夏召弟，劉霞

山西省中醫(yī)藥研究院，山西 太原 030012

柴胡為傘形科植物柴胡BupleurumchinenseDC.或狹葉柴胡B.scorzonerifoliumWild.的干燥根，按性狀不同，分別習(xí)稱“北柴胡”和“南柴胡”[1]。北柴胡又名韭葉柴胡、津柴胡，其主根較粗大，棕褐色，質(zhì)堅(jiān)硬，也被稱為“硬苗柴胡”，主要分布于我國(guó)東北、華北、西北、華東和華中各地?，F(xiàn)用的北柴胡多為其本種及3個(gè)變種，分別為北京柴胡B.chinensef.pekinense(Franch.) Shan et Y.Li、百花山柴胡B.chinensef.octoradiatum(Bunge) Shan et Sheh以及多傘北柴胡B.chinensef.chiliosciadium(Wolff) Shan et Y.Li。柴胡味辛、苦，性微寒，歸肝、膽、肺經(jīng)，有疏散退熱、疏肝解郁、升舉陽(yáng)氣之功效。臨床應(yīng)用以北柴胡為主，用于感冒發(fā)熱、寒熱往來(lái)、胸脅脹痛、月經(jīng)不調(diào)、子宮脫垂等證。本文對(duì)近年來(lái)北柴胡化學(xué)成分、有效成分提取工藝、質(zhì)量控制和藥理作用方面研究進(jìn)展進(jìn)行綜述，為柴胡屬藥用資源后續(xù)的開(kāi)發(fā)利用提供參考。

1 化學(xué)成分

1.1 皂苷類

皂苷類化合物是北柴胡中的主要化學(xué)成分，也是其發(fā)揮藥理藥效的最重要的成分。柴胡皂苷結(jié)構(gòu)均為五環(huán)三萜類齊墩果烷型衍生物，具有7種不同類型的苷元結(jié)構(gòu)，分別為環(huán)氧醚、異環(huán)雙烯、12-烯、同環(huán)雙烯、12-烯-28-羧酸、異環(huán)雙烯-30-羧酸和18-烯型[2]。張維瑞等[3]用高效液相色譜法(HPLC)測(cè)定了柴胡皂苷在柴胡不同部位的分布情況，發(fā)現(xiàn)柴胡根中柴胡皂苷a、c、d的含量遠(yuǎn)高于地上部分(根莖和葉片)，這也就是一直以來(lái)柴胡地上部分不作藥用，只將根作藥用的重要原因之一。楊印軍等[4]利用超高效液相色譜串聯(lián)四極桿飛行時(shí)間質(zhì)譜法(UPLC-Q-TOF-MS)比較了北柴胡、竹葉柴胡B.marginatumWall. ex DC.、藏柴胡B.marginatumWall.ex DC.var.stenophyllum(Wolff)Shan et Y.Li與小葉黑柴胡B.smithiivar.parvifoliumShan et Y.Li 4種柴胡的化學(xué)成分，發(fā)現(xiàn)竹葉柴胡與北柴胡在化學(xué)成分的整體構(gòu)成上有很高的相似性，這也解釋了為何竹葉柴胡作為目前市場(chǎng)上的主流品種，常作為正品使用的原因。北柴胡中研究較多的21個(gè)皂苷類成分及相關(guān)信息見(jiàn)表1[4-8]。

表1 北柴胡中皂苷類成分

1.2 揮發(fā)油類

北柴胡中含有多種揮發(fā)油類化合物，是其發(fā)揮解熱、抗炎作用的主要成分[9]。施錚等[10]考察了不同提取方法對(duì)柴胡揮發(fā)油成分的影響，并采用氣相色譜-質(zhì)譜法(GC-MS)分析所得揮發(fā)油的成分。其中酸水蒸氣蒸餾法提取的揮發(fā)油中抗炎的有效成分己酸含量最高，但是不同提取方法得到的揮發(fā)油中茴香腦的相對(duì)含量均為最高，其次為茴香腦的同分異構(gòu)體蒿腦。張博文等[11]采用響應(yīng)面法篩選出超聲提取柴胡揮發(fā)油的最佳工藝，在GC-MS所得到的揮發(fā)油成分中共鑒定出46個(gè)化合物，占總揮發(fā)油組分質(zhì)量分?jǐn)?shù)的96.84%。其中相對(duì)含量較高的成分為1，2-二甲基環(huán)戊烷、甲基環(huán)己烷、庚烷等，其中甲基環(huán)己烷最高。劉玉法等[12-13]在北柴胡地上部分鑒定出25個(gè)化合物，地下部分鑒定出14個(gè)化合物，從柴胡果實(shí)的揮發(fā)油成分中鑒定出124個(gè)化合物。研究結(jié)果表明，柴胡屬植物地上與地下部分含有的揮發(fā)油成分組成差異較大。Meng等[14]分別對(duì)柴胡不同部位的揮發(fā)油進(jìn)行了分析，共鑒定出71個(gè)化合物，根中有30個(gè)、花中有14個(gè)、葉中有6個(gè)、果實(shí)中有17個(gè)、莖中有4個(gè)。可以看出，對(duì)北柴胡不同部位揮發(fā)油成分的研究技術(shù)已經(jīng)非常成熟，這也為今后柴胡屬植物的化學(xué)成分研究提供了豐富的經(jīng)驗(yàn)和參考。

