常燕 林建國(guó) 李成 張曉彤 湯文麗 姚魁武

摘要 目的：運(yùn)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)及分子對(duì)接分析交泰丸治療心律失常的作用機(jī)制。方法：通過中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)與分析平臺(tái)（TCMSP）與BATMAN數(shù)據(jù)庫(kù)檢索黃連、肉桂的活性成分和靶基因，利用GeneCards數(shù)據(jù)庫(kù)檢索得到與心律失常相關(guān)的靶基因，采用Cytoscape軟件繪制交泰丸的“活性成分-作用靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)圖，采用STRING數(shù)據(jù)庫(kù)構(gòu)建交泰丸治療心律失常的蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用（Protein Protein Interaction，PPI）網(wǎng)絡(luò)圖，將PPI網(wǎng)絡(luò)圖導(dǎo)入Cytoscape，采用DAVID數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)藥物-疾病交集靶點(diǎn)進(jìn)行基因本體（Gene Ontology，GO）富集分析和京都基因和基因組百科全書（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes，KEGG） 通路富集分析，使用Autodock Vina和Pymol進(jìn)行分子對(duì)接。結(jié)果：共收集到交泰丸31個(gè)有效成分及其556個(gè)成分靶點(diǎn);心律失常相關(guān)靶點(diǎn)2 205個(gè);藥物成分和疾病的共有靶點(diǎn)174個(gè);使用Cytoscape拓?fù)浞治龅玫叫￠藿A、表小檗堿、黃藤素、黃柏酮、小檗堿等20個(gè)核心成分，PPI網(wǎng)絡(luò)得到ALB、AKT1、MAPK3、VEGFA、SRC等15個(gè)關(guān)鍵核心靶點(diǎn)。生物信息學(xué)富集分析中共獲取821個(gè)GO條目，109條KEGG通路，主要涉及PI3K-AKT信號(hào)通路、Rap1信號(hào)通路、cAMP信號(hào)通路、甲狀腺激素信號(hào)通路、HIF-1信號(hào)通路等。分子對(duì)接結(jié)果表明，度值排名前5的主要活性成分與核心靶點(diǎn)（ALB、AKT1、MAPK3、VEGFA、SRC）有較強(qiáng)的親和力。結(jié)論：該研究揭示了交泰丸可能通過調(diào)控細(xì)胞代謝、降低氧化刺激、改善血管重塑等方面治療心律失常，為后續(xù)研究交泰丸治療心律失常提供一定的中藥藥理依據(jù)。

關(guān)鍵詞 交泰丸;心律失常;網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué);分子對(duì)接;中藥藥理;作用機(jī)制

Abstract Objective：To analyze the action mechanism of Jiaotai Pills in the treatment of arrhythmia by network pharmacology and molecular docking.Methods：The active components and their target genes of Rhizoma Coptidisn（黃連） and Cortex Cinnamomi（肉桂） were obtained through TCMSP platform and BATMAN database，GeneCards database retrieval were used to get the target genes associated with arrhythmia.Cytoscape software was used to draw “active ingredient-action target ” network graph.The STRING database was used to construct protein-protein interaction（PPI） network diagram of Jiaotai Pills in the treatment of arrhythmia.PPI network diagram was imported into Cytoscape.The DAVID database was used to perform GO（Gene Ontology） function and KEGG（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes） pathway enrichment analysis on drug-disease intersection targets，and Autodock Vina and Pymol were used for molecular docking.Results：A total of 31 active components and 556 component targets of Jiaotai Pills were collected.There were 2 205 targets related to arrhythmia; 174 drug and disease intersection targets were obtained; The Cytoscape topological analysis was used to obtain 20 core components such as berlambin，epiberberine，palmatine，obacunone，berberine and etc.and PPI network was used to obtain 15 core targets such as ALB，AKT1，MAPK3，VEGFA，SRC.A total of 821 GO terms and 109 KEGG pathways were obtained through bioinformatics enrichment analysis，mainly involving PI3K-AKT signaling pathway，Rap1 signaling pathway，cAMP signaling pathway，thyroid hormone signaling pathway，HIF-1 signaling pathway，etc.The results of molecular docking showed that the main active components had strong affinity with the core target（ALB，AKT1，MAPK3，VEGFA，SRC）.Conclusion：This study revealed the mechanism of Jiaotai Pills in the treatment of arrhythmia by regulating cellular metabolism，reducing oxidative stress，improving vascular remodeling，providing some pharmacological basis for the follow-up study on the treatment of arrhythmia by Jiaotai Pills.

