海南地區(qū)白木香南方根結(jié)線蟲(chóng)防控藥劑篩選

孫衍湯，連春枝，王科明，凌家如

海南省林業(yè)科學(xué)研究院（海南省紅樹(shù)林研究院），海南?？?71100

南方根結(jié)線蟲(chóng)（Meloidogyneincognita）是喜溫性植物根系定居性?xún)?nèi)寄生生物，是根結(jié)線蟲(chóng)屬中4大優(yōu)勢(shì)種群之一，其寄主范圍很廣，超過(guò)3000種，分屬114科，尤以茄科、葫蘆科、十字花科等植物受害嚴(yán)重[1]。

白木香（Aquilaria sinensis(Lour.)Gilg）又稱(chēng)土沉香、香樹(shù)、女兒香等，是瑞香科沉香屬常綠喬木，喜溫暖，耐干旱，對(duì)土壤要求不嚴(yán)，在酸性的砂質(zhì)壤土、黃壤土和紅壤土均能生長(zhǎng)，為中國(guó)生產(chǎn)中藥沉香的唯一植物來(lái)源，是國(guó)家二級(jí)重點(diǎn)保護(hù)野生植物[2-3]。近年來(lái)，隨著海南白木香種植面積不斷增大，種植后帶來(lái)的病蟲(chóng)害問(wèn)題越來(lái)越嚴(yán)重，影響和制約了白木香產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展，產(chǎn)量減少、質(zhì)量降低較為突出，其中一個(gè)最主要的原因是南方根結(jié)線蟲(chóng)的不斷累積、傳播、蔓延和危害[4]。該線蟲(chóng)寄生在苗期發(fā)生非常普遍，如果不進(jìn)行處理栽種后枯死率較高。目前對(duì)南方根結(jié)線蟲(chóng)主要依靠藥劑防治，但防治南方根結(jié)線蟲(chóng)的藥劑種類(lèi)不多，大部分防效不高。因此，了解殺蟲(chóng)劑對(duì)南方根結(jié)線蟲(chóng)的防治效果并篩選出綜合防治效果較好的藥劑對(duì)白木香種植產(chǎn)業(yè)具有重要現(xiàn)實(shí)意義。

該研究使用7種藥劑，通過(guò)室內(nèi)試驗(yàn)初步篩選出毒殺效果較好的藥劑，再進(jìn)行田間試驗(yàn)，根據(jù)田間試驗(yàn)結(jié)果統(tǒng)計(jì)綜合評(píng)價(jià)，篩選出防治效果較好的防控藥劑，為海南白木香根結(jié)線蟲(chóng)的防治工作提供參考依據(jù)。

1 田間試驗(yàn)地概況

試驗(yàn)地位于樂(lè)東縣尖峰鎮(zhèn)苗圃園內(nèi)，屬于熱帶海洋季風(fēng)氣候地區(qū)，年平均氣溫23℃，年降雨量1200mm左右，試驗(yàn)地地勢(shì)平坦，土壤質(zhì)地為沙土，pH6.5，有機(jī)質(zhì)含量1.61，南方根結(jié)線蟲(chóng)病常年發(fā)生較重。試驗(yàn)前后未施用其他農(nóng)藥，肥水管理照常規(guī)進(jìn)行。

2 材料和方法

2.1 供試藥劑

41.7%的氟吡菌酰胺懸浮劑；20%的噻唑膦水乳劑；1.8%的阿維菌素乳油；50%的辛硫磷乳油；48%的毒死蜱乳油；淡紫擬青霉粉劑，2億個(gè)孢子/g；厚孢輪枝菌微粒劑，25億個(gè)孢子/g。

2.2 室內(nèi)毒力測(cè)定方法

（1）藥劑的配制

將1.8%的阿維菌素乳油按有效成分配制濃度分別為0.45mg/mL、0.23mg/mL、0.11mg/mL、0.056mg/mL和0.028mg/mL；41.7%的氟吡菌酰胺懸浮劑按有效成分配制濃度分別為0.42mg/mL、0.21mg/mL、0.11mg/mL、0.053mg/mL和0.026mg/mL；20%的噻唑膦水乳劑和50%的辛硫磷乳油按有效成分配制濃度分別為10mg/mL、5mg/mL、2.50mg/mL、1.25mg/mL和0.63mg/mL。

