張成華

摘要：為了解決沉香組培苗生根難的問題，我們應(yīng)用ABT生根粉，誘導(dǎo)沉香組培苗在組織培養(yǎng)中生根，分析不同ABT生根粉濃度之間在沉香組培生根的差異及其生根效應(yīng)。結(jié)果表明：?jiǎn)为?dú)使用生長(zhǎng)素?zé)o生根表現(xiàn)，配合使用ABT生根粉后提高了生根率。為沉香組培快速繁育提供了有力的技術(shù)支撐。

關(guān)鍵詞：沉香;ABT生根粉;組織培養(yǎng)

沉香樹（學(xué)名：Aquilaria sinensis （Lour.） Spreng.），是一種熱帶及亞熱帶常綠喬木，屬于瑞香科沉香屬植物，樹能生長(zhǎng)達(dá)5-15米左右，在中國(guó)又被叫做土沉香、白木香、牙香樹、莞香等等。沉香可以用作珍貴的中藥材和高級(jí)香料用品，而且有著凈化空氣、美化環(huán)境的優(yōu)點(diǎn)。隨著人們對(duì)沉香藥理作用的了解越來越深，作為日用品、熏香品、香水、藥品和美容品等制作對(duì)沉香的需求不斷增加，導(dǎo)致沉香的種植面積在不斷擴(kuò)大。

沉香種子繁殖存在著遺傳多樣性，而且種子繁殖是一種有性繁殖方式，不經(jīng)過系統(tǒng)選育的種子會(huì)產(chǎn)生形狀的變異，因此，其繁殖后代的生物性狀和經(jīng)濟(jì)形狀都有所差別。選用優(yōu)良的沉香植株，用組培的方法來快速繁殖大量苗木能保持植株的親本性。有資料顯示，沉香在組培生根中生根率不高。為此，我們把ABT生根粉應(yīng)用在沉香組織培養(yǎng)中，應(yīng)用不同ABT生根粉濃度，對(duì)提高其生根率我們做了試驗(yàn)研究與探索，獲得了一定效果。

1 材料與方法

1.1 供試材料

選用沉香樹當(dāng)年新發(fā)出幼嫩的莖尖和莖段誘導(dǎo)無菌苗。

1.2 培養(yǎng)基

試驗(yàn)所用的培養(yǎng)基：改良MS培養(yǎng)基，搭配NAA、ABT進(jìn)行。

2 試驗(yàn)方法

在初代培養(yǎng)中，我們選取生長(zhǎng)旺盛、健壯、無病蟲害的1-2年生沉香苗木。陽光比較充足、紫外線比較強(qiáng)烈的天氣進(jìn)行采集。采集外植體時(shí)，去掉多余的葉子和枝條。剪成帶有一個(gè)腋芽和莖尖的枝條。我們把它放入燒杯中，然后蓋上紗布，用皮筋扎緊，水龍頭下流水沖洗0.5-1h。再到超凈工作臺(tái)上用75%乙醇消毒30s，5%的次氯酸鈉消毒3-5min，無菌水沖洗3-4次，濾紙吸干表面的水分，再次修剪一下外植體，轉(zhuǎn)入新鮮培養(yǎng)基MS（改良）+BA0.5-1.0mg/L上，培養(yǎng)室培養(yǎng)15-20d。莖段和頂芽誘導(dǎo)出新的腋芽約為2cm。此時(shí)我們將誘導(dǎo)的2cm左右的嫩芽，轉(zhuǎn)入新鮮的繼代增殖培養(yǎng)基MS+BA0.8-1.0mg/L中，大約15d嫩芽基部會(huì)長(zhǎng)出愈傷組織，在愈傷組織上10-15d長(zhǎng)出了多個(gè)芽點(diǎn)，芽點(diǎn)慢慢發(fā)育成嫩芽，增殖倍數(shù)在3-4，達(dá)到了一個(gè)良好的繁殖系數(shù)。

