杜志國，龍海斌，胡敏華

(廣州醫(yī)藥研究總院有限公司實驗動物研究開發(fā)中心/國家犬類實驗動物資源庫，廣東 廣州 510240)

比格犬是國際通用的標準化實驗用犬，在藥物安全性評價、人類疾病模型開發(fā)、生物制劑制備、醫(yī)療器械研制以及教學實踐等領(lǐng)域應用廣泛。在利用犬(主要為Beagle犬)進行科學研究的過程中，對犬的麻醉已經(jīng)成為實驗過程中必須解決的難題。除了動物倫理的原因，實驗過程中減輕實驗動物不必要的疼痛和痛苦也可提高所獲得的科學數(shù)據(jù)的質(zhì)量。疼痛和痛苦已被證明可導致細胞因子的產(chǎn)生和內(nèi)分泌代謝狀態(tài)的激活，轉(zhuǎn)化為一系列效應，如免疫反應和愈合速度的下降，術(shù)后腫瘤轉(zhuǎn)移保留的增加，以及慢性疼痛狀態(tài)的發(fā)展。因此，疼痛和痛苦可能是不受控制的實驗變量，對研究結(jié)果有顯著影響。減少疼痛和痛苦的幅度，可使動物的福利和科學成果都受益。

丙泊酚(propofol，2,6-二異丙基苯酚)是一種非巴比妥類靜脈麻醉藥，最初被用于誘導和維持人體麻醉[1-2]。其麻醉原理是通過藥物特異性機制調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng)中γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid，GABA) 介導的神經(jīng)傳遞。GABA作用于突觸后，會增加氯離子的電導，并使神經(jīng)元超級化而抑制神經(jīng)傳遞[3]。丙泊酚與其他靜脈注射麻醉使用的中樞神經(jīng)抑制劑相比，具有誘導麻醉迅速、催眠效果好和肌肉松弛良好的效果，且無累積效應，麻醉完成后恢復快[4-5]。本文對獸醫(yī)臨床上丙泊酚麻醉犬的使用方法、臨床應用及與其他麻醉劑復合麻醉的效果進行了綜述，以供參考。

1 麻醉方案

丙泊酚可以滿足誘導麻醉時安全和迅速誘導的要求，有效地用于犬的麻醉誘導和維持。在要求犬快速恢復的臨床情況下，丙泊酚效果優(yōu)于傳統(tǒng)麻醉劑。Maney等[6]報道，利用丙泊酚進行誘導麻醉，恢復時間短、不良事件發(fā)生率低。丙泊酚與多種麻醉前用藥的配伍可作為一種安全可靠的靜脈麻醉方案使用，用于犬的誘導、維持麻醉和鎮(zhèn)靜。在麻醉過程中，應根據(jù)犬的具體反應調(diào)整丙泊酚的使用劑量，因為犬對麻醉劑需求存在差異。

1.1 誘導麻醉

根據(jù)文獻報道[6-11]，丙泊酚誘導麻醉時的靜脈注射劑量為2～6 mg/kg，劑量的差異與麻醉前用藥、注射速度、犬個體差異均有關(guān)系。Raillard等[8]發(fā)現(xiàn)，誘導麻醉時較慢的丙泊酚注射速度(由每分鐘4 mg/kg)降低到1.3 mg/kg)，可顯著減少麻醉誘導所需的丙泊酚劑量(由(5.0±0.9)mg/kg減少到 (3.5±1.2)mg/kg)。Boveri等[12]為確定犬身體狀況評分(body condition score, BCS)是否影響氣管插管時丙泊酚的誘導麻醉使用劑量，將犬分為正常體重組(BCS 4～5)和超重組(BCS>6)，并記錄丙泊酚誘導麻醉以實現(xiàn)氣管插管時的總劑量。結(jié)果發(fā)現(xiàn)超重組犬的丙泊酚用量低于正常BCS組時，即可達到允許氣管插管的效果。較低劑量的丙泊酚可減少超重/肥胖犬誘導麻醉后發(fā)生呼吸暫停的幾率。

1.2 維持麻醉

丙泊酚維持麻醉時靜脈注射的劑量為0.3～0.5 mg/(kg·min)，劑量的差異與麻醉前用藥、疼痛反應、犬個體差異均有關(guān)系[5,9,13-15]。丙泊酚維持麻醉的持續(xù)時間可達2 h以上，麻醉結(jié)束后犬恢復狀態(tài)良好[5,9]。 丙泊酚維持麻醉可用于犬整形外科手術(shù)、顱內(nèi)疾病犬進行磁共振成像(magnetic resonance imaging，MRI)檢測、卵巢子宮切除術(shù)等過程[13-15]。

