徐華建，盧宙民，林 斌，劉慶山，譚冬初，韋學(xué)耀，譚德清，何興恒，丁 瑤，張 健，何能鎮(zhèn)，韋 祥，胡世貴

（1.武漢中科瑞華生態(tài)科技股份有限公司，武漢 430083；2.廣西來(lái)賓市興賓區(qū)水產(chǎn)技術(shù)推廣站，廣西 來(lái)賓 546100；3.廣西投資集團(tuán)方元電力股份有限公司橋鞏水電站分公司，廣西 來(lái)賓 546100）

烏原鯉（Procypris mera）隸屬于鯉形目（Cyprini?formes）鯉科（Cyprinidae）鯉亞科（Cyprininae）原鯉屬（Procypris），俗稱烏鯉、墨鯉、烏鯽、烏鉤、墨鯉，僅分布于珠江水系西江流域部分干支流［1，2］。近年來(lái)，由于分布區(qū)域狹窄、生態(tài)環(huán)境變化、過(guò)度捕撈等致危因素導(dǎo)致其自然資源呈逐年遞減的趨勢(shì)，已被列為《中國(guó)瀕危動(dòng)物紅皮書》瀕危物種和《世界自然保護(hù)聯(lián)盟瀕危物種紅色名錄》易危物種，開展烏原鯉人工繁殖增殖放流工作已迫在眉睫［3］。目前對(duì)烏原鯉人工繁殖的研究資料較少，僅見(jiàn)韓耀全等［4］對(duì)其人工繁殖研究進(jìn)行了報(bào)道。本試驗(yàn)于2018 年開始從紅水河進(jìn)行烏原鯉人工馴化并開展仿生態(tài)養(yǎng)殖，旨在積累烏原鯉繁殖生物學(xué)的基礎(chǔ)資料，為該魚的資源保護(hù)、規(guī)?；B(yǎng)殖及開發(fā)利用提供參考。

1 材料與方法

1.1 親魚來(lái)源

2018 年4—7 月，烏原鯉親魚采集于廣西省來(lái)賓市興賓區(qū)境內(nèi)紅水河流域，選擇規(guī)格在1.2 kg 以上、活力好、體表無(wú)傷的個(gè)體作為親魚。

1.2 親魚馴化培育

1.2.1 培育池條件 培育池面積200 m2，池深2 m、水深1.8 m 的室外水泥池，進(jìn)排水獨(dú)立方便，周圍通風(fēng)。放養(yǎng)前將池內(nèi)淤泥及雜物清理干凈，用生石灰徹底清塘消毒，5 d 后開始進(jìn)水，進(jìn)水的同時(shí)用遮陽(yáng)網(wǎng)遮蓋培育池1/2 的面積。

1.2.2 親魚馴化及投喂 共放養(yǎng)25 尾烏原鯉親魚。野生親魚進(jìn)入培育池先適應(yīng)3 d，在遮陽(yáng)網(wǎng)邊緣水域掛上食臺(tái)，食臺(tái)入水60 cm。野生烏原鯉長(zhǎng)期生活在深水層，對(duì)光線敏感且膽小，每天上午8：00 和下午18：00 時(shí)，將甲魚料加水捏團(tuán)沉入食臺(tái)，在投喂第六天時(shí)親魚開始慢慢觸碰人工配合餌料；第14 天時(shí)，親魚開始正常攝食人工配合餌料。從第15 天開始，投喂時(shí)加以輕緩聲音進(jìn)行物理刺激。選擇蛋白質(zhì)含量36%以上的沉水人工配合餌料，如甲魚料、鰻魚料、鱘魚料；投喂時(shí)做到定時(shí)、定點(diǎn)、定質(zhì)、定量，不定期在餌料中添加維生素C，增強(qiáng)免疫力。

1.2.3 親魚強(qiáng)化 進(jìn)入2 月后，除投喂人工餌料外，還配合投喂水蚯蚓等活餌，增加營(yíng)養(yǎng)。每周2 d 用抽水泵在魚池中進(jìn)行抽水循環(huán)，增加水流速，刺激親魚性腺發(fā)育。

1.2.4 培育池水質(zhì)管理 培育使用的水源為紅水河河水，經(jīng)過(guò)物理過(guò)濾、沉淀后再進(jìn)入培育池。在培育過(guò)程中，套養(yǎng)少量的花白鰱改善水質(zhì)，定期換掉部分下層水、定期對(duì)培育池潑灑微生物制劑、定期對(duì)培育水域進(jìn)行消毒和食臺(tái)清洗消毒。

1.3 人工繁殖

1.3.1 人工催產(chǎn)時(shí)間 烏原鯉在自然狀態(tài)下繁殖時(shí)間為2—4 月，當(dāng)水溫回升到16 ℃以上便開始繁殖。

1.3.2 繁殖親魚挑選 3 月初，水溫回升到18 ℃，在晴天上午拉網(wǎng)開始挑選親魚，拉網(wǎng)前停食2 d。烏原鯉3 齡達(dá)性成熟，雌魚選擇體質(zhì)健壯、體表無(wú)傷無(wú)畸形、腹部膨大柔軟，向上翻時(shí)卵巢輪廓明顯、生殖孔向外突出、紅潤(rùn)，規(guī)格在1.2～2.0 kg/尾的親魚；雄魚選擇體質(zhì)健壯、體表無(wú)傷無(wú)畸形、吻端有朱星，手摸有明顯粗糙感、腹部狹長(zhǎng)、生殖孔內(nèi)凹較窄，輕壓腹部有白色精液流出，精液隨水馬上散開、規(guī)格在1.2～1.8 kg/尾的親魚。

