對照的1.29倍。

2.4 印度梨形孢的定殖

取處于萌發(fā)第2~3階段的種子用臺盼藍染色檢測，在顯微鏡下可觀察到印度梨形孢孢子貼著鐵皮石斛的種皮，并通過表皮毛進入種子(圖4: E)。

印度梨形孢與原球莖共生7、10和15 d時，隨機選取10個原球莖用臺盼藍染色檢測，在顯微鏡下可見印度梨形孢孢子通過表皮毛進入原球莖組織中(圖4: A~C)。共培養(yǎng)7 d時印度梨形孢孢子接觸到處于種子萌發(fā)第3階段的原球莖表皮毛(圖4: A)；共培養(yǎng)10 d時孢子開始進入處于種子萌發(fā)第4階段的原球莖表皮毛中(圖4: B)；到共培養(yǎng)15 d時原球莖處于種子萌發(fā)的第4階段，孢子大量進入原球莖表皮毛中(圖4: C)；共生40 d時原球莖處于種子萌發(fā)的第5階段，可見孢子定殖到原球莖根部細胞內或細胞間(圖4: D)。

表3 共培養(yǎng)80 d時印度梨形孢對鐵皮石斛原球莖光合參數(shù)和多糖的影響

3 結論和討論

姜鵬等提出蘭科植物種子萌發(fā)階段和成年蘭花階段有較多的真菌種類與其共生，幼苗階段的共生真菌種類較少[18]，真菌可能同時出現(xiàn)在多個時期，也可能只出現(xiàn)在其中的一個時期。本試驗證實在鐵皮石斛種子和原球莖發(fā)育階段分別接種印度梨形孢，可以達到共生的目的。不同蘭科植物對共生萌發(fā)真菌的專一性不同，有些植物對特定真菌具有偏好性，有些植物呈現(xiàn)泛化的特征，如火燒蘭屬植物()可與多種真菌共生[19]。有研究表明，瘤菌根菌屬、絲核菌屬、角菌根菌屬、小菇屬真菌可侵染鐵皮石斛幼苗，枝孢霉菌、膠膜菌屬等真菌可侵染鐵皮石斛種子[20–24]。因此，我們推測促進鐵皮石斛種子萌發(fā)的真菌可能具有一定的泛化特征，但這仍需更多的試驗來驗證。

蘭科植物種子細小且無胚乳，共生微生物可以促進種子發(fā)芽，而且可以使成年植物更好地適應環(huán)境壓力，通常情況下蘭科種子與適宜的內生真菌共生后能夠較好萌發(fā)[25]。王亞妮等報道菌根真菌與蘭科植物共生時能主動分泌赤霉素、吲哚乙酸、脫落酸等多種植物激素和生長調節(jié)類物質，從而打破細胞休眠，刺激細胞分裂分化，促進蘭科植物種子萌發(fā)和植株生長[26]。據(jù)報道印度梨形孢侵染大麥()后，其植物生長素、赤霉素、脫落酸生長激素代謝基因上調表達[27]。通過鏡檢，推斷印度梨形孢孢子可能是在種子萌發(fā)的第0和1階段粘附種皮，提高鐵皮石斛種子的抗逆能力，在第2和3階段通過表皮毛作用于種子，刺激種子分泌相關生長素，加快種子生長發(fā)育。

印度梨形孢可以與被子植物、裸子植物、苔蘚植物和蕨類植物共生，提高植物的生物量[28–33]。據(jù)報道印度梨形孢可以促進蘭科植物的生長[34–35]。本研究表明，印度梨形孢在根沒有長出時通過表皮毛作用于原球莖，這和種子的侵入方式相同，在根長出后，再次侵入到已經(jīng)生長為幼苗的原球莖。與對照相比，接種印度梨形孢80 d的原球莖的葉綠素a、葉綠素b、總葉綠素、多糖含量和凈光合速率均提高，推斷印度梨形孢可能是通過增強鐵皮石斛葉片的光合性能，從而促進原球莖的生長，提高多糖含量。印度梨形孢對鐵皮石斛原球莖具有顯著促進生長的作用，而印度梨形孢促進鐵皮石斛種子萌發(fā)、原球莖生長的作用機制還有待深入研究。

[1] Chinese Pharmacopoeia Commission. Pharmacopoeia of the People’s Republic of China, Vol. 1 [M]. Beijing: China Medical Science and Technology Press, 2015: 282–283. 國家藥典委員會. 中華人民共和國藥典, 一部 [M]. 北京: 中國醫(yī)藥科技出版社, 2015: 282–283.

[2] SUN H, HU Q, JIN H, et al. Research advances in chemical consti- tuents and pharmacological activities of[J]. Chin J Exp Trad Med Formul, 2017, 23(11): 225–234. doi: 10.13422/ j.cnki.syfjx.2017110225.孫恒, 胡強, 金航, 等. 鐵皮石斛化學成分及藥理活性研究進展 [J]. 中國實驗方劑學雜志, 2017, 23(11): 225–234. doi: 10.13422/j.cnki. syfjx.2017110225.