（2）線蟲(chóng)懸浮液的制備

從培養(yǎng)于大棚中的袋裝白木香幼苗根部分離南方根結(jié)線蟲(chóng)卵粒，置于培養(yǎng)皿中的滅菌水中，于28℃孵化48h～72h，然后用貝曼漏斗法分離根結(jié)線蟲(chóng)2齡幼蟲(chóng)，24h后收集線蟲(chóng)于培養(yǎng)皿中，加滅菌水配制成濃度為40頭/mL的線蟲(chóng)懸浮液。

（3）室內(nèi)藥劑毒力測(cè)定

往培養(yǎng)皿中分別加入線蟲(chóng)懸浮液1mL，再分別加入對(duì)應(yīng)的處理藥劑1mL；1.8%的阿維菌素乳油按有效成分配制濃度分別為0.45mg/mL、0.23mg/mL、0.11mg/mL、0.056mg/mL和0.028mg/mL；41.7%的氟吡菌酰胺懸浮劑按有效成分配制濃度分別為0.42mg/mL、0.21mg/mL、0.11mg/mL、0.053mg/mL和0.026mg/mL；20%的噻唑膦水乳劑和50%的辛硫磷乳油按有效成分配制濃度分別為10mg/mL、5mg/mL、2.50mg/mL、1.25mg/mL和0.63mg/mL。毒力測(cè)定實(shí)驗(yàn)于直徑為3.5cm的培養(yǎng)中進(jìn)行，24h后，統(tǒng)計(jì)死亡蟲(chóng)數(shù)。1個(gè)培養(yǎng)皿為1個(gè)處理，每個(gè)處理分別設(shè)4次重復(fù)。

2.3 田間試驗(yàn)

2.3.1 試驗(yàn)材料

（1）試驗(yàn)作物：白木香

（2）防治對(duì)象：南方根結(jié)線蟲(chóng)病

（3）供試藥劑見(jiàn)表1

表1 供試藥劑及施藥劑量Tab.1 The Test Insecticides and The Dosage of Application

2.3.2 試驗(yàn)及調(diào)查方法

（1）施藥方法

量取各藥劑，用苗圃園內(nèi)貯藏的地下水稀釋?zhuān)♂尡稊?shù)1000倍，水溫為22℃，天氣陰，氣溫23℃～27℃。施藥器械為10kg帶噴頭的不銹鋼鐵桶，均勻澆灌到白木香苗內(nèi)。

（2）調(diào)查時(shí)間和次數(shù)

試驗(yàn)共進(jìn)行3次調(diào)查，施藥前進(jìn)行線蟲(chóng)基數(shù)調(diào)查，施藥后15d調(diào)查線蟲(chóng)減退情況；定植后植株生長(zhǎng)45d，挖取植株調(diào)查根結(jié)情況。

（3）小區(qū)面積與調(diào)查方法

小區(qū)面積：每小區(qū)面積20m2，每處理設(shè)4次重復(fù)。

土壤線蟲(chóng)采樣方法：基數(shù)調(diào)查，在施藥前，通過(guò)土壤采樣確定侵染程度，每小區(qū)用取土器從白木香苗的根周?chē)?cm～20cm）隨機(jī)采集5個(gè)點(diǎn)的土樣，采集后用貝曼漏斗法分離，測(cè)定2齡線蟲(chóng)侵染期的數(shù)量。鑒別線蟲(chóng)死活采用0.3%龍膽紫染色法。

病情調(diào)查方法：采用隨機(jī)取樣調(diào)查法，每小區(qū)取樣30株檢查根系蟲(chóng)癭情況。病株分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)：

0級(jí)：根系無(wú)蟲(chóng)癭；

1級(jí)：根系有少量小蟲(chóng)癭；

3級(jí)：2/3根系布滿(mǎn)小蟲(chóng)癭；

5級(jí)：根系布滿(mǎn)小蟲(chóng)癭并且次生蟲(chóng)癭；

7級(jí)：根系形成須根團(tuán)；

（4）藥效計(jì)算方法

根據(jù)線蟲(chóng)數(shù)和病情指數(shù)按下列指數(shù)公式計(jì)算出防治效果：

式中：

CK0、PT0：施藥前空白對(duì)照區(qū)和藥劑處理區(qū)活線蟲(chóng)數(shù)；CK1、PT1：施藥后空白對(duì)照區(qū)和藥劑處理區(qū)活線蟲(chóng)數(shù)。

