王紅梅 張琳

摘要 [目的]建立正相高效液相色譜（NP-HPLC）同時測定萬壽菊中玉米黃質(zhì)和葉黃素含量的方法。[方法]色譜柱Inertsil SIL-100A（4.6 mm×250 mm，3 μm），流動相為正己烷∶乙酸乙酯=70∶30（V∶V），檢測波長446 nm，柱溫30 ℃。[結(jié)果]玉米黃質(zhì)在5～50 μg/mL呈線性關(guān)系（r=0.997），加標(biāo)回收率為97.5%（n=5），檢出限為0.055 μg/mL;葉黃素在10～100 μg/mL呈線性關(guān)系（r=0.999），加標(biāo)回收率為97.3%（n=5），檢出限為0.085 μg/mL。[結(jié)論]建立的正相HPLC方法快速、穩(wěn)定，能夠?yàn)闄z測萬壽菊中葉黃素和玉米黃質(zhì)含量提供有效方法。

關(guān)鍵詞 正相高效液相色譜;葉黃素;玉米黃質(zhì);萬壽菊

中圖分類號 R284.2文獻(xiàn)標(biāo)識碼 A文章編號 0517-6611（2021）02-0186-03

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2021.02.050

開放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識碼（OSID）：

Determination of Zeaxanthin and Lutein in Marigold by Normal Phase HPLC

WANG Hongmei1，ZHANG Lin2

（1.Tianjin Rianlon Corporation，Tianjin 300384;2.School of Chinese Materia Medica，Tianjing Univerisity of Traditional Chinese Medicine，Tianjin 301617）

Abstract [Objective] To establish a method for the simultaneous determination of lutein and zeaxanthin in marigold by normal phase high performance liquid chromatography （NPHPLC）. [Method]The column， Inertsil SIL100A （4.6 mm × 250 mm， 3 μm）， mobile phase， nHexane∶ethyl acetate = 70∶30 （V∶V）， detection wavelength 446 nm， column oven temperature 30 ℃. [Result]Zeaxanthin showed a linear relationship between 5-50 μg/mL （r = 0.997）， the recovery rate was 97.5% （n=5）， the detection limit was 0.055 μg/mL， lutein showed a linear relationship between 10-100 μg/mL （r = 0.999）， the recovery rate was 97.3% （n= 5）， the detection limit was 0.085 μg/mL. [Conclusion] The established HPLC method is rapid and stable， and can provide an effective method for the determination of lutein and zeaxanthin in marigold.

Key words NPHPLC;Lutein;Zeaxanthin;Marigold

葉黃素（lutein）和玉米黃質(zhì)（zeaxanthin）為天然的植物色素，多存在于植物果實(shí)、蔬菜、花卉及藻類植物中，屬于較為基本的天然色素，具有提高人和動物免疫力以及抗氧化的作用。葉黃素能夠預(yù)防眼睛的視網(wǎng)膜黃斑，延緩失明癥和視力退化等眼部的疾病。近年來研究表明，葉黃素具有調(diào)節(jié)動物免疫力、加強(qiáng)巨噬細(xì)胞活性、遏制腫瘤等功能[1-4]。玉米黃質(zhì)也具有抗氧化性，分子中含多個共軛雙鍵，可阻斷自由基的鏈?zhǔn)絺鬟f。在生物體中，雖然玉米黃質(zhì)不能轉(zhuǎn)化成為維生素A，不具其活性，但也是人體可直接利用的強(qiáng)抗氧化劑。同時玉米黃質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)中帶有羥基，增強(qiáng)了其抗氧化能力。人體中，葉黃素和玉米黃質(zhì)主要分布在肝臟、腎臟、胰臟、卵巢、眼、脾臟等組織器官中，并且人體和動物均不能自身合成2種物質(zhì)，只能通過攝取食物或相關(guān)制劑獲得。葉黃素和玉米黃質(zhì)的食物來源主要有黃玉米、橙汁、桃子和雞蛋黃等[5-8]。

萬壽菊的花中含有豐富的玉米黃質(zhì)和葉黃素。從20世紀(jì)70年代起，美國從萬壽菊中規(guī)模化提取葉黃素，用作雞飼料添加劑。在化妝品、醫(yī)藥、水產(chǎn)品等行業(yè)中，玉米黃質(zhì)和葉黃素有應(yīng)用。天然色素具有廣泛的應(yīng)用前景，其相關(guān)產(chǎn)品市場需求將會不斷增大，對萬壽菊中葉黃素和玉米黃質(zhì)的提取工藝和檢測方法的準(zhǔn)確性也會有更高的要求[9-16]。

高效液相色譜法（HPLC）是有效測定玉米黃質(zhì)和葉黃素含量的首選方法[17-19]。黃小春等[20]利用高效液相色譜法測定雞蛋黃中的葉黃素。由于玉米黃質(zhì)與葉黃素互為同分異構(gòu)體，化學(xué)結(jié)構(gòu)極為相似，屬異戊二烯類化合物，因此在載碳量較低的C18柱上實(shí)現(xiàn)其基線分離較為困難?；莶Φ萚21]在YMC C30柱上實(shí)現(xiàn)玉米黃質(zhì)和葉黃素基線分離，測得玉米黃質(zhì)和葉黃素含量分別為54.2和12.8 mg/kg。上述文獻(xiàn)表明，由于兩者結(jié)構(gòu)相似，在C18柱上僅限于單獨(dú)檢測葉黃素或玉米黃質(zhì)，當(dāng)兩者均存在時難以實(shí)現(xiàn)基線分離;在C30柱上雖然能夠?qū)崿F(xiàn)基線分離，但C30柱價格較高，通用性不強(qiáng)，不利于推廣和普及。因此，在正相硅膠色譜柱（NP-HPLC）上建立同時快速測定相關(guān)農(nóng)產(chǎn)品的葉黃素和玉米黃質(zhì)含量具有重要意義。

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