王婷婷，韋小麗，孔德明，龍莉

(1.貴州大學(xué) 林學(xué)院，貴州 貴陽 550025；2.貴州省林業(yè)學(xué)校，貴州 修文 550201；3.畢節(jié)市林業(yè)局，貴州 畢節(jié) 551700)

“種子際”是一個(gè)短暫、迅速變化及微生物動(dòng)態(tài)的土壤帶，是距離種子1～10 mm受種子萌發(fā)影響的土壤[1]。種子滲出物影響著微生物的群落，而微生物也對(duì)植物有促進(jìn)或抑制生長(zhǎng)的作用[2]。盡管它對(duì)植物的未來發(fā)展有很大的影響，但前人對(duì)種子際的研究仍然很少。Liu等[3]研究玉米(Zeamays)種子萌發(fā)過程中種子際微生物多樣性和種群演替動(dòng)態(tài)，并且從中鑒定出一些優(yōu)勢(shì)常見菌PGPR；Harman等[4]用從種子際中分離出的球殼菌(Daldiniaconcentrica)和子囊孢子處理種子減少了腐菌引起的種子腐爛。Parke等[5]利用種子際微生物進(jìn)行生物防治。Mahaffee[6]研究表明細(xì)菌在棉花(Gossypiumspp.)種子上的根部定殖潛力有可能促進(jìn)植物生長(zhǎng)的潛力。種子際土壤微生物是了解植物有益微生物與其他微生物群落競(jìng)爭(zhēng)必要的第一步，種子際微生物的研究成果頗多[4-6]，但是對(duì)花櫚木(OrmosiahenryiPrain)種子際的研究未見報(bào)道。

花櫚木屬蝶形花科(Papilionaceae)紅豆屬(Ormosia)，國(guó)家二級(jí)保護(hù)植物，為優(yōu)良的用材樹種[7]。前人對(duì)花櫚木種子多樣性及萌發(fā)特性[8-9]、根瘤菌多樣性[10]、播種育苗[11]、繁殖生態(tài)學(xué)特征[12]進(jìn)行了研究，對(duì)種子際真菌的研究未有報(bào)道。因此本研究用項(xiàng)目前期已分離得到的6種種子際真菌對(duì)花櫚木進(jìn)行接種試驗(yàn)，探索種子際真菌對(duì)花櫚木幼苗生長(zhǎng)及生理的影響，篩選對(duì)花櫚木苗木有促生效應(yīng)的微生物，通過有益微生物調(diào)控提高花櫚木的苗木質(zhì)量。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 菌種及其來源

6個(gè)菌種來源于貴州省晴隆、三穗、關(guān)嶺花櫚木種子際，已分離純化鑒定且具有促生功能的真菌，分別為SS-1-6(青霉屬Penicilliumsp.)的一種、SS-2-3(擬康寧木霉Trichodermakoningiopsis))、SS-1-3(莖霉屬的一種)、QL-3-5(產(chǎn)黑色素短梗霉Aureobasidiummelanogenum)、GL-4-1(菌核青霉Penicilliumsclerotiorum)、GL-3-1(被孢霉屬的一種)。

1.1.2 培養(yǎng)基質(zhì)

培育基質(zhì)是按一定比例混合的改良基質(zhì),由泥炭、蛭石、珍珠巖、木屑按5︰2︰1︰1混合而成，基質(zhì)置于滅菌鍋中滅菌2 h取出冷卻備用。

典型斷面在管片收斂整治期間，管片水平位移時(shí)程曲線見圖2，水平位移分布曲線見圖3。注漿結(jié)束時(shí)各斷面的水平位移統(tǒng)計(jì)見表1。由圖2～3和表1分析得到水平位移的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律主要有：①各個(gè)斷面的水平位移變化特征均不同，當(dāng)隧道收斂整治注漿靠近監(jiān)測(cè)斷面時(shí)，水平位移有明顯的突變?cè)黾?，?dāng)注漿位置稍遠(yuǎn)離監(jiān)測(cè)斷面時(shí)，水平位移的突變?cè)黾訙p弱；②注漿結(jié)束時(shí)，最大水平位移主要發(fā)生在第352環(huán)(即注漿區(qū)間中部位置)；③注漿區(qū)間中部水平位移由逐漸增大，逐步演變?yōu)橹虚g正向水平位移逐漸減小，兩側(cè)負(fù)向水平位置逐漸增大。

