3株氟咯草酮降解菌株的篩選及其生物降解效果研究

雷向榮，沈 碩,4，李 瑋,3,5*

（1. 青海大學(xué)，西寧 810016；2. 青海省農(nóng)林科學(xué)院，西寧 810016；3. 青海省農(nóng)業(yè)有害生物綜合治理重點實驗室，西寧 810016；4. 青海省馬鈴薯育種重點實驗室，西寧 810016；5. 農(nóng)業(yè)農(nóng)村部西寧作物有害生物科學(xué)觀測實驗站，西寧 810016）

隨著農(nóng)業(yè)的發(fā)展，農(nóng)藥被廣泛用于獲得更高的作物產(chǎn)量，由于殘留水平高、利用率低，許多農(nóng)藥殘留在土壤、水、作物和空氣中，造成環(huán)境污染[1-3]。包括人類在內(nèi)的非目標(biāo)生物接觸農(nóng)藥，會引發(fā)嚴(yán)重的不良影響[4,5]；除草劑作為應(yīng)用最廣泛的農(nóng)藥，顯著提高了農(nóng)業(yè)生產(chǎn)力和作物產(chǎn)量[6]，但大規(guī)模使用農(nóng)藥會對作物和環(huán)境造成間接的不利影響，除草劑可能會影響植物酶或中斷生物系統(tǒng)，從而傷害或破壞正常的植物生長和發(fā)育，最終導(dǎo)致植物死亡[7-9]；其不可避免地通過瀝濾和地表徑流進(jìn)入地表水，這種除草劑會對水生生物和無脊椎動物以及土壤環(huán)境造成嚴(yán)重?fù)p害[10,11]。所以，大量的除草劑的土壤殘余會對農(nóng)業(yè)生態(tài)可續(xù)性發(fā)展造成極大阻礙[12]。氟咯草酮（flurochloridone，F(xiàn)LC）作為一種新型的吡咯酮類芽前施用的選擇性除草劑，可有效防除冬小麥、棉花、向日葵、胡蘿卜和土豆田的大部分闊葉雜草，近年來得到了廣泛的推廣，并于2014年被我國列為農(nóng)藥優(yōu)勢開發(fā)項目[13-16]。然而，氟咯草酮在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的普遍使用會在生態(tài)環(huán)境中留下大量的殘余[6]。研究表明，在青海高原三個不同地區(qū)（海東、海西和海北）進(jìn)行25%氟咯草酮乳油在馬鈴薯中的消解動態(tài)和殘留分析，氟咯草酮在三個地區(qū)土壤中的半衰期分別為25.7、27.7和19.3 d，葉片中分別為8.1、10.2和7.0 d[17]。由此可見，氟咯草酮的半衰期較長且在自然條件下降解速率較為緩慢，如何對其進(jìn)行快速而安全地降解是亟待解決的問題。

生物修復(fù)是一種利用活的綠色植物或微生物來去除土壤、地表水和地下水中的污染物的技術(shù)，而以微生物修復(fù)理論為基礎(chǔ)的除草劑的殘留降解技術(shù)是解決土壤修復(fù)問題的有效途徑[18]。微生物修復(fù)法被廣泛用于除草劑阿特拉津（Atrazine）在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中殘留的降解研究中，具有阿特拉津生物降解性的不同類型的微生物（細(xì)菌、真菌）已被大量識別、分離，并廣泛應(yīng)用于阿特拉津殘余的去除。由鐵氧化菌（iron-oxidizing bacteria）、采絨革蓋菌Coriolus versicolor和白腐菌（white rot fungi）組成的混合微生物也可有效降解阿特拉津，降解率甚至可達(dá)到98%[19]。近年來，關(guān)于除草劑微生物降解的研究較多，其中磺酰脲類、氯乙酰胺類、咪唑啉酮類、三嗪類除草劑降解菌的研究取得了突破性的進(jìn)展[20-35]，然而對除草劑氟咯草酮降解菌株的相關(guān)研究和報道較少。本研究以應(yīng)用青海馬鈴薯田間雜草防除的氟咯草酮為研究對象，在前期引進(jìn)手性除草劑氟咯草酮并進(jìn)行該藥劑在高原馬鈴薯田的除草效果、安全性、使用方式、使用劑量、殺草譜等方面研究的工作基礎(chǔ)上[36]，篩選來源于青海本地生境的微生物降解菌株，初步探明氟咯草酮在高效降解菌作用下的降解效率以及降解菌株對后茬作物的安全性，以期為該藥劑的推廣應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)，對保護(hù)三江源生態(tài)環(huán)境具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 供試材料

