大石橋市衛(wèi)生健康事務(wù)中心疾控所檢驗科 （遼寧 營口 115100）

內(nèi)容提要：目的：研究化學(xué)發(fā)光分析儀在檢測乙型肝炎病毒標(biāo)志物中的性能。方法：取本院2018年1月～2018年12月收治的確診乙型肝炎患者80例為研究對象，隨機(jī)均分成對照組和觀察組各40例，對照組給予ELISA法檢測病毒五項標(biāo)志物，觀察組給予雅培i2000化學(xué)發(fā)光分析儀測病毒五項標(biāo)志物。對比檢測準(zhǔn)確率。結(jié)果：兩種方法檢測后HBsAb符合32例，符合率80%，HBeAb符合33例，符合率82.5%、HBcAb符合37例，符合率92.5%，HBsAg符合35例，符合率87.5%，HBeAg符合率35例為87.5%。觀察組明顯優(yōu)于對照組，且數(shù)據(jù)差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論：化學(xué)發(fā)光分析儀檢測乙肝標(biāo)志物的準(zhǔn)確率高于ELISA法，且操作方便，誤診率低。

乙型肝炎為嚴(yán)重傳染疾病，并且在世界范圍內(nèi)具有較高的發(fā)病率，對患者生命威脅較大。數(shù)據(jù)顯示，全世界的慢性乙肝病毒攜帶者可達(dá)3.5億～4.0億。乙肝病毒發(fā)現(xiàn)和治療不及時會惡化成肝衰竭、肝硬化甚至肝癌，我國近年來成為乙型肝炎的高發(fā)區(qū)域，對于該病的治療首先要及時發(fā)現(xiàn)并正確診斷[1]。在臨床檢查中，以往使用放射疫檢，但該方對患者身體機(jī)能的影響較大，隨后研究并使用了酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）檢驗法，安全性更高，但是檢驗率偏低，有一定的漏診率[2]。本次研究所提出的化學(xué)發(fā)光分析儀主要是一種以光學(xué)原理作為基礎(chǔ)的檢測方法，主要檢測指標(biāo)包括乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎病毒表面抗體（抗-HBs）等，現(xiàn)對兩種不同方法的檢測效果報道如下。

1.資料與方法

1.1 臨床資料

取本院2018年1月～2018年12月收治的確診乙型肝炎患者80例為研究對象，隨機(jī)均分成對照組和觀察組各40例。其中對照組男性患者20例，女性患者20例，年齡50～88歲，觀察組男性患者21例，女性患者19例，年齡49～81歲，所有患者均在本院經(jīng)過病理檢查，確診攜帶乙肝病毒，確診為乙型肝炎，患者時間均在1年以上，所有患者均進(jìn)行血清標(biāo)志物的檢查，排除腎衰竭患者，兩組患者在一般資料上差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

儀器為雅培ARCHITEC T-i2000全自動酶免分析儀，聯(lián)合使用美國Bio-rad550型酶標(biāo)儀和法國YR-WASH-1型洗板機(jī)。所有配套設(shè)備均由雅培公司提供。所有患者分組后，分別采用ELISA法和化學(xué)發(fā)光分析儀法檢測。對比兩種檢測結(jié)果。其中ELISA檢測法的主要過程為：按照說明書以表面抗原定值血清作為質(zhì)控，陰陽對照各兩孔。加樣，使聚苯乙烯板包被的抗體（或抗原）與樣本抗體（或抗原）相互結(jié)合，加入辣根過氧化物酶孵育，洗去游離的酶標(biāo)抗原或抗體，加顯色劑顯色，經(jīng)酸終止后在450/630nm處測讀吸光度值。其中HBcAb指標(biāo)檢測的樣本需進(jìn)行1:40稀釋。陰性對照平均吸光度（A）值×2.1作為臨界值。以檢測孔A值為判斷標(biāo)準(zhǔn)，大于臨界值為陽性，反之為陰性。觀察組給予化學(xué)發(fā)光分析儀檢查，主要為雙抗體夾心檢測法。所有患者取樣后進(jìn)行標(biāo)記，培育，反復(fù)洗滌使游離抗體和抗原相互分離，將反應(yīng)液吸入流動室，磁微粒由磁鐵吸附到電極表面，再加入三丙胺，電極加電壓，啟動ECL反應(yīng)，形成病毒血清標(biāo)志物，使用雅培i2000儀器進(jìn)行病毒檢測。

1.3 觀察指標(biāo)