1.1.3 無菌芽苗

接種的幼苗來源于培育的無菌芽苗。花櫚木種子用0.5%的福爾馬林浸泡30 min后用75%醫(yī)用酒精消毒15 min，取出用無菌水沖洗；將培育芽苗的基質(zhì)、松針置于滅菌鍋中滅菌2 h后取出冷卻備用；用75%的醫(yī)用酒精擦洗育苗箱(托盤+育苗箱+蓋)，將種子播種于滅菌基質(zhì)中，澆無菌水，最后在表面覆蓋3 cm厚的松針，將育苗箱置于25 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)25 d以上，待芽苗長(zhǎng)出備用。

1.2.5 數(shù)據(jù)計(jì)算及統(tǒng)計(jì)分析

培養(yǎng)6種真菌的PDA固體培養(yǎng)基，分別使用10 mm的打孔器在培養(yǎng)基上打菌餅，將5個(gè)菌餅放入裝有PDB液體培養(yǎng)基(450 mL)的500 mL三角錐形瓶中，每種真菌裝3個(gè)錐形瓶。用封口膜封好后放入搖床中震蕩培養(yǎng)7 d，菌液備用[13]。

1.2 研究方法

2019年6月將滅菌好的無菌基質(zhì)裝入13 cm×9 cm的花盆中，無菌芽苗移栽至盆中，每盆1株，澆無菌水，每個(gè)菌種接種30株芽苗。待芽苗生長(zhǎng)到15 d，表現(xiàn)穩(wěn)定后澆菌液，不同菌液按照1×108個(gè)/mL的孢子量進(jìn)行接種，各種菌液取50 mL；1個(gè)月澆1次，連續(xù)澆3次，以不澆菌液作為對(duì)照(CK)。于2019年10月(培養(yǎng)4個(gè)月)測(cè)定幼苗的生長(zhǎng)指標(biāo)和生理生化指標(biāo)。

1.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

1.7 樞紐基因驗(yàn)證 使用測(cè)試集GSE73731數(shù)據(jù)對(duì)各樞紐基因進(jìn)行線性回歸分析驗(yàn)證其表達(dá)量與腎透明細(xì)胞癌進(jìn)展關(guān)系。另外繪制各備選樞紐基因ROC曲線并計(jì)算AUC，當(dāng)AUC>0.7時(shí)，該樞紐基因被認(rèn)為對(duì)于區(qū)分低級(jí)別(grade Ⅰ、Ⅱ)及高級(jí)別(grade Ⅲ、Ⅳ)腎透明細(xì)胞癌有較高的靈敏度及特異度。進(jìn)一步利用GEPIA 數(shù)據(jù)庫(kù)[12](http://GEPIA.cancer-pku.cn/)對(duì)樞紐基因與腎透明細(xì)胞癌病理分期及預(yù)后相關(guān)性進(jìn)行驗(yàn)證。

1.2.2 侵染定殖觀察

每個(gè)處理取3株標(biāo)準(zhǔn)株幼苗，將根系剪下清洗后，用FAA固定液浸泡24 h；取出剪成約1 cm長(zhǎng)的根段，經(jīng)過解離—透明—酸化—染色—脫色過程，具體方法參考盛萍萍等[14]和楊亞萍等[15]的方法，最后制片壓片放于熒光萬能顯微鏡(型號(hào)：DM 3000)下觀察拍照。

不同真菌處理的根系總長(zhǎng)度、表面積、體積、根尖數(shù)均呈顯著差異(P<0.05)(表2)。

待生長(zhǎng)4個(gè)月后，使用鋼卷尺、游標(biāo)卡尺測(cè)定每個(gè)處理幼苗的苗高(cm)、地徑(mm)，并記錄葉片數(shù)。按苗高、地徑平均值±5%的要求在每個(gè)處理取5株標(biāo)準(zhǔn)株，整株從容器中取出后沖洗掉基質(zhì)，用吸水紙擦干水分，將其根、莖、葉剪下測(cè)定鮮重(g)，將幼苗根系洗凈放入根系掃描儀中掃描測(cè)定根系長(zhǎng)度(cm)、表面積(cm2)、體積(cm3)、平均直徑(mm)、根尖數(shù)，最后放入烘箱在80 ℃下烘干至恒重分別稱其干重(g)。

