王 立，王芹芹，芮昌輝，袁會(huì)珠，崔 麗

(中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所，農(nóng)業(yè)部作物有害生物綜合治理重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100193)

芹菜蚜，又稱胡蘿卜微管蚜，其可危害芹菜的莖、葉、花絮及種子等[1]，近幾年成為危害芹菜的最重要害蟲(chóng)且呈上升趨勢(shì)。目前，芹菜蚜蟲(chóng)的防治主要依靠化學(xué)農(nóng)藥[1-2]，但關(guān)于殺蟲(chóng)劑對(duì)芹菜蚜系統(tǒng)的毒力測(cè)定的文獻(xiàn)報(bào)道較少，而且用于防治芹菜蚜蟲(chóng)的藥劑品種主要是借鑒其他作物上登記的防治相似害蟲(chóng)的農(nóng)藥品種。因此，本試驗(yàn)測(cè)定了7類14種殺蟲(chóng)劑對(duì)芹菜蚜的毒力，主要包括新煙堿類、雜環(huán)類和擬除蟲(chóng)菊酯類殺蟲(chóng)劑，并從田間防治需求和延緩害蟲(chóng)抗藥性角度開(kāi)展了農(nóng)藥增效配方的篩選。

本文選用氟啶蟲(chóng)胺腈與烯啶蟲(chóng)胺進(jìn)行復(fù)配增效研究，旨在找出最佳配比以提高殺蟲(chóng)效果，延緩害蟲(chóng)抗藥性的產(chǎn)生。氟啶蟲(chóng)胺腈是美國(guó)陶氏益農(nóng)公司研制的砜亞胺類殺蟲(chóng)劑，作用于煙堿型乙酰膽堿受體(nAChR)內(nèi)獨(dú)特的結(jié)合位點(diǎn)，可有效防治對(duì)吡蟲(chóng)啉產(chǎn)生抗性的刺吸式口器害蟲(chóng)[3]。烯啶蟲(chóng)胺是繼吡蟲(chóng)啉之后的又一新型新煙堿類殺蟲(chóng)劑，具有獨(dú)特的化學(xué)與生物性質(zhì)。廣泛用于水稻、果樹(shù)、蔬菜和茶葉等多種農(nóng)作物上，可有效防治蚜蟲(chóng)、粉虱、水稻葉蟬和薊馬等多種害蟲(chóng)[4]。因兩者作用機(jī)制不同，且無(wú)交互抗性，所以兩者復(fù)配具有重要的意義。

1 材料與方法

1.1 供試蟲(chóng)源 芹菜蚜，采自北京市順義區(qū)木林鎮(zhèn)，在室內(nèi)以芹菜為寄主進(jìn)行飼養(yǎng)，飼養(yǎng)條件為：溫度(23±1)℃、相對(duì)濕度70%～75%、光周期14L:10d，光照強(qiáng)度3 500Lx左右。

1.2 供試藥劑 95%吡啶喹唑啉原藥，98%噻蟲(chóng)嗪原藥，96%氟啶蟲(chóng)酰胺原藥，96%啶蟲(chóng)脒原藥，96%噻蟲(chóng)啉原藥，95%噻蟲(chóng)胺原藥，98%呋蟲(chóng)胺原藥，97%烯啶蟲(chóng)胺原藥，98%吡蟲(chóng)啉原藥，95.9%氟啶蟲(chóng)胺腈原藥，95%環(huán)氧蟲(chóng)啶原藥，96%高效氯氟氰菊酯原藥，96%戊吡蟲(chóng)胍原藥，96%吡蚜酮原藥。

1.3 室內(nèi)毒力測(cè)定 采用浸漬法進(jìn)行毒力測(cè)定試驗(yàn)，選取帶有適量蚜蟲(chóng)的芹菜葉片，剔除不適個(gè)體，再在配制好的測(cè)定藥液中浸漬處理，5s后取出，于室溫晾干后，放置于鋪有濾紙的培養(yǎng)皿中并用保鮮膜封口。處理后的試蟲(chóng)放于光照培養(yǎng)箱(25±1)℃、L:d=14:10中處理。每個(gè)處理重復(fù)3次。吡蚜酮、吡啶喹唑啉及氟啶蟲(chóng)酰胺藥后48h檢查死亡率，其他藥劑于藥后24h檢查死亡率。檢查時(shí)用細(xì)毛筆輕輕撥動(dòng)蟲(chóng)體，完全不動(dòng)或只有一條腿動(dòng)但不能正常站立的視為死亡。

