廣州市天河區(qū)戶籍婦女人乳頭狀瘤病毒基因與宮頸細(xì)胞病變篩查結(jié)果分析

吳海燕 侯賦園 梁澤瑜 劉運(yùn)科

廣州市天河區(qū)婦幼保健計(jì)劃生育服務(wù)中心 510000

宮頸癌已經(jīng)發(fā)展成為威脅我國婦女健康的第二大婦科惡性腫瘤［1］。研究表明，引發(fā)宮頸癌的主要因素是高危型人乳頭狀瘤病毒（high risk human hapillonma virus，Hr-HPV）的持續(xù)感染。從宮頸細(xì)胞癌前病變發(fā)展為浸潤癌、宮頸癌，大約需要10 年的時間。因而宮頸癌的防控關(guān)鍵在于早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療。目前，液基薄層細(xì)胞學(xué)（thinprep cytologic test，TCT）與HPV-DNA 檢測技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用于宮頸病變的臨床檢測。在宮頸癌篩查中，HPV-DNA和TCT的聯(lián)合檢測具有較高的應(yīng)用價值［2］。

為了了解廣州市天河區(qū)婦女HPV 感染及宮頸病變情況，探索對本地區(qū)有針對性的宮頸癌防治措施，為宮頸癌防控策略的制定提供參考依據(jù)。本文對廣州市天河區(qū)5 618例宮頸癌篩查標(biāo)本的HPV-DNA 亞型及TCT 結(jié)果進(jìn)行了分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 在2019年至2020年內(nèi)，按宮頸癌篩查項(xiàng)目的要求，對轄區(qū)內(nèi)適齡婦女進(jìn)行宣傳動員，并按規(guī)范采集廣州市天河區(qū)女性的宮頸脫落細(xì)胞標(biāo)本，共5 618例。標(biāo)本采集對象年齡范圍為20～70歲，年齡（44.42±8.64）歲。標(biāo)本采集后當(dāng)天帶回檢驗(yàn)科及時檢測（4 ℃儲存，72 h內(nèi)檢測）。

1.2 檢測方法

1.2.1 HPV-DNA 分型檢測 使用細(xì)胞裂解液（分離法）試劑盒分離提取標(biāo)本總核酸，用ABI2720PCR 儀擴(kuò)增靶基因片段后，采用醫(yī)用核酸分子雜交儀HB-2012A 對擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行反向半點(diǎn)雜交，顯色，最后根據(jù)顯色斑點(diǎn)做結(jié)果判斷（提取、擴(kuò)增、雜交試劑及雜交儀均由凱普生物提供）。本方法所檢測的HPV 亞型共21 種，包括15 種高危型，分別為16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68 型，以及6種低危型，分別為6、11、42、43、44、81型。

1.2.2 TCT 檢測 按照宮頸液基細(xì)胞制片檢測流程（BD prepstainTMsystem）制成宮頸細(xì)胞薄層涂片，巴氏染色后經(jīng)顯微鏡下閱片檢測［液基細(xì)胞制片機(jī)，染色試劑均由BD 醫(yī)療器械（上海）有限公司提供］。依據(jù)貝塞斯達(dá)系統(tǒng)（TBS）分類診斷標(biāo)準(zhǔn)，宮頸細(xì)胞學(xué)診斷報(bào)告分為正常（NR）、意義不明的不典型鱗狀細(xì)胞（ASCUS）、不除外高級別鱗狀上皮細(xì)胞病變（ASC-H）、低度鱗狀上皮內(nèi)病變（LSIL）、高度鱗狀上皮內(nèi)病變（HSIL）、鱗狀細(xì)胞癌（SCC）和腺癌。

1.2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 利用Excel 建立數(shù)據(jù)庫，百分位數(shù)采用四舍五入法保留兩位小數(shù)點(diǎn)。SPSS 20.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)數(shù)資料用例（%）表示，組間比較使用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 HPV 和TCT 陽性率概況 共檢測5 618 例標(biāo)本，檢出HPV 感染570 例（10.15%），其中Hr-HPV 感染426 例，Hr-Lr-HPV（高危合并低危HPV）47 例，Lr-HPV 97 例。在Hr-HPV 感染中，52 型陽性檢出率最高（2.81%），其次依次是58、16、53型。在低危型HPV感染中，81型陽性檢出率最高（1.03%），如圖1 示。檢出TCT 異常348 例（6.19%），其中ASCUS 286例，LSIL 61例，HSIL 1例。

圖1 570例廣州市天河區(qū)戶籍婦女HPV亞型感染率分布

2.2 HPV 感染與TCT 異常的關(guān)系 TCT 異常者中，HPV 感染與未感染占比分別為99.14%和0.86%（P＜0.05）。其 中，Hr-HPV，Hr-Lr-HPV，Lr-HPV 感染率分別 為84.48%、12.93%、1.73%（P＜0.05），如表1 所示。LSIL/HSIL組 中HPV16 或HPV18感染率顯著高于ASCUS組（P＜0.05），如表2所示。

表1 廣州市天河區(qū)戶籍婦女TCT異常者中各型別HPV感染情況[例（%）]

表2 廣州市天河區(qū)戶籍婦女TCT異常者中各HPV16、HPV18型感染情況[例（%）]