1.3 黃酮類

目前研究結(jié)果表明，槲皮素型、山柰酚型和異鼠李素型是北柴胡中黃酮類化合物的3種主要苷元類型。北柴胡根中的黃酮類成分含量較低，其主要存在于非藥用部位的莖葉中[8]。陳亞雙等[7]通過(guò)總結(jié)得出，北柴胡的根中可以得到9個(gè)黃酮類物質(zhì)，主要是槲皮素、蘆丁和異鼠李素等；地上部分可以得到6個(gè)，主要是山柰酚類。而近年來(lái)又發(fā)現(xiàn)了異鼠李素-O-β-D-蕓香糖苷、山柰酚-O-β-L-阿拉伯糖苷、山柰酚-O-β-D-蕓香糖苷、山柰酚-7-O-β-L-鼠李糖苷、槲皮素-O-β-D-葡萄糖苷、曲克蘆丁、廣寄生苷、水仙苷、蕓香苷、大豆苷等糖苷類化合物。因此，探索柴胡不同部位中黃酮類成分的差異對(duì)柴胡非藥用部位的開(kāi)發(fā)利用具有參考價(jià)值。目前北柴胡中發(fā)現(xiàn)的黃酮類化合物見(jiàn)表2。

表2 北柴胡中黃酮類化合物

1.4 多糖類

北柴胡多糖類成分也是近年來(lái)受到關(guān)注的活性成分之一。北柴胡中多糖類化合物主要由L-阿拉伯糖基[阿拉伯聚糖(AG)型果膠]、核糖基、D-木糖基、L-鼠李糖基I型聚鼠李半乳糖醛酸(RG-I)、Ⅱ型聚鼠李半乳糖醛酸(RG-Ⅱ)、D-葡萄糖基(D-木糖、D-葡萄糖)、D-半乳糖基[均聚半乳糖醛酸(HG)]等組成，此外還有少量的柴胡多糖-Ⅲ-5311、柴胡多糖2Ⅱb、柴胡多糖2Ⅱc[32-34]。杜柯等[32]解析了柴胡多糖的結(jié)構(gòu)，認(rèn)為該糖鏈具有分支結(jié)構(gòu)，且纏繞形成特殊的環(huán)狀結(jié)構(gòu)，由此證明了單糖殘基以吡喃環(huán)的形式存在。盧嬌嬌[33]系統(tǒng)闡述了柴胡多糖的組成及結(jié)構(gòu)特征。王斌等[34]采用蒽酮-硫酸比色法分析了明水縣不同采收期柴胡多糖含量動(dòng)態(tài)積累規(guī)律，發(fā)現(xiàn)隨著采收期的延后，柴胡總多糖的變化趨勢(shì)是先下降，后上升，再下降，再上升的規(guī)律。可能的原因是隨著柴胡地上部分的發(fā)育，總多糖的含量呈下降的趨勢(shì)，進(jìn)入10月份以后，柴胡地上部分基本停止生長(zhǎng)，其體內(nèi)的代謝物質(zhì)向根內(nèi)轉(zhuǎn)移，因此，總多糖含量又達(dá)到較高水平。

1.5 香豆素類

脫腸草素、七葉亭、蒿屬香豆素、白檸檬素和白蠟樹(shù)亭等屬于簡(jiǎn)單香豆素，也是柴胡藥材中主要的香豆素類成分[35]。除此之外，有學(xué)者在北柴胡中還發(fā)現(xiàn)了吡喃香豆素類的川白芷內(nèi)酯[36]。豆強(qiáng)紅[37]研究了北柴胡果實(shí)發(fā)育不同時(shí)期香豆素含量的變化，結(jié)果表明，北柴胡果實(shí)中香豆素含量呈現(xiàn)先升高，后降低，再升高的折線型趨勢(shì)，并認(rèn)為抑制柴胡種子發(fā)芽的內(nèi)源物質(zhì)主要是香豆素，柴胡皂苷的影響較小。