1.4 復(fù)配增效毒力測(cè)定 設(shè)置烯啶蟲(chóng)胺與氟啶蟲(chóng)胺腈的不同配比，實(shí)驗(yàn)方法同上，于藥劑處理后24h統(tǒng)計(jì)死亡率。

1.5 玻璃管藥膜法毒力測(cè)定 采用玻璃管藥膜法測(cè)定3種殺蟲(chóng)劑吡蟲(chóng)啉、噻蟲(chóng)嗪和高效氯氟氰菊酯對(duì)芹菜蚜的觸殺毒力。首先將原藥用丙酮分別配制成1%的母液，然后用丙酮稀釋為系列濃度的測(cè)定藥液，分別吸取系列濃度的殺蟲(chóng)劑藥液300μL加入到玻璃管(直徑2cm，高10cm)中，將玻璃管橫放并滾動(dòng)至藥液均勻覆蓋玻璃管內(nèi)壁，待丙酮揮發(fā)干后，挑取健康無(wú)翅芹菜蚜30頭左右進(jìn)行處理，每個(gè)濃度重復(fù)3次，空白對(duì)照用丙酮處理。將已接蟲(chóng)的玻璃管放于實(shí)驗(yàn)室條件下處理(25±2)℃，3h后檢查死亡率，死亡判斷標(biāo)準(zhǔn)同浸漬法。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析與處理 采用DPS version 7.05軟件計(jì)算毒力回歸方程和致死中濃度。共毒系數(shù)(CTC)計(jì)算參照孫云沛法[5]。

2 結(jié)果

2.1 14種殺蟲(chóng)劑對(duì)芹菜蚜的毒力 14種殺蟲(chóng)劑對(duì)芹菜蚜的毒力測(cè)定結(jié)果(表1)。結(jié)果表明：芹菜蚜對(duì)噻蟲(chóng)嗪、氟啶蟲(chóng)胺腈、烯啶蟲(chóng)胺、高效氯氟氰菊酯及環(huán)氧蟲(chóng)啶較為敏感，其中對(duì)噻蟲(chóng)嗪最為敏感，其LC50值為2.83mg/L。芹菜蚜對(duì)戊吡蟲(chóng)胍和啶蟲(chóng)脒敏感性較差，其中戊吡蟲(chóng)胍的LC50值為101.55mg/L。整體上看14種殺蟲(chóng)劑對(duì)芹菜蚜的毒力水平為：噻蟲(chóng)嗪>氟啶蟲(chóng)胺腈>烯啶蟲(chóng)胺>高效氯氟氰菊酯>環(huán)氧蟲(chóng)啶>吡蟲(chóng)啉>氟啶蟲(chóng)酰胺>噻蟲(chóng)胺>吡啶喹唑啉>噻蟲(chóng)啉>吡蚜酮>呋蟲(chóng)胺>啶蟲(chóng)脒>戊吡蟲(chóng)胍。

表1 14種殺蟲(chóng)劑對(duì)芹菜蚜蟲(chóng)的毒力測(cè)定結(jié)果

2.2 玻璃管藥膜法測(cè)定3種殺蟲(chóng)劑對(duì)芹菜蚜的毒力 采用玻璃管藥膜法測(cè)定3種殺蟲(chóng)劑對(duì)芹菜蚜的觸殺毒力。結(jié)果表明：3種殺蟲(chóng)劑對(duì)芹菜蚜的觸殺毒力大小順序?yàn)椋亨缦x(chóng)嗪>吡蟲(chóng)啉>高效氯氟氰菊酯，其中噻蟲(chóng)嗪的LC50值為0.548 6μg/cm2(表2)。玻璃管藥膜法測(cè)得殺蟲(chóng)劑對(duì)芹菜蚜的毒力結(jié)果與浸葉法測(cè)得的結(jié)果一致，2種方法都以噻蟲(chóng)嗪的毒力最高。