Keywords Jiaotai Pills; Arrhythmia; Network pharmacology; Molecular docking; Pharmacology of Chinese medicine; Mechanism of action

中圖分類號(hào)：R285.6，R541.7文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2021.13.006

心律失常是指心臟節(jié)律的紊亂，主要有不規(guī)則心率、異?？焖傩穆剩ㄐ膭?dòng)過速）和異常慢速心率（心動(dòng)過緩）3種表現(xiàn)[1]，臨床上本病既可單獨(dú)發(fā)病，又可同時(shí)伴發(fā)其他心血管疾病，具有發(fā)病率高及病情復(fù)雜等特點(diǎn)[2]，甚至危及生命。據(jù)中國(guó)心源性猝死流行病學(xué)調(diào)查顯示，我國(guó)每年因心源性猝死患者可達(dá)54.4萬(wàn)例，其中80%以上是由惡性心律失常引起的[3]。目前在治療方面，臨床上多采用西藥治療，作用機(jī)制雖明確，但有“再致心律失?！钡娘L(fēng)險(xiǎn)。在臨床實(shí)踐中，中藥可通過多途徑、多靶點(diǎn)等方向治療疾病，療效較為顯著。

交泰丸是臨床中治療心悸的常用經(jīng)典方劑，此方源自明·韓懋《韓氏醫(yī)通》，主要用于治療“心腎不交，怔忡不寐”，方由黃連、肉桂兩味藥物組成，黃連苦寒入心經(jīng)，擅降心火不使其炎上，肉桂辛熱入腎經(jīng)，擅暖水臟不使其潤(rùn)下，二者寒溫并用，水火既濟(jì)，亦有瀉南補(bǔ)北、交通心腎之妙[4]。因其組方獨(dú)特，療效顯著，被后世臨床治療心悸廣泛配合應(yīng)用[5]。有研究報(bào)道使用交泰丸加味治療室性早搏68例，早搏癥狀消失共計(jì)50例，癥狀明顯好轉(zhuǎn)有14例，總有效率達(dá)94%[6]。許鳳云等[7]觀察交泰丸對(duì)心血管系統(tǒng)的影響，結(jié)果顯示交泰丸在增加耐缺氧能力、降壓、增加冠脈流量及改善急性心肌缺血所引起的心電圖的變化等方面效果較佳。

網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)是基于系統(tǒng)生物學(xué)的理論，融合多向藥理學(xué)、生物信息學(xué)、計(jì)算機(jī)科學(xué)等多學(xué)科內(nèi)容和技術(shù)，通過多種數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)分析，建立可視化網(wǎng)絡(luò)關(guān)系圖，從分子層面和整體角度對(duì)藥物活性成分、作用靶點(diǎn)以及疾病的靶點(diǎn)蛋白進(jìn)行分析，預(yù)測(cè)其作用機(jī)制[8-9]。目前臨床對(duì)于交泰丸治療心律失常的作用機(jī)制研究較少，本研究擬通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)技術(shù)，構(gòu)建交泰丸成分-靶點(diǎn)-疾病網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行分析，以探究其物質(zhì)基礎(chǔ)及治療心律失常的作用機(jī)制，為后續(xù)研究提供有效的藥理學(xué)依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 交泰丸靶點(diǎn)收集

通過中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)與分析平臺(tái)（Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform，TCMSP，https：//tcmspw.com/tcmsp.php）與BATMAN數(shù)據(jù)庫(kù)（http：//bionet.ncpsb.org/batman-tcm/），分別檢索黃連、肉桂的活性成分。TCMSP平臺(tái)篩選條件為口服生物利用度（Oral Bioavailability，OB）≥30%，類藥性（Drug Likeness，DL）≥0.18，BATMAN數(shù)據(jù)庫(kù)設(shè)定為Score≥20進(jìn)行篩選。通過PubChem數(shù)據(jù)庫(kù)（https：//pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/）獲取活性成分化學(xué)結(jié)構(gòu)，保存Smile號(hào)，隨后將Smile號(hào)上傳至Swiss Target Prediction數(shù)據(jù)庫(kù)，以“人類”為研究物種，進(jìn)行相關(guān)活性成分的靶點(diǎn)預(yù)測(cè)，最后得到交泰丸活性成分及其作用的靶點(diǎn)。