1.3.3 人工催產(chǎn) 選擇DOM、LRH-A2、HCG 3 種催產(chǎn)劑混合使用，采用兩針注射，兩針間隔10 h。第一針只使用LRH-A2對(duì)雌魚進(jìn)行催熟，雄魚不注射，用量為總用量的10%～20%；第二針將剩余的LRH-A2配合HCG 和DOM 進(jìn)行催產(chǎn)，雄魚用量為雌魚的1/2（表1）。

表1 2019 年烏原鯉催產(chǎn)情況

1.3.4 人工授精 注射催產(chǎn)劑后，當(dāng)發(fā)現(xiàn)親魚相互追逐時(shí)，立即撈出雌魚檢查，輕壓腹部時(shí)卵粒能順暢流出即刻進(jìn)行人工授精。撈起雄魚，用毛巾擦干親魚體表水分，輕壓腹部將精液擠入提前準(zhǔn)備好的塑料盆中，同時(shí)加入適量的0.7%生理鹽水稀釋精液；撈起雌魚，用毛巾擦干親魚體表水分，輕壓腹部將魚卵擠進(jìn)稀釋好的精液中，擠卵同時(shí)輕輕晃動(dòng)塑料盆，使精卵充分混合，擠卵結(jié)束后用提前消毒的羽毛不停攪拌，再加入適量清水激活精子，然后靜置30 s，充分授精，1 min 后用清水洗卵3～4 次，洗去多余的精液和雜質(zhì)。

1.3.5 孵化 烏原鯉的受精卵呈黏性，將洗好的受精卵均勻分布在人工魚巢（遮陽(yáng)網(wǎng)片）上進(jìn)孵化網(wǎng)箱中進(jìn)行淋水孵化。烏原鯉受精卵呈金黃色，圓球形，吸水前卵徑為1.7～2.0 mm，受精后10 min 開始吸水膨脹，卵徑達(dá)2.26～2.50 mm。

孵化過(guò)程中每天用3%食鹽水對(duì)受精卵進(jìn)行2次消毒，防治水霉滋生同時(shí)觀察胚胎發(fā)育狀況，統(tǒng)計(jì)受精卵數(shù)量、受精率、出膜時(shí)間、孵化率、出苗率等。

1.4 魚苗培育

剛出膜的烏原鯉苗除卵黃囊外全身透明，全長(zhǎng)5.9～6.1 mm，靜臥在人工魚巢上和孵化網(wǎng)箱底部，偶爾不規(guī)則擺動(dòng)。魚苗出膜3 d 內(nèi)，屬于內(nèi)源營(yíng)養(yǎng)期，由卵黃囊提供營(yíng)養(yǎng)；第四天，卵黃囊吸收完2/3，進(jìn)入混合營(yíng)養(yǎng)期，卵黃囊只能提供部分營(yíng)養(yǎng)，另一部分營(yíng)養(yǎng)靠外界攝食補(bǔ)充；第五天，卵黃囊已經(jīng)全部吸收完，進(jìn)入外源營(yíng)養(yǎng)期，魚苗鰾充氣，能平穩(wěn)且快速游動(dòng)四處覓食，在孵化網(wǎng)箱中人工投喂甲魚料與豐年蟲。

1.4.1 魚苗培育池的準(zhǔn)備 魚苗培育池3 個(gè)，每個(gè)面積為200 m2、池深2 m、水位最深能達(dá)到1.8 m 的室外水泥池，池底、池壁光滑，無(wú)淤泥，進(jìn)排水方便，進(jìn)水口和排水口呈對(duì)角線，且進(jìn)水口與排水口呈30°斜坡；魚苗下塘前一周將池內(nèi)雜物清理干凈并用強(qiáng)氯精徹底清塘消毒，隔天用60目篩絹網(wǎng)將進(jìn)水口包住，進(jìn)水50 cm，全池使用氨基酸肥水膏和小球藻藻種進(jìn)行肥水，少量多次連續(xù)使用3 d并將水位加到70 cm。

1.4.2 魚苗放養(yǎng) 當(dāng)培育池池水出現(xiàn)白色條紋狀，表明進(jìn)入輪蟲高峰期，可以下苗。每批魚苗全部平游，開口攝食后，選擇晴天傍晚在培育池上風(fēng)口放苗，放苗密度為180～200 尾/m2，放苗時(shí)調(diào)節(jié)水溫一致并飽食下塘。