表2 3種殺蟲(chóng)劑藥膜法對(duì)芹菜蚜的毒力

2.3 烯啶蟲(chóng)胺與氟啶蟲(chóng)胺腈復(fù)配增效 烯啶蟲(chóng)胺與氟啶蟲(chóng)胺腈不同配比下的毒力測(cè)定結(jié)果(表3)。結(jié)果表明：隨著烯啶蟲(chóng)胺和氟啶蟲(chóng)胺腈比例的增大，共度系數(shù)基本呈現(xiàn)逐漸增大的趨勢(shì)。烯啶蟲(chóng)胺與氟啶蟲(chóng)胺腈配比為20:1、10:1、8:1、1:6、1:8、1:10、1:20時(shí)，共毒系數(shù)均>300，表現(xiàn)出顯著的增效作用。其中以烯啶蟲(chóng)胺：氟啶蟲(chóng)胺腈為1:10時(shí)增效作用最大，增效系數(shù)達(dá)到900.87。

表3 烯啶蟲(chóng)胺與氟啶蟲(chóng)胺腈在不同配比下的毒力測(cè)定結(jié)果

3 討論

化學(xué)防治是控制芹菜蚜最主要的手段，本研究表明：噻蟲(chóng)嗪、烯啶蟲(chóng)胺、氟啶蟲(chóng)胺腈、環(huán)氧蟲(chóng)啶及高效氯氟氰菊酯對(duì)芹菜蚜具有較高的毒力，因此可作為芹菜蚜防治的首選藥劑。本研究所采用的環(huán)氧蟲(chóng)啶，戊吡蟲(chóng)胍，吡啶喹唑啉為近幾年新登記的農(nóng)藥。其中環(huán)氧蟲(chóng)啶是首個(gè)順硝烯類新煙堿殺蟲(chóng)劑，而傳統(tǒng)的新煙堿殺蟲(chóng)劑均為反式構(gòu)型。新穎的結(jié)構(gòu)賦予其新的作用靶點(diǎn)和作用機(jī)制。據(jù)報(bào)道：環(huán)氧蟲(chóng)啶是國(guó)際上首例具有超高活性的nAChR拮抗劑，與傳統(tǒng)新煙堿殺蟲(chóng)劑不存在交互抗性。環(huán)氧蟲(chóng)啶對(duì)褐飛虱、煙粉虱、灰飛虱、棉蚜、白背飛虱、盲蝽等多種害蟲(chóng)具有優(yōu)異的活性，并且對(duì)多種吡蟲(chóng)啉抗性害蟲(chóng)具有優(yōu)異的防效，于2015年獲得國(guó)家新農(nóng)藥臨時(shí)登記證[6-7]。本文選用的氟啶蟲(chóng)酰胺、吡啶喹唑啉和吡蚜酮均可抑制剌吸式口器害蟲(chóng)的取食，導(dǎo)致害蟲(chóng)因饑餓而死亡，具有高效、低毒、環(huán)境友好等特點(diǎn)。最新研究還發(fā)現(xiàn)，氟啶蟲(chóng)酰胺的作用靶標(biāo)是內(nèi)向整流鉀離子(Kir)通道，可高活性地抑制Kir1通道鉀電流，干擾昆蟲(chóng)細(xì)胞的離子穩(wěn)態(tài)與平衡電位，破壞馬氏管與唾液腺的正常分泌功能，從而影響昆蟲(chóng)的取食與排泄過(guò)程，最終導(dǎo)致害蟲(chóng)死亡[8]。研究表明：昆蟲(chóng)弦音神經(jīng)元膜上的瞬時(shí)感受器電位(TRP)通道家族中TRPV亞家族成員nanchung和inactive基因所編碼的蛋白復(fù)合物是殺蟲(chóng)劑吡蚜酮的分子靶標(biāo)。TRP通道家族基因在昆蟲(chóng)體內(nèi)扮演著調(diào)控各種生理與行為的重要角色，參與調(diào)控昆蟲(chóng)各種感覺(jué)的發(fā)生，例如視覺(jué)、嗅覺(jué)、聽(tīng)覺(jué)、溫度感知以及機(jī)械刺激感覺(jué)等[9]。本研究結(jié)果顯示，此3種殺蟲(chóng)劑對(duì)芹菜蚜的室內(nèi)毒力水平較噻蟲(chóng)嗪等偏低，可能與該類藥劑的作用速度慢有關(guān)，因此有待進(jìn)一步延長(zhǎng)觀察時(shí)間并進(jìn)行田間防效試驗(yàn)，進(jìn)而明確其毒力水平。