1.2 心律失常靶點(diǎn)收集

通過GeneCards數(shù)據(jù)庫(kù)（https：//www.genecards.org/）篩選治療心律失常的相關(guān)靶點(diǎn)，以“arrhythmia”為關(guān)鍵詞進(jìn)行檢索，篩選收集心律失常相關(guān)基因靶點(diǎn)。

1.3 活性成分-作用靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖的繪制

選取活性成分作用靶點(diǎn)和疾病靶點(diǎn)的交集靶點(diǎn)，利用Cytoscape軟件繪制活性成分-作用靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖，使用Network Analyzer分析功能對(duì)網(wǎng)絡(luò)圖進(jìn)行計(jì)算，根據(jù)結(jié)果篩選出核心活性成分。

1.4 核心蛋白的收集

通過STRING平臺(tái)（https：//string-db.org）對(duì)交集靶點(diǎn)進(jìn)行蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用（Protein Protein Interaction，PPI）網(wǎng)絡(luò)的繪制，將PPI信息導(dǎo)入Cytoscape中，對(duì)蛋白網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行模塊化聚類處理，通過Network Analyzer計(jì)算得出核心蛋白。

1.5 GO和KEGG富集分析

利用DAVID數(shù)據(jù)庫(kù)（https：//david.ncifcrf.gov）對(duì)交集靶點(diǎn)進(jìn)行基因本體（Gene Ontology，GO）和京都基因與基因組百科全書（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes，KEGG）富集分析，設(shè)定閾值P≤0.5，選擇生物過程（Biological Process，BP）、細(xì)胞成分（Cell Component，CC）和分子功能（Molecular Function，MF）3個(gè)模塊進(jìn)行GO富集分析，通路分析選擇KEGG，并將得到的數(shù)據(jù)進(jìn)行可視化，構(gòu)建其排名前15個(gè)條目的氣泡圖。

1.6 分子對(duì)接

將“活性成分-作用靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)圖中節(jié)點(diǎn)度值最高的5個(gè)活性成分與PPI網(wǎng)絡(luò)中節(jié)點(diǎn)度值最高的5個(gè)核心蛋白進(jìn)行分子對(duì)接，驗(yàn)證其相互作用強(qiáng)度，活性成分結(jié)構(gòu)通過PubChem數(shù)據(jù)庫(kù)（https：//pubchem.ncbi.nlm.nih.gov）獲取，蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)通過PDB數(shù)據(jù)庫(kù)（http：//www.rcsb.org）獲取。隨后使用AutoDock Vina軟件進(jìn)行分子對(duì)接，借助Pymol軟件對(duì)對(duì)接結(jié)果進(jìn)行優(yōu)化制圖。

2 結(jié)果

2.1 交泰丸活性成分及其靶點(diǎn)獲取

通過TCMSP平臺(tái)以O(shè)B≥30%，DL≥0.18為篩選條件，BATMAN數(shù)據(jù)庫(kù)設(shè)定為Score≥20進(jìn)行篩選，收集到活性成分31個(gè)，其中黃連14個(gè)、肉桂17個(gè)。見表1。通過Swiss Target Prediction數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)活性成分進(jìn)行靶點(diǎn)預(yù)測(cè)，共得到556靶點(diǎn)基因。

2.2 心律失常靶點(diǎn)獲取

以“Arrhythmia”為檢索詞進(jìn)行檢索，收集心律失常相關(guān)靶點(diǎn)，其中GeneCards數(shù)據(jù)庫(kù)2 205個(gè)（Relevance Score≥2），對(duì)疾病靶點(diǎn)與藥物靶點(diǎn)取交集，得到二者交集靶點(diǎn)174個(gè)。見圖1。

