抑制火龍果果腐病病菌桃吉爾霉的植物精油篩選(簡(jiǎn)報(bào))

于 婧，李 敏，高兆銀，弓德強(qiáng)，張紹剛,3，洪小雨，花靜靜,4，胡美姣

（1.海南大學(xué) 植物保護(hù)學(xué)院，海口 570228; 2.中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院 環(huán)境與植物保護(hù)研究所/農(nóng)業(yè)農(nóng)村部熱帶作物有害生物綜合治理重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，?？?571101; 3.海南大學(xué) 生命科學(xué)與藥學(xué)院，?？?570228;4.海南大學(xué) 園藝學(xué)院，?？?570228）

本課題組參照文獻(xiàn)[1]采用組織分離法對(duì)火龍果果腐病病原菌進(jìn)行分離純化，并通過形態(tài)學(xué)及分子生物學(xué)對(duì)病原菌進(jìn)行鑒定，確定引起火龍果果腐病的病原菌為桃吉爾霉（Gilbertella persicaria）。植物精油是一類植物源次生代謝物質(zhì)，分子量較小，且具有一定揮發(fā)性[2]，具有對(duì)環(huán)境友好的優(yōu)勢(shì)。植物精油在抑菌方面和果蔬采后保鮮方面均表現(xiàn)出較好的效果[3]。本實(shí)驗(yàn)研究植物精油對(duì)火龍果果腐病病原菌的抑菌效果，為后期使用天然植物精油對(duì)火龍果果腐病進(jìn)行防治提供技術(shù)支撐。

1 材料與方法

1.1 材料桃吉爾霉（G.persicaria）編號(hào)為HLG-T，分離自海南省東方市某果園的貯藏期病果。由中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院環(huán)境與植物保護(hù)研究所采后病害及貯運(yùn)保鮮課題組分離鑒定，經(jīng)致病性測(cè)定后純化保存?zhèn)溆?。供試植物精油：牛至精油、香茅精油、肉桂精油、芥末精油、丁香精油、樟腦精油、玫瑰草精油、草果精油、山茶花精油、茶樹精油、檸檬精油和橄欖精油等12 種精油。上述精油均購(gòu)自上海源葉生物科技有限公司。接種用實(shí)驗(yàn)果實(shí)采購(gòu)自海南省海口市南北水果市場(chǎng)，選取新鮮健康、表面無(wú)損傷、大小和成熟度一致的果實(shí)。

1.2 不同植物精油的抑菌效果設(shè)置12 種植物精油的不同濃度梯度，以無(wú)菌水為空白對(duì)照。植物精油的抑菌效果實(shí)驗(yàn)采用含藥平板法[4]。將病原菌菌餅（直徑d=5 mm）接種于PDA 平板中央，置于28 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h 后，采用十字交叉法測(cè)量菌落直徑，每處理3 次重復(fù)。依據(jù)公式（1）計(jì)算抑菌率，以質(zhì)量濃度的對(duì)數(shù)值為橫坐標(biāo)，以抑菌率幾率值為縱坐標(biāo)求毒力回歸方程，計(jì)算相關(guān)系數(shù)、EC50值，比較供試12 種植物精油對(duì)供試菌株的毒力大小。

1.3 病害控制效果病害控制效果實(shí)驗(yàn)采用浸泡法。參照繆應(yīng)林[5]等方法稍作修改，選用抑菌效果較好的5 種植物精油，配制成1 000 μL·L?1精油溶液，將打好孔（d=5 mm)的火龍果果實(shí)在1 000 μL·L?1精油溶液中浸泡10 min，晾干后接種病原菌菌餅（d=5 mm)，裝入密封保鮮盒中，于25 ℃恒溫保濕培養(yǎng)。每處理設(shè)置3 次重復(fù)，以無(wú)菌水處理為空白對(duì)照。2 d 后采用“十字交叉法”測(cè)量病斑直徑，按公式（2）進(jìn)行計(jì)算。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同植物精油對(duì)病原菌的抑菌效果在供試的12 種植物精油中，牛至精油的抑菌效果最好，其EC50值僅為94.1 μg·mL?1；其次是香茅精油、肉桂精油、芥末精油、丁香精油、樟腦精油、玫瑰草精油和草果精油，EC50值依次為122.9，174.0，254.3，261.1，311.6，349.6，372.7 μg·mL?1，均在100.0～500.0 μg·mL?1；而山茶花精油、茶樹精油、檸檬精油、橄欖精油的抑菌效果不好，EC50值均在500.0 ～ 1 000.0 μg·mL?1。

2.2 病害控制效果在供試的5 種精油中，芥末精油對(duì)該病害的控制效果最好，其控制率達(dá)到100%；其次是牛至精油和丁香精油，其控制率達(dá)到91.96%和56.80%；香茅精油和肉桂精油抑菌效果最差，其控制率均在50%以下。牛至精油對(duì)該病害的控制率雖然達(dá)到91.96%，但使用牛至精油浸果極易對(duì)果面造成藥害。

3 結(jié) 論

植物精油是從植物組織中提取的物質(zhì)，具有抑菌廣譜、綠色安全、高效長(zhǎng)效和不易產(chǎn)生抗性等特點(diǎn)，是一種很有潛力的新型殺菌物質(zhì)[6?7]。供試12 種精油對(duì)于桃吉爾霉（G.persicaria）在離體條件下的生長(zhǎng)均有抑制作用，其中牛至精油抑菌效果最好，其次是香茅精油、肉桂精油、芥末精油、丁香精油、樟腦精油、玫瑰草精油和草果精油的抑菌效果也較強(qiáng)。選取抑菌效果較好的5 種精油（牛至精油、香茅精油、肉桂精油、芥末精油、丁香精油）進(jìn)行浸果實(shí)驗(yàn)，病害控制結(jié)果表明，芥末精油對(duì)該病害的控制效果最好，其控制率達(dá)到100%，且果面未見損傷；牛至精油其次，其控制率雖然達(dá)到91.96%，但是牛至精油處理使果實(shí)出現(xiàn)嚴(yán)重藥害，不適合在實(shí)際生產(chǎn)中應(yīng)用。綜上所述，對(duì)桃吉爾霉（G.persicaria）引起的火龍果果腐病控制效果最好的是芥末精油，該精油處理可抑制該病原菌的生長(zhǎng)，減少該菌引起的火龍果果腐病的發(fā)生。