1.1.1 土壤樣品 土樣來自青海省農(nóng)林科學(xué)院植物保護(hù)研究所試驗地施用氟咯草酮的馬鈴薯田，該試驗地連續(xù)3年施用制劑量為1250.0 g a.i./hm2的25%氟咯草酮進(jìn)行播后苗前封閉處理土壤。

1.1.2 試劑 氟咯草酮原藥由上海泰禾集團(tuán)有限公司提供。

1.1.3 培養(yǎng)基 LB液體培養(yǎng)基：肉提取物3 g，蛋白胨10 g，乳糖5 g，溴麝香草酚藍(lán)0.024 g，pH 7.0，115 ℃滅菌30 min；固體培養(yǎng)基加入1.5%的瓊脂。改良馬丁培養(yǎng)基：酵母浸出粉2 g，葡萄糖20 g，蛋白胨5 g，磷酸氫二鉀1 g，硫酸鎂0.5 g，pH（6.4±0.2），121 ℃滅菌30 min；固體培養(yǎng)基加入1.5%的瓊脂。高氏1號培養(yǎng)基：氯化鈉0.5 g，可溶性淀粉20 g，硝酸鉀1 g，磷酸氫二鉀0.5 g，硫酸亞鐵0.01 g，無水硫酸鎂0.244 g，121 ℃滅菌30 min；固體培養(yǎng)基加入1.5%的瓊脂。無機(jī)鹽培養(yǎng)基：硫酸銨0.4 g，硝酸銨1.2 g，磷酸二氫鉀0.5 g，磷酸氫二鉀1.5 g，硫酸鎂0.5 g，氯化鈉0.5 g，酵母提取物0.05 g，pH 7.0，121 ℃滅菌30 min。固體培養(yǎng)基加入1.5%的瓊脂。

1.1.4 儀器 液相三重四級桿液質(zhì)聯(lián)用儀（型號LCMS-8040，日本島津公司）條件為霧化氣流量3.0 L/min；DL管溫度：250 ℃；加熱塊溫度：450 ℃；干燥氣流量：15 L/min；柱溫箱：40 ℃；流速：0.25 mL/min；梯度洗脫：B泵濃度50%，2 min變?yōu)?%，5.01 min變?yōu)?0%，8 min結(jié)束。多反應(yīng)監(jiān)測模式（Multiple Reaction Monitoring，MRM）來檢測氟咯草酮，并且正電離和負(fù)電離模式均用于調(diào)整質(zhì)譜（Mass Spectrometry，MS）參數(shù)。色譜條件：色譜柱，C18柱；柱溫，40 ℃；流動相A為甲醇，流動相B為0.1%乙酸+5 mmol/L乙酸銨；流速，0.4 mL/min；進(jìn)樣體積，2.0 μL。質(zhì)譜條件見表1。

表1 質(zhì)譜條件Table 1 Mass spectrometry conditions

1.2 試驗方法

1.2.1 菌種的分離純化 稱取10 g土樣加有90 mL無菌水的250 mL三角瓶中，28 ℃、180 r/min恒溫振蕩培養(yǎng)30 min獲得稀釋10倍的菌懸液，吸取1 mL菌懸液加到含9 mL無菌水的試管中，稀釋成10-2，按此方法依次10倍系列稀釋，分別吸取0.1 mL濃度在10-4、10-5和10-6的菌液，在提前準(zhǔn)備好的高氏1號、改良馬丁和LB固體培養(yǎng)基中用滅過菌的涂布棒進(jìn)行涂布，每組3次重復(fù)；將涂布好的平板置于生化培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，LB平板在37 ℃下培養(yǎng)1 d，改良馬丁培養(yǎng)基28 ℃培養(yǎng)5～7 d；高氏1號培養(yǎng)基28 ℃培養(yǎng)4～14 d，在平板中挑取單菌落重復(fù)多次劃線分離培養(yǎng)，直至分離出單菌落，將單菌落保存于相應(yīng)的固體斜面培養(yǎng)基中。