2.3 活性成分-作用靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖分析

使用Cytoscape對(duì)174個(gè)交集靶點(diǎn)進(jìn)行“活性成分-作用靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)圖的繪制。Network Analyzer計(jì)算分析得到209個(gè)節(jié)點(diǎn)，704條邊，平均度值為6.7，根據(jù)度值篩選前20名的活性成分。其中度值排名前5的化合物分別為小檗浸堿（Berlambine）、表小檗堿（Epiberberine）、黃藤素（Palmatine）、黃柏酮（Obacunone）、小檗堿（Berberine），由此推測(cè)上述化合物可能是交泰丸治療心律失常的重要活性成分。見圖2，表2。

2.4 核心蛋白PPI網(wǎng)絡(luò)圖分析

將174個(gè)交集基因，導(dǎo)入STRING數(shù)據(jù)庫(kù)，獲取PPI網(wǎng)絡(luò)圖及對(duì)應(yīng)的網(wǎng)絡(luò)數(shù)據(jù)，使用Cytoscape對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)拓?fù)浞治?，得?73個(gè)節(jié)點(diǎn)，2 199條邊，平均度值25.4。根據(jù)篩選度值前15的蛋白質(zhì)，其中度值排名較高的ALB、AKT、MAPK3、VEGFA、SRC等核心靶點(diǎn)，在PPI網(wǎng)絡(luò)中與其他蛋白相互作用較強(qiáng)。見圖3，表3。

2.5 GO富集與KEGG富集分析

利用DAVID數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)174個(gè)交集基因進(jìn)行基因富集分析共得到生物過程（Biological Process，BP）621個(gè)、分子功能（Molecular Function，MF）121個(gè)，細(xì)胞成分（Cellular Component，CC）79個(gè)。根據(jù)校正后P值進(jìn)行排序，選擇GO富集和KEGG富集排名前15的條目繪制氣泡圖。BP主要與藥物反應(yīng)、蛋白磷酸化、細(xì)胞增殖的負(fù)調(diào)控、凋亡過程的負(fù)調(diào)控、細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶的負(fù)調(diào)控等過程相關(guān);MF主要涉及凋亡過程、蛋白質(zhì)結(jié)合、腺苷三磷酸、酶結(jié)合、相同蛋白質(zhì)結(jié)合等功能;CC主要涉及細(xì)胞質(zhì)膜、細(xì)胞膜、細(xì)胞外隙、細(xì)胞表面、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜等。此外，KEGG富集分析篩選得到109條（P<0.05）信號(hào)通路，推測(cè)交泰丸治療心律失常關(guān)鍵靶標(biāo)所參與的通路主要涉及PI3K-AKT信號(hào)通路、Rap1信號(hào)通路、cAMP信號(hào)通路、甲狀腺激素信號(hào)通路、HIF-1信號(hào)通路等，推測(cè)交泰丸可能通過以上主要通路發(fā)揮治療心律失常的作用。見圖4。

2.6 分子對(duì)接

利用Autodock軟件將活性成分-作用靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖中得到的節(jié)點(diǎn)度值最高的5個(gè)活性成分：小檗浸堿、表小檗堿、黃藤素、黃柏酮、小檗堿，分別與PPI網(wǎng)絡(luò)圖中排名前5位的核心蛋白ALB、AKT1、MAPK3、VEGFA、SRC進(jìn)行分子對(duì)接。配體和受體二者結(jié)合越穩(wěn)定，二者結(jié)合能越低，由分子對(duì)接結(jié)果可知，各活性成分與目標(biāo)受體蛋白對(duì)接的結(jié)合能均小于-6 kcal/mol，說(shuō)明活性成分能夠與配體自發(fā)結(jié)合并借助氫鍵等分子間作用力形成較為穩(wěn)定的構(gòu)象。其中表小檗堿與AKT1（-10.1 kcal/mol）結(jié)合性最好，從圖中可看出表小檗堿與AKT1相互作用，結(jié)合后呈現(xiàn)穩(wěn)定狀態(tài)。結(jié)合情況見圖5，分子對(duì)接構(gòu)象見圖6。