式中：CK1為空白對(duì)照區(qū)施藥后病情指數(shù)；PT1為藥劑處理區(qū)施藥后病情指數(shù)。

2.4 統(tǒng)計(jì)分析

通過(guò)SPSS 22.0軟件，求出每種藥劑的毒力回歸方程Y=a+bx、相關(guān)系數(shù)R2、95%置信限及致死中濃度LC50。用鄧肯新復(fù)極差法（DMRT）對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

3 結(jié)果與分析

3.1 毒力測(cè)定結(jié)果

根據(jù)每種藥劑不同濃度測(cè)試皿內(nèi)南方根結(jié)線蟲(chóng)2齡線蟲(chóng)的毒殺活性，結(jié)果見(jiàn)表2。由表2可知，1.8%的阿維菌素乳油對(duì)南方根結(jié)線蟲(chóng)2齡幼蟲(chóng)的毒殺活性最好，LC50為0.53mg/mL；其次是41.7%的氟吡菌酰胺懸乳劑，LC50為1.28mg/mL；20%的噻唑膦水乳劑的LC50為18.56mg/mL，50%的辛硫磷乳油的LC50為41.51mg/mL。

表2 4種農(nóng)藥制劑對(duì)白木香南方根結(jié)線蟲(chóng)2齡幼蟲(chóng)的毒殺活性（24h）Tab.2 The Toxicidal Activity of 4 Insecticides Control Efficacy of The Second Instar larvae of The Aquilaria Sinensis Meloidogyne Incognita（24h）

除上述4種藥劑外，余下3種藥劑測(cè)試時(shí)沒(méi)有顯示線性關(guān)系，由此，在固定濃度下，測(cè)試余下3種藥劑的致死率，結(jié)果如下：

40%的毒死蜱乳油在200μg a.i./mL下對(duì)南方根結(jié)線蟲(chóng)2齡幼蟲(chóng)的致死率為34.9%；厚孢輪枝菌微粒劑（2.5×106個(gè)孢子/mL）對(duì)南方根結(jié)線蟲(chóng)2齡幼蟲(chóng)的致死率為15.6%；淡紫擬青霉粉劑（2.0×106個(gè)孢子/mL）對(duì)南方根結(jié)線蟲(chóng)2齡幼蟲(chóng)的致死率為19.4%。其中后2種藥劑為微生物殺線蟲(chóng)劑，在實(shí)驗(yàn)室測(cè)試皿內(nèi)毒殺活性沒(méi)有顯示出較好的致死率，可能是由于微生物藥劑的滯后性，而測(cè)試的時(shí)間是藥后24h，因此，出現(xiàn)上述結(jié)果。

3.2 田間試驗(yàn)結(jié)果

根據(jù)皿內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，選擇毒殺活性較好的3種農(nóng)藥，1.8%的阿維菌素乳油、41.7%的氟吡菌酰胺懸乳劑和20%的噻唑膦水乳劑為田間試驗(yàn)藥劑。每種藥劑按照高中低3個(gè)濃度布置試驗(yàn)，空白對(duì)照用清水替代。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表3、表4。

由表3可知，根據(jù)土壤中統(tǒng)計(jì)的南方根結(jié)線蟲(chóng)數(shù)目可以計(jì)算施藥后蟲(chóng)口減退率及其防效。藥后15d，41.7%的氟吡菌酰胺懸浮劑的效果整體較好，其次是20%的噻唑膦水乳劑，1.8%的阿維菌素乳油的防效稍差。有效成分用量為312.75mL/hm2時(shí)，41.7%的氟吡菌酰胺懸浮劑對(duì)線蟲(chóng)的蟲(chóng)口減退率為83.58%，防效為84.85%，防治效果最好；有效成分用量為135mL/hm2時(shí)，藥后15d，1.8%的阿維菌素乳油的蟲(chóng)口減退率為63.15%，防效為65.99%，效果較差。有效成分用量為3000mL/hm2時(shí)，20%的噻唑膦水乳劑的防效與41.7%的氟吡菌酰胺懸浮劑最低濃度的防效相當(dāng)。

表3 3種藥劑防治白木香南方根部線蟲(chóng)田間試驗(yàn)結(jié)果（15d）Tab.3 The Field Control Efficacy of 3 Insecticides to Meloidogyne Incognita of Aquilaria Sinensis（15d）