1.6 其他類

柴胡中除了以上化學(xué)成分外，還發(fā)現(xiàn)了豆甾醇、赪桐甾醇、豆甾-7-烯醇葡萄糖苷、色氨酸、巖芹酸、木脂素、尿苷和腺苷等化合物[38]。

2 有效成分提取工藝

2.1 皂苷類成分提取方法

從20世紀(jì)80年代至今，柴胡皂苷提取工藝已經(jīng)發(fā)展的非常成熟，近年來(lái)主要采用更加先進(jìn)高效的提取方法和檢測(cè)手段對(duì)多種皂苷類成分進(jìn)行純化分析。陳良勝等[39]研究發(fā)現(xiàn)，經(jīng)高效液相色譜法(HPLC)測(cè)定，閃式提取的柴胡皂苷含量高于傳統(tǒng)的乙醇回流提取法，得到最佳提取工藝為75%乙醇、料液比1∶12、提取時(shí)間2.0 min。這種方法操作簡(jiǎn)便、高效節(jié)能且提取率高。姜華等[40]采用HPLC測(cè)定不同溶劑對(duì)藥材中柴胡皂苷a提取量的影響，提出僅提取柴胡皂苷a時(shí)，用堿性50%乙醇作為提取溶劑，其他情況則建議采用50%乙醇作為柴胡的提取溶劑。王仁廣等[41]在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上，以提取時(shí)間、物料粒度、料液比為考察因素，以柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的總提取率為響應(yīng)值，采用Box-Behnken響應(yīng)面法優(yōu)化其提取工藝，并與超聲法和煎煮法進(jìn)行比較，得出了最優(yōu)提取工藝為水提取1次、提取時(shí)間2.50 min、藥材過(guò)80目篩、料液比1∶28。響應(yīng)面法是通過(guò)試驗(yàn)數(shù)據(jù)建立數(shù)學(xué)模型，篩選最優(yōu)條件的統(tǒng)計(jì)分析方法。傳統(tǒng)的單因素分析不考慮各因素之間的影響，響應(yīng)面法可以評(píng)估各影響因素的相互作用，建立連續(xù)表面模型，預(yù)測(cè)結(jié)果與試驗(yàn)結(jié)果接近，在研究中得到廣泛的應(yīng)用[42-43]。趙艷丹等[44]在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上，采用中心復(fù)合設(shè)計(jì)(central composite design，CCD)響應(yīng)面法優(yōu)化了柴胡皂苷類成分的提取工藝，考察并分析了提取次數(shù)、提取時(shí)間、提取溫度、液料比對(duì)柴胡皂苷類成分提取的影響。最終確定了柴胡皂苷類成分的最佳提取工藝參數(shù)為提取溫度80 ℃、提取時(shí)間60 min、液料比8∶1、提取2次。

2.2 揮發(fā)油類成分提取方法

傳統(tǒng)的水蒸氣蒸餾法提取柴胡揮發(fā)油成分提取時(shí)間長(zhǎng)，同時(shí)揮發(fā)油在提取過(guò)程中容易揮發(fā)，油水分離難度較大。張曉玲等[45]優(yōu)選出超臨界CO2萃取柴胡揮發(fā)油最佳工藝，并利用氣相色譜-質(zhì)譜法(GC-MS)分析其成分。裴曉麗等[46]采用水蒸氣蒸餾法與鹽析法提取柴胡中的揮發(fā)油，毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定柴胡中的揮發(fā)油成分。魏洋[47]以吸光度為指標(biāo)，考察了柴胡物料比、浸泡時(shí)間、NaCl質(zhì)量濃度、蒸餾時(shí)間等單因素對(duì)柴胡揮發(fā)油提取率的影響，并通過(guò)L9(34)正交試驗(yàn)確立了最佳提取方案。正交試驗(yàn)結(jié)果表明，當(dāng)浸泡時(shí)間為1 h，物料比為1∶15，NaCl質(zhì)量濃度為0.3 g·mL-1，蒸餾4 h時(shí)提取效果最佳。李勇慧等[48]研究了以索氏、微波、水蒸餾和超臨界CO2-水蒸氣蒸餾提取法萃取甘肅野生柴胡中的揮發(fā)油，并用GC-MS結(jié)合保留指數(shù)分析化合物的成分。結(jié)果表明，索氏、微波、水蒸餾、超臨界CO2-水蒸氣蒸餾提取法揮發(fā)油得率依次為2.768%、2.380%、2.004%、0.985%，共分析并確定化合物依次為34、21、25、19個(gè)，種類主要包括酸、酯、酮、醇、烷烴類等。在這4種方法中，前2種方法所得共有組分為n-十六烷酸，后2種方法所得共有組分為鐮葉芹醇。說(shuō)明4種方法提取柴胡揮發(fā)油各有優(yōu)劣，需要結(jié)合實(shí)際需要進(jìn)行合理運(yùn)用。

