李園園 周潔蕊 彭軍輝 馬忠文 盧世杰 吳紅翔

（江西農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，江西南昌330045）

20世紀(jì)50年代，抗生素對(duì)預(yù)防動(dòng)物疾病、促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)等方面發(fā)揮了積極的作用[1]，但因其耐藥性及藥物殘留對(duì)人類健康的影響，面臨著被禁用的挑戰(zhàn)[2]。大量研究表明，益生菌作為抗生素替代物的潛力巨大[3]，為畜禽維持優(yōu)異的生產(chǎn)性能提供了有力保障[4]。

早在1973 年研究人員就發(fā)現(xiàn)，通過(guò)給剛孵化的雛雞灌服健康成年雞的腸內(nèi)容物懸浮液可以保護(hù)其免受腸炎沙門氏菌的攻擊[5]。Lilly 等[6]把益生素描述為一種可以刺激其他微生物生長(zhǎng)的微生物物質(zhì)，是與抗生素作用相反的物質(zhì)。Fuller[7]將益生菌定義為：直接或間接有效地提高宿主腸道微生物平衡的活菌添加劑。益生素應(yīng)用于畜牧生產(chǎn)前景廣闊。甜葉菊(Stiewia rebaudiana)是一種天然、綠色無(wú)公害食品[8]，其葉片中的甜味成分主要是甜菊糖甙，含量占10%左右，非糖部分含有蛋白質(zhì)、脂肪、纖維素、灰分、無(wú)氮浸出物等物質(zhì)[9]。

本試驗(yàn)從益生素對(duì)青腳麻雞的生長(zhǎng)性能、屠宰性能等方面影響入手，探討了益生素與甜葉菊提取物的聯(lián)用是否具有協(xié)同效應(yīng)。旨在尋求提高青腳麻雞生長(zhǎng)性能及改善其品質(zhì)的最佳添加劑組合，為促進(jìn)青腳麻雞的科學(xué)養(yǎng)殖和提高該產(chǎn)業(yè)的綜合效益提供試驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

青腳麻雞160 只(由江西省崇仁畜牧局提供)；益生素(由江西天意生物科技公司提供，主要成分為乳酸菌類、芽孢桿菌類、酵母菌類)；甜葉菊提取物(由贛州畜牧局提供)；主要儀器設(shè)備：電子天平、離心管、離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)(722 型)；試劑：3.8%枸櫞酸鈉溶液(陜西省西隴化工有限公司)、pHB-4型酸度計(jì)(德國(guó)WTW公司)。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與分組

飼養(yǎng)一批剛出生的青腳麻雞，用不含抗生素的全價(jià)料飼養(yǎng)2 周。挑選160 只2 周齡平均體重約在168.84 g 的青腳麻雞，將其隨機(jī)分為4組，每組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10 只。A 組在基礎(chǔ)日糧中添加0.2%益生素；B 組在基礎(chǔ)日糧中添加0.2%甜葉菊提取物和0.2%益生素；C組在基礎(chǔ)日糧中添加0.2%甜葉菊提取物；D組為對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧。

1.2.2 各組飼料的營(yíng)養(yǎng)水平

本次試驗(yàn)的飼料采用自配的配合飼料,其中玉米、豆粕、麥麩用粉碎機(jī)粉碎。日糧配方及養(yǎng)分含量參照NRC(1994)標(biāo)準(zhǔn)配制?；A(chǔ)日糧組成與營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

表1 基礎(chǔ)日糧組成和營(yíng)養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.3 飼養(yǎng)管理

將分好組的4 組小雞分區(qū)飼養(yǎng)，每天喂三次，自由采食、籠養(yǎng)，7日齡時(shí)，給4組雞按1份劑量點(diǎn)眼、滴鼻接種新城疫Ⅳ系疫苗，21日齡按1.5倍量二免，接種方式為點(diǎn)眼、滴鼻。