1.3 復合麻醉

由于丙泊酚沒有明顯的鎮(zhèn)痛作用且其代謝迅速，在很多情況下需要與其他鎮(zhèn)靜/鎮(zhèn)痛劑聯(lián)合使用。丙泊酚結(jié)合鎮(zhèn)靜/鎮(zhèn)痛劑用于誘導和維持麻醉時，麻醉質(zhì)量較好。丙泊酚與芬太尼(fentanyl)、瑞芬太尼(remifentanil)、右美托咪定(dexmedetomidine)等鎮(zhèn)靜/鎮(zhèn)痛劑聯(lián)合使用時，丙泊酚的使用劑量應適當降低[16-20]。

Andreoni等[21]使用丙泊酚、芬太尼作為復合麻醉的方案麻醉犬。麻醉前用藥為乙酰丙嗪(acepromazine maleate，0.03 mg/kg或0.05 mg/kg)和卡洛芬(carprofen，4 mg/kg)。用丙泊酚誘導麻醉(4.0 mg/kg)5 min后，靜脈注射給予芬太尼(2 μg/kg)和阿托品(atropine sulfate，40 μg/kg)。然后根據(jù)犬的狀態(tài)用丙泊酚以每分鐘0.3～0.5 mg/kg的速度進行靜脈輸注維持麻醉。結(jié)果發(fā)現(xiàn)此方案在歷時(131±38.5)min的手術(shù)期內(nèi)提供了可靠的麻醉和鎮(zhèn)痛效果。雖然麻醉結(jié)束后恢復期較長，但是恢復期平穩(wěn)安靜，恢復效果好。

Abdel-Hady等[22]利用阿托品(0.03 mg/kg)，甲苯噻嗪(xylazine，0.25 mg/kg)，氯胺酮(ketamine HCl，10.2 mg/kg)和丙泊酚(5 mg/kg)的復合麻醉方案麻醉犬。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，此麻醉方案在數(shù)秒內(nèi)迅速起到麻醉效果，麻醉效果維持約29 min，麻醉過程中的鎮(zhèn)痛、肌肉松弛效果均達到要求。犬在麻醉后約68 min內(nèi)非常順利地恢復，麻醉結(jié)束后副作用很小。

Martinez-Taboada等[23]比較丙泊酚和酮體素(丙泊酚-氯胺酮混合物)對健康犬的誘導麻醉效果。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，2種藥物鎮(zhèn)靜作用相似，酮體素比丙泊酚氣管插管和誘導質(zhì)量要好。但丙泊酚與氯胺酮的聯(lián)合使用效果并不理想，容易引起犬呼吸抑制[24-26]。氯胺酮與丙泊酚聯(lián)合使用用于誘導麻醉的具體效果存在爭議，建議慎重選擇此種麻醉方案。

筆者在科研實驗過程中，利用丙泊酚對實驗用比格犬進行誘導麻醉、復合麻醉40余次。根據(jù)筆者臨床應用經(jīng)驗，丙泊酚應用于比格犬的誘導麻醉劑量為5～6 mg/kg。丙泊酚與鹽酸賽拉嗪(即甲苯噻嗪，xylazine，商品名：速眠新Ⅱ)聯(lián)合使用，丙泊酚劑量適當降低為4～5 mg/kg，鹽酸塞拉嗪的劑量為0.05 mL/kg，即可維持約30 min的麻醉效果。麻醉過程中誘導迅速，肌松效果好，麻醉恢復過程平穩(wěn)。但麻醉過程中存在呼吸抑制情況，且抑制程度與丙泊酚劑量、注射速度均有聯(lián)系。

2 臨床應用

在獸醫(yī)臨床上，丙泊酚常用于犬喉部功能檢查和腹腔手術(shù)過程中的麻醉。根據(jù)臨床具體要求，麻醉方式主要有誘導麻醉(亦可用于短時間內(nèi)的保定檢查)、維持麻醉和復合麻醉等。以上麻醉方式均取得了良好的麻醉效果。同時，亦有研究探索了丙泊酚在抗炎過程中的積極作用。