2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

經(jīng)過3-4次繼代培養(yǎng)的沉香苗，待生長(zhǎng)到2-3cm時(shí)，植株生長(zhǎng)健壯，把叢芽分割成單芽，接種至我們?cè)O(shè)計(jì)的生根培養(yǎng)基①1/4MS大量元素+1/2微量元素+NAA0.05mg/L;②1/4MS大量元素+1/2微量元素+IBA0.05mg/L;③1/4MS 大量元素+1/2微量元素+IBA0.05mg/L+ NAA0.05mg/L;④1/4MS大量元素+1/2微量元素+ABT1.0mg/L+NAA0.05mg/L;⑤1/4MS大量元素+1/2微量元素+ABT1.5mg/L+NAA0.05mg/L;⑥1/4MS大量元素+1/2微量元素+ABT2.0mg/L+NAA0.05mg/L，6種培養(yǎng)基中進(jìn)行誘導(dǎo)生根。蔗糖20g/L，瓊脂6.5g，PH6.8。每種培養(yǎng)基接種6瓶，每瓶4株，三個(gè)重復(fù)，放培養(yǎng)室中進(jìn)行培養(yǎng)。光照強(qiáng)度1500-2000Lx，光照時(shí)間12小時(shí)，溫度20-28℃。

3 試驗(yàn)結(jié)果與分析

在生根誘導(dǎo)培養(yǎng)基培養(yǎng)30d后，觀察記錄生長(zhǎng)情況及生根率（見圖1圖2）。

通過試驗(yàn)結(jié)果分析：在試驗(yàn)⑤號(hào)使用ABT1.5mg/mL的培養(yǎng)基中，生根率為70%，生根長(zhǎng)度為1.6cm，生根條數(shù)為2.3條。而在試驗(yàn)⑥號(hào)使用ABT2.0mg/mL的培養(yǎng)基中，生根長(zhǎng)度為2.5cm，生根條數(shù)為1.5條，苗子長(zhǎng)勢(shì)健壯，生根率在80%。在無添加ABT生根粉的①②③ 號(hào)培養(yǎng)基的上，我們發(fā)現(xiàn)試驗(yàn)結(jié)果無生根現(xiàn)象，而且生長(zhǎng)一段時(shí)間，苗子基本沒有變化。試驗(yàn)④號(hào)使用ABT1.0mg/L的培養(yǎng)基也只有少量生根。在使用①②③的培養(yǎng)基中，無生根現(xiàn)象見（表1）。

上述試驗(yàn)充分證明，使用了ABT與NAA配合的生根培養(yǎng)基，有利于沉香組培苗的生根。在使用NAA和IBA的培養(yǎng)基上，沒有誘導(dǎo)出根系。在同時(shí)使用NAA含有ABT生根粉的1.0、1.5、2.0的培養(yǎng)基上，有不同程度的生根效果。對(duì)促進(jìn)生根長(zhǎng)度最長(zhǎng)的，以ABT1.5 mg/L最佳，ABT2.0 mg/L對(duì)生根條數(shù)是最佳的。通過本次試驗(yàn)，解決了沉香生根難的問題，也為我們?cè)诮M培上使用ABT生根粉的提供了依據(jù)，同時(shí)本試驗(yàn)也為沉香的組培工廠化育苗提供了技術(shù)服務(wù)。

參考文獻(xiàn)

[1]邱運(yùn)亮， 闞文靖. 生根粉（ABT）在赤桉組織培養(yǎng)芽叢生根中的應(yīng)用[J]. 經(jīng)濟(jì)林研究， 1994（S1）：68-70.

[2]黃守印， 殷果， 劉桂蘭， et aL. ABT生根粉在都山繡球試管苗生根上的應(yīng)用[C]// 生態(tài)文明建設(shè)中的植物學(xué)：現(xiàn)在與未來——中國(guó)植物學(xué)會(huì)第十五屆會(huì)員代表大會(huì)暨八十周年學(xué)術(shù)年會(huì).

[3]余素芹，李正新. “ABT”生根粉在植物組織培養(yǎng)中的應(yīng)用[J]. 貴州農(nóng)業(yè)科學(xué)（5期）：8-8.

[4]汪騰越. 土沉香組織培養(yǎng)再生體系的研究[D]. 中國(guó)林業(yè)科學(xué)研究院， 2012.

[5]賈賢. 土沉香組織培養(yǎng)再生體系的建立[D]. 海南大學(xué)， 2014.

[6]百度百科.