根結(jié)防效：藥后45d，拔出幼苗統(tǒng)計(jì)根結(jié)發(fā)病情況，結(jié)果見(jiàn)表4。有效成分用量為312.75mL/hm2時(shí)，41.7%的氟吡菌酰胺懸浮劑對(duì)線蟲(chóng)根結(jié)的平均病情指數(shù)為7.26，防效為85.41%，防治效果最好；有效成分用量為135mL/hm2時(shí)，1.8%的阿維菌素乳油對(duì)線蟲(chóng)根結(jié)的平均病情指數(shù)為17.02，防效僅為65.79%，效果較差。有效成分用量為3000mL/hm2時(shí)，20%的噻唑膦水乳劑對(duì)線蟲(chóng)根結(jié)的防效與41.7%的氟吡菌酰胺懸浮劑最低濃度的防效相當(dāng)，分別為78.71%和78.47%。整體防效表現(xiàn)為41.7%的氟吡菌酰胺懸浮劑的效果較好，其次是20%的噻唑膦水乳劑，1.8%的阿維菌素乳油的防效稍差。

表4 3種藥劑防治白木香根部南方根結(jié)線蟲(chóng)田間試驗(yàn)結(jié)果（45d）Tab.4 The Field Control Efficacy of 3 Insecticides to Meloidogyne Incognita of Aquilaria Sinensis（45d）

4 結(jié)論與討論

4.1 結(jié)論

該研究結(jié)果表明，室內(nèi)毒力試驗(yàn)1.8%的阿維菌素乳油對(duì)南方根結(jié)線蟲(chóng)2齡幼蟲(chóng)的毒殺活性最好，LC50為0.53mg/mL；其次是41.7%的氟吡菌酰胺懸乳劑，LC50為1.28mg/mL；20%的噻唑膦水乳劑的LC50為18.56mg/mL，50%的 辛 硫 磷 乳 油 的LC50為41.51mg/mL；40%毒死蜱乳油、厚孢輪枝菌微粒劑（2.5×106個(gè)孢子/mL）和淡紫擬青霉粉劑（2.0×106個(gè)孢子/mL）這3種藥劑測(cè)試時(shí)沒(méi)有顯示線性關(guān)系。

田間藥效試驗(yàn)41.7%的氟吡菌酰胺懸浮劑的效果整體較好，其次是20%的噻唑膦水乳劑，1.8%的阿維菌素乳油的防效稍差。有效成分用量為312.75mL/hm2時(shí)，41.7%的氟吡菌酰胺懸浮劑對(duì)線蟲(chóng)的蟲(chóng)口減退率為83.58%，防效為84.85%，防治效果最好；有效成分用量為135mL/hm2時(shí)，藥后15d 1.8%的阿維菌素乳油的蟲(chóng)口減退率為63.15%，防效為65.99%，效果較差。有效成分用量為3000mL/hm2時(shí)，20%的噻唑膦水乳劑的防效與41.7%的氟吡菌酰胺懸浮劑最低濃度的防效相當(dāng)。

4.2 討論

根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)41.7%的氟吡菌酰胺懸乳劑整體效果最好，20%的噻唑膦水劑其次，1.8%的阿維菌素乳油效果一般，田間試驗(yàn)結(jié)果與室內(nèi)篩選結(jié)果不一致，可能原因是室內(nèi)主要以培養(yǎng)皿的生測(cè)為主，乳油的吸收和滲透效果較好，對(duì)線蟲(chóng)有較好的毒殺作用，而在田間，受到土壤因素的影響，乳油被吸附等原因，導(dǎo)致阿維菌素效果難以發(fā)揮，因而結(jié)果不一致。淡紫擬青霉粉劑藥劑測(cè)試時(shí)沒(méi)有顯示線性關(guān)系，這與許天委等研究的結(jié)果不一致[5]，這可能是由于施藥后受土壤和環(huán)境對(duì)生物農(nóng)藥的影響，從而導(dǎo)致藥效發(fā)揮不好。

從價(jià)格因素考慮，41.7%的氟吡菌酰胺懸乳劑的價(jià)格比較貴，20%的噻唑膦水劑的價(jià)格相對(duì)便宜，因而僅僅單一防治線蟲(chóng)，建議選擇20%的噻唑膦水劑進(jìn)行灌根防治；由于41.7%的氟吡菌酰胺懸乳劑對(duì)白粉病也有良好的防治，一旦白粉病和線蟲(chóng)同時(shí)發(fā)生，可以使用該藥兼顧兩種病害。

盡管阿維菌素乳油的效果稍差，但是由于沒(méi)有使用阿維菌素顆粒劑等其他劑型進(jìn)行防治，因而暫時(shí)不能說(shuō)阿維菌素的效果欠佳。