[3] NG T B, LIU J Y, WONG J H, et al. Review of research on, a prized folk medicine [J]. Appl Microbiol Biotechnol, 2012, 93(5): 1795–1803. doi: 10.1007/s00253-011-3829-7.

[4] GUO Z B, ZHOU Y M, YANG J P, et al.extract inhibits proliferation and induces apoptosis of liver cancer cells by inactivating Wnt/-catenin signaling pathway [J]. Biomed Pharma- cother, 2019, 110: 371–379. doi: 10.1016/j.biopha.2018.11.149.

[5] XIAO L, NG T B, FENG Y B, et al.extract increases the expression of aquaporin-5 in labial glands from patients with Sj?gren’s syndrome [J]. Phytomedicine, 2011, 18(2–3): 194–198. doi: 10.1016/j.phymed.2010.05.002.

[6] CHEN J, QI H, LI J B, et al. Experimental study onpolysaccharides on promotion of hair growth [J]. China J Chin Mat Med, 2014, 39(2): 291–295. doi:10.4268/cjcmm20140225.陳健, 戚輝, 李金標, 等. 鐵皮石斛多糖促進毛發(fā)生長的實驗研究[J]. 中國中藥雜志, 2014, 39(2): 291–295. doi:10.4268/cjcmm2014 0225.

[7] VARMA A, VERMA S, SUDHA, et al., a cultivable plant-growth-promoting root endophyte [J]. Appl Environ Microbiol, 1999, 65(6): 2741–2744. doi: 10.1128/AEM.65.6.2741-2744. 1999.

[8] VARMA A, BAKSHI M, LOU B G, et al.: A novel plant growth-promoting mycorrhizal fungus [J]. Agric Res, 2012, 1(2): 117–131. doi: 10.1007/s40003-012-0019-5.

[9] SU Z Z, WANG T, SHRIVASTAVA N, et al.promotes growth, seed yield and quality ofL. [J]. Microbiol Res, 2017, 199: 29–39. doi: 10.1016/j.micres.2017.02.006.

[10] SHAH S, THAPA B B, CHAND K, et al.promotes the growth of the-raisedplantlet and their acclimatization [J]. Plant Signal Behav, 2019, 14(6): 1596716. doi: 10.1080/15592324.2019.1596716.

[11] PRASAD R, KAMAL S, SHARMA P K, et al. Root endophyteDSM 11827 alters plant morphology, enhances biomass and antioxidant activity of medicinal plant[J]. J Bas Microbiol, 2013, 53(12): 1016–1024. doi: 10.1002/jobm. 201200367.

[12] CAO X X. Isolation and identification of pathogenic fungi causing diseases onand the research of growth- promoting effect of[D]. Hangzhou: Zhejiang University, 2015. 曹星星. 鐵皮石斛病原真菌分離與鑒定及印度梨形孢促生作用研究 [D]. 杭州: 浙江大學, 2015.

[13] WU H F, SONG X Q, LIU H X.symbiotic seed germination of[J]. Acta Ecol Sin, 2012, 32(8): 2491–2497. doi: 10.5846 / stxb201101280147.吳慧鳳, 宋希強, 劉紅霞. 鐵皮石斛種子的室內共生萌發(fā)[J]. 生態(tài)學報, 2012, 32(8): 2491–2497. doi: 10.5846 /stxb201101280147.

[14] STEWART S L, ZETTLER L W. Symbiotic germination of three semi- aquatic rein orchids (,,) from Florida [J]. Aquat Bot, 2002, 72(1): 25–35. doi: 10.1016/ S0304-3770(01)00214-5.

[15] ZHOU Y, FU Q, WANG Y, et al. Effects of different hormones on seed sterile germination and cultivation of[J]. Seed, 2019, 38(2): 83–85,88. doi: 10.16590/j.cnki.1001-4705.2018.02.083.周雨, 付巧, 汪意, 等. 不同激素對白及種子無菌萌發(fā)生長的影響 [J]. 種子, 2019, 38(2): 83–85,88. doi: 10.16590/j.cnki.1001-4705.2018. 02.083.

[16] LI H S. Principles and Techniques of Plant Physiological Biochemical Experiment [M]. Beijing: Higher Education Press, 2000: 35–160. 李合生. 植物生理生化實驗原理和技術 [M]. 北京: 高等教育出版社, 2000: 35–160.