1.2.2 微生物的馴化 配置500 mL無機(jī)鹽固體培養(yǎng)基，高壓滅菌，待溫度冷卻到40 ℃左右時吸取10 mg/L的氟咯草酮標(biāo)準(zhǔn)母液5 mL，制備成氟咯草酮濃度為0.1 mg/L的無機(jī)鹽培養(yǎng)基，將分離純化得到的菌株接種在此平板上28 ℃條件下培養(yǎng)2～3 d，將能夠在0.1 mg/L的氟咯草酮無機(jī)鹽培養(yǎng)基中生長的菌種轉(zhuǎn)代接種于濃度為0.2 mg/L的無機(jī)鹽固體培養(yǎng)基中，繼續(xù)馴化轉(zhuǎn)代培養(yǎng)，當(dāng)氟咯草酮濃度增大到1 mg/L時若還能在平板上生長，即此菌株具有降解氟咯草酮的潛能，保存菌株研究其降解特性。

1.2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 將氟咯草酮標(biāo)準(zhǔn)品配置成0.01、0.05、0.1、0.2、0.5和1 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液，根據(jù)氟咯草酮出峰的保留時間定性、峰面積定量，以氟咯草酮進(jìn)樣濃度和峰面積關(guān)系制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.2.4 菌株降解能力的測定 將馴化得到的具有降解氟咯草酮潛能的菌株分別接種至無機(jī)鹽液體培養(yǎng)基中，28 ℃、180 r/min振蕩培養(yǎng)72 h，作為種子液。將種子液以5%的接種量接到濃度為1 mg/L的氟咯草酮無機(jī)鹽液體培養(yǎng)基中，28 ℃、180 r/min振蕩培養(yǎng)，每隔1、3、5、7和14 d取樣，以添加相同濃度氟咯草酮不接菌的各培養(yǎng)基為對照，高效液相色譜－串聯(lián)質(zhì)譜法檢測分析各菌株對氟咯草酮的降解率。吸取10 mL培養(yǎng)液，置于50 mL具塞離心管中，加入10 mL乙腈溶液。渦旋振蕩3 min至充分混勻。加入3 g NaCl，渦旋1 min，5000 r/min離心5 min，取上清液1.5 mL，加入50 mg PSA和100 mg無水硫酸鎂，渦旋1 min，以12000 r/min離心2 min。取上層清液，經(jīng)0.22 μm膜過濾后，供液相三重四級桿液質(zhì)聯(lián)用儀測定。降解率計算公式[37]：Q（%）＝（C0－Ct）/C0×100，式中Q為氟咯草酮降解率（%），C0為氟咯草酮的初始濃度（mg/L）；Ct為培養(yǎng)結(jié)束后培養(yǎng)基中殘留的氟咯草酮含量（mg/L）。

1.2.5 降解菌株的形態(tài)學(xué)鑒定 菌株FL-G-2在高氏1號固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)2 d，菌株FL-M-2、FL-M-3分別在改良馬丁培養(yǎng)基上培養(yǎng)5 d，分別于載玻片上點無菌水1滴，用解剖針挑取少許孢子均勻分散涂抹于水中，于40×光學(xué)顯微鏡下觀察其形態(tài)特征。

1.2.6 降解菌株的分子鑒定 使用Ezup柱式真菌基因組DNA抽提試劑盒，分別提取菌株FL-M-2、FL-M-3的基因組DNA[38]，選擇ITS基因進(jìn)行PCR擴(kuò)增；使用Ezup柱式細(xì)菌基因組DNA抽提試劑盒提取菌株FL-G-2的基因組DNA[39]，選擇16S rDNA基因進(jìn)行PCR擴(kuò)增（表2）。擴(kuò)增產(chǎn)物由上海生工生物公司完成測序，獲取序列后，登錄NCBI網(wǎng)站選擇Blast窗口，輸入獲得的基因序列進(jìn)行同源性序列比對，用MEGA 6.0軟件構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹。

表2 構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹引物信息Table 2 Primers of phylogenetic tree

1.2.7 降解菌株生長曲線測定 將篩選得到的3株降解菌分別在28 ℃、180 r/min振蕩培養(yǎng)，每隔1 d取樣，每次取樣100 μL菌液，用酶標(biāo)儀測定菌株FL-M-2和FL-M-3菌液在OD620下的吸光值，菌株FL-G-2菌液在OD600下的吸光值，分別作菌株生長曲線圖。