顱內(nèi)腫瘤合并糖尿病患者相較于單純顱內(nèi)腫瘤患者病情較重，且圍手術(shù)期患者血糖控制水平對(duì)手術(shù)結(jié)果產(chǎn)生一定影響。手術(shù)對(duì)患者而言是一種應(yīng)激性刺激源，胰島素拮抗激素分泌量增加易導(dǎo)致患者出現(xiàn)急性并發(fā)癥。此外高血糖狀態(tài)下持續(xù)性的無氧代謝會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)酸中毒與乳酸積聚，從而引發(fā)一系列的生理反應(yīng)，如誘導(dǎo)顱內(nèi)壓上升，對(duì)術(shù)后恢復(fù)效果造成影響[6]。因此加強(qiáng)圍手術(shù)期血糖控制護(hù)理十分必要。

1.2.4 生理生化指標(biāo)的測(cè)定

光合特性指標(biāo)測(cè)定：2019年10月選擇典型晴天，采用LI-6400便攜式光合儀測(cè)定7個(gè)處理下花櫚木幼苗的光合參數(shù)，每個(gè)處理選取3株標(biāo)準(zhǔn)株進(jìn)行測(cè)定，測(cè)定指標(biāo)包括凈光合速率(Pn)、蒸騰速率(Tr)、氣孔導(dǎo)度(Gs)、胞間CO2濃度(Ci)，每株重復(fù)測(cè)定3片葉子。

那么利用這個(gè)運(yùn)算符號(hào)π(x,y)作為矩陣A和B的求最小值廣義交叉乘法的數(shù)據(jù)層面的運(yùn)算，而框架層面運(yùn)算仍然采用普通矩陣乘法的運(yùn)算法則，可以定義矩陣A和B的剖面求最小值廣義交叉乘法如下：

生理生化指標(biāo)：采用丙酮浸提法測(cè)定葉片的葉綠素含量，包括葉綠素a、葉綠素b、類胡蘿卜素；考馬斯亮藍(lán)法測(cè)定可溶蛋白、蒽酮比色法測(cè)定可溶性總糖和淀粉含量[16]，每個(gè)處理重復(fù)3次。

不同真菌在幼苗根系的侵染定殖情況如圖1顯示，回接真菌的幼苗根系均有明顯的菌絲定殖在根系表面，對(duì)照CK無菌絲定殖在根表面，說明花櫚木種子際微生物能成功定殖在幼苗根系上，并同花櫚木幼苗根系共生。

1.1.4 菌液的制備

聚焦精準(zhǔn)識(shí)別。嚴(yán)格對(duì)照國(guó)家2016年脫貧攻堅(jiān)工作考核提出的整改要求，認(rèn)真落實(shí)國(guó)家建檔立卡數(shù)據(jù)核準(zhǔn)、補(bǔ)錄、動(dòng)態(tài)調(diào)整工作部署，在全省范圍開展精準(zhǔn)識(shí)別“回頭看”，不設(shè)指標(biāo)、不設(shè)限制，確保不落一戶、應(yīng)進(jìn)盡進(jìn)。截至2017年底，全省貧困人口減至87.54萬人，貧困發(fā)生率降至2.37%。

采用SPASS 18.0軟件進(jìn)行試驗(yàn)數(shù)據(jù)的方差分析、主成分分析及綜合評(píng)價(jià)，并用Excel輔助繪制圖表。

2 結(jié)果與分析

2.1 菌種的侵染定殖情況

工程地質(zhì)勘察通常按照工程設(shè)計(jì)階段逐步進(jìn)行。不同類型的項(xiàng)目有不同的劃分階段。對(duì)于工程地質(zhì)條件簡(jiǎn)單且具有一定工程資料的中小型工程，也可以適當(dāng)組合勘察階段?？睖y(cè)方法與工作量按照工程類別和規(guī)模、勘測(cè)階段、場(chǎng)地工程地質(zhì)與研究現(xiàn)狀的復(fù)雜性、工程經(jīng)驗(yàn)、建筑等級(jí)及其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)、特殊要求來確定設(shè)計(jì)與施工。

