藏藥野生麻花秦艽研究現(xiàn)狀＊

康 燕，格桑頓珠，張喜萍

（1.西藏藏醫(yī)藥大學(xué)，西藏 拉薩 850000；2.蘭州市食品藥品檢驗(yàn)所，甘肅 蘭州 730070）

秦艽最早記載于 《神農(nóng)本草經(jīng)》，在我國已有2000 多年的歷史，麻花秦艽為多年草本植物[1]，是傳統(tǒng)中藥“秦艽”藥材之一，屬于龍膽科（Gentianaceae）龍膽屬（Gentiana(Tourn.)L）植物。麻花秦艽是一種很有價值的藏藥材，藏文譯名解吉嘎保，屬于解吉類藥物。解吉分為黑白兩種，白的稱“解吉嘎保”，黑的稱“解吉那保”，主要分布在高海拔的山坡草地、河谷灘地和高寒草甸中，麻花秦艽花具有清熱解毒的功效[2-3]，用于胃腸炎、肝炎、膽囊炎等[4]，其根作為常用上品藏藥，用于治療風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，黃疸、皮疹及二便不通等癥狀[5]。近年來各大學(xué)者對產(chǎn)自四川、青海、云南和甘肅等地的麻花秦艽、特別是野生麻花秦艽的干燥根的生藥學(xué)，化學(xué)成分，藥理作用，臨床應(yīng)用等各方面做了大量的研究[6-12]。

1 麻花秦艽的資源分布

圖1 中灰色部分為我國麻花秦艽的種植資源圖，麻花秦艽主要分布于我國的青海、甘肅、四川、寧夏、湖北西部、西藏等地，生長于海拔2000-5000米的高山草甸、山坡草地、灌叢、林緣、山溝河灘[13-15]。

圖1 麻花秦艽的種質(zhì)資源圖

2 麻花秦艽的生物學(xué)研究

2.1 麻花秦艽的植物學(xué)特征

麻花秦艽為多年生草本，高10-35cm，金株光滑，基部被枯存的纖維狀葉鞘包裹。須根多數(shù)，扭結(jié)成1 個圓柱形根?；ㄖΧ鄶?shù)，斜升，黃綠色，稀帶紫紅色，近圓形。蓮座叢葉寬披針形或卵狀橢圓形，兩端漸狹，葉脈3-5 條，在兩面均明顯，并在下面突起，葉柄寬，膜質(zhì)；莖生葉小，線狀披針形至線形。聚傘花序頂生及腋生，排列成疏松的花序；花梗斜生，不等長；花萼膜質(zhì)，一側(cè)開裂，鄂齒2-5，鉆形；花冠黃綠色，喉部具綠色斑點(diǎn)，漏斗形，裂片卵形，褶偏斜，三角形；雄蕊整齊。蒴果內(nèi)藏，種子褐色，表面有細(xì)網(wǎng)紋?；ü?-9 月[13,15]。如圖2、圖3 所示。

圖2 麻花秦艽植物生長圖

圖3 麻花秦艽根圖

2.2 麻花秦艽的顯微學(xué)特征[16]

麻花秦艽橫切面的外部細(xì)胞多頹廢或破碎。近內(nèi)皮層處有眾多層呈不規(guī)則增厚的厚壁細(xì)胞，內(nèi)皮層明顯。韌皮部寬廣，裂縫明顯，有韌皮束散在。形成層明顯，木質(zhì)部呈放射狀排列。導(dǎo)管單個散在或2-3 個成群。

2.3 麻花秦艽的理化特征[16，17]

麻花秦艽粉末或斷面置紫外燈(365nm)下觀察，顯黃白色或金黃色熒光。取麻花秦艽粉末2g，加氯仿-甲醇-濃氨溶液（75:25:5）混合液30mL，浸泡2h，過濾，濾液水浴濃縮至1ml，加1mol/L 鹽酸溶液2mL，繼續(xù)蒸除氯仿，放冷，過濾，濾液分兩只試管，一支加碘化汞鉀試液出現(xiàn)淡黃白色沉淀；另一只加入碘化鉍鉀試液出現(xiàn)棕紅色沉淀。

