顧?quán)嶇? 賈睿 何勤 曹麗萍 杜金梁 徐跑 殷國(guó)俊

摘要：【目的】探究不同濃度梔子苷對(duì)雙酚A（BPA）致鯉魚（Cyprinus carpio）肝毒性的影響，為魚類保肝藥物的篩選提供依據(jù)?！痉椒ā恳?5條鯉魚為試驗(yàn)材料，設(shè)5個(gè)處理組，即空白對(duì)照組、模型組（0.5 mg/L BPA暴露）及梔子苷處理組（BPA+梔子苷），其中，梔子苷設(shè)低（1.25 g/kg）、中（2.50 g/kg）、高（5.00 g/kg）3個(gè)濃度，養(yǎng)殖70 d后，檢測(cè)血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（GOT）、堿性磷酸酶（AKP）、甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）的水平，肝組織中超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）、谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）和總抗氧化能力（T-AOC）的水平，以及肝臟中fatp1、fas、ppar-α、nrf2、keap1、ho-1、tlr1、myd88、il-1β、il-6和il-10基因的表達(dá)量，來評(píng)價(jià)梔子苷對(duì)鯉魚肝毒性的治療效果?！窘Y(jié)果】與對(duì)照組相比，模型組鯉魚的特定生長(zhǎng)率顯著降低，餌料系數(shù)顯著增高（P<0.05，下同），而聯(lián)合投喂3種濃度的梔子苷可顯著提高特定生長(zhǎng)率，降低餌料系數(shù)，改善鯉魚的生長(zhǎng)情況。與模型組相比，飼喂中、高濃度的梔子苷顯著降低鯉魚血清中GPT、GOT和AKP活性，緩解鯉魚肝損傷的程度。飼喂低、中濃度的梔子苷顯著降低血清中TG和LDL-C的水平和肝組織中fatp1和ppar-α基因的表達(dá)量，增加血清中HDL-C的含量，改善了鯉魚肝臟脂質(zhì)代謝紊亂。同時(shí)，經(jīng)過3種濃度的梔子苷處理后，肝組織中SOD活性和nrf2、ho-1基因的表達(dá)量顯著升高，keap1基因的表達(dá)量顯著降低，表明梔子苷對(duì)雙酚A引起的肝臟氧化應(yīng)激有緩解作用。此外，飼喂3種濃度的梔子苷較模型組顯著下調(diào)了myd88、il-1β和il-6基因的表達(dá)量，但顯著上調(diào)了il-10基因的表達(dá)，抑制了鯉魚肝臟的炎癥反應(yīng)?！窘Y(jié)論】梔子苷可不同程度緩解雙酚A引起的鯉魚肝毒性，并通過改善肝臟脂質(zhì)異常代謝，增強(qiáng)抗氧化能力，抑制炎癥反應(yīng)等，減輕鯉魚肝損傷程度?？紤]到實(shí)際生產(chǎn)成本，推薦以中濃度（2.50 g/kg）的梔子苷作為保肝藥物的篩選依據(jù)。

關(guān)鍵詞： 梔子苷;雙酚A;保肝作用;肝毒性;鯉魚

中圖分類號(hào)： S948? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號(hào)：2095-1191（2021）02-0501-08