3 討論

從中醫(yī)學(xué)角度分析，心律失常多歸屬于“心悸”“怔忡”等范疇。中醫(yī)認(rèn)為心悸病機(jī)以臟腑功能失常為本，心神失養(yǎng)為標(biāo)。早在先秦時(shí)期，《黃帝內(nèi)經(jīng)》一書就從心腎二臟論述該病，如“心病，治不得，索之水，水者腎也”，說(shuō)明了病位在心而不止于心;《素問·大奇論》“腎肝并小弦欲驚”，指出驚悸的發(fā)生與腎亦有關(guān)系[10]。交泰丸是治療心腎不交證的代表方，對(duì)心腎不交型心悸療效顯著?，F(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)交泰丸及各組分含藥血清對(duì)鈉離子、鈣離子電流均有不同程度的抑制，可通過改變膜反應(yīng)性，消除折返激動(dòng)，延長(zhǎng)細(xì)胞動(dòng)作電位從而發(fā)揮抗心律失常的作用[11-12]。

從有效藥物成分分析，本研究通過網(wǎng)絡(luò)藥理得出交泰丸治療心律失常的有效成分主要有小檗浸堿、表小檗堿、黃藤素、黃柏酮、小檗堿等?，F(xiàn)有研究表明，表小檗堿是一種多靶標(biāo)小分子，可通過AKT和ERK途徑發(fā)揮其活性作用從而抑制膽固醇合成產(chǎn)生的抗血脂異常[13]，明顯降低心血管疾病的危險(xiǎn)因素，保護(hù)心肌免受缺血再灌注損傷[14]。黃藤素具有較強(qiáng)的抗心律失常、提高免疫功能、抗炎及抗菌等藥理特性[15-16]，對(duì)氯仿-腎上腺素、哇巴因誘發(fā)的心律失常及大鼠復(fù)灌性和心肌缺血性心律失常等多種實(shí)驗(yàn)性大鼠模型心律失常均具有抑制作用[17]。黃柏酮屬于檸檬苦素類似物，具有抗氧化性、抑制細(xì)胞增殖和促進(jìn)細(xì)胞凋亡的作用，通過調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮細(xì)胞NO的合成，減少超氧化物產(chǎn)生，從而降低由氧化損傷引起的對(duì)血管系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和功能造成的有害影響，同時(shí)下調(diào)AKT磷酸化水平來(lái)抑制血管平滑肌細(xì)胞的增殖，減少內(nèi)膜增生，有助于治療由于內(nèi)皮功能障礙所引起的心血管疾病[18-19]。小檗堿主要通過阻斷抑制激活鉀離子通道，延長(zhǎng)心肌細(xì)胞動(dòng)作電位時(shí)程而發(fā)揮抗心律失常作用，能有效防治多種因素引起的室性心律失常[20]。在大鼠心臟缺血再灌注誘導(dǎo)的心律失常模型中，口服小檗堿可降低心肌組織ANP、BNP和cTn-I的水平，并可顯著改善心肌結(jié)構(gòu)性的損傷[21]，通過上調(diào)缺血心肌的蛋白激酶水平來(lái)實(shí)現(xiàn)保護(hù)心肌的作用[22]。

從關(guān)鍵核心靶點(diǎn)分析，在PPI網(wǎng)絡(luò)中得到前5位靶點(diǎn)分別為ALB、AKT1、MAPK3、VEGFA、SRC。大量數(shù)據(jù)表明ALB的治療機(jī)制不僅通過對(duì)血漿容量擴(kuò)充的影響而介導(dǎo)，而且還通過對(duì)炎癥和氧化應(yīng)激的調(diào)節(jié)發(fā)揮作用[23]。低ALB水平可以預(yù)測(cè)穩(wěn)定的冠狀動(dòng)脈疾病患者的主要不良心血管事件[24]。AKT具有調(diào)節(jié)細(xì)胞分化、凋亡、代謝等功能，并可影響各種促血管生成因子和抗血管生成因子的表達(dá)和活性，并指出AKT1作為AKT亞型之一，是血管生成相關(guān)異常的治療靶標(biāo)[25]。VEGF對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞具有促有絲分裂、細(xì)胞遷移和抗凋亡作用，增加血管的通透性，參與調(diào)節(jié)正常和病理性血管生成過程[26]，同時(shí)VEGF被認(rèn)為是心律失常和冠狀動(dòng)脈疾病的病理生理因素，是潛在治療靶標(biāo)之一，對(duì)預(yù)后具有重要意義[27]。VEGFA作為VEGF家族中的重要一員，研究證實(shí)其在心律失常致死的大鼠心肌組織中呈彌漫性表達(dá)，可為致死性心律失常和冠狀動(dòng)脈供血不足引起的急性心肌缺血的鑒別診斷提供依據(jù)[28]。SRC是一種酪氨酸蛋白激酶，可調(diào)節(jié)細(xì)胞的代謝、成活和增殖，并在巨噬細(xì)胞介導(dǎo)下的炎癥反應(yīng)中起到關(guān)鍵作用[29]。C-SRC作為SRC的一種表現(xiàn)形式，其抑制可以改善心肌梗死后心律失常的縫隙連接蛋白43（Cx43）水平和傳導(dǎo)速度，并降低心律失常的可誘導(dǎo)性[30]。