2.1 在喉部檢查時的應用

硫噴妥鈉(thiopental)被認為是喉部檢查的首選藥物，但硫噴妥鈉在某些國家為禁售藥物，丙泊酚是目前喉部檢查較為常用的藥物[27]。Smalle等[28]經(jīng)過臨床驗證，發(fā)現(xiàn)丙泊酚在檢查時間較短的情況下為喉部評估提供了足夠的條件，在犬的喉鏡檢查中是有效的。Radkey等[27]發(fā)現(xiàn)，乙酰丙嗪(0.03 mg/kg)、布托啡諾(butorphanol，0.2 mg/kg)和丙泊酚(0.5 mg/kg)的麻醉組合提高了喉部檢查的質(zhì)量，檢查過程中的喉部評分明顯高于單獨使用丙泊酚。在解決麻醉劑影響喉部功能的問題上，多沙普侖(doxapram)可以克服由這些麻醉藥物導致的對杓狀肌運動的負面影響[26-28]。

2.2 在腹腔手術(shù)時的應用

2.2.1 一般腹腔手術(shù)

Kisani等[29]利用甲苯噻嗪(2 mg/kg)和丙泊酚(6 mg/kg)復合麻醉方案，麻醉前用藥為阿托品(0.04 mg/kg)，用于犬卵巢子宮切除術(shù)、胃切開術(shù)、腸切除術(shù)和吻合術(shù)過程中的麻醉。Suarez等[15]利用丙泊酚在犬卵巢子宮切除術(shù)中進行誘導麻醉(5.8 mg/kg)和維持麻醉(0.37 mg/(kg·min))，麻醉前用藥為乙酰丙嗪(0.01 mg/kg)和嗎啡(0.4 mg/kg)。二者通過臨床使用，均發(fā)現(xiàn)丙泊酚可實現(xiàn)平穩(wěn)、快速誘導麻醉和令人滿意的維持麻醉，達到滿足一般腹腔手術(shù)要求的麻醉效果。

2.2.2 在剖腹產(chǎn)中的應用

不同于一般的腹腔手術(shù)，在剖腹產(chǎn)手術(shù)的過程中，術(shù)后1 h內(nèi)是關(guān)鍵時間。麻醉導致的母犬嗜睡和新生兒活力下降會導致幼犬初乳攝入量減少和死亡率增加。丙泊酚注射后可以快速在體內(nèi)代謝，犬恢復比較迅速和順利。雖然丙泊酚能穿過胎盤屏障，但它能迅速從新生兒體內(nèi)循環(huán)中清除[11]。

Doebeli等[11]驗證了丙泊酚在剖腹產(chǎn)中誘導麻醉對新生兒活力的影響，使用改良阿普伽新生兒評分(modified apgar score)方法對81只幼犬進行了評分同時監(jiān)測母犬在誘導麻醉后的狀態(tài)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，丙泊酚誘導麻醉(2 ～6 mg/kg)對初生幼犬的Apgar評分有一定影響，但不影響幼犬的成活率，可以用于接受緊急剖腹產(chǎn)母犬的誘導麻醉。

Vilar等[10]利用麻醉前用藥為嗎啡(0.2 mg/kg)，用丙泊酚(3 mg/kg)誘導麻醉母犬，然后利用利多卡因(lidocaine，濃度2%, 劑量0.15～0.20 mL/kg)進行硬膜外麻醉，根據(jù)情況利用適量丙泊酚維持麻醉，直至完全取出所有幼犬，然后用七氟醚繼續(xù)進行麻醉的麻醉方案，應用于犬剖腹產(chǎn)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，此種麻醉方案需要較低濃度的七氟醚，手術(shù)期間表現(xiàn)出較高的麻醉質(zhì)量，并且幼犬在出生后立即顯示出活力。

2.3 抗炎作用

越來越多動物和人類研究結(jié)果表明，丙泊酚在急性炎癥過程中發(fā)揮抗炎保護作用[30]。Hernandez-Jimenez等[31]在油酸誘導的急性肺損傷犬模型中使用丙泊酚預處理，結(jié)果發(fā)現(xiàn)該藥物具有抗炎作用，對抗炎癥和肺損傷具有潛在的治療作用。Pei等[30]探索了丙泊酚對犬外周血單核細胞的抗炎作用。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，非細胞毒性劑量的丙泊酚顯著抑制脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)誘導的犬外周血單核細胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMCs)中一氧化氮(NO)的釋放和白細胞介素-6(interleukin-6, IL-6)以及腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor-α, TNF-α)的基因表達。非細胞毒性劑量的丙泊酚預處理，可降低PBMCs中誘導型一氧化氮合酶(inducible NO synthase, iNOS)的蛋白表達；通過抑制核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB p65蛋白的核轉(zhuǎn)位來下調(diào)犬PBMCs中LPS誘導的炎癥反應。