2.3 黃酮類成分提取方法

黃酮類化合物穩(wěn)定性差，在較高溫度下容易分解氧化，因此在提取時(shí)要注意控制溫度。柴胡中黃酮類化合物的提取浸漬溫度不宜過(guò)高，浸漬時(shí)間與提取時(shí)間對(duì)黃酮的提取率有一定的影響。唐志國(guó)等[49]篩選出了柴胡中黃酮類化合物提取工藝的關(guān)鍵參數(shù)和影響因素，發(fā)現(xiàn)對(duì)黃酮類化合物提取率影響最大的是浸漬溫度和pH。郝彩琴等[30]探討了不同提取溶劑和提取方法對(duì)柴胡地上部分總黃酮提取率的影響，得到最優(yōu)提取方法是用55%乙醇靜態(tài)熱回流提取。雷燕妮等[50]建立了可供工業(yè)化生產(chǎn)借鑒的柴胡莖葉總黃酮最佳提取工藝，即用55%乙醇作溶劑、料液比為1∶12、85 ℃熱回流提取2 h。

2.4 多糖類成分提取方法

李小寧等[51]通過(guò)單因素與正交試驗(yàn)優(yōu)選柴胡總多糖的提取工藝，采用苯酚-硫酸法測(cè)定總多糖含量，其中可溶性總多糖提取率最高達(dá)19.39%，得出柴胡總多糖的最佳提取工藝條件為加50倍量水在100 ℃下提取2次，每次2 h，優(yōu)選的提取工藝合理可靠、重復(fù)性好。林浩等[52]采用“雙高優(yōu)化法”優(yōu)化了柴胡多糖提取工藝(料液比為8，提取溫度98 ℃，提取2次，每次4 h)，提高了提取物的純化率。

3 質(zhì)量控制方法

3.1 色譜技術(shù)

3.1.1薄層色譜法(TLC) TLC是在中藥化學(xué)分析及質(zhì)量評(píng)價(jià)中應(yīng)用最早的技術(shù)手段。李競(jìng)等[53]通過(guò)考察薄層鑒別條件，確定以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10，10 ℃以下放置的下層溶液)為展開(kāi)劑，2%對(duì)二甲氨基苯甲醛-磷酸為顯色劑，60 ℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，檢視條件為日光和紫外光燈(365 nm)，而這也作為《中華人民共和國(guó)藥典》(以下簡(jiǎn)稱《中國(guó)藥典》)各版柴胡藥材定性鑒別的常用手段。經(jīng)TLC對(duì)柴胡皂苷進(jìn)行定性鑒別，為柴胡質(zhì)量控制提供了最基礎(chǔ)的手段。

3.1.2HPLC HPLC是目前中藥鑒定和質(zhì)量評(píng)價(jià)應(yīng)用最廣泛的色譜技術(shù)，HPLC指紋圖譜可全面反映出藥材的精細(xì)化學(xué)構(gòu)成特征和含量等信息。李巖等[54]采用HPLC測(cè)定10批北柴胡樣品，以柴胡皂苷a為參照組分，指認(rèn)了15個(gè)共有峰，并進(jìn)行相似度評(píng)價(jià)。李媛媛等[55]采用柱前衍生化高效液相色譜-紫外光譜法(HPLC-UV)測(cè)定不同產(chǎn)地和不同品種柴胡中柴胡皂苷a、柴胡皂苷d的含量。葉耀輝等[56]采用UPLC-Q-TOF-MS建立了北柴胡的指紋圖譜，并結(jié)合主成分分析評(píng)價(jià)了不同產(chǎn)地藥材的質(zhì)量。Zhou等[57]采用高效液相色譜-蒸發(fā)光散射檢測(cè)器法(HPLC-ELSD)對(duì)柴胡皂苷a、柴胡皂苷c、柴胡皂苷d進(jìn)行定性定量研究。王硯[58]利用高效液相色譜-二極管陣列檢測(cè)器-電噴霧飛行時(shí)間質(zhì)譜法(HPLC-DAD-TOF-MS)建立了柴胡皂苷類成分檢測(cè)方法，鑒定了北柴胡中的38個(gè)化合物。

