耿 凱， 李抒柏， 張 泰， 金英海*， 房家琛， 楊立彬

(1.延邊大學(xué)農(nóng)學(xué)院，吉林 延吉 133000；2.日本弘前大學(xué)農(nóng)學(xué)生命科學(xué)部，日本 弘前 036-8560；3.北京君德同創(chuàng)農(nóng)牧科技股份有限公司，北京 100089)

1 材料與方法

1.1 添加劑制作

在粉碎機(jī)的作用下將添加劑所需的材料如胍基乙酸(≥96.0%，由河北固安君德同創(chuàng)生物工程有限公司提供)、蛋氨酸(≥99%，由贏創(chuàng)蛋氨酸有限公司提供)、陳皮、紅棗、山楂、白術(shù)(均亳州市眾益堂中藥材銷售有限公司提供)等粉碎后，再經(jīng)過40目篩過篩，得到的各物質(zhì)按配方上比例混合均勻，得到本次試驗所用的胍基乙酸中藥制劑。該試驗參考其他論文中胍基乙酸使用量，然后添加其他中藥成分，添加量為干物質(zhì)含量的0.5%。比例涉及配方問題，不予公開。

1.2 試驗設(shè)計與試驗動物

該試驗采用單因素變量控制。選擇日齡相近、體重(88±0.5)kg、健康無病的杜×長×大三元雜交育肥豬36頭，隨機(jī)分成兩組，即飼喂基礎(chǔ)日糧的對照組和飼喂基礎(chǔ)日糧+0.5%胍基乙酸中藥制劑的試驗組，每組3個重復(fù)，每個重復(fù)6頭，公母比1∶1。

1.3 飼養(yǎng)管理

正式飼喂期前，安排10 d預(yù)飼期，10 d內(nèi)逐漸增加添加劑的使用比例，直至完全達(dá)到試驗所需添加劑的量，飼養(yǎng)期為41 d。飼養(yǎng)期間各組育肥豬安排在一個圈舍中，保持豬舍內(nèi)通風(fēng)換氣，適合的溫濕度，足夠的光照，自由采食與飲水，密切觀察每組育肥豬的生長情況以及健康狀況?；A(chǔ)日糧營養(yǎng)水平和配方見表1。

表1 基礎(chǔ)日糧營養(yǎng)水平和配方

1.4 樣品采集及測定

1.4.1 血樣采集

在按照飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)飼喂41 d后，在每個組中隨機(jī)選取6頭育肥豬做好記號(每個重復(fù)選擇2頭接近平均體重的豬，公母比例一致，防止誤差)。晨飼前，頸下采血至少5 mL，做好樣本記錄。樣本常溫靜置20 min后，離心機(jī)3 500 r/min離心15 min，收集至少1.5 mL血清，做好標(biāo)號后，管口向上垂直放于-80 ℃冰箱中備用。

1.4.2 血清生化指標(biāo)的測定

1) 血清生化指標(biāo)檢測：總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、堿性磷酸酶(ALP)、乳酸脫氫酶(LD)；

2) 血清免疫指標(biāo)檢測：測定IgA、IgG、IgM含量；

概而言之，6個版本義務(wù)教育數(shù)學(xué)教材中平行四邊形內(nèi)容螺旋間隔差異較大，廣度和深度基本上隨著學(xué)段升高而增加．

3) 血清、組織器官的抗氧化指標(biāo)檢測：測定總抗氧化能力(T-AOC)、過氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)的含量。

以上指標(biāo)結(jié)果均由北京華英生物技術(shù)研究所檢測得出。

1.5 數(shù)據(jù)處理

試驗數(shù)據(jù)用Excel軟件整理，并用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行方差分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 胍基乙酸中藥制劑對育肥豬血清生化指標(biāo)的影響

由表2可知，與對照組相比，試驗組TP、ALB、GLB、ALP、LD等指標(biāo)含量均提高，但無顯著性差異(P>0.05)；試驗組AST含量顯著提高(P<0.05)；試驗組ALT含量顯著降低(P<0.05)。

表2 胍基乙酸中藥制劑對育肥豬血清生化指標(biāo)的影響Table 2 Effect of Guanidine acetic acid preparation on serum biochemical index in finishing pigs

2.2 胍基乙酸中藥制劑對育肥豬血清免疫指標(biāo)的影響

由表3可知，與對照組相比，試驗組IgA含量極顯著提高(P<0.01)；試驗組IgG含量有所提升，但無顯著性差異(P>0.05)；試驗組IgM含量極顯著提高(P<0.01)。

表3 胍基乙酸中藥制劑對育肥豬血清免疫指標(biāo)的影響Table 3 Effect of Guanidine acetic acid preparation on serum immune index in finishing pigs

2.3 胍基乙酸中藥制劑對育肥豬血清、組織器官抗氧化能力的影響

2.3.1 胍基乙酸中藥制劑對育肥豬血清抗氧化能力的影響

由表4可知，與對照組相比，試驗組血清T-AOC、SOD、GSH-Px含量極顯著提高(P<0.01)；試驗組血清MDA含量極顯著降低(P<0.01)。

表4 胍基乙酸中藥制劑對育肥豬血清抗氧化指標(biāo)的影響Table 4 Effect of Guanidine acetic acid preparation on serum antioxidant index in finishing pigs