1.4 測(cè)定指標(biāo)與方法

1.4.1 生長(zhǎng)性能

記錄試驗(yàn)雞的初始體重，在試驗(yàn)期間以重復(fù)為單位，每隔兩周進(jìn)行一次空腹稱重（稱重前禁食12 h）。

1.4.2 屠宰性能測(cè)定

飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后，每組隨機(jī)抽取4只接近平均體重且健康的青腳麻雞禁食12 h，并分別稱其活重，頸部放血致死后進(jìn)行屠宰，測(cè)定其胴體重、全凈膛重、半凈膛重，并計(jì)算屠宰率、全凈堂率、半凈堂率。測(cè)定方法參照《家禽生產(chǎn)性能名詞術(shù)語(yǔ)和度量統(tǒng)計(jì)方法(NY/T 823—2004)》。

屠宰率(%)=屠體重/活重×100

全凈膛率(%)=全凈膛重/活重×100

半凈膛率(%)=半凈膛/活重×100

1.4.3 免疫指數(shù)測(cè)定

飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后，每組隨機(jī)選取4只接近平均體重的青腳麻雞，屠宰，摘取胸腺、法氏囊、脾臟，稱量重量并計(jì)算免疫器官指數(shù)。

免疫器官指數(shù)(%)=[免疫器官重量(g)/活重(g)]×100

1.4.4 血清尿素氮測(cè)定

飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后清晨空腹條件下，每組隨機(jī)選取4只雞，進(jìn)行翅靜脈采血5 mL/只，室溫靜置30 min，以3 000 r/min 分離血清，-20 ℃冷藏。使用血清尿素氮測(cè)試盒[10]測(cè)定后，在可見(jiàn)分光光度計(jì)下測(cè)得氮的含量。

1.4.5 回、盲腸pH值

宰后45 min，將腸分離，用酸度計(jì)電極插入雞回腸、盲腸、十二指腸內(nèi)距前端2 cm部位[11]，讀取pH值。

1.5 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 11.5 軟件統(tǒng)計(jì)，用單因子方差分析(One-Way ANOVA)進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 益生素和甜葉菊提取物對(duì)青腳麻雞生長(zhǎng)性能的影響（見(jiàn)表2）

表2 益生素和甜葉菊提取物對(duì)雞生長(zhǎng)性能的影響(g)

由表2可知，各組青腳麻雞在第2周和第4周時(shí)體重差異不顯著（P＞0.05）。當(dāng)在第6周和第8周時(shí)，與對(duì)照組相比，A組和B組顯著提高了青腳麻雞的體重（P＜0.05），C組青腳麻雞的體重?zé)o顯著差異（P＞0.05）。由上述結(jié)果可知，飼料中添加益生素可以改善青腳麻雞的生長(zhǎng)性能，與甜葉菊提取物一同添加時(shí)可以起到促進(jìn)作用。

2.2 益生素和甜葉菊提取物對(duì)青腳麻雞屠宰性能的影響（見(jiàn)表3）

表3 益生素和甜葉菊提取物對(duì)雞屠宰性能的影響

由表3 可知，與對(duì)照組相比，A 組、B 組顯著提高了青腳麻雞的宰前活重、屠宰率、全凈膛率以及半凈膛率（P＜0.05）。飼料中添加益生素改善了青腳麻雞的屠宰性能，與甜葉菊提取物一同添加時(shí)效果尤佳。

2.3 益生素和甜葉菊提取物對(duì)青腳麻雞免疫指數(shù)的影響（見(jiàn)表4）

表4 益生素和甜葉菊提取物對(duì)雞免疫器官指數(shù)的影響(%)

由表4 可知，與對(duì)照組相比，B 組顯著提高了青腳麻雞的法氏囊指數(shù)(P＜0.05)。益生素和甜葉菊提取物一同添加時(shí)，刺激了青腳麻雞的法氏囊發(fā)育，增強(qiáng)了機(jī)體的免疫力。