綜上，HPLC已在柴胡的研究中廣泛應(yīng)用，將是柴胡屬藥用資源指紋圖譜快速鑒別、定量研究和質(zhì)量評(píng)價(jià)的重要方法。

3.1.3GC-MS GC-MS是目前藥材及制劑中揮發(fā)性、半揮發(fā)性成分及熱穩(wěn)定性藥材分析和鑒別的首選技術(shù)。龐雪等[59]采用GC-MS比較分析了柴胡不同炮制品中揮發(fā)性成分的變化。韓曉偉等[60]利用GC-MS對(duì)北柴胡揮發(fā)油成分進(jìn)行分析鑒定，共鑒定出55個(gè)化合物。王硯等[61]利用固相微萃取技術(shù)(SPME)提取，采用GC-MS進(jìn)行分離和鑒定，共鑒定出北柴胡中21個(gè)成分，相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)最高的為n-十六烷酸。SPME-GC-MS能全面快速分析柴胡揮發(fā)油成分，可作為柴胡藥材質(zhì)量評(píng)估和基原鑒定的科學(xué)手段。

3.2 光譜技術(shù)

3.2.1UV 周亞福等[62]采用UV測(cè)定和揭示了柴胡屬5種植物根、莖、葉及果實(shí)中總皂苷及總黃酮的含量及差異。馬艷芝[63]研究了不同播期對(duì)不同柴胡品種根中有效成分含量及產(chǎn)量的影響，并確定了柴胡的適宜播期。但UV只能測(cè)定柴胡揮發(fā)油總含量，將其作為柴胡揮發(fā)油質(zhì)量控制的方法存在一定的局限性。

3.2.2紅外光譜和近紅外光譜 紅外光譜指紋圖譜用于測(cè)定中藥材及制劑的固體粉末，與干燥的溴化鉀粉末壓片后可直接進(jìn)行檢測(cè)鑒定。宋愛(ài)華等[64]應(yīng)用紅外光譜和系統(tǒng)指紋定量法(SQFM)評(píng)價(jià)西北地區(qū)柴胡藥材的質(zhì)量，為柴胡藥材質(zhì)量鑒定提供了快速可靠的方法。韓君等[65]采用近紅外光譜法對(duì)各產(chǎn)地柴胡進(jìn)行確認(rèn)分析，所建立的柴胡定性判別模型能夠快速、準(zhǔn)確地對(duì)柴胡產(chǎn)地及其偽品進(jìn)行鑒別。

3.2.3原子吸收光譜 劉茹等[66]采用原子吸收光譜法分析了四川省3種柴胡中微量元素含量，發(fā)現(xiàn)柴胡中5種微量元素(Ca、Fe、Mg、Cu、Zn)與柴胡總黃酮含量之間有一定的相關(guān)性，且品種、產(chǎn)地對(duì)Ca、Mg、Zn含量影響最大。

3.3 分子技術(shù)

3.3.1DNA條形碼技術(shù) DNA條形碼是利用1個(gè)或一些短的DNA片段作為條形碼對(duì)物種進(jìn)行快速、準(zhǔn)確的識(shí)別[67]。陳士林等[68-69]提出建立以內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)2(ITS2)/ITS為主、psbA-trnH為輔的植物類藥材鑒定體系。DNA分子鑒定技術(shù)在中藥柴胡中的應(yīng)用主要表現(xiàn)為真?zhèn)舞b定、正品與替代品鑒定、多基原鑒定和遺傳多樣性分析、產(chǎn)地鑒別、年限鑒別5個(gè)方面[70]。趙晴等[71]建立了基于核糖體DNA內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)(ITS)序列的北柴胡種子分子鑒定方法，結(jié)果表明，在19份市售北柴胡種子中有3份為三島柴胡，偽品率為15.8%。韓曉偉等[72]和王亞丹等[73]利用ITS2序列準(zhǔn)確鑒定出北柴胡藥材及其偽品，說(shuō)明DNA條形碼技術(shù)能夠準(zhǔn)確、快速地完成北柴胡的鑒定工作。

3.3.2隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA技術(shù)(RAPD) RAPD是通過(guò)分析DNA的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)產(chǎn)物的多態(tài)性來(lái)推測(cè)生物體內(nèi)基因排布與外在性狀表現(xiàn)規(guī)律的技術(shù)[74]。梁之桃等[75]利用RAPD有效鑒別了5種柴胡，為柴胡屬植物的鑒定提供參考。