從信號(hào)通路分析，KEGG富集分析顯示，交泰丸治療心律失常主要涉及PI3K-AKT信號(hào)通路、Rap1信號(hào)通路、cAMP信號(hào)通路、甲狀腺激素信號(hào)通路、HIF-1信號(hào)通路等。PI3K-AKT途徑主要通過磷脂酰肌醇-3，4，5-三磷酸（PIP3）激活下游信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)因子AKT來(lái)調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖和成活，從而對(duì)心肌細(xì)胞起到保護(hù)作用，若PIP3信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的活性降低可導(dǎo)致心律失常[31]。研究證實(shí)白藜蘆醇可通過PI3K-AKT信號(hào)通路增加心肌Cx43的水平和活性，從而防止再灌注性心律失常的發(fā)生[32]。Rap1作為心臟線粒體活性氧（ROS）生成的負(fù)調(diào)控因子，Epac2-Rap1信號(hào)會(huì)減弱線粒體ROS的產(chǎn)生并降低心律失常的易感性，若Epac2-Rap1信號(hào)通路受損會(huì)由于ROS依賴晚鈉電流的激活而導(dǎo)致心律失常[33]。甲狀腺激素（Thyroid hormones，TH）在心血管系統(tǒng)，特別是在心臟中具有中樞調(diào)節(jié)作用，血漿或組織中TH水平的變化與心血管功能的顯著改變有關(guān)[34]。單純TH可引起持續(xù)性竇性心動(dòng)過速和交界性心動(dòng)過速[35]，其甲狀腺激素信號(hào)在包括心臟在內(nèi)的所有器官或組織的分化、生長(zhǎng)、代謝和生理功能中均起著至關(guān)重要的作用[36]。心肌受損和應(yīng)激可促進(jìn)心臟組織的重塑，這與心肌細(xì)胞死亡和纖維化發(fā)展相關(guān)，cAMP信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)是受損心肌纖維化反應(yīng)中的主要調(diào)節(jié)劑，調(diào)節(jié)涉及心肌纖維化的多種基本細(xì)胞過程，其中就包括調(diào)控成肌纖維細(xì)胞分化、增殖，膠原蛋白分泌和侵襲，避免其過度活化而導(dǎo)致心律失常、心功能障礙等疾病的發(fā)生[37]。缺氧誘導(dǎo)因子1（HIF-1）是一種轉(zhuǎn)錄因子，具有調(diào)節(jié)血管生成、血管重塑、葡萄糖代謝、細(xì)胞凋亡等功能，并參與多條細(xì)胞信號(hào)通路。當(dāng)心臟因缺血而引起心肌超微結(jié)構(gòu)、心功能和電生理一系列損傷性變化時(shí)，激活HIF-1可以上調(diào)與血管系統(tǒng)相關(guān)蛋白的基因表達(dá)，增加血流，降低缺血損傷，通過參與重建細(xì)胞代謝途徑來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)心臟組織的保護(hù)[38]。

最后，通過分子對(duì)接技術(shù)，計(jì)算得出交泰丸主要活性成分與核心蛋白的結(jié)合能均小于-6 kcal/mol，且對(duì)接較為穩(wěn)定的組合為表小檗堿與AKT1（-10.1 kcal/mol）、小檗浸堿與SRC（-10.0 kcal/mol）2組。該結(jié)果表明交泰丸的活性成分與受體蛋白穩(wěn)定結(jié)合，從而能夠發(fā)揮治療心律失常的作用，在分子層面為接下來(lái)的基礎(chǔ)研究起到了奠基作用。