3 麻花秦艽的遺傳學(xué)研究

麻花秦艽是構(gòu)成青藏高原生態(tài)的重要種群，也是國家三級重點(diǎn)保護(hù)植物。朱甜甜和晉玲等人[11]對甘肅祁連山地區(qū)麻花秦艽遺傳多樣性的研究表明，麻花秦艽化學(xué)成分分布與地理分布無顯著相關(guān)性，而在物種水平上具有較高的遺傳多樣性，居群里內(nèi)的遺傳多樣性水平高于居群間，遺傳變異主要存在于居群間。

4 麻花秦艽的化學(xué)成分

麻花秦艽屬龍膽科龍膽屬多年草本植物，化學(xué)成分復(fù)雜，從結(jié)構(gòu)上看主要是環(huán)烯醚萜苷類，有不少文獻(xiàn)報道，麻花秦艽含有龍膽苦苷[12,18,19]、糖類[20]、揮發(fā)油[21]等，圖4 為龍膽苦苷的化學(xué)結(jié)構(gòu)式。武云霞[22]等人利用硅膠柱層析及薄層層析方法從甘肅產(chǎn)麻花秦艽根的醇提取物中分離得到了7 種化合物，其中β-D-葡糖糖乙苷（ethyl-β-D-glucopyranoside）為首次從該屬植物中分離得到的化合物，圖5 為其化學(xué)結(jié)構(gòu)式。張莉[23]等人利用微孔樹脂柱、硅膠柱、SephadexLH-20 凝膠柱和制備色譜等分析手段，從麻花秦艽根中分離得到了12 種化合物，其中原兒茶醛、原兒茶酸、沒食子酸甲酯、鄰苯二甲酸二丁酯為首次分離得到，圖6、圖7、圖8、圖9 分別是它們化學(xué)結(jié)構(gòu)式。

麻花秦艽作為《中國藥典》收錄的藥用秦艽，目前僅對其化學(xué)成分進(jìn)行了初步的研究，研究表明其主要化學(xué)成分為龍膽苦苷[24]。中藥化學(xué)成分復(fù)雜，許多臨床有效的中藥，其發(fā)揮藥理作用的物質(zhì)基礎(chǔ)往往不限于一類成分，因此，危士虎[25]等人對麻花秦艽的非環(huán)烯醚萜成分進(jìn)行了研究，利用硅膠、Sephadex LH-20、ODS 等柱色譜從麻花秦艽70%乙醇提取物中分離得到了12 種化合物，其中syringgaresinol-4,4 ˊ-bis-β-O-D-glucopyranoside、gentiaphyllide-D、紅白金花內(nèi)酯、大葉苷-D、gentiaphyllide-E、櫟癭酸、烏蘇醇和龍膽三塘7 種化合物為首次從該植物中分離得到。該發(fā)現(xiàn)將非環(huán)烯醚萜成分的檢測納入到藥材鑒定和質(zhì)量控制方面提供了科學(xué)依據(jù)。

麻花秦艽花有清熱解毒的功效，常用于肝炎、膽囊炎和胃腸炎的治療。孫雅惠[26]等人運(yùn)用多種現(xiàn)代分離手段，從青海藏藥秦艽花中分離出了9 種化合物，其中牡荊黃素和異葒草苷-4-O-葡糖糖苷為首次從該屬植物中獲得。如圖9-11 所示。

圖4 龍膽苦苷

圖5 β-D-葡糖乙苷

圖6 原兒茶醛

圖7 原兒茶醛

圖8 沒食子酸甲酯

圖9 鄰苯二甲酸二丁酯

圖10 牡荊黃素

圖11 異葒草苷-4-O-葡糖糖苷

5 麻花秦艽的藥理作用和臨床應(yīng)用

5.1 麻花秦艽的藥理作用

現(xiàn)代藥理學(xué)研究[27-28]發(fā)現(xiàn)，麻花秦艽主要含有秦艽堿甲、秦艽堿乙、秦艽堿丙及龍膽苦苷等成分，具有消炎抗菌、鎮(zhèn)靜止痛，抗過敏，保肝利膽、降血壓、升血糖，調(diào)節(jié)免疫等作用。