3.3.3簡(jiǎn)單重復(fù)序列間標(biāo)記法(ISSR) 與RAPD和限制性內(nèi)切酶片段長(zhǎng)度多態(tài)性(RFLP)相比，ISSR揭示的多態(tài)性較高，可獲得幾倍于RAPD的信息量，檢測(cè)非常方便。目前，ISSR已廣泛應(yīng)用于植物品種鑒定、基因定位、遺傳多樣性研究、進(jìn)化及分子生態(tài)學(xué)研究中[76]。李勇慧等[77]首次利用ISSR技術(shù)對(duì)不同產(chǎn)地的北柴胡進(jìn)行了遺傳多樣性研究，認(rèn)為北柴胡存在比較豐富的遺傳變異，且與地理分布有一定相關(guān)性。馬艷芝等[78]利用ISSR標(biāo)記結(jié)合ITS序列，對(duì)11份柴胡種子進(jìn)行分子生物學(xué)鑒定，提高了柴胡種質(zhì)資源鑒定的準(zhǔn)確性和效率。

4 藥理作用

4.1 對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)的作用

4.1.1抗抑郁作用 目前治療抑郁癥的化學(xué)藥易出現(xiàn)不良反應(yīng)，依從性較差。柴胡作為常用的疏肝解郁類中藥，近年在抑郁癥治療方面發(fā)揮了積極的作用。柴胡抗抑郁的藥理作用研究主要以臨床常用的柴胡類復(fù)方為研究對(duì)象[79-82]，隨著研究的不斷深入，又闡明其抗抑郁作用機(jī)制主要有腦中樞作用機(jī)制、免疫與抗氧化作用機(jī)制與內(nèi)分泌作用機(jī)制3個(gè)方面。董海影等[83]通過(guò)觀察大鼠行為學(xué)改變、電鏡下腦海馬區(qū)超微結(jié)構(gòu)變化、腦源性神經(jīng)生長(zhǎng)因子(BDNF)蛋白及基因的表達(dá)水平，發(fā)現(xiàn)柴胡皂苷A可能的抗抑郁機(jī)制為通過(guò)調(diào)控BDNF減少海馬神經(jīng)元凋亡。方媛[84]通過(guò)觀察柴胡石油醚部位對(duì)慢性不可預(yù)見(jiàn)性溫和刺激(CUMS)模型大鼠體質(zhì)量、糖水偏愛(ài)率、曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)的影響，發(fā)現(xiàn)柴胡石油醚部位能改善CUMS引起的抑郁狀態(tài)，并且抗抑郁作用存在劑量依賴性。對(duì)柴胡抗抑郁作用的深入研究，有助于揭示抑郁癥發(fā)病機(jī)制、研發(fā)抗抑郁新藥。

4.1.2鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛作用 楊輝等[85]采用熱板法觀察北柴胡對(duì)小鼠的鎮(zhèn)痛作用，結(jié)果表明，在12 g·kg-1劑量下，北柴胡可使小鼠的痛閾值顯著延長(zhǎng)(P<0.05)，可發(fā)揮顯著的鎮(zhèn)痛作用。此外還發(fā)現(xiàn)北柴胡高劑量組與竹葉柴胡高劑量組小鼠的痛閾值較對(duì)照組明顯延長(zhǎng)，表明高劑量的北柴胡和竹葉柴胡均有鎮(zhèn)痛作用，因此在用于鎮(zhèn)痛時(shí)，北柴胡與竹葉柴胡在一定程度上可相互代替。但由于兩者的鎮(zhèn)痛機(jī)制目前尚不清楚，故在臨床使用時(shí)，竹葉柴胡和北柴胡是否可以混用有待進(jìn)一步研究。譚超等[86]研究表明，大柴胡湯對(duì)冰醋酸致小鼠的扭體反應(yīng)有顯著的抑制作用，還能對(duì)抗蛋清引起的小鼠腫脹。當(dāng)大柴胡湯中柴胡與大黃用量為5∶2時(shí)抗炎鎮(zhèn)痛作用效果最好。袁小晶等[87]采用反相高效液相色譜法(RP-HPLC)測(cè)定了柴胡地上部分皂苷、黃酮的含量，并采用熱板法考察其鎮(zhèn)痛效果。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，柴胡地上部分煎煮液鎮(zhèn)痛效果顯著，且其鎮(zhèn)痛效果在0～1 h達(dá)到峰值。柴胡地上部分產(chǎn)量大、取材方便，可以作為一種鎮(zhèn)痛藥用資源加以利用，另外作為動(dòng)物飼料添加劑使用或獸醫(yī)臨床應(yīng)用也可以在一定程度上減少化學(xué)藥品出現(xiàn)的耐藥性或者器官毒性等問(wèn)題。因此，深入研究如何正確合理地使用柴胡地上部分作為中藥飼料添加劑，不僅能夠?qū)?dòng)物疾病預(yù)防與控制發(fā)揮積極的作用，也極大提高了柴胡的經(jīng)濟(jì)效益。