Abstract：【Objective】Explored the effects of different concentrations of geniposide on the hepatotoxicity of bisphenol A（BPA） in common carp（Cyprinus carpio）， and provided a reference for screening hepatoprotective drug in fish. 【Method】In this study， 75 common carps were divided into five treatment groups： blank control group， model group（0.5 mg/L BPA exposure） and geniposide treatment group （BPA+geniposide）. Geniposide was set at low （1.25 g/kg）， medium（2.50 g/kg） and high（5.00 g/kg） concentrations for 70 d. Then detected glutamic-pyruvic transaminase（GPT）， glutamic oxalacetic transaminase（GOT）， alkaline phosphatase（AKP）， triglycerides（TG）， total cholesterol（TC）， high-density lipoprotein cholesterol（HDL-C）， low-density lipoprotein cholesterol（LDL-C） levels in the serum， super oxide dismutase（SOD）， catalase（CAT）， glutathione（GSH）， malondialdehyde（MDA） and total antioxidant capacity（T-AOC） levels， as well as the expression levels of fatp1， fas， ppar-α， nrf2， keap1， ho-1， tlr1， myd88， il-1β， il-6 and il-10 genes in the liver to evaluate the therapeutic effects of geniposide on hepatotoxicity in common carp. 【Result】Compared with the control group， the specific growth rate of common carp in the model group was significantly reduced， and the feed coefficient was significantly increased（P<0.05， the same below）. The combined feeding of three concentrations of geniposide could significantly increase the specific growth rate， reduce the feedcoefficient， and improve the growth of carp. Compared with model group， geniposide at middleandhighconcentrations significantly reduced the activities of GPT， GOT and AKP in common carp serum， and alleviated the degree of liver injury in common carp. Lowor middle concentrations of geniposide significantly reduced the levels of TG and LDL-C in serum and the gene expressions of fatp1 and ppar-α in liver tissue， and increased the content of HDL-C in serum， which improved common carp liver lipid metabolism disorder. At the same time， after three concentrations of geniposide treatment， the activity of SOD and the gene expressions of nrf2 and ho-1 in liver tissues were significantly increased， and the expression levels of keap1 gene was significantly decreased， indicating that geniposide could relieve liver oxidative stress caused by BPA. In addition， compared with model group， feeding three concentrations of geniposide significantly down-regulated the gene expressions of myd88， il-1β and il-6， significantly up-regulated the gene expression of il-10， which inhibited the inflammatory response in liver of common carp. 【Conclusion】In summary，geniposide can alleviate common carp hepatotoxicity caused by BPA to varying degrees， and reduce hepatotoxicity by improving liver lipid metabolism， enhancing antioxidant capacity， and inhibiting inflammation. Taking into account the actual production cost， it is recommended to use geniposide at middle concentration（2.50 g/kg） as the basis for screening hepatoprotective drugs.

Key words： geniposide; bisphenol A; liver protection; hepatotoxicity; common carp

Foundation item：National Natural Science Foundation of China（31702318）; Basal Research Fund of Freshwater Fisheries Research Center， Chinese Academy of Fishery Sciences（2021JBFM09）

0 引言

【研究意義】雙酚A（Bisphenol A，BPA）是合成聚碳酸酯和環(huán)氧樹脂等的原材料，其在水環(huán)境中的分布十分廣泛（石健等，2009;Ibrahim et al.，2015）。BPA能干擾魚類的生長(zhǎng)和發(fā)育，對(duì)其內(nèi)分泌系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)也有不利影響，給水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)帶來了很大的危害（Kim et al.，2018）。肝臟是魚體最主要的代謝器官，大多數(shù)有毒物質(zhì)都要經(jīng)肝臟分解代謝（初曉紅等，2010）。研究表明，長(zhǎng)期的BPA暴露對(duì)鯉魚（Cyprinus carpio）肝臟具有明顯的毒性作用，可引起氧化應(yīng)激，以及脂質(zhì)代謝功能異常等（莊惠生和楊光，2005;吳雪菲，2014）。因此，研發(fā)能有效緩解或治療BPA致肝毒性的藥物，對(duì)提升魚類健康水平具有重要意義?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】據(jù)報(bào)道，中草藥因其成分天然、毒副作用小、不易在魚體富集等優(yōu)點(diǎn)，在水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中應(yīng)用廣泛，對(duì)魚類疾病的預(yù)防及治療發(fā)揮著重大作用（Galina et al.，2009;賈睿等，2013）。梔子苷（Geniposide）又名京尼平苷，是從茜草科植物梔子（Gardenia jasminoides Ellis）的干燥成熟果實(shí)中提取的一種環(huán)烯醚萜苷類化合物，被認(rèn)為是保肝利膽的良藥，且已廣泛應(yīng)用于肝臟疾病的治療中（劉益華等，2012;Kim et al.，2013;代亞萍等，2019）。在對(duì)哺乳動(dòng)物的研究中發(fā)現(xiàn)，一定濃度的梔子苷對(duì)四氯化碳（CCl4）誘導(dǎo)的大鼠慢性肝損傷有保護(hù)作用，可以提高受損傷肝臟的抗氧化水平，緩解肝臟的炎癥反應(yīng)及纖維化（尚新濤等，2012;Chen et al.，2016）。同時(shí)，梔子苷可有效改善大鼠非酒精性脂肪肝，明顯降低大鼠血清中的游離脂肪酸水平，改善肝臟的病理表現(xiàn)（Ma et al.，2011;Liang et al.，2016）。另外，梔子苷能通過緩解氧化應(yīng)激、調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡等途徑，發(fā)揮對(duì)小鼠肝臟缺血再灌注損傷的保護(hù)作用（Kim et al.，2013）。【本研究切入點(diǎn)】目前，在水產(chǎn)動(dòng)物中，關(guān)于梔子苷對(duì)魚類肝臟保護(hù)作用的研究幾乎未見報(bào)道?！緮M解決的關(guān)鍵問題】以BPA誘導(dǎo)的鯉魚肝毒性模型為基礎(chǔ)，通過檢測(cè)相關(guān)生化指標(biāo)及基因表達(dá)水平的變化，探究不同濃度梔子苷對(duì)BPA致鯉魚肝臟毒性的治療效果，為梔子苷在魚類肝病防治中的應(yīng)用提供理論參考。