綜上所述，本研究運(yùn)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法和分子對(duì)接技術(shù)初步闡釋了交泰丸通過多種靶點(diǎn)、多種生物過程和通路治療心律失常的作用機(jī)制可能與調(diào)控細(xì)胞代謝、降低氧化刺激、改善血管重塑等方面有關(guān)，然而本研究的數(shù)據(jù)主要從數(shù)據(jù)庫(kù)收錄獲取，具有一定局限性，故仍有部分結(jié)果需進(jìn)一步完善和深入的實(shí)驗(yàn)研究。

參考文獻(xiàn)

[1]Hussain L，Aziz W，Saeed S，et al.Arrhythmia detection by extracting hybrid features based on refined Fuzzy entropy（FuzEn） approach and employing machine learning techniques[J].Waves in Random and Complex Media，2020，30（4）：656-686.

[2]師帥，耿彥婷，胡元會(huì)，等.穩(wěn)心顆粒聯(lián)合比索洛爾治療心力衰竭合并心律失常的系統(tǒng)評(píng)價(jià)[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2016，22（15）：216-219.

[3]陳璇，王雨鋒，張筑欣，等.中國(guó)心律失常現(xiàn)狀及治療進(jìn)展[J].中國(guó)研究型醫(yī)院，2020，7（1）：75-78，198-201.

[4]曹雯，張會(huì)峰，范堯夫，等.交泰丸的現(xiàn)代研究進(jìn)展[J].長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2019，35（3）：610-612.

[5]朱明軍，李同平，王永霞.淺析交泰丸治療心悸的臨床應(yīng)用與藥理研究[J].遼寧中醫(yī)雜志，2006，33（9）：1168-1169.

[6]張文華.交泰丸加味治療室性早搏68例[J].廣西中醫(yī)藥，1994，17（4）：7-8.

[7]許鳳云，孫曙光，苗明三，等.交泰丸對(duì)心血管系統(tǒng)的影響[J].河南中醫(yī)，1992，12（6）：266-267.

[8]邢心睿，呂狄亞，柴逸峰，等.網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)在中藥作用機(jī)制中的研究進(jìn)展[J].藥學(xué)實(shí)踐雜志，2018，36（2）：97-102.

[9]董培良，李慧，韓華.中藥網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的應(yīng)用與思考[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2020，26（17）：204-211.

[10]鐘立達(dá).從心腎相關(guān)論治心律失常[J].中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志，2014，12（8）：1016-1017.

[11]邢作英，王永霞，朱明軍，等.交泰丸及其組分含藥血清對(duì)豚鼠心室肌細(xì)胞鈉通道的影響[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志，2019，39（8）：983-987.

[12]邢作英，王永霞，朱明軍，等.交泰丸含藥血清對(duì)豚鼠心室肌細(xì)胞ICa-L的影響[J].天津中醫(yī)藥，2019，36（1）：71-74.

[13]Liu L，Li J，He Y.Multifunctional epiberberine mediates multi-therapeutic effects[J].Fitoterapia，2020，147：104771.

[14]Tan HL，Chan KG，Pusparajah P，et al.Rhizoma Coptidis：A Potential Cardiovascular Protective Agent[J].Front Pharmacol，2016，7：362.

[15]Mai CT，Wu MM，Wang CL，et al.Palmatine attenuated dextran sulfate sodium（DSS）-induced colitis via promoting mitophagy-mediated NLRP3 inflammasome inactivation[J].Mol Immunol，2019，105：76-85.

[16]楊念云，張啟春，朱華旭，等.黃連生物堿類資源性化學(xué)成分研究進(jìn)展與利用策略[J].中草藥，2019，50（20）：5080-5087.

[17]劉丹，曹廣尚，司席席，等.黃連中生物堿類成分抗心律失常研究概述[J].山東中醫(yī)雜志，2017，36（2）：164-166，171.

[18]Yoon J，Park M，Jh L，et al.Endothelial nitric oxide synthase activation through obacunone-dependent arginase inhibition restored impaired endothelial function in ApoE-null mice[J].Vascul Pharmacol，2014，60（3）：102-109.

[19]李東耀，陳文杰，商駿，等.黃柏酮對(duì)大鼠自體移植靜脈橋術(shù)后內(nèi)膜增生的抑制作用及其機(jī)制[J].廣西醫(yī)學(xué)，2018，40（7）：808-811.