4.2 免疫調(diào)節(jié)作用

4.2.1抗炎和抗病毒作用 柴胡另一個(gè)重要的藥理作用為抗炎作用，發(fā)揮此藥效的物質(zhì)基礎(chǔ)主要為皂苷和揮發(fā)油。王麗娜等[88]比較了生柴胡和醋柴胡的抗炎作用，結(jié)果表明，生柴胡抗炎作用優(yōu)于醋柴胡。近年對(duì)柴胡抗病毒活性的研究較少。

杜士明[89]對(duì)比了鄂西北地區(qū)的竹葉柴胡和北柴胡的抗炎作用，采用二甲苯制備耳殼腫脹小鼠模型，采用蛋清制備足腫脹小鼠模型，2個(gè)模型的研究結(jié)果均表明，竹葉柴胡和北柴胡有顯著的抗炎作用。謝東浩等[90]采用小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性和耳廓腫脹實(shí)驗(yàn)對(duì)比了春柴胡和北柴胡的抗炎作用發(fā)現(xiàn)，雖然北柴胡和春柴胡都具有抗炎效果，但是春柴胡的效果明顯強(qiáng)于北柴胡。

4.2.2抗細(xì)菌、內(nèi)毒素作用 王紅燕等[91]對(duì)柴胡地上部分不同醇提物抑菌活性進(jìn)行了初步研究，發(fā)現(xiàn)柴胡地上部分抑菌活性與其主要活性成分黃酮類化合物有一定關(guān)系。劉萍等[92]研究發(fā)現(xiàn)，柴胡提取液對(duì)內(nèi)毒素攻擊的小鼠具有保護(hù)作用。郭明雄等[93]采取淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)研究柴胡提取物對(duì)正常小鼠免疫功能的影響，結(jié)果表明，北柴胡提取物能夠增強(qiáng)機(jī)體的細(xì)胞免疫功能。

4.3 保肝、護(hù)腎作用

目前，中藥治療肝損傷逐漸成為研究熱點(diǎn)。而柴胡作為經(jīng)典方劑小柴胡湯和小柴胡顆粒的君藥，在治療急性肝損傷方面的研究也取得了一定進(jìn)展。賈為壹等[94]探討了小柴胡顆粒對(duì)硫代乙酰胺(TAA)致大鼠急性肝損傷(ALI)的保護(hù)機(jī)制，結(jié)果顯示，小柴胡顆粒通過(guò)改善肝功能和肝組織病理學(xué)變化，對(duì)TAA誘導(dǎo)的大鼠ALI具有明確的治療作用，推測(cè)小柴胡顆粒治療ALI的作用機(jī)制可能是通過(guò)調(diào)節(jié)核轉(zhuǎn)錄因子E2相關(guān)因子2(Nrf2)途徑對(duì)抗氧化應(yīng)激，從而進(jìn)一步修復(fù)肝細(xì)胞損傷。柴胡皂苷d為北柴胡發(fā)揮臨床療效的主要皂苷類物質(zhì)，研究發(fā)現(xiàn)，其可能通過(guò)抑制α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(TGF-β1)蛋白的表達(dá)抑制四氯化碳(CCl4)誘導(dǎo)的大鼠肝纖維化，可使大鼠肝小葉結(jié)構(gòu)清晰，炎癥壞死、纖維化程度減輕[95]。“肝腎同源”是中醫(yī)五臟相關(guān)理論之一，有研究表明，復(fù)方柴胡制劑柴胡龍骨牡蠣湯在治療肝損傷疾病的同時(shí)，也具有一定的腎臟保護(hù)作用，可有效增強(qiáng)肝腎疾病的臨床治療效果[96-97]。