1.4.3 飼養(yǎng)管理 魚苗下塘后采用“豆?jié){法”和“粉料法”配合投喂，每天全池潑灑豆?jié){2 次，用粉料沿培育池邊拋灑2 次；魚苗下塘一周內(nèi)每天每200 m2用黃豆2 kg，將黃豆浸泡后磨漿均勻潑灑，每天拋灑粉料20 g/次；一周后開始減少黃豆?jié)姙⒋螖?shù)和潑灑量，每天每200 m2用1 kg 浸泡磨漿潑灑，粉料增加到30 g/次，每天4 次，并根據(jù)天氣和水質(zhì)情況將水位提高到80～100 cm。

兩周后魚苗長(zhǎng)至20 mm 左右，停止黃豆?jié){的潑灑，將水位慢慢升高至最高水位，根據(jù)水色合理追肥和補(bǔ)充藻類。將粉料的投喂范圍慢慢縮?。欢c(diǎn)加掛餌料臺(tái)，將粉料投喂量降低改為破碎料，慢慢直接用破碎料代替粉料，投喂時(shí)在餌料臺(tái)邊加以聲音的刺激。

培育30 d 左右魚苗長(zhǎng)至30～40 mm，開始拉網(wǎng)鍛煉，為分池培育大規(guī)格魚種做準(zhǔn)備。

2 結(jié)果與分析

2.1 親魚馴養(yǎng)

截至2019 年3 月，25 尾烏原鯉親魚馴化成功23尾，死亡2 尾，馴化成活率92.0%。

2.2 人工繁殖結(jié)果

2019 年共進(jìn)行了3 批催產(chǎn)試驗(yàn)，結(jié)果如表2 所示。

表2 2019 年烏原鯉催產(chǎn)結(jié)果

2.3 人工孵化結(jié)果

人工授精后將受精卵均勻黏附在人工魚巢上，將人工魚巢放進(jìn)孵化網(wǎng)箱內(nèi)淋水孵化，在18.5～21.0 ℃的水溫下，經(jīng)過(guò)110～160 h 孵化出膜，平均受精率73.5%，平均孵化率69.7%，共孵化出魚苗6.16萬(wàn)尾（表3）。

表3 2019 年烏原鯉孵化結(jié)果

2.4 魚苗培育結(jié)果

下塘水花6.05 萬(wàn)尾，采用“豆?jié){法”“粉料法”和“破碎料”3 個(gè)階段投喂飼料，經(jīng)過(guò)30 d 的培育，平均成活率達(dá)68.7%，培育出夏花4.080 萬(wàn)尾，魚苗規(guī)格為28～40 mm（表4）。

表4 魚苗培育結(jié)果

3 討論

3.1 親魚的選擇與培育

烏原鯉性成熟在3 齡以上，體重在1.0～1.5 kg，市場(chǎng)上能夠收購(gòu)到的親魚多數(shù)在0.5～1.0 kg，數(shù)量較少。收購(gòu)的親魚因?yàn)槟懶∨鹿猓斯ゑZ化相對(duì)困難。試驗(yàn)表明，野生親魚適合的人工配合餌料，蛋白質(zhì)含量在35%的沉性料比較適合，而同為原鯉屬的巖原鯉則報(bào)道有較常使用蛋白質(zhì)含量為40%～45%的人工配合飼料［5，6］。投喂時(shí)間選擇在傍晚日落和上午日出前，做到定時(shí)、定點(diǎn)、定質(zhì)、定量；在催產(chǎn)前一個(gè)月左右開始定期沖水，刺激親魚性腺發(fā)育。

3.2 人工催產(chǎn)與人工孵化

進(jìn)入3 月，養(yǎng)殖水溫到18 ℃左右，挑選親魚進(jìn)行人工催產(chǎn)試驗(yàn)，使用 DOM、LRH-A2、HCG 3 種催產(chǎn)劑的合劑，催產(chǎn)率為50%～100%，親魚的選擇與催產(chǎn)劑的配伍還需要進(jìn)一步試驗(yàn)。

3.3 人工孵化

孵化水溫為18.5～21.0 ℃，經(jīng)過(guò)110 h 魚苗出膜，這與韓耀全等［4］結(jié)果有一定偏差，可能是因孵化方式的不同而導(dǎo)致出膜時(shí)間的偏差。刁曉明等［7］采用黃泥水脫黏，在19～21 ℃流水條件下，經(jīng)過(guò)78～106 h，成功獲得巖原鯉魚苗。

3.4 魚苗培育

與黃輝等［6］對(duì)巖原鯉采用清水下塘不同，本試驗(yàn)中烏原鯉水花肥水飽食下塘，提高了水花下塘的成活率。在培育過(guò)程中，用豆?jié){全池潑灑，既保證了魚苗的營(yíng)養(yǎng)，魚苗吃剩下的豆?jié){又作為肥料對(duì)培育進(jìn)行追肥。黃豆必須經(jīng)過(guò)2 h 以上的泡水，讓黃豆充分吸水。在投喂豆?jié){的同時(shí)配合人工粉料，提高了魚苗的馴化率和轉(zhuǎn)食率；在培育過(guò)程中注重水質(zhì)管理，培育大批生物餌料，能有效提高烏原鯉魚苗成活率和減少魚苗病害。