長(zhǎng)期單一使用農(nóng)藥會(huì)增加害蟲(chóng)抗藥性發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)。經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期持續(xù)使用，吡蟲(chóng)啉等新煙堿類殺蟲(chóng)劑面臨的抗性及交互抗性問(wèn)題日益嚴(yán)重，自2005年報(bào)道褐飛虱對(duì)吡蟲(chóng)啉產(chǎn)生抗性以來(lái)[13]，陸續(xù)報(bào)道了稻飛虱、灰飛虱、煙粉虱、桃蚜、棉蚜等害蟲(chóng)對(duì)新煙堿殺蟲(chóng)劑的抗性[10-13]。雖然目前尚沒(méi)有關(guān)于芹菜蚜抗藥性的報(bào)道，但長(zhǎng)期使用單一農(nóng)藥會(huì)增加農(nóng)藥抗藥性發(fā)生和發(fā)展的風(fēng)險(xiǎn)，為防止抗藥性的快速發(fā)展，生產(chǎn)中可以選取作用機(jī)制不同的農(nóng)藥復(fù)配使用。本文選用的復(fù)配藥劑氟啶蟲(chóng)胺腈與烯啶蟲(chóng)胺均為煙堿型乙酰膽堿受體( nAChR )激動(dòng)劑，但是與烯啶蟲(chóng)胺等新煙堿殺蟲(chóng)劑不同的是氟啶蟲(chóng)胺腈作用于昆蟲(chóng)煙堿型乙酰膽堿受體(nAChR)內(nèi)獨(dú)特的結(jié)合位點(diǎn)而發(fā)揮殺蟲(chóng)功能[14]。結(jié)果顯示烯啶蟲(chóng)胺與氟啶蟲(chóng)胺腈在1:10混配的CTC為900.87，表現(xiàn)為明顯的協(xié)同增效作用。因此，2種殺蟲(chóng)劑混合使用時(shí)，建議按照烯啶蟲(chóng)胺與氟啶蟲(chóng)胺腈為1:10的比例復(fù)配，從而起到協(xié)同增效，減少殺蟲(chóng)劑使用量、延緩害蟲(chóng)抗藥性的發(fā)生的目的。

本文還選取對(duì)芹菜蚜較為敏感的噻蟲(chóng)嗪，吡蟲(chóng)啉和高效氯氟氰菊酯采用藥膜法進(jìn)行快速觸殺毒力測(cè)定，結(jié)果顯示3種農(nóng)藥中噻蟲(chóng)嗪的觸殺毒力最高，藥效最快。因此，在生產(chǎn)中對(duì)芹菜蚜的防治可以優(yōu)先選擇噻蟲(chóng)嗪。

不同地區(qū)的用藥背景不同，因此害蟲(chóng)對(duì)殺蟲(chóng)劑的敏感性不同。本文選用的芹菜蚜采自北京市順義區(qū)，該地區(qū)芹菜蚜對(duì)噻蟲(chóng)嗪、烯啶蟲(chóng)胺、氟啶蟲(chóng)胺腈、環(huán)氧蟲(chóng)啶及高效氯氟氰菊酯敏感性較高，因此，推薦當(dāng)?shù)貎?yōu)先使用這幾種藥劑防治芹菜蚜。然而，田間實(shí)際防治效果還有待進(jìn)一步驗(yàn)證。