虎耳草組培快繁體系的研究

趙玉琳，陳陸琴

(太原植物園，山西 太原 030025)

虎耳草(Saxifragastolonifera)是虎耳草科虎耳草屬多年生草本植物。其主要有效成分為異香豆精類、酚酸類、萜類和黃酮類等化合物，具有抗菌、抗炎、抗氧化、美白、保肝、抗腫瘤和止咳的作用，臨床上主要用于治療化膿性中耳炎、肺熱咳喘和預(yù)防口蹄疫?；⒍菽凸庑暂^弱，為喜陰植物，耐低溫，越冬性能好，適宜在北方應(yīng)用。山西省現(xiàn)有5種虎耳草，分別為虎耳草(SaxifragastoloniferaMeerb)、球莖虎耳草(SaxifragasibiricaLinn.)、零余虎耳草(SaxifragacernuaLinn.)、山地虎耳草(SaxifragamonanthaH.Smith)和爪虎耳草[Saxifragaunguiculata var.limprichtii(Engl. et Irmsch.) J. T. Pan]。為保護(hù)山西省虎耳草野生資源，筆者對(duì)虎耳草組培快繁體系進(jìn)行了研究，可為后續(xù)山西省虎耳草種質(zhì)資源保護(hù)提供參考。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

山西省太原市太原植物園生產(chǎn)溫室的盆栽虎耳草。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 無菌外植體的獲得

在盆栽虎耳草上剪取嫩芽，用洗衣粉浸泡10 min 后，置于流水下沖洗1 h，再用75%酒精消毒30 s，0.1%氯化汞洗滌2 min～3 min，無菌水沖洗5次～6次，最后用無菌濾紙吸干外植體表面水分，接種到MS基本培養(yǎng)基中。

1.2.2 基本培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件

MS培養(yǎng)基：蔗糖30 g/L，瓊脂6 g/L，pH值5.8～6.2.培養(yǎng)條件：溫度23 ℃～27 ℃，光照時(shí)間12 h/d，光照強(qiáng)度為2 000 lx.

1.2.3 最佳分化培養(yǎng)基的篩選

以MS為基本培養(yǎng)基，設(shè)置A1,A2,A3,A4,A55種不同激素濃度的分化培養(yǎng)基。6-BA濃度分別為0.3 mol/L，0.5 mol/L，0.8 mol/L，1.0 mol/L和1.3 mol/L，NAA濃度分別為0.03 mol/L，0.05 mol/L，0.08 mol/L，0.10 mol/L和0.13 mol/L.將獲得的無菌外植體轉(zhuǎn)入其中，每瓶6個(gè)嫩芽，每種培養(yǎng)基3瓶。25 d后觀察生長狀態(tài)和分化情況。

1.2.4 最佳生根培養(yǎng)基的篩選

以1/2 MS為基本培養(yǎng)基，設(shè)置6個(gè)不同的激素濃度，分別為0.3 mol/L NAA，0.5 mol/L NAA，1.0 mol/L NAA，0.3 mol/L IBA，0.5 mol/L IBA，1.0 mol/L IBA.將分化好的虎耳草幼苗分割移栽到生根培養(yǎng)基上，觀察生根狀況。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同激素濃度對(duì)虎耳草分化的影響

不同激素濃度對(duì)虎耳草分化的影響見表1.

表1 不同激素濃度對(duì)虎耳草分化的影響

由表1可知，不同激素濃度的分化培養(yǎng)基中，虎耳草均可分化增殖。隨著激素濃度的降低，增殖系數(shù)增大。A5培養(yǎng)基中激素濃度最高，增殖系數(shù)最低，玻璃化現(xiàn)象嚴(yán)重，愈傷組織較大，葉片發(fā)黃。隨著激素濃度的降低，在A3培養(yǎng)基中玻璃化現(xiàn)象消失，分化幼苗長勢較好。在A1和A2培養(yǎng)基中分化苗生長迅速，苗壯，葉片較綠。其中，激素濃度最低的A1培養(yǎng)基增殖系數(shù)最高，達(dá)7.84.因此，虎耳草最佳分化培養(yǎng)基為MS+6-BA 0.3 mol/L+NAA0.03 mol/L.

2.2 不同激素濃度對(duì)虎耳草生根的影響

不同激素濃度對(duì)虎耳草生根的影響見表2.

由表2可知，在不同激素條件下虎耳草均可生根，且生根率都在90%以上。在NAA條件下，最佳濃度為0.5 mol/L，高于此濃度或低于此濃度苗的生根率和平均根數(shù)均降低。IBA比NAA生根效果好，生根率均為100%.IBA為0.5 mol/L時(shí)，平均根長和平均根數(shù)最高，分別為1.0 cm，17.6條。由此得出，虎耳草最佳生根培養(yǎng)基為1/2 MS+IBA 0.5 mol/L.

表2 不同激素濃度對(duì)虎耳草生根的影響

2.3 煉苗移栽

將生根苗放于自然光下煉苗2 d～3 d，之后栽入小拱棚煉苗7 d，移栽成活率達(dá)98%以上。

3 結(jié)論與討論

本試驗(yàn)得出虎耳草最佳分化培養(yǎng)基為MS+6-BA 0.3 mol/L+NAA 0.03 mol/L，最佳生根培養(yǎng)基為1/2 MS+IBA 0.5 mol/L.近年來，虎耳草在醫(yī)藥及園林中的應(yīng)用越來越廣，虎耳草種植資源的收集和保護(hù)可為其進(jìn)一步開發(fā)利用奠定基礎(chǔ)。本試驗(yàn)研究的虎耳草組培體系可為其它種類虎耳草組培體系的建立提供依據(jù)。