[17] JIN R, XIE W H, CHEN J B, et al. Effects of ultrasonic-assisted hot water extraction on the yield and structure of water soluble polysac- charides from[J]. J Zhejiang Univ (Agric Life Sci), 2019, 45(2): 196–204. doi: 10.3785/j.issn.1008-9209.2018.04. 161.金蓉, 謝文華, 陳杰標, 等. 超聲輔助熱水提取對鐵皮石斛水溶性多糖得率和結構的影響 [J]. 浙江大學學報(農業(yè)與生命科學版), 2019, 45(2): 196–204. doi: 10.3785/j.issn.1008-9209.2018.04.161.

[18] JIANG P, FAN L. The application of research methods in the symbiosis between orchids and fungi [J]. Mycosystema, 2009, 28(6): 895–901. 姜鵬, 范黎. 蘭科植物與真菌共生關系研究方法及其應用[J]. 菌物學報, 2009, 28(6): 895–901.

[19] GAO Y, CHEN Y H, XING X K. Symbiotic fungi inducing seed germination of medicinalof Orchidaceae [J]. Mycosystema, 2019, 38(11): 1948–1957. doi: 10.13346/j.mycosystema. 190208.高越, 陳艷紅, 邢曉科. 蘭科藥用植物手參種子的真菌共生萌發(fā)[J]. 菌物學報, 2019, 38(11): 1948–1957. doi: 10.13346/j.mycosystema. 190208.

[20] WANG W Y, ZOU H, DAI Y M, et al. Effect ofsp. on root morphology ofand their symbiotic relationship [J]. J Trop Subtrop Bot, 2020, 28(2): 124–130. doi: 10.11926/jtsb.4093.王偉英, 鄒暉, 戴藝民, 等. 瘤菌根菌對鐵皮石斛根系形態(tài)的影響及其共生關系的研究[J]. 熱帶亞熱帶植物學報, 2020, 28(2): 124– 130. doi: 10.11926/jtsb.4093.

[21] KANG Z H, HAN S F, HAN Z M. Effects of Orchidaceous rhizoc- tonias on the growth of[J]. J Nanjing For Univ (Nat Sci), 2007, 31(5): 49–52. doi:10.3969/j.issn.1000-2006.2007.05. 011.亢志華, 韓素芬, 韓正敏. 蘭科絲核菌類真菌對鐵皮石斛生長的影響[J]. 南京林業(yè)大學學報(自然科學版), 2007, 31(5): 49–52. doi:10. 3969/j.issn.1000-2006.2007.05.011.

[22] GAO W W, GUO S X. Effects of endophytic fungal hyphae and their metabolites on the growth ofand[J]. Acta Acad Med Sin, 2001, 23(6): 556–559. 高微微, 郭順星. 內生真菌菌絲及代謝物對鐵皮石斛及金線蓮生長的影響 [J]. 中國醫(yī)學科學院學報, 2001, 23(6): 556–559.

[23] YANG J W, CHEN X M, MENG Z X, et al. Effects of fungus S7 (sp.) and extracts on the germination ofseeds [J]. Sci Sin Vit, 2020, 50(5): 559–570. 楊建文, 陳曉梅, 孟志霞, 等. 膠膜菌屬真菌S7 (sp.)及提取物對鐵皮石斛種子萌發(fā)的影響 [J]. 中國科學: 生命科學, 2020, 50(5): 559–570.

[24] WANG Z C. Response mechanisms ofinoculated withand key environmental factors for its seed germination [D]. Chongqing: Southwest University, 2019. 王兆春. 鐵皮石斛接種枝孢霉菌的響應機制及其種子萌發(fā)關鍵環(huán)境因子研究 [D]. 重慶: 西南大學, 2019.

[25] TEIXEIRA DA SILVA J A,TSAVKELOVA E A, ZENG S J, et al. Symbioticseed propagation ofFungal and bacterial partners and their influence on plant growth and development [J]. Planta, 2015, 242(1): 1–22. doi: 10.1007/s00425-015-2301-9.

[26] WANG Y N, WANG L K, MIAO Z B, et al. Research advances in mycorrhizal fungi of(Orchidaceae) [J]. J Trop Subtrop Bot, 2013, 21(3): 281–288. doi:10.3969/j.issn.1005-3395.2013.03.015.王亞妮, 王麗琨, 苗宗保, 等. 蘭科石斛屬植物菌根真菌研究進展 [J]. 熱帶亞熱帶植物學報, 2013, 21(3): 281–288. doi:10.3969/j.issn. 1005-3395.2013.03.015.

[27] SCH?FER P, PFIFFI S, VOLL L M, et al. Manipulation of plant innate immunity and gibberellin as factor of compatibility in the mutualistic association of barley roots with[J]. Plant J, 2009, 59(3): 461–474. doi: 10.1111/j.1365-313X.2009.03887.x.