觀察兩組的HBsAb、HBeAb、HBcAb、HBsAg陽性檢出率，比較兩組檢測質(zhì)指標(biāo)的符合率。HBsAg陽性為＞0.05lU/mL，HBsAb陽性為＞10mlU/mL，HBeAg陽性為≥1，抗-HbeS/CO陽性≤1。兩組檢測后的正確率吻合度為符合率，分別記錄四項指標(biāo)的符合率，統(tǒng)計檢出正確率，與病理檢測向比較。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

本次采用統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS20.0進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計，分別進(jìn)行計量檢測和計數(shù)檢測，計量檢測以均數(shù)來表示，計數(shù)資料以%來表示，所有數(shù)據(jù)的統(tǒng)計學(xué)意義分析以P＜0.05為標(biāo)準(zhǔn)。即P＜0.05為數(shù)據(jù)差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 兩種方法檢測結(jié)果比較

兩種方法檢測后HBsAb符合32例，符合率80%，HBeAb符合33例，符合率82.5%、HBcAb符合37例，符合率92.5%，HBsAg符合35例，符合率87.5%，HBeAg符合率35例為87.5%。

2.2 乙型肝炎陽性檢出率

本次80例病理確診攜帶乙肝病毒患者，對照組陽性檢出33例，檢測正確率為82.5%，觀察組陽性檢出39例，檢出正確率為97.5%，觀察組明顯優(yōu)于對照組，且數(shù)據(jù)差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。

3.討論

隨著技術(shù)水平的提高，光學(xué)儀器在檢查中開始應(yīng)用，化學(xué)發(fā)光儀的檢出正確率被證明高于ELISA法檢查，檢查結(jié)果影響因素較少，因此結(jié)果更加穩(wěn)定?；瘜W(xué)發(fā)光分析儀是一種全新的將化學(xué)發(fā)光與生物發(fā)光相結(jié)合的檢測儀器，主要應(yīng)于檢測微量抗原或抗體的一種新型標(biāo)記免疫測定技術(shù)。檢測原理或可看做與放射免疫（RIA）和酶免疫（EIA）的檢測原理相似，但該方法使用發(fā)光底物自身的發(fā)光強(qiáng)度來進(jìn)行病毒的判定。酶促化學(xué)發(fā)光系統(tǒng)的原理在于免疫反應(yīng)中的酶作用于發(fā)光底物，也就是酶對檢測發(fā)光物起到促進(jìn)作用，使其釋放出能量，利用其穩(wěn)定狀態(tài)下發(fā)射出的光子進(jìn)行掃描檢查。在檢測中，檢測儀器的光量子產(chǎn)額與酶量成正比，因此可以基于此建立數(shù)據(jù)曲線來計算被檢驗樣本中的病毒含量，這就是其基本的檢測原理。在檢驗靈敏度上，主要采用HBsAg靈敏度來表示，其中化學(xué)發(fā)光儀的檢測在達(dá)到0.1/mL既可以顯示陽性，酶標(biāo)ELISA檢測HBsAg的靈敏度需要達(dá)到到2ng/mL時才顯示出陽性。本次研究對兩種方法的樣本檢查結(jié)果進(jìn)行報道，檢查過程正確，檢查樣本均符合要求，且檢查結(jié)果與臨床其他檢查結(jié)果保持差異性，但整體結(jié)論上保持一致。但缺點(diǎn)在于所選樣本的數(shù)量不足，需要進(jìn)一步研究并結(jié)合臨床其他研究資料。研究結(jié)果顯示，研究中部分患者的乙型肝炎E抗原的低值總精密度超標(biāo)，但不影響整體檢測，提示與患者的自身E抗原數(shù)值偏低有關(guān)。儀器選擇的是雅培i2000檢測儀，定量項目乙型肝炎表面抗體檢測范圍內(nèi)的線性良好。所有參考數(shù)值均為發(fā)現(xiàn)離群值。檢查報告數(shù)據(jù)記錄由本院專業(yè)醫(yī)生完成，配套試劑選擇合理。另外，本次未對兩種儀器檢查的假陽性做出對比，僅從病理確診患者中進(jìn)行檢查。

綜上所述，化學(xué)發(fā)光分析儀檢測乙肝標(biāo)志物的準(zhǔn)確率高于ELISA法，且操作方便，誤診率低，可以在臨床乙肝病毒檢查中推廣使用，也可以在醫(yī)學(xué)實(shí)驗室中使用，推進(jìn)乙肝病毒的研究。