2.3.2 胍基乙酸中藥制劑對育肥豬組織器官抗氧化能力的影響

由表5可知，與對照組相比，試驗組肌肉器官中T-AOC、SOD、GSH-Px、MDA等含量均無顯著性差異(P>0.05)；試驗組肝臟器官的T-AOC、SOD、GSH-Px含量均極顯著高于對照組(P<0.01)；試驗組肝臟組織中MDA水平極顯著降低(P<0.01)。

表5 胍基乙酸中藥制劑對育肥豬組織器官抗氧化指標(biāo)的影響Table 5 Effect of Guanidine acetic acid preparation on antioxidant index of tissue and organ in finishing pigs

3 討論

3.1 胍基乙酸中藥制劑對育肥豬血清生化指標(biāo)的影響

TP在體內(nèi)的含量高低直接代表著機(jī)體蛋白質(zhì)代謝水平的高低，此外其還作為機(jī)體營養(yǎng)物質(zhì)的載體在體內(nèi)發(fā)揮作用。ALB和GLB這2種物質(zhì)構(gòu)成TP，而且2種物質(zhì)與免疫水平有關(guān)[10]。動物的心肌和肝肌細(xì)胞作為AST和ALT的主要聚集地，當(dāng)心臟和肝臟功能受到破壞時，這2種酶在血清中的活性就會受到影響[11]。在機(jī)體正常情況下的血清中，ALP由骨細(xì)胞產(chǎn)生，當(dāng)血清中ALP含量上升時，可以表示某種疾病的發(fā)生，如佝僂病、肝癌和肝硬化等，也可能是兒童骨骼發(fā)育。LD是糖酵解通路中的主要酶，可以催化氧化乳酸變成丙酮酸，其在血清中含量升高主要是心臟或者肝臟產(chǎn)生疾病，例如：急性心肌梗死、肝硬化、肝炎等。該試驗結(jié)果表明，胍基乙酸中藥制劑對育肥豬血清生化指標(biāo)影響的差異不顯著。趙元等[12]的研究表明，在肥育豬飼糧添加不同劑量的胍基乙酸，試驗組血清生化指標(biāo)均不存在顯著差異，此結(jié)果與該試驗結(jié)果一致，這可能與胍基乙酸的添加劑以及TP等物質(zhì)的自身特性有關(guān)，還需要進(jìn)一步的深入研究。

3.2 胍基乙酸中藥制劑對育肥豬血清免疫指標(biāo)的影響

免疫球蛋白常被用來當(dāng)作反應(yīng)機(jī)體免疫能力的指標(biāo)，其主要包括IgA、IgM、IgG 3種。IgA主要存在于外分泌液中，是體內(nèi)粘膜細(xì)胞表面的主要免疫活性成分，是機(jī)體免疫過程中不可缺少的一份子；IgM是這3種中分子量最大的，一般無法穿透血管壁，主要負(fù)責(zé)血管內(nèi)免疫，早于其他2種出現(xiàn)在免疫應(yīng)答過程中，但是存在時間不長；IgG在這3種免疫因子中含量最高，可以達(dá)到75%左右，是起免疫功能的主要因子，可以通過阻止抗原穿透黏膜細(xì)胞進(jìn)入組織，從而可以保護(hù)粘膜細(xì)胞不受傷害[13]。目前對于胍基乙酸是否影響血清免疫能力方面的研究鮮有報道。該試驗結(jié)果表明，飼喂胍基乙酸中藥制劑可以極顯著提高育肥豬血清中IgA和IgG的含量，且維持在正常水平中，說明日糧添加胍基乙酸中藥制劑可以提高育肥豬免疫能力。

3.3 胍基乙酸中藥制劑對育肥豬血清、組織器官抗氧化能力的影響

血清T-AOC的含量影響參與畜體氧化作用酶的活性，是展現(xiàn)畜體抗氧化力的綜合性參數(shù)。SOD作為抗氧化酶在機(jī)體中起著保護(hù)細(xì)胞、消除多余自由基以及抵抗過氧化物攻擊的作用，是表現(xiàn)動物體抗氧化能力的關(guān)鍵參數(shù)。GSH-Px能夠降低體內(nèi)過氧化物的含量，保護(hù)機(jī)體不受氧化損傷。MDA產(chǎn)生于膜質(zhì)過氧化過程中，其含量與細(xì)胞損傷呈正比。有研究表明[14-16]，紅棗、山楂、白術(shù)等均可提高動物對過氧化物的抵抗能力，且能降低MDA含量。宣晶晶[17]等的研究顯示，在肉雞日糧中適量添加復(fù)合中草藥處方制劑可以增強(qiáng)其抗氧化能力。李潔蕾[18]等的研究表明，添加胍基乙酸可以顯著提升保育豬血漿中T-AOC、SOD、GSH-Px的含量，但MDA含量無明顯變化。該試驗研究表明，在日糧中添加胍基乙酸中藥制劑，可以顯著提高豬肝臟和血液中T-AOC、SOD、GSH-Px的含量，并且顯著降低MDA的含量，對肌肉中T-AOC、SOD、GSH-Px的含量雖有提升，但未達(dá)到顯著水平，這可能與胍基乙酸的添加量有關(guān)。

4 結(jié)論

綜上所述，日糧添加0.5 %胍基乙酸中藥制劑能夠增強(qiáng)育肥豬機(jī)體免疫力，提高血清、組織抗氧化能力。