[28] CHENG C Z, SUN X L, HAO X Y, et al. Effects oftreatment on seed germination and seedling growth of longan plants [J]. Fujian J Agric Sci, 2018, 33(5): 481–484. doi:10.19303/j. issn.1008-0384.2018.05.006.程春振, 孫雪麗, 郝向陽, 等. 印度梨形孢對龍眼種子萌發(fā)和幼苗生長的影響 [J]. 福建農業(yè)學報, 2018, 33(5): 481–484. doi:10. 19303/j.issn.1008-0384.2018.05.006.

[29] JISHA S, SABU K K. Multifunctional aspects ofin plant endosymbiosis [J]. Mycology, 2019, 10(3): 182–190. doi: 10.1080/21501203.2019.1600063.

[30] ZHOU X Y, LIANG Y, DONG Z, et al. Effects ofon growth and root morphology ofseedlings [J]. J Shandong Univ (Nat Sci), 2018, 53(7): 7–14. doi: 10.6040/j.issn. 1671-9352.0.2018.019.周曉瑩, 梁玉, 董智, 等. 印度梨形孢對黑松幼苗生長量及其根系形態(tài)的動態(tài)影響 [J]. 山東大學學報(理學版), 2018, 53(7): 7–14. doi: 10.6040/j.issn.1671-9352.0.2018.019.

[31] WU J D, CHEN Q, LIU X X, et al. Preliminary study on mechanisms of growth promotion in rice colonized by[J]. Chin J Rice Sci, 2015, 29(2): 200–207. doi: 10.3969/j.issn.1001-7216. 2015.02.012.吳金丹, 陳乾, 劉曉曦, 等. 印度梨形孢對水稻的促生作用及其機理的初探 [J]. 中國水稻科學, 2015, 29(2): 200–207. doi: 10.3969/j. issn.1001-7216.2015.02.012.

[32] WANG H L, ZHENG J R, ZHENG X D. Effect ofon the growth and nutritional quality of Chinese celery (L.) [J]. J Chin Inst Food Sci Technol, 2017, 17(6): 124–130. doi:10.16429/j.1009-7848.2017.06.017.王慧俐, 鄭積榮, 鄭曉冬. 印度梨形孢對芹菜的生長及營養(yǎng)品質的影響 [J]. 中國食品學報, 2017, 17(6): 124–130. doi:10.16429/j.1009- 7848.2017.06.017.

[33] LIN H F, XIONG J, ZHOU H M, et al. Growth promotion and disease resistance induced incolonized by the beneficial root endo- phyte[J]. BMC Plant Biol, 2019, 19(1): 40. doi: 10.1186/s12870-019-1649-6.

[34] LIU H C, LI M J, JIN L, et al. Effect of Piriformospora indica on tissue cultured seedling growth oforchid [J]. Zhejiang Agric Sci, 2019, 60(4): 642–645. doi: 10.16178/j.issn.0528-9017.20190436.劉慧春, 李明江, 金亮, 等. 印度梨形孢對文心蘭組培苗生長的影響 [J]. 浙江農業(yè)科學, 2019, 60(4): 642–645. doi: 10.16178/j.issn. 0528-9017.20190436.

[35] YE W, SHEN C H, LIN Y L, et al. Growth promotion-related miRNAs inorchid roots colonized by the endophytic fungus[J]. PLoS One, 2014, 9(1): e84920. doi: 10.1371/ journal.pone.0084920.

Effects ofon Seed Germination and Protocorm Growth of

XU Feng-lai, ZHU Zhi-yan, HE Yong, TIAN Zhi-hong*

(College of Life Science, Yangtze University, Jingzhou 434025, Hubei, China)

In order to explore the effects ofon seed germination and protocorm growth of, the morphological and physiological characteristics were studied inoculated byon seeds and protocorm. The results showed that the initial germination time ofseeds inoculated withwas earlier than the control, and the height, fresh weight, dry weight, number of leaves, leaf length, leaf width, root number and root length of protocorm ofinoculated withwere higher than the control. The seed germination rate was 68.8% after 60 days of inoculation, which was higher than the control (28.6%). The chlorophyll a content, chlorophyll b content and total chlorophyll content in the protocorm ofinoculated for 80 days were significantly higher than the control, chlorophyll a/b was lower than the control, the net photosynthesis rate, stomatal conductance and transpirationrate were higher than the control, and the content of medicinal polysaccharide was significantly higher than the control. Therefore, the seed germination and protocorm growth ofwere promoted by inoculation, and the quality and yield were improved.

;; Seed; Germination; Protocorm; Growth

10.11926/jtsb.4231

2020–04–03

2020–06–12

湖北省生物菌肥工程技術研究中心項目(GCZX2012042)資助

This work was supported by the Project of Hubei Biological Fertilizer Engineering Technology Research Center (Grant No. GCZX2012042).

許鳳來(1995~ ), 女, 碩士研究生, 從事植物與微生物互作研究。E-mail: 2731438573@qq.com.

E-mail:zhtian@yangtzeu.edu.cn