5.1.1 消炎鎮(zhèn)痛作用

麻花秦艽的醇提取物含有主要的抗炎活性成分，張新新[29]等研究表明，給雌性小鼠胃部分別灌于不同劑量的麻花秦艽花75%的乙醇提取物，1 次/d，連續(xù)6d 結(jié)果發(fā)現(xiàn)，麻花秦艽的醇提取物能減少二甲苯所致小鼠耳腫脹度；給雄性大鼠胃部分別灌于不同劑量的提取物1 次/d，連續(xù)7d，結(jié)果發(fā)現(xiàn)提取物能明顯降低角叉菜膠所致的大鼠足腫脹率，通過小鼠熱板法時間、醋酸扭體法小鼠扭體次數(shù)測定實(shí)驗(yàn)及關(guān)照甩尾法測定小鼠甩尾潛伏實(shí)驗(yàn)，說明麻花秦艽的醇提取物有顯著的抗炎鎮(zhèn)痛作用。趙勤[30]等研究發(fā)現(xiàn)給予大鼠不同劑量的麻花秦艽95%醇提取物（10、5、2.5）g/kg 對左劑性關(guān)節(jié)炎大鼠原發(fā)性和繼發(fā)性病變足腫脹均有明顯抑制作用，對大鼠的免疫器官無明顯抑制作用。年蔚[31]等研究發(fā)現(xiàn)連續(xù)7d 給予Wistar 大鼠5g/kg/d、10g/kg/d 麻花秦艽95%醇提取物能抑制TNF-α 的釋放，減輕了胃粘膜損傷的炎性程度，保護(hù)了大鼠的胃粘膜，其機(jī)理有待進(jìn)一步研究。Jia[32]等研究發(fā)現(xiàn)，75%的麻花秦艽提取物能抑制細(xì)胞核因子-κB(NF-κB)轉(zhuǎn)錄活性與p65、p50(NF-κB 家族成員)二聚體的移位，改善二甲苯誘導(dǎo)的小鼠廓腫脹和角叉菜膠誘導(dǎo)的大鼠足腫脹程度。包婷雯[33]等研究發(fā)現(xiàn)分別給小鼠胃部灌于麻花秦艽地上、地下部分提取物10、30g/kg，末次給藥后40min，在小鼠腹腔注射0.9%冰乙酸10Μl/mg，結(jié)果顯示，麻花秦艽地上、地下提取物能很好地抑制冰乙酸引起的小鼠扭體反應(yīng)。

龍膽苦苷為麻花秦艽的活性成分，具有很好的抗炎作用，研究表明[34-36]龍膽苦苷能抑制二甲苯所致的耳中脹，能抑制醋所致的扭體反應(yīng)和扭體次數(shù)，使小數(shù)腹腔毛細(xì)血管通透性增加。每天給SD 大鼠給藥100mg/kg，150mg/kg 龍膽苦苷與ip20mg/kg氫化可的松可印制蛋清引起的炎癥反應(yīng)。龍膽苦苷有很好的抗炎作用，但采用傳統(tǒng)的胃部給藥生物利用度低，采取皮下注射方式可以減少給藥量提高生物利用度。

5.1.2 中樞鎮(zhèn)靜作用

研究發(fā)現(xiàn)[37]給小鼠給予小劑量的麻花秦艽醇提取物和水提取物，對小鼠有很好的鎮(zhèn)靜作用，當(dāng)給予大劑量的提取物時出現(xiàn)興奮、驚厥，甚至導(dǎo)致麻痹而死。