2.4 益生素和甜葉菊提取物對(duì)青腳麻雞血清尿素氮含量的影響（見(jiàn)表5）

由表5 可知，與對(duì)照組相比，A、B、C 三組顯著降低了青腳麻雞的血清尿素氮含量（P＜0.05）。

表5 益生素和甜葉菊提取物對(duì)雞血清尿素氮的影響

2.5 益生素和甜葉菊提取物對(duì)青腳麻雞腸道pH 值的影響（見(jiàn)表6）

由表6可見(jiàn)，益生素和甜葉菊提取物對(duì)青腳麻雞腸道的pH無(wú)明顯影響。

表6 益生素和甜葉菊提取物對(duì)雞腸道pH值的影響

3 討論

3.1 益生素和甜葉菊提取物對(duì)青腳麻雞生長(zhǎng)性能的影響

從表2可知，與對(duì)照組相比，A組和B組顯著增加了青腳麻雞的體重(第6周、第8周)(P＜0.05)，說(shuō)明添加益生素可促進(jìn)青腳麻雞的生長(zhǎng)。益生菌可通過(guò)改善腸道微生態(tài)平衡、增強(qiáng)黏膜免疫功能、促進(jìn)消化道對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收而提高生長(zhǎng)性能[12]。Mountzouris等[13]的研究結(jié)果表明，日糧中添加復(fù)合益生菌，可顯著提高腸道消化酶活性和肉雞的生長(zhǎng)性能。本試驗(yàn)中單一添加甜葉菊提取物沒(méi)有提高青腳麻雞的體重，推其機(jī)理，甜葉菊提取物中的甜菊糖苷元和糖基主要依靠β-1,2 糖苷鍵連接，這使其在消化道中不能被動(dòng)物體直接吸收，因而不能直接增加體重。

3.2 益生素和甜葉菊提取物對(duì)青腳麻雞屠宰性能的影響

屠宰性能是反映營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)在動(dòng)物體內(nèi)沉積差異、衡量雞產(chǎn)肉性能的一組重要指標(biāo)[14]。陸銀等[15]研究表明，復(fù)合益生菌能夠提高21～35 日齡肉雞的屠宰率、腿肌率和胸肌率，并且呈劑量依賴效應(yīng)。肉雞的活體品質(zhì)直接關(guān)系和影響機(jī)體屠體性狀，屠宰性能也是唯一與營(yíng)養(yǎng)價(jià)值并列的重要指標(biāo)，而屠宰率和全凈膛率均被公認(rèn)為是衡量肉雞產(chǎn)肉性能的主要指標(biāo)[16]。本試驗(yàn)屠宰性能結(jié)果表明，與對(duì)照組相比，A組和B組顯著提高了青腳麻雞的宰前活重、屠宰率、全凈堂率以及半凈堂率(P＜0.05)，這充分說(shuō)明，在日糧中添加益生素可以提高青腳麻雞的屠宰性能，這與廖玉英等[17]的研究結(jié)果相一致，且益生素與甜葉菊提取物一同添加時(shí)效果更好，說(shuō)明甜葉菊在其中可起到促進(jìn)的作用。

3.3 益生素和甜葉菊提取物對(duì)青腳麻雞免疫器官的影響

免疫系統(tǒng)是動(dòng)物體抗病力的物質(zhì)基礎(chǔ)，免疫器官的生長(zhǎng)、發(fā)育以及成熟情況直接反映動(dòng)物機(jī)體免疫功能的狀況。本試驗(yàn)結(jié)果表明，添加益生素和甜葉菊提取物可促進(jìn)法氏囊指數(shù)增加，這一點(diǎn)與林云[18]的益生菌的使用可刺激機(jī)體免疫細(xì)胞生長(zhǎng)，使免疫器官發(fā)育增快，免疫系統(tǒng)的成熟快而早，提高局部免疫機(jī)能及抗病力的觀點(diǎn)相符。在正常生理情況下，動(dòng)物機(jī)體的免疫器官（法氏囊、胸腺、脾臟）重量增加，主要原因?yàn)檫@些器官自身細(xì)胞的生長(zhǎng)發(fā)育、增殖所形成；而重量的減小則是這些器官的成熟細(xì)胞釋放入血液或自身細(xì)胞停止生長(zhǎng)發(fā)育、分裂增殖所致[19]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示法氏囊指數(shù)B 組顯著大于D 組(P＜0.05)，這與劉艷芬等[20]試驗(yàn)結(jié)果中益生菌和寡糖均可提高肉雞的免疫功能的觀點(diǎn)相符。單一添加益生素或甜葉菊提取物對(duì)免疫器官的影響不大，推測(cè)原因可能為兩者濃度不夠所造成。當(dāng)兩者一同添加時(shí)，可起到協(xié)同的作用，從而達(dá)到促進(jìn)免疫器官發(fā)育的效果。