1.2.8 降解菌株的安全性評價 采用種子萌發(fā)法[40]。在28 ℃、180 r/min的培養(yǎng)條件下，在平板上挑取菌株FL-G-2單菌落接種到高氏1號液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)3 d，在平板上挑取菌株FL-M-2、FL-M-3單菌落分別接種到改良馬丁液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)3 d，分別制成種子液，再將各種子液以5%的接種量分別接入各液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)5 d，將菌懸液濃度均調(diào)整為1×108cfu/mL；以小麥和油菜種子為受體，向每個培養(yǎng)皿中播入16粒種子，用移液管每皿添加5 mL菌懸液，共設(shè)置4個處理：（1）FL-M-2菌懸液（1×108cfu/mL）；（2）FL-M-3菌懸液（1×108cfu/mL）；（3）FL-G-2菌懸液（1×108cfu/mL）；（4）清水對照。每個處理設(shè)置3次重復(fù)，在智能光照培養(yǎng)箱中25 ℃恒溫保濕光照培養(yǎng)，光照12 h，黑暗12 h。種子在生測前進(jìn)行滅菌消毒，之后分別加入蒸餾水催芽直至露白，7 d后計算各小麥和油菜種子萌發(fā)的根長、芽長、鮮重和干重。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

采用Origin 2019軟件和SPSS 25軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理分析，LSD法進(jìn)行差異顯著性檢驗。

2 結(jié)果與分析

2.1 土壤中降解菌的分離與純化

對經(jīng)過富集與馴化的土樣培養(yǎng)液混合菌群分別進(jìn)行梯度稀釋涂布平板，挑取菌落外觀特征存在差異的菌株進(jìn)行純化，在氟咯草酮無機(jī)鹽培養(yǎng)基中得到11株菌，供試菌株在28 ℃、pH 7.0的條件下均能夠生長且長勢良好。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

使用氟咯草酮標(biāo)準(zhǔn)品建立標(biāo)準(zhǔn)曲線（圖1），標(biāo)準(zhǔn)方程為y=185382+4.0253×106x（R2＝0.9989），標(biāo)準(zhǔn)樣品在濃度范圍內(nèi)峰面積呈良好的線性關(guān)系，表明該方法測定培養(yǎng)基中氟咯草酮的含量比較精確，并且操作簡便、可靠，符合農(nóng)藥殘留分析質(zhì)量控制的技術(shù)要求。

圖1 氟咯草酮標(biāo)準(zhǔn)品的標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig. 1 Standard curve of flurochloridone standard product

2.3 菌株降解能力的測定

降解能力的測定結(jié)果表明，菌株FL-M-2、FL-M-3和FL-G-2培養(yǎng)14 d 時，對氟咯草酮的降解率分別為50.82%、73.43%和84.37%，均顯著高于其他菌株，各培養(yǎng)液中氟咯草酮濃度隨著處理時間的延長均呈現(xiàn)逐漸降低趨勢，其中菌株FL-M-2培養(yǎng)液中氟咯草酮濃度14 d內(nèi)緩慢平穩(wěn)降低，菌株FL-M-3培養(yǎng)液中氟咯草酮濃度7 d內(nèi)降低較快，由初始濃度1 mg/L降低到0.28 mg/L，但隨著處理時間延長至14 d，氟咯草酮濃度只下降了0.01 mg/L；菌株FL-G-2培養(yǎng)液中氟咯草酮濃度14 d內(nèi)快速降低，并于14 d降低到0.16 mg/L；其余8株菌與其對應(yīng)空白對照組相比，對氟咯草酮無明顯的降解作用（表3）。

表3 不同時期各菌株培養(yǎng)液中氟咯草酮殘留濃度Table 3 Residual concentration of flurochlorid in the culture broth of each strain at different periods

2.4 降解菌株的鑒定

2.4.1 降解菌株的形態(tài)觀察 菌株FL-M-2在改良馬丁培養(yǎng)基上，菌落近圓形，初期為白色，后為淡紫色，邊緣呈絨毛狀；分生孢子梗呈樹狀，各分支頂端含小梗（圖2 a，d）。