[20]趙西子，李文芳，邢彥超，等.小檗堿體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)及藥理活性研究進(jìn)展[J].遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2020，22（10）：86-90.

[21]陳凱，向莉莉，裴芳，等.黃連素對(duì)大鼠心肌缺血再灌注所致心肌損傷的保護(hù)作用[J].中南藥學(xué)，2017，15（1）：32-35.

[22]胡誠(chéng)毅，莫志賢.黃連素的藥理作用及機(jī)制研究進(jìn)展[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2017，23（20）：213-219.

[23]Artigas A，Wernerman J，Arroyo V，et al.Role of albumin in diseases associated with severe systemic inflammation：Pathophysiologic and clinical evidence in sepsis and in decompensated cirrhosis[J].J Crit Care，2016，33：62-70.

[24]Suzuki S，Hashizume N，Kanzaki Y，et al.Prognostic significance of serum albumin in patients with stable coronary artery disease treated by percutaneous coronary intervention[J].PLoS One，2019，14（7）：e0219044.

[25]Somanath PR，Razorenova OV，Chen J，et al.Akt1 in endothelial cell and angiogenesis[J].Cell Cycle，2006，5（5）：512-518.

[26]Melincovici CS，Boca AB，uman S，et al.Vascular endothelial growth factor（VEGF）-key factor in normal and pathological angiogenesis[J].Rom J Morphol Embryol，2018，59（2）：455-467.

[27]Vm M，Al S，Aa A，et al.Circulating interleukin-18：Association with IL-8，IL-10 and VEGF serum levels in patients with and without heart rhythm disorders[J].Int J Cardiol，2016，215：105-109.

[28]張圓，曹志鵬，毛瑞明，等.HIF-1α、VEGF-A在心律失常大鼠心肌組織中的變化[J].法醫(yī)學(xué)雜志，2017，33（3）：225-231.

[29]Byeon SE，Yi YS，Oh J，et al.The role of Src kinase in macrophage-mediated inflammatory responses[J].Mediators Inflamm，2012，2012：512926.

[30]Rutledge CA，Ng FS，Sulkin MS，et al.c-Src kinase inhibition reduces arrhythmia inducibility and connexin43 dysregulation after myocardial infarction[J].J Am Coll Cardiol，2014，63（9）：928-934.

[31]Ezeani M，Elom S.Necessity to evaluate PI3K/Akt signalling pathway in proarrhythmia[J].Open Heart，2017，4（2）：e000596.

[32]宋娟，王佳，李寶紅，等.PI3K/Akt信號(hào)通路在白藜蘆醇抗大鼠缺血/再灌注性心律失常中的作用及機(jī)制[J].中國(guó)應(yīng)用生理學(xué)雜志，2017，33（3）：239-243.

[33]Yang Z，Kirton HM，Al-Owais M，et al.Epac2-Rap1 Signaling Regulates Reactive Oxygen Species Production and Susceptibility to Cardiac Arrhythmias[J].Antioxid Redox Signal，2017，27（3）：117-132.

[34]Vale C，Neves JS，von Hafe M，et al.The Role of Thyroid Hormones in Heart Failure[J].Cardiovasc Drugs Ther，2019，33（2）：179-188.

[35]Li H，Scherlag BJ，Kem DC，et al.Atrial tachyarrhythmias induced by the combined effects of β1/2-adrenergic autoantibodies and thyroid hormone in the rabbit[J].J Cardiovasc Transl Res，2014，7（6）：581-589.

[36]Zhang D，Li Y，Liu S，et al.microRNA and thyroid hormone signaling in cardiac and skeletal muscle[J].Cell Biosci，2017，7：14.

[37]Delaunay M，Osman H，Kaiser S，et al.The Role of Cyclic AMP Signaling in Cardiac Fibrosis[J].Cells，2019，9（1）：69.

[38]王蘋蘋，孔繁平，陳學(xué)群，等.低氧細(xì)胞應(yīng)激的HIF-1信號(hào)通路[J].浙江大學(xué)學(xué)報(bào)：醫(yī)學(xué)版，2011，40（5）：559-566.

（2021-01-14收稿 責(zé)任編輯：魏慶雙，徐穎）