3.4 益生素和甜葉菊提取物對(duì)青腳麻雞血清尿素氮含量的影響

血清尿素氮是反映機(jī)體的營(yíng)養(yǎng)狀況以及蛋白質(zhì)代謝水平的指標(biāo)[21]。尿素氮與體內(nèi)氮沉積和蛋白質(zhì)利用率呈負(fù)相關(guān)[22]。血清尿素氮高表明較多蛋白質(zhì)被氧化代謝，造成了蛋白質(zhì)飼料的浪費(fèi)[23]。血清尿素氮（blood urea nitrogen,BUN）是體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝的最終產(chǎn)物，其產(chǎn)生的速度取決于蛋白質(zhì)的攝入量和肝臟的功能。BUN 分子小，不與血漿蛋白質(zhì)結(jié)合，可自由通過(guò)腎小球?yàn)V過(guò)膜，反映了腎小球的濾過(guò)能力[24]。血清尿素氮是反映腎功能的重要指標(biāo)[25]。在本試驗(yàn)中，與對(duì)照組相比，三個(gè)試驗(yàn)組的血清尿素氮含量顯著下降(P＜0.05)，說(shuō)明益生素與甜葉菊提取物無(wú)論是單獨(dú)添加還是組合添加，對(duì)促進(jìn)蛋白質(zhì)代謝、改善肝腎功能都有顯著作用。益生素可以促進(jìn)蛋白質(zhì)在體內(nèi)的合成代謝，可能是由于益生素降低了腸道的pH值，刺激腸道蠕動(dòng)，同時(shí)分泌多種肽類及由肽類衍生的抗菌活性物質(zhì)，抑制病原菌的生長(zhǎng)繁殖。保障了腸道菌群的多樣性，維持了腸道的微生態(tài)平衡，促進(jìn)了日糧中養(yǎng)分在體內(nèi)的降解，從而提高了體內(nèi)氮和蛋白質(zhì)的利用率。甜葉菊是一種可理氣、消食、益脾、健胃的中草藥，可以調(diào)節(jié)機(jī)體代謝和免疫機(jī)能，同時(shí)改善飼料的適口性，促進(jìn)動(dòng)物的食欲，提高飼料消化利用率。李志靜等[26]報(bào)道，血清尿素氮正常為3.5～16 mmol/L，在本研究中各組血清尿素氮濃度均在此范圍內(nèi)。

3.5 益生素和甜葉菊提取物對(duì)青腳麻雞腸道pH 值的影響

陳主平等[27]研究指出添加化學(xué)益生菌如寡糖類物質(zhì)，或飼喂益生菌，可使動(dòng)物腸道內(nèi)的乳酸菌和鏈球菌含量增多，從而產(chǎn)生更多的有機(jī)酸使腸道內(nèi)pH 值下降。邵良平等[28]的甘露寡糖和糞鏈球菌各試驗(yàn)組雞盲腸和回腸內(nèi)容物的pH 值都極顯著低于對(duì)照組(P＜0.01)。本試驗(yàn)結(jié)果中回、盲腸的pH值各組間差異不顯著(P＞0.05)，可能因季節(jié)、品種及養(yǎng)殖條件不同所造成。

4 結(jié)論

①益生素可提高青腳麻雞的生長(zhǎng)性能及屠宰性能，當(dāng)與甜葉菊提取物一同使用時(shí)還可促進(jìn)免疫器官法氏囊的發(fā)育，同時(shí)添加甜葉菊提取物比單一使用益生素效果更明顯，但對(duì)腸道pH值的影響不明顯。

②本次試驗(yàn)的結(jié)果中，前三個(gè)試驗(yàn)組的血清尿素氮含量與對(duì)照組相比顯著降低(P＜0.05)，說(shuō)明添加益生素和甜葉菊提取物可以有效減少青腳麻雞體內(nèi)血清尿素氮含量。