菌株FL-M-3在改良馬丁培養(yǎng)基上，菌落圓形，初期為白色，后為灰白色，邊緣呈纖毛狀；分生孢子梗有分支，壁光滑（圖2 b，e）

菌株FL-G-2在高氏1號培養(yǎng)基上，菌落灰白色，干燥不透明，表面呈致密的絲絨狀；孢子表面呈光滑狀，孢子鏈呈直鏈狀，孢子絲彎曲，無螺旋（圖2 c，f）。

圖2 菌株FL-M-2、FL-M-3、FL-G-2的形態(tài)結(jié)構(gòu)Fig. 2 Morphology of strain FL-M-2, FL-M-3 and FL-G-2

2.4.2 降解菌株的分子鑒定 通過PCR擴(kuò)增，分別從菌株 FL-M-2、FL-M-3 和 FL-G-2獲得1294、1343和1459 bp基因片段；經(jīng)過裁剪后，利用MEGA 6.0的鄰近法構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹，菌株FL-M-2（登錄號：MW686879）、FL-M-3（登錄號：MW686880）和 FL-G-2（登錄號：MW686908）分別與紫色紫孢菌（FR775516.1）、小雙胞腔菌屬（MT453292.1）和小鏈霉菌（MF359745.1）聚為同一分支（圖3）。因此，結(jié)合形態(tài)學(xué)特征和分子鑒定結(jié)果，將3株菌分別鑒定為紫色紫孢菌Purpureocillium lavendulum、小雙胞腔菌屬Didymellaceaesp.和小鏈霉菌Streptomyces parvus。

圖3 降解菌株的系統(tǒng)發(fā)育樹圖Fig. 3 Phylogenetic tree diagram of degrading strains

2.5 降解菌株生長曲線測定

由圖4可知，菌株FL-M-2和菌株FL-M-3在前3 d內(nèi)均生長較快，培養(yǎng)的第3～6 d進(jìn)入了生長穩(wěn)定期；菌株FL-G-2前3 d生長較快，培養(yǎng)的第3～5 d進(jìn)入了生長穩(wěn)定期。

圖4 降解菌株的生長曲線圖Fig. 4 Growth curve of degrading strains

2.6 降解菌株的安全性評價

經(jīng)恒溫保濕光照培養(yǎng)7 d后，分別對菌株FL-M-2、FL-M-3和FL-G-2處理的油菜和小麥幼苗生長進(jìn)行調(diào)查結(jié)果顯示，菌液濃度為1×108cfu/mL時，3株降解菌處理的油菜的根長和干重與對照相比無明顯差異，其中菌株FL-M-2菌液處理的油菜芽長為4.86 cm，較對照增加了1.3 cm，菌株FL-M-2菌液處理的油菜的鮮重為0.93 g，較對照組增加了0.4 g；3株降解菌處理的小麥的根長、芽長和干重與對照組相比無明顯差異，菌株FL-M-3菌液處理的鮮重顯著高于其他菌株，比對照處理小麥的鮮重增加了1.53 g（表4）。結(jié)果表明，3株降解菌對油菜和小麥生長均無明顯的抑制作用。

表4 降解菌株對油菜和小麥幼苗生長的影響Table 4 Effects of strains with degrading ability on the growth of rape and wheat seedlings

3 討論

氟咯草酮對馬鈴薯田雜草具有較好的防除效果，后期具有一定的推廣應(yīng)用價值[36]。然而，由于其殘效期長、在自然條件下難降解、易對后茬作物產(chǎn)生藥害等限制性因素制約了該藥劑的大面積推廣應(yīng)用，因此篩選安全高效的降解菌株，開發(fā)微生物降解產(chǎn)品，可為該藥劑后期的大面積安全應(yīng)用提供配套保障。目前，國內(nèi)外學(xué)者報道了多種具有降解除草劑的微生物菌株，但關(guān)于吡咯烷酮類除草劑氟咯草酮的降解微生物研究較少，本研究從青海高原土壤中分離到 3株優(yōu)勢降解菌紫色紫孢菌、小鏈霉菌和小雙胞腔菌屬，3株菌能夠高效地降解氟咯草酮，尤其是小鏈霉菌的降解效果最好，發(fā)酵培養(yǎng)14 d對1mg/L氟咯草酮降解率達(dá)到84.37%，研究結(jié)果可為后續(xù)研究氟咯草酮及吡咯烷酮類除草劑的生物降解提供基礎(chǔ)，揭示吡咯烷酮類除草劑的生物降解途徑、降解代謝產(chǎn)物和生物降解機(jī)制方面是后續(xù)研究的重點。