本研究提出一種配電網(wǎng)大面積停電兩階段恢復(fù)的最優(yōu)路徑選取方法，考慮了最大恢復(fù)負(fù)荷量、恢復(fù)路徑時(shí)限及恢復(fù)后網(wǎng)架負(fù)荷平衡、恢復(fù)期間負(fù)荷波動(dòng)情況，能夠充分體現(xiàn)現(xiàn)有網(wǎng)架的網(wǎng)絡(luò)轉(zhuǎn)供能力，并充分發(fā)揮配電自動(dòng)化系統(tǒng)在恢復(fù)供電方案的優(yōu)勢(shì)，能適應(yīng)存在三雙接線、單環(huán)接線以已經(jīng)有固定FA的配電網(wǎng)，最終形成多目標(biāo)Pareto最優(yōu)解集。之后對(duì)有多個(gè)可行解的再進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)，智能給出最優(yōu)方案，而且針對(duì)不同的季節(jié)有多套綜合評(píng)價(jià)策略，使得選出的最優(yōu)路徑更具有可操作性。

圖1 不同真菌處理的根部真菌侵染定殖圖

2.2 對(duì)花櫚木幼苗高、徑、葉生長(zhǎng)的影響

不同真菌處理的花櫚木芽苗接菌后的地徑差異顯著(P<0.05)，苗高差異不顯著(P>0.05)(表1)。其中SS-1-6處理的地徑最大，SS-2-3處理的地徑最低；葉片數(shù)一致，均為10片。說明不同真菌處理后，對(duì)幼苗的地徑影響較大；SS-1-6處理對(duì)花櫚木的地徑有明顯促進(jìn)作用。

表1 不同真菌處理對(duì)花櫚木幼苗高、徑、葉生長(zhǎng)的影響

2.3 不同真菌處理對(duì)幼苗的根系生長(zhǎng)發(fā)育的影響

1.2.3 生長(zhǎng)指標(biāo)的測(cè)定

表2 不同真菌處理的幼苗根系差異Tab.2 Root differences of seedlings treated with different fungal treatments

由表2可知，根系總長(zhǎng)度變幅為68.8～237.85 cm，其中SS-1-3處理的最長(zhǎng)，GL-3-1處理的最短，相差3.5倍，SS-1-6處理比CK高1.3倍；表面積變幅為15.83～53.78 cm2，其中SS-1-3處理的最大，GL-3-1處理的最小，相差3.4倍，SS-1-3處理比CK高1.6倍；根體積變幅為0.46～1.63 cm3，其中SS-1-6處理的最大，GL-3-1處理的最小，相差3.5倍，SS-1-6比CK高1.7倍；根平均直徑變幅為0.42～0.98 mm，其中GL-1-4處理的最大，GL-3-1處理的最小，相差2.3倍，GL-4-1比CK高1.2倍；根尖數(shù)變幅為67～267根，其中SS-2-3處理的最多，GL-3-1處理的最少，相差4倍，SS-2-3處理比CK高1.8倍?？傮w上看，SS-1-3和SS-1-6處理可促進(jìn)幼苗根系生長(zhǎng)。

2.4 不同真菌處理對(duì)幼苗生物量的影響

不同真菌處理的幼苗根、莖、葉干重、總生物量均呈顯著差異(P<0.05)，莖干重差異不顯著(P>0.05)。表3顯示，根干重的變幅為0.157～0.213 g，QL-3-5處理的最高，SS-1-6處理的最低，相差1.4倍，QL-3-5處理比CK高1.2倍。葉干重變幅為0.17～0.219 4 g，QL-3-5處理的最高，GL-3-1處理的最低，相差1.5倍，QL-3-5處理比CK高1.4倍?？偵锪孔兎?.481～0.63 g，QL-3-5處理的最高，GL-3-1處理的最低，相差1.3倍，QL-3-5處理比CK高1.2倍。

表3 不同真菌處理對(duì)幼苗生物量的差異Tab.3 Differences of seedling biomass under different different fungal treatments g