1 材料與方法

1. 1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)用鯉魚選自中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院淡水漁業(yè)研究中心漁場(chǎng)，體重為50±5 g，體表無傷，體質(zhì)健康。將75條鯉魚隨機(jī)分到5個(gè)養(yǎng)殖箱，每個(gè)養(yǎng)殖箱15條魚，每天定時(shí)投喂2次基礎(chǔ)顆粒飼料（28%粗蛋白、11.6%粗纖維、4%粗脂肪、15%粗灰分），每日投喂量約為魚體總重的2%;暫養(yǎng)7 d，適應(yīng)養(yǎng)殖環(huán)境（溶氧量>6 mg/L，pH 7.4～8.1，溫度28～32 ℃）之后開始試驗(yàn)。主要試劑：梔子苷（純度≥98%）購(gòu)自上海源葉生物科技有限公司;BPA（純度≥99%）和二甲基亞砜（DMSO）購(gòu)自美國(guó)Sigma公司。

1. 2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

根據(jù)前期研究結(jié)果，本研究以0.5 mg/L BPA作為暴露濃度（Gu et al.，2020）?；陬A(yù)試驗(yàn)結(jié)果及在草魚（Ctenopharyngodon idella）、小鼠和大鼠中的使用劑量（尚新濤等，2012;Sun et al. 2017），本研究選取3種不同劑量的梔子苷添加入基礎(chǔ)飼料中，梔子苷濃度分別為1.25、2.50和5.00 g/kg。將養(yǎng)殖箱中的鯉魚分為5組，分別為空白對(duì)照組、模型組（BPA）及低、中、高3個(gè)濃度的梔子苷處理組（BPA+梔子苷），每組15條魚。除空白對(duì)照組外，其余4組鯉魚均暴露在0.5 mg/L BPA中?？瞻讓?duì)照組和模型組投喂基礎(chǔ)顆粒飼料，梔子苷處理組分別投喂含對(duì)應(yīng)劑量梔子苷的飼料。每天定時(shí)吸取殘餌和糞便，并更換1/2養(yǎng)殖用水，確保水質(zhì)健康及BPA濃度穩(wěn)定。每7 d稱量1次各組魚的總重，并及時(shí)更新飼料投喂量。養(yǎng)殖70 d后停喂24 h，給所有魚稱重并記錄后，分別從每個(gè)養(yǎng)殖箱中隨機(jī)選取8條鯉魚，采集血液和肝臟組織進(jìn)行后續(xù)分析。

1. 3 血清及肝臟組織勻漿的制備

將采集好的新鮮血液室溫放置一段時(shí)間，析出透明液體后4000 r/min離心10 min，吸取上清液（血清）備用。將100 mg肝組織用生理鹽水漂洗干凈，用濾紙吸干表面水分，放入1.5 mL的離心管中，加入9倍體積的western及IP細(xì)胞裂解液，用勻漿器進(jìn)行勻漿，之后10000 r/min離心3 min，吸取上清液備用。

1. 4 生化指標(biāo)檢測(cè)

谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（GOT）、堿性磷酸酶（AKP）、甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）、總抗氧化能力（T-AOC）和總蛋白（TP）檢測(cè)試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所有限公司。丙二醛（MDA）和過氧化氫酶（CAT）檢測(cè)試劑盒購(gòu)自上海碧云天生物技術(shù)有限公司。按照試劑盒的操作說明檢測(cè)血清生化指標(biāo)GOT、GPT、AKP、TG、TC、HDL-C和LDL-C，以及肝組織生化指標(biāo)SOD、GSH、CAT、MDA、T-AOC和TP。