研究表明，紫色紫孢菌在防治植物病原線蟲中有突破性進(jìn)展，該菌已成為商品化應(yīng)用最廣泛的食線蟲真菌之一[41]；此外該菌對植物的生長呈現(xiàn)“低促高抑”的濃度效應(yīng)[42]。在本試驗中，當(dāng)FL-M-2菌液濃度為1×108cfu/mL時，菌液處理的油菜芽長和鮮重顯著高于清水對照組，可能的原因是該濃度的FL-M-2菌液可以促進(jìn)油菜的生長，根據(jù)此特性可開發(fā)天然抑草劑和催芽劑。作為苦馬豆、藏沙蒿、披針葉黃華等多種藥用植物的內(nèi)生真菌[43-45]，小雙胞腔菌屬可有效促進(jìn)藥用植物生長發(fā)育，提高植物的抗逆性，本試驗初步探究了該菌株在微生物降解方面的功能，構(gòu)建多功能的小雙胞腔菌屬。小鏈霉菌可有效地防治黃瓜枯萎病并提高小麥的耐干旱能力[46]，同時小鏈霉菌還是一類重要的防治番茄潰瘍病的生防菌株[47]，此外小鏈霉菌分離可獲得較高抗性的抗病毒蛋白，可有效防治煙草花葉病毒及黃瓜花葉病毒[48]。而關(guān)于這3株菌在微生物降解方面的研究均尚未見報道，本試驗探究了菌株對目標(biāo)除草劑的降解作用，不斷提高3株菌株的功能性，使其具有兼顧防治農(nóng)業(yè)病害，降低土壤農(nóng)藥殘留等優(yōu)點，期望實現(xiàn)農(nóng)藥高效減量的同時并改善微生物環(huán)境，從而探索出一種經(jīng)濟(jì)高效的微生物降解途徑。

溫濕度、酸堿度、碳氮含量、粘度、鹽度、通氣情況和基質(zhì)吸附作用等都會影響微生物降解農(nóng)藥殘留的速率，微生物的適應(yīng)性、代謝活性以及種類等因素也可以直接影響微生物對農(nóng)藥降解和轉(zhuǎn)化過程[49]。本研究在pH為7.0，溫度為28 ℃，接種量為5%的條件下，菌株FL-G-2和菌株FL-M-2在14 d內(nèi)呈現(xiàn)平穩(wěn)降解趨勢，而菌株FL-M-3起始降解速率較其他兩株高效降解菌降解速率較快，而后其降解速率逐漸平緩，后續(xù)將對其降解速率變化的原因以及降解菌株最優(yōu)發(fā)酵條件下的最佳降解速率進(jìn)一步深入探究，以期得到優(yōu)勢降解菌株對氟咯草酮的最優(yōu)降解效果。從本地生境中篩選到的微生物降解菌株，較為容易適應(yīng)田間生態(tài)環(huán)境，經(jīng)田間馴化，將形成的生物產(chǎn)品以生物激勵和生物強(qiáng)化的方式應(yīng)用于田間生產(chǎn)，具有較好的應(yīng)用價值。

微生物修復(fù)處理方法必須監(jiān)測和評估生物修復(fù)過程[50]，以最大程度地避免新的環(huán)境污染問題的產(chǎn)生，本試驗在篩選出具有降解氟咯草酮能力的菌株的基礎(chǔ)上，通過研究降解菌株對青海馬鈴薯田常見后茬作物（小麥和油菜）幼苗的生長的影響對其進(jìn)行安全性評價，結(jié)果表明3株菌的發(fā)酵液對小麥和油菜幼苗的生長均無明顯的抑制作用。這一結(jié)論為降解菌株的安全應(yīng)用提供了理論基礎(chǔ)。由此可見，作為降解吡咯烷酮類除草劑的新型菌種資源，F(xiàn)L-M-2、FL-G-2和FL-M-3具有良好的研發(fā)和應(yīng)用潛力，其菌株及其發(fā)酵代謝產(chǎn)物對多種作物的生長安全。