2.5 不同真菌處理對(duì)花櫚木幼苗光合參數(shù)的影響

通過方差分析結(jié)果顯示(表4、表5)：不同真菌處理幼苗的葉綠素a、葉綠素b、葉綠素a/b、類胡蘿卜素含量和凈光合速率(Pn)、氣孔導(dǎo)度(Gs)、胞間CO2濃度(Ci)、蒸騰速率(Tr)差異不顯著(P>0.05)，說明不同真菌處理對(duì)幼苗的光合及葉綠素?zé)o顯著影響。

志愿服務(wù)指在不考慮回報(bào)的前提下，為改善社會(huì)，促進(jìn)人類進(jìn)步而自愿付出個(gè)人的時(shí)間及精力所做出的服務(wù)性工作，是衡量城市文明程度的重要標(biāo)志，也是文明大學(xué)生素質(zhì)的重要體現(xiàn)。大學(xué)生志愿服務(wù)包括環(huán)境保護(hù)、應(yīng)急救助、扶貧開發(fā)、大型賽會(huì)、社區(qū)建設(shè)等，在團(tuán)中央的指引下，越來越多的高校大學(xué)生愿意參與到志愿服務(wù)當(dāng)中，志愿服務(wù)不僅是促進(jìn)社會(huì)和諧發(fā)展的優(yōu)化主體，也是高校思想政治教育的有效載體，同時(shí)為培育志愿精神和服務(wù)基層的潛在化意識(shí)提供了必要的支撐?；鶎臃?wù)主要是繼高校擴(kuò)招之后，國(guó)家和社會(huì)需要有更多的高校畢業(yè)生扎根基層，為基層大發(fā)展貢獻(xiàn)青春和力量。

表4 不同真菌處理光合參數(shù)差異

表5 不同真菌處理間葉綠素的差異

2.6 不同真菌處理對(duì)幼苗生理生化指標(biāo)的影響

不同真菌處理的幼苗可溶性蛋白、可溶性總糖、淀粉含量均呈顯著差異(P<0.05)(表6)?？扇苄缘鞍椎淖兎鶠?.327～3.794 mg/g，SS-1-6處理的最大，SS-1-3處理的最小，相差2.86倍，SS-1-6處理比CK高1.6倍；可溶性總糖變幅為33.369%～43.94%，SS-1-6處理的最大，GL-4-1處理的最小，相差1.32倍，SS-1-6處理比CK高1.1倍；淀粉含量變幅為18.209%～41.572%，SS-1-6處理的最大，GL-3-1處理的最小，相差2.3倍，SS-1-6處理比CK高1.6倍。

第三，“南海核心利益說”與2009年來不斷趨緊的南海局勢(shì)聯(lián)系緊密。2009年來中國(guó)的南海立場(chǎng)不斷面臨嚴(yán)峻挑戰(zhàn)。一方面美國(guó)頻繁的近海抵近偵察直接造成“無暇號(hào)事件”，中美之間關(guān)于專屬經(jīng)濟(jì)區(qū)航行自由的權(quán)利之爭(zhēng)使得中國(guó)相關(guān)國(guó)內(nèi)法面臨挑戰(zhàn)；同時(shí)還嚴(yán)重威脅九段線的相應(yīng)權(quán)利。大多數(shù)西方學(xué)者認(rèn)為，中國(guó)九段線的實(shí)質(zhì)就是視南海為中國(guó)的內(nèi)湖，而美國(guó)所主張的航行自由根本不認(rèn)同該觀點(diǎn)。

表6 不同真菌處理生理生化的差異

2.7 不同真菌促進(jìn)生長(zhǎng)效果的主成分分析及綜合評(píng)價(jià)

進(jìn)行主成分分析之前，對(duì)不同真菌處理的幼苗的苗高、地徑、生物量、總根長(zhǎng)、根表面積、根體積、根直徑等11個(gè)指標(biāo)進(jìn)行KMO系數(shù)檢驗(yàn)，結(jié)果顯示(表7)：剔除KMO檢驗(yàn)系數(shù)低于0.7以下的指標(biāo)，故排除苗高0.555和淀粉0.49。

表7 不同真菌各指標(biāo)的KMO系數(shù)檢驗(yàn)