5.1.3 抗過敏作用

龍膽苦苷是麻花秦艽的主要活性成分，文獻(xiàn)報道[38-39]秦艽類植物根部含有龍膽苦苷不含有秦艽堿，由于在提取過程中使用氨液，會使不穩(wěn)定的龍膽苦苷與氫氧化銨發(fā)生反應(yīng)生成秦艽堿甲。秦艽堿甲能減輕組胺噴霧引起的豚鼠哮喘，且能對抗組胺等引起的離體豚鼠回腸平滑肌起收縮作用。腹腔給藥能明顯降低毛細(xì)血管通透性，秦艽堿甲對免蛋清性過敏性休克有顯著的保護(hù)作用。

5.1.4 保肝作用

蘇曉玲[40]等研究發(fā)現(xiàn)麻花秦艽的水煎液能降低血清TNF-α 水平，升高IL-10 的水平，對CCl4 致小鼠急性肝損傷有很好的保護(hù)作用。李秋燕[41]等發(fā)現(xiàn)，龍膽苦苷能防止干細(xì)胞出現(xiàn)明顯的變性、壞死，對多種肝損傷有明顯的改善作用。

5.2 麻花秦艽臨床作用

文獻(xiàn)報道[27]，臨床上麻花秦艽單方或復(fù)方常用于心腦血管疾病、呼吸道疾病、面神經(jīng)疾病及類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、結(jié)腸炎等疾病的治療。

6 麻花秦艽的繁育技術(shù)研究

6.1 種子繁育

仿生栽培是模仿生物自然規(guī)律栽培植物的方法。田豐[42]等運(yùn)用仿生栽培方式，繁育出出苗密度、返青綠、單株葉片數(shù)、葉長、單株鮮重、根鮮重均高于常規(guī)栽培的麻花秦艽，活性成分龍膽苦苷含量與常規(guī)栽培無顯著差異。文獻(xiàn)報道[43-48]麻花秦艽種子的休眠屬綜合休眠，用青霉素、赤霉素、高錳酸鉀、硫酸處理均可以打破種子休眠。李兵兵[49]等研究表明，用1.5%高錳酸鉀處理10min，光照培養(yǎng)，麻花秦艽種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)和活力指數(shù)分別比對照提高了106.90%、521.43%、266.71%、709.66%。張西玲[50]等研究了熱水浸泡種子以及不同溫度和不同濃度赤霉素對種子萌芽的影響，結(jié)果表明麻花秦艽種子屬于中溫萌發(fā)型，20℃為最佳萌發(fā)溫度，高溫或低溫均有抑制作用；用200ppm 赤霉素浸泡24h，發(fā)芽率可達(dá)90.0%。人工栽培可在春天（氣溫約10-20℃）。

6.2 組織培養(yǎng)

植物組織培養(yǎng)是人工化育苗的技術(shù)之一，劉麗莎[51]等以麻花秦艽根、莖育出的無菌苗為外植體，采用MS 培養(yǎng)基，附加BA 0.5-1.0mg/L+NAA 0.5 mg/L、IAA 1.0mg/L +BA3mg/L、IAA 1.0mg/L +BA2.0 -3.0mg/L、BA2.0mg/L+NAA 0.5mg/L 植物激素進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，研究表明，通過誘導(dǎo)愈傷組織途徑可以達(dá)到快速繁育的目的。

7 展望

藏藥麻花秦艽是藏族民間常用草藥，具有祛風(fēng)濕、清濕熱、止痹痛、退濕熱功效。隨著經(jīng)濟(jì)的發(fā)展和人民生活水平的提高，醫(yī)療保健越來越受到人們的關(guān)注，麻花秦艽由于其獨(dú)特的藥用價值被越來越多的人所熟悉，在經(jīng)濟(jì)利益的推動下，一些商人和藥農(nóng)進(jìn)行了大量的亂采亂挖，嚴(yán)重破壞了野生藏藥材的生長環(huán)境。為了更好的保護(hù)野生藏藥資源，發(fā)展人工栽培技術(shù)，提高藥材利用率成為了當(dāng)下的主要途徑。因此，探索出一種方法簡單，成本低廉，栽培周期短，藥材品質(zhì)好，并適用于大面積種植的人工繁育技術(shù)對于保護(hù)野生藏藥資源具有很好的研究意義。