2.3 Hr-Hr-HPV（高危合并高危HPV）復(fù)合型感染檢出Hr-HPV 感染共471 例，其中單一型Hr-HPV 感染415 例（88.11%），Hr-Hr-HPV 復(fù)合型感染56 例（11.09%）。從TCT 正常組至ASCUS組、LSIL/HSIL組，Hr-Hr-HPV 復(fù)合型感染率和總Hr-HPV 感染率均逐漸升高（均P＜0.05），見表3。

表3 廣州市天河區(qū)戶籍婦女各TCT組中單一型Hr-HPV和復(fù)合型Hr-HPV感染情況[例（%）]

2.4 年齡組間HPV 感染率分布 40～49 歲組HPV 和Hr-HPV 感染率最低，60 歲以上年齡組感染率最高，整體成“V”字形分布。各年齡組間HPV和Hr-HPV感染率比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05）。Hr-Hr-HPV 型混合感染率隨著年齡增長而呈升高趨勢。見表4。

表4 廣州市天河區(qū)戶籍婦女各年齡組間HPV陽性率分布（%）

2.5 年齡組間TCT 細(xì)胞學(xué)異常率分布隨著年齡的增長，ASCUS 和LSIL 陽性率分別呈現(xiàn)降低和升高的趨勢，各年齡組間TCT 異常率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表5。

表5 廣州市天河區(qū)戶籍婦女各年齡組間TCT異常率分布（%）

3 討 論

已有研究表明，絕大多數(shù)宮頸上皮內(nèi)瘤變與HPV 感染有關(guān)，在2 年內(nèi)HPV 病毒常可由人體自身免疫系統(tǒng)清除［3］。但Hr-HPV的持續(xù)感染將會導(dǎo)致宮頸細(xì)胞癌變，最終發(fā)展為浸潤癌及宮頸癌。積極開展HPV 及細(xì)胞學(xué)篩查有利于患者的早發(fā)現(xiàn)、早分流、早治療。本文數(shù)據(jù)顯示廣州市天河區(qū)婦女HPV總體感染率為10.15%，其中育齡期婦女Hr-HPV 感染率為8.06%，與廣州市白云區(qū)、東莞、惠州流動人口育齡婦女?dāng)?shù)據(jù)相近［4-7］。廣州市天河區(qū)婦女Hr-HPV感染率為8.42%，低于上海閔行區(qū)婦女的11.7%［8］。廣州市天河區(qū)婦女Hr-HPV 感染率最高的為52 型，其后依次是58、16 型。此3 個優(yōu)勢型別構(gòu)成與東莞、惠州、上海閔行區(qū)相同。以上數(shù)據(jù)提示，廣州市天河區(qū)婦女HPV 感染率情況與省內(nèi)外其他地區(qū)均較為一致。

不同的HPV 亞型，其致病性和自我清除速度也不同［9］，Hr-HPV 感染致病性更高，其中HPV16 型和18 型感染在宮頸癌患者中更為常見。本文分析結(jié)果顯示，細(xì)胞學(xué)病變程度越高，Hr-HPV 感染率越高（P＜0.05）。HPV16 或18 型感染者的TCT 異常率均在92%以上。在HPV16 型陽性樣本中，LSIL/HSIL 型異常率達(dá)63.04%，為Hr-HPV 亞型中最高，其次是HPV18 型（48.15）。檢出的62 例LSIL/HSIL 中，含HPV16 或18 型感染占64.52%（40/62）。表明相對于其他亞型，16型和18型對人體的致病性更高。

在本研究中，單一型HPV 感染率是二重以上型HPV 感染率的7 倍，遠(yuǎn)高于其他幾個地區(qū)［8］。劉頌等［10］報(bào)道從CINⅠ到CINⅢ，二重以上HPV 感染率依次降低，宮頸癌組則均為單一型HPV 感染。由此可推測單一型HPV 感染在宮頸癌中可能更為常見［11］。但本研究顯示，從TCT 正常到ASCUS 到LSIL/HSIL，二重以上型Hr-HPV 混合感染率依次升高（P＜0.05），與Spinillo等［12］研究結(jié)果相符。本文TCT異常患者中，單一型Hr-HPV 感染占82.18%，則接近于劉頌等［10］報(bào)道的CIN 單一型HPV 感染率的81.4%。但本研究中存在不足之處在于HSIL 異常樣本量過少以及缺乏宮頸癌中二重以上Hr-HPV 感染的檢測數(shù)據(jù)。通過上述分析，可推測從宮頸細(xì)胞學(xué)正常至ASCUS、LSIL，二重以上Hr-HPV感染率逐漸上升，而從LSIL 到HSIL 再到宮頸癌，則呈下降趨勢。足量的宮頸癌前病變及宮頸癌樣本的檢測研究，將有利于二重以上型Hr-HPV 混合感染與宮頸癌變關(guān)系的進(jìn)一步闡明。

本文結(jié)果顯示，60 歲以上年齡組的HPV 及Hr-HPV 感染率均最高，40～49 歲年齡組最低，總體呈“V”字形分布。隨著年齡的增長，Hr-HPV 復(fù)合型感染率及LSIL 異常率逐漸升高，與黃艷和郝春佳［13］報(bào)道的侯馬市農(nóng)村婦女CIN 檢出率的年齡分布特征基本一致。廣州市天河區(qū)HPV、Hr-HPV 感染率、TCT 異常率在各年齡組間差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。除了