1. 5 基因轉(zhuǎn)錄水平分析

用RNAiso Plus試劑盒提取鯉魚肝臟中的總RNA，酶標(biāo)儀測(cè)定OD260/280值（1.8～2.1），并計(jì)算RNA濃度。取1 μg RNA，用PrimeScriptTM RT reagent反轉(zhuǎn)錄試劑盒合成cDNA。根據(jù)TB GreenTM Premix Ex TaqTM II試劑盒的操作說明，在實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qPCR）儀上對(duì)cDNA進(jìn)行qPCR檢測(cè)。以β-actin為內(nèi)參基因，根據(jù)2-ΔΔCq法（Livak and Schmittgen，2001），計(jì)算目的基因的相對(duì)表達(dá)量。上述所用試劑盒均購(gòu)自寶生物工程（大連）有限公司（TaKaRa）。目的基因的特異性引物由寶生物工程（大連）有限公司（TaKaRa）合成，序列如表1所示。

1. 6 生長(zhǎng)指標(biāo)計(jì)算公式

特定生長(zhǎng)率（%）=100×（lnW末?lnW初）/t

餌料系數(shù)=F/（W末?W初）

式中，W初為養(yǎng)殖試驗(yàn)初的魚體總重（g），W末為養(yǎng)殖試驗(yàn)?zāi)┑聂~體總重（g），W末為養(yǎng)殖試驗(yàn)初的魚體均重（g），W初為養(yǎng)殖試驗(yàn)?zāi)┑聂~體均重（g），t為養(yǎng)殖試驗(yàn)天數(shù)（d），F(xiàn)為飼料消耗量（g）。

1. 7 統(tǒng)計(jì)分析

采用SPASS 19.0的單因素方差法（One-way ANOVA）進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。用LSD檢驗(yàn)進(jìn)行組間多重比較（P<0.05）。采用GraphPad Prism 8制圖。

2 結(jié)果與分析

2. 1 生長(zhǎng)指標(biāo)分析

試驗(yàn)期間未發(fā)現(xiàn)魚體死亡，各組魚的存活率均為100%。魚的生長(zhǎng)指標(biāo)如表2所示，模型組的特定生長(zhǎng)率與其他各組相比顯著降低（P<0.05，下同），餌料系數(shù)與其他各組相比顯著增加。

2. 2 不同濃度梔子苷對(duì)BPA暴露下鯉魚肝損傷指標(biāo)的影響

如圖1所示，與對(duì)照組相比，模型組的鯉魚血清中GPT、GOT和AKP活性均顯著升高;聯(lián)合投喂梔子苷后，這些指標(biāo)的活性均較模型組有所降低，其中，GPT和GOT的活性在中、高濃度組顯著降低，AKP的活性在中、低濃度組顯著降低。

2. 3 不同濃度梔子苷對(duì)BPA暴露下鯉魚肝臟脂質(zhì)代謝相關(guān)指標(biāo)的影響

如圖2所示，與對(duì)照組相比，模型組的鯉魚血清中TG、TC和LDL-C含量有所增加，其中TG含量顯著增加;聯(lián)合投喂梔子苷后，與模型組相比，上述3個(gè)指標(biāo)含量均呈下降趨勢(shì)，其中TG含量在3個(gè)濃度組中均顯著降低，LDL-C含量在低濃度組顯著降低。與對(duì)照組相比，HDL-C含量在模型組顯著降低;HDL-C的含量在低、高濃度組比模型組顯著增加。

2. 4 不同濃度梔子苷對(duì)BPA暴露下鯉魚肝臟脂質(zhì)代謝相關(guān)基因表達(dá)量的影響

從圖3可看出，與對(duì)照組相比，模型組的fatp1、fas和ppar-α基因表達(dá)量均有所上調(diào)，其中fatp1和fas的表達(dá)量顯著上調(diào);與模型組相比，fatp1基因的表達(dá)量在3個(gè)梔子苷濃度組中均顯著下調(diào)，ppar-α基因的表達(dá)量在中濃度組顯著下調(diào)。

2. 5 不同濃度梔子苷對(duì)BPA暴露后鯉魚肝臟氧化應(yīng)激相關(guān)指標(biāo)的影響

如圖4所示，與對(duì)照組相比，模型組的SOD、GSH、CAT和T-AOC水平均顯著降低，聯(lián)合投喂梔子苷之后，上述4個(gè)指標(biāo)的水平較模型組均有所提高，其中SOD活力在3個(gè)濃度組中均顯著增加，GSH的在低濃度組顯著提高。MDA的水平在模型組升高，在3個(gè)梔子苷濃度組降低，但差異均不顯著（P>0.05）。

