龔貞清 ，陳學(xué)生，周 亮，*

(1.瓜州縣畜牧獸醫(yī)局，甘肅 瓜州736100；2.酒泉市畜牧獸醫(yī)局)

為了科學(xué)分析一種羊痘小反芻二價(jià)疫苗的免疫效果，全面做好實(shí)驗(yàn)區(qū)域羊痘和小反芻獸疫防控工作，筆者所在縣畜牧獸醫(yī)局與一疫苗生產(chǎn)廠家合作，選擇3個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)為3個(gè)實(shí)驗(yàn)組，按照注射二價(jià)苗前、注射二價(jià)苗后21 d、42 d分別進(jìn)行免疫抗體檢測(cè)，并進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)分析，現(xiàn)將實(shí)驗(yàn)結(jié)果總結(jié)如下，供同行探討借鑒。

1 實(shí)驗(yàn)疫苗及檢測(cè)試劑

實(shí)驗(yàn)疫苗為某生物工程有限公司生產(chǎn)的羊痘羊小反芻獸疫二價(jià)活疫苗，疫苗由公司提供。每只羊皮內(nèi)注射0.5ml。檢測(cè)試劑為中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸研所生產(chǎn)的小反芻獸疫阻斷ELISA抗體檢測(cè)試劑盒、羊痘間接ELISA抗體檢測(cè)試劑盒。

2 實(shí)驗(yàn)群體

在羊群飼養(yǎng)條件好、規(guī)?；潭雀叩?個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，確定為3個(gè)實(shí)驗(yàn)組，其中：第1實(shí)驗(yàn)組養(yǎng)殖場(chǎng)羊只700只，第2實(shí)驗(yàn)組養(yǎng)殖場(chǎng)羊只700只，第3實(shí)驗(yàn)組養(yǎng)殖場(chǎng)羊只600只。

3 實(shí)驗(yàn)技術(shù)方案

3.1 注射疫苗前

按照15%的比例，在注射疫苗前進(jìn)行免疫抗體檢測(cè)。

3.2

疫苗注射 在采樣的同時(shí)，注射羊痘羊小反芻獸疫二價(jià)疫苗，每只羊皮內(nèi)注射0.5 mL。

3.3 疫苗安全觀察

注射疫苗72 h內(nèi)觀察疫苗安全性，主要觀察疫苗過敏反應(yīng)等情況，發(fā)現(xiàn)過敏反應(yīng)，及時(shí)處置。

3.4 抗體檢測(cè)

注射疫苗21 d后采樣，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室抗體檢測(cè)。

3.5 抗體二次檢測(cè)

在注射疫苗42 d后進(jìn)行第二次抗體檢測(cè)。

3.6 抗體檢測(cè)方法

羊痘免疫抗體采取液相阻斷ELISA抗體檢測(cè)方法，小反芻獸疫免疫抗體采取間接ELISA抗體檢測(cè)。

3.7 對(duì)比分析

根據(jù)抗體檢測(cè)情況，分析評(píng)估免疫效果，并出具實(shí)驗(yàn)室分析報(bào)告。

4 保障措施

為保證實(shí)驗(yàn)工作的順利進(jìn)行，成立以主要領(lǐng)導(dǎo)為組長(zhǎng)、分管領(lǐng)導(dǎo)為副組長(zhǎng)，各辦室主任為成員的技術(shù)領(lǐng)導(dǎo)小組，解決實(shí)驗(yàn)過程中的各種問題，并協(xié)調(diào)解決羊群、疫苗、抗體檢測(cè)試劑等問題。嚴(yán)格按照要求，配發(fā)防護(hù)服、連續(xù)注射器、注射針頭、酒精、疫苗冷藏箱、檢測(cè)試劑、檢測(cè)設(shè)備等疫苗、試劑等物資，保證疫苗注射科學(xué)規(guī)范，免疫抗體檢測(cè)程序科學(xué)，數(shù)據(jù)準(zhǔn)確可靠。

5 實(shí)驗(yàn)要求

凡是實(shí)驗(yàn)羊只全部佩戴免疫耳標(biāo)，單獨(dú)圈養(yǎng)，詳細(xì)登記免疫信息、耳標(biāo)信息。在注射前未注射羊痘及小反芻獸疫疫苗。

6 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

通過疫苗注射前采血實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)、疫苗注射后21 d抗體檢測(cè)、疫苗注射后42 d采血檢測(cè)，抗體變化情況如下表。

表1 小反芻獸疫羊痘二價(jià)苗免疫實(shí)驗(yàn)情況表 %

7 結(jié)論

小反芻獸疫免疫抗體變化情況：第一次實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)3家規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)小反芻獸疫抗體分別為49%、94%、87%，平均為79.8%。疫苗注射后21d實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，3家規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)疫苗免疫抗體分別為90%、87%、90%，平均為89.1%，平均增加9.3%。疫苗注射42 d后，免疫抗體分別為87%、93%，87%，平均為88.9%，免疫效果好，且抗體維持性強(qiáng)。

羊痘免疫抗體變化情況：第一次實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)3家規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)羊痘抗體分別為87%、60%、93%，平均為80%，疫苗注射后21 d實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，3家規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)疫苗免疫抗體分別為53%、27%、53%，平均為44.4%，較第一次下降35.6%。疫苗注射42 d后，3家規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)免疫抗體分別為27%、0%，47%，平均為24.4%，較第一次下降55.6%。注射二價(jià)疫苗后羊痘免疫抗體下降快，維持性不強(qiáng)。