2.4 其他應用

除以上應用外，丙泊酚還有一些其他方面的應用。Ahn等[32]首次報道了1例丙泊酚和呋塞米(furosemide)聯(lián)合使用治療氟喹酮(afloqualone)中毒的病例，取得了一定的療效。氟喹酮是一種用于治療人背部疼痛的肌肉松弛藥，藥物對犬的毒性作用包括嘔吐、呼吸抑制、癲癇、共濟失調(diào)、心動過緩和血尿。Gommeren等[33]和Heidenreich等[34]報道丙泊酚和苯巴比妥聯(lián)合使用具有治療門體分流術(shù)(portosystemic shunt，PSS)導致的持續(xù)癲癇狀態(tài)(status epilepticus，SE)的作用。Bullock等[35]報道，在執(zhí)行安樂死時，先用丙泊酚誘導麻醉，而后靜脈注射戊巴比妥類藥物，犬死亡過程中肌肉活動顯著減少。Batista等[36]利用丙泊酚、氯胺酮和右美托咪定麻醉犬后，采集犬附睪精液，發(fā)現(xiàn)精液質(zhì)量與常規(guī)采集精液相比，質(zhì)量沒有顯著變化。

3 丙泊酚引起的不良反應

Cattai等[37]分析了使用丙泊酚靜脈注射麻醉導致犬肌陣攣的發(fā)生率，結(jié)果發(fā)現(xiàn)1.2%的犬在接受靜脈注射麻醉后產(chǎn)生了肌陣攣的現(xiàn)象，需要進行藥物治療。筆者利用丙泊酚對實驗用Beagle犬進行麻醉的過程中，暫未發(fā)現(xiàn)此類癥狀。

丙泊酚在大豆油、甘油和純化的卵磷脂乳液中形成1%的溶液[38]，是一種懸浮在乳液系統(tǒng)中的麻醉劑，乳液主要成分為蛋黃卵磷脂和大豆油。對這些物質(zhì)過敏的犬使用丙泊酚可能會引起過敏癥狀。Onuma等[39]驗證對蛋黃卵磷脂和大豆油過敏的犬與注射丙泊酚而引起的不良事件發(fā)生率的關(guān)系?；谶^敏原特異性免疫球蛋白E(IgE)試驗的結(jié)果，選擇14只高抗體滴度的犬(高IgE組)和7只低抗體滴度的犬(正常IgE組)進行試驗。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在高IgE組和正常IgE組中，丙泊酚給藥后過敏反應的發(fā)生率分別為21.4%和14.3%，平均組胺濃度分別為(167.9±94.5) nmol/L和(65.7±40.3) nmol/L。2組動物過敏反應均較為輕微，沒有出現(xiàn)類似休克這種嚴重的過敏反應癥狀。對蛋黃卵磷脂或大豆油有過敏性疾病史的犬使用丙泊酚時，建議仔細進行圍術(shù)期麻醉監(jiān)測和準備備用的麻醉方案。

同時，丙泊酚保存不當，乳液易繼發(fā)細菌感染。Franci等[40]報道過一起由于誤用細菌感染的丙泊酚進行麻醉，導致犬死亡的案例。

4 結(jié)語

隨著生物醫(yī)藥行業(yè)的高速發(fā)展，犬類實驗動物開發(fā)與利用規(guī)模隨之加大，對其麻醉方案的要求也會更加的多樣化。在實驗過程中，對實驗用犬進行安全、可靠的麻醉與保定，是取得實驗成功的一個重要基礎(chǔ)。但目前為止，對不同實驗條件下犬的麻醉、保定方案仍有待完善。

丙泊酚作為一種麻醉藥品，在獸醫(yī)臨床上已得到較為廣泛的認可與利用。本文綜合分析了獸醫(yī)臨床上丙泊酚用于麻醉犬的使用方式與臨床應用的方法。這些使用經(jīng)驗對實驗用犬麻醉方案的制定具有很大借鑒意義，可為制定不同要求的麻醉方案提供參考。但受犬品系多樣、個體大小、營養(yǎng)狀態(tài)差異等因素的影響，還需技術(shù)人員結(jié)合實驗犬本身的特點及狀態(tài)，合理制定麻醉方案。