2. 6 不同濃度梔子苷對(duì)BPA暴露后鯉魚肝臟氧化應(yīng)激相關(guān)基因表達(dá)量的影響

如圖5所示，nrf2和ho-1基因的表達(dá)量在模型組比對(duì)照組顯著下調(diào)，3個(gè)梔子苷濃度組比模型組顯著上調(diào);keap1基因的表達(dá)量在模型組比對(duì)照組顯著上調(diào)，3個(gè)梔子苷濃度組比模型組顯著下調(diào)。

2. 7 不同濃度梔子苷對(duì)BPA暴露下肝臟免疫功能的影響

從圖6可看出，與對(duì)照組相比，tlr1、myd88、il-1β和il-6基因的表達(dá)量在模型組均顯著上調(diào)，聯(lián)合投喂梔子苷后，這些基因的表達(dá)量較模型組均有所下調(diào)，其中tlr1的表達(dá)量在高濃度組下調(diào)顯著，myd88、il-1β和il-6基因的表達(dá)量在3個(gè)濃度組均顯著下調(diào)。il-10基因的表達(dá)量在模型組比對(duì)照組顯著下調(diào)，在3個(gè)梔子苷濃度組比模型組顯著上調(diào)。

3 討論

BPA是分布十分廣泛的環(huán)境雌激素，能對(duì)機(jī)體生長(zhǎng)、發(fā)育、代謝和免疫等多個(gè)方面產(chǎn)生不良影響（Kim et al.，2018）。本研究中，BPA單獨(dú)暴露顯著降低了鯉魚的特定生長(zhǎng)率，且明顯提高了投喂飼料的餌料系數(shù)（餌料系數(shù)越高，飼料轉(zhuǎn)化率越低，飼料使用效果越差）;而聯(lián)合投喂梔子苷后，3個(gè)濃度組中的特定生長(zhǎng)率和餌料系數(shù)均恢復(fù)到正常水平（與對(duì)照組相比），表明梔子苷投喂可改善BPA引起的鯉魚生長(zhǎng)抑制。

肝臟是魚體代謝有毒物質(zhì)的關(guān)鍵器官，也最先受到許多外源性化學(xué)品的毒性影響（初曉紅等，2010;端正花等，2015）。GPT、GOT和AKP活性的變化是反映肝損傷的重要指標(biāo)，一定濃度的BPA暴露可導(dǎo)致肝功能受損，引起血清GPT活性升高（Lee et al.，2006）。在對(duì)小鼠和斑馬魚的（Danio rerio）研究中顯示，BPA可擾亂肝臟脂質(zhì)代謝，上調(diào)fatp1、fas和ppar-α等基因的表達(dá)，干擾脂肪酸的轉(zhuǎn)運(yùn)、合成及代謝，以及加重肝內(nèi)TG沉積（Srivastava et al.，2015;李丹婷等，2016;姚亞運(yùn)，2016）。同時(shí)，BPA暴露可引起機(jī)體TC代謝出現(xiàn)異常，改變血清中HDL-C和LDL-C的水平（馮丹和楊嵐，2015）;BPA暴露還會(huì)產(chǎn)生過多的活性氧自由基（Abdel-Wahab，2014），誘導(dǎo)小鼠肝臟細(xì)胞發(fā)生脂質(zhì)過氧化，促進(jìn)MDA形成。此外，多余的活性氧自由基可消耗抗氧化酶和非酶抗氧化物質(zhì)（SOD、GSH和CAT等），嚴(yán)重影響肝臟的抗氧化能力，導(dǎo)致氧化還原狀態(tài)失衡（Korkmaz et al.，2010;Battisti et al.，2011）。Nrf2、keap1和ho-1是調(diào)節(jié)氧化應(yīng)激的關(guān)鍵基因，而BPA暴露會(huì)下調(diào)nrf2和ho-1基因的表達(dá)，上調(diào)keap1基因的表達(dá)，進(jìn)一步降低小鼠肝臟的抗氧化能力（Müller et al.，2018）。有報(bào)道稱，BPA暴露會(huì)影響機(jī)體的免疫功能，誘發(fā)炎癥反應(yīng)。Toll樣受體信號(hào)通路在免疫炎癥調(diào)節(jié)中發(fā)揮著重要作用（Rauta et al.，2014），BPA暴露能激活此通路，使斑馬魚胚胎中tlr3、myd88和促炎因子il-1β基因的表達(dá)上調(diào)（Xu et al.，2013），也能使小鼠心肌組織中促炎因子il-6基因的表達(dá)上調(diào)，抗炎因子il-10基因的表達(dá)下調(diào)（洪燕，2013），促進(jìn)炎癥反應(yīng)的發(fā)生。