4.4 抗腫瘤作用

腫瘤的形成經(jīng)過(guò)了腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)、凋亡和分化，同時(shí)也包括腫瘤的血管生長(zhǎng)、侵襲和轉(zhuǎn)移等過(guò)程。劉丹等[98]對(duì)柴胡的抗腫瘤作用機(jī)制進(jìn)行總結(jié)研究，發(fā)現(xiàn)柴胡皂苷對(duì)這些過(guò)程都有抑制作用，同時(shí)還可以調(diào)控腫瘤細(xì)胞自噬機(jī)制發(fā)揮抗腫瘤的作用。步世忠等[99]將柴胡皂苷d(10 μg·mL-1)作用于人急性早幼粒白血癥細(xì)胞 HL60的糖皮質(zhì)激素受體mRNA，發(fā)現(xiàn)柴胡皂苷d可上調(diào)HL60細(xì)胞糖皮質(zhì)激素受體mRNA表達(dá)，并抑制細(xì)胞生長(zhǎng)。宋景貴等[100]報(bào)道柴胡提取物對(duì)人肝癌細(xì)胞SMMC-7721線粒體代謝活性、細(xì)胞增殖及小鼠移植S-180實(shí)體腫瘤有明顯抑制作用。

4.5 解熱、鎮(zhèn)咳作用

柴胡味苦、微辛，有解熱止咳的作用。北柴胡揮發(fā)油可降低干酵母所致大鼠體溫升高和降低內(nèi)毒素所致家兔體溫升高，具有良好的解熱作用[101]。袁小晶等[87]采用脂多糖致小鼠發(fā)熱模型考察柴胡地上部分黃酮類成分的解熱效果，效果非常顯著。張?jiān)撇ǖ萚102]研究表明，柴胡黃酮部分和其他物質(zhì)在解熱效應(yīng)中發(fā)揮重要作用，能協(xié)同增強(qiáng)解熱效果。柴胡皂苷-d可通過(guò)降低血清中的白細(xì)胞介素-5(IL-5)和腫瘤壞死因子-α(THF-α)的水平對(duì)咳嗽變異性哮喘具有治療作用[103]。

4.6 對(duì)心血管的作用

臨床研究表明，小柴胡湯對(duì)心血管疾病具有較好的治療效果，而且并發(fā)癥較少，在臨床上具有推廣意義[104-106]。

5 安全性

劉亞旻等[107]通過(guò)對(duì)柴胡毒性作用的物質(zhì)基礎(chǔ)、影響因素及作用機(jī)制研究進(jìn)展進(jìn)行綜述，總結(jié)出柴胡皂苷和揮發(fā)油是柴胡的主要毒性成分，其毒性大小與兩者的含量有關(guān)。近年有關(guān)炮制對(duì)柴胡毒性影響的研究也在逐步開(kāi)展，孫蓉等[108]研究結(jié)果表明，炮制對(duì)南、北柴胡藥材皂苷類成分含量和安全劑量范圍有一定影響?？梢?jiàn)，柴胡毒性作用與藥材品種、炮制方法和提取方式等有一定的關(guān)系，提示臨床用藥須綜合多方面因素來(lái)保證其合理、安全、有效。

6 展望

柴胡作為中醫(yī)臨床上常用的藥物，含有柴胡皂苷、揮發(fā)油、黃酮、多糖等多種有效成分，具有解熱、鎮(zhèn)痛、抗炎等多方面的藥理活性。而柴胡屬約有150種植物，我國(guó)分布有42種、17變種、7變型，植物資源非常豐富[35]，但是歷版《中國(guó)藥典》收載的藥用柴胡只有2種，其中北柴胡就作為目前柴胡類資源研究的對(duì)照藥材。但是隨著北柴胡野生資源的匱乏，尋找合適的柴胡補(bǔ)充品成為當(dāng)務(wù)之急。目前，市場(chǎng)上有不同品種柴胡被作為正品柴胡的替代品使用，再加上還有摻雜偽混品的現(xiàn)象，在一定程度上造成了柴胡屬藥用植物品種的混亂和質(zhì)量的良莠不齊，使得柴胡臨床用藥的安全性和有效性受到很大的影響。

所以，筆者認(rèn)為柴胡屬藥用資源的藥效和毒性研究應(yīng)該將化學(xué)成分的提取與分離、藥理活性、毒理學(xué)三者之間的關(guān)聯(lián)性進(jìn)行更深入的綜合研究和評(píng)價(jià)，在確保質(zhì)量可控和臨床用藥安全有效的前提下，大力開(kāi)發(fā)和利用具有豐富野生資源和藥用歷史的柴胡類品種，通過(guò)對(duì)其標(biāo)準(zhǔn)化栽培與生產(chǎn)技術(shù)的探究，有效擴(kuò)充柴胡藥源和規(guī)范中藥材市場(chǎng)，進(jìn)一步滿足臨床需求。