主成分分析結(jié)果(表8)顯示：選3個(gè)成分為主要影響因子。主成分1(PRIN1)、主成分2(PRIN2)、主成分3(PRIN3)的特征根分別為5.614、2.624、1.151，貢獻(xiàn)率分別為51.032%、23.858%、10.46%，累計(jì)貢獻(xiàn)率為85.355%?？偢L(zhǎng)、根表面積、根體積、根直徑、根尖數(shù)為主成分1(PRIN1)的因子，第1主成分反映了根系生長(zhǎng)狀況的變異；地徑、可溶性總糖、可溶性蛋白為主成分2(PRIN2)的因子，第2主成分反映了幼苗生長(zhǎng)和生理的差異；生物量是主成分3(PRIN3)的因子，所有因子的參數(shù)均為正載荷。

表8 不同處理各指標(biāo)主成分分析的特征根和特征向量

綜合評(píng)價(jià)結(jié)果顯示(表9),第1主成分排名前三的真菌是SS-1-6、GL-4-1、SS-2-3；第2主成分排名前三的是SS-1-6、GL-3-1、CK；第3主成分排名前三的是QL-3-5、CK、GL-4-1；綜合排名根據(jù)促生效果優(yōu)劣排序SS-1-6>GL-4-1>SS-1-3>SS-2-3>CK>QL-3-5>GL-3-1。

表9 不同真菌處理主成分分析及綜合評(píng)價(jià)

3 討論與結(jié)論

目前關(guān)于根際微生物[17-19]的研究已經(jīng)十分廣泛，苗期研究是觀察植物后期生長(zhǎng)是否同苗期生長(zhǎng)一致的重要研究階段[20]。植物生長(zhǎng)指標(biāo)是最為直觀和簡(jiǎn)單的判別方法[21]，結(jié)合生理生化的指標(biāo)測(cè)定可充分說明微生物對(duì)植物的影響。

對(duì)不同真菌處理在花櫚木幼苗根系上的侵染定殖情況進(jìn)行觀察，發(fā)現(xiàn)種子際真菌已成功定殖在根系上，并和植物共同生長(zhǎng)，這與Howie[22]研究結(jié)果一致，而在CK處理的根系上無發(fā)現(xiàn)菌絲。不同真菌處理的幼苗地徑、生物量、根系指標(biāo)、可溶性總糖、可溶性蛋白、淀粉呈顯著差異(P<0.05)；種子際真菌來自三穗的SS-1-6、SS-1-3、SS-2-3處理在根系指標(biāo)上表現(xiàn)較好，但來自關(guān)嶺種子際真菌GL-3-1處理的幼苗生長(zhǎng)指標(biāo)比CK處理的還差。可溶性總糖、可溶性蛋白、淀粉指標(biāo)均是植物物質(zhì)代謝的重要指標(biāo)，有3個(gè)真菌在可溶性蛋白和可溶性總糖指標(biāo)比CK處理好，有4個(gè)菌種在淀粉含量上比CK處理好，說明具有促生功能的真菌對(duì)植物生長(zhǎng)的促進(jìn)作用并不是絕對(duì)的，有的促生真菌對(duì)植物生長(zhǎng)反而有抑制作用。光合生理指標(biāo)是植物重要的生理參數(shù)，但結(jié)果表明不同真菌處理的花櫚木幼苗光合參數(shù)指標(biāo)差異不顯著(P>0.05)，說明本研究中所用的促生真菌對(duì)植物光合無促進(jìn)作用，與林燕青等[23]研究結(jié)論不一致，原因可能因?yàn)槲⑸锓N類及樹種不同以及促生功能的強(qiáng)弱不同導(dǎo)致。

通過主成分分析和綜合評(píng)價(jià)初步評(píng)價(jià)出對(duì)花櫚木幼苗生長(zhǎng)促進(jìn)效果排名前三的真菌分別是：來自三穗的SS-1-6(青霉屬的一種)和SS-1-3(莖霉屬的一種)，關(guān)嶺的GL-4-1(菌核青霉)。但本研究對(duì)苗期研究時(shí)間較短，幼苗后期生長(zhǎng)生理的變化是否同苗期一致還有待研究，且僅針對(duì)單一菌株接種，對(duì)花櫚木幼苗的促生效果并不是十分突出和明顯，混合菌種接菌效果以及促進(jìn)效果更好的微生物研究還有待探索，以期為花櫚木高效生產(chǎn)化育苗提供技術(shù)上的指導(dǎo)。