本研究用0.5 mg/L的BPA對(duì)鯉魚進(jìn)行70 d的暴露試驗(yàn)，結(jié)果顯示，鯉魚血清中GPT、GOT和AKP活性顯著提高，說明BPA暴露引起鯉魚肝臟損傷。在BPA暴露后，肝組織中fatp1、fas和ppar-α基因的表達(dá)量也顯著上調(diào)，血清中TG含量明顯增加，HDL-C含量顯著減少，表明BPA引起鯉魚肝臟脂代謝功能發(fā)生紊亂。此外，BPA明顯降低了肝組織中SOD、CAT、GSH和T-AOC的水平，下調(diào)了nrf2和ho-1基因的表達(dá)，上調(diào)了keap1基因的表達(dá)，誘導(dǎo)鯉魚肝臟發(fā)生了嚴(yán)重的氧化應(yīng)激反應(yīng)。同時(shí)，暴露后tlr1、il-1β和il-6基因的表達(dá)量上調(diào)，il-10基因的表達(dá)量下調(diào)，說明BPA還會(huì)使鯉魚肝臟的免疫功能失調(diào)，誘發(fā)炎癥反應(yīng)。

梔子苷具有保肝利膽、鎮(zhèn)痛抗炎及抗氧化等作用（劉益華等，2012）。研究表明，梔子苷可有效緩解由CCl4引起的小鼠肝損傷，顯著抑制血清中GPT、GOT和AKP的活性，提高肝組織中SOD、CAT和GSH等抗氧化指標(biāo)的水平（尚新濤等，2012）。梔子苷還可通過對(duì)Toll樣受體通路的調(diào)節(jié)，抑制tlr2和tlr4基因的表達(dá)，提高敗血癥小鼠的抗炎能力（Kim et al.，2012）。在脂多糖誘導(dǎo)的大鼠巨噬細(xì)胞損傷的模型中，梔子苷的處理顯著降低了炎癥因子il-1β和il-6基因的表達(dá)量，改善了大鼠巨噬細(xì)胞的炎癥反應(yīng)（Fu et al.，2012）。另外，在探究梔子苷對(duì)脂質(zhì)代謝影響的研究中發(fā)現(xiàn)，梔子苷可降低非酒精性脂肪肝大鼠血清中TG和游離脂肪酸的含量，提高HDL-C的水平，明顯改善非酒精性脂肪肝大鼠的脂質(zhì)代謝功能（林曼婷，2015）。本研究結(jié)果顯示，聯(lián)合投喂梔子苷后，與模型組相比，鯉魚血清中GPT、GOT和AKP這3種酶活性升高被抑制，表明梔子苷可緩解BPA誘導(dǎo)的鯉魚肝損傷。梔子苷處理組中TG、TC和LDL-C含量降低，HDL-C含量增加，肝臟中脂代謝有關(guān)基因fatp1、fas和ppar-α基因的表達(dá)量下調(diào)，表明梔子苷可改善鯉魚肝臟脂質(zhì)代謝紊亂;SOD、CAT、GSH和T-AOC的水平升高，MDA含量減少，nrf2和ho-1基因的表達(dá)量上調(diào)，keap1基因的表達(dá)量下調(diào)，表明梔子苷的保肝機(jī)制與其抗氧化作用相關(guān)。同時(shí)，投喂梔子苷抑制了與炎癥相關(guān)的tlr1、myd88、il-1β和il-6基因的表達(dá)，表明梔子苷可有效抑制BPA引起的肝臟炎癥反應(yīng)。

4 結(jié)論

梔子苷可不同程度緩解雙酚A引起的鯉魚肝毒性，并通過改善肝臟脂質(zhì)異常代謝，增強(qiáng)抗氧化能力，抑制炎癥反應(yīng)等，減輕鯉魚肝損傷程度?？紤]到實(shí)際生產(chǎn)成本，推薦以中濃度（2.5 g/kg）的梔子苷作為保肝藥物的篩選依據(jù)。

參考文獻(xiàn)：

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（責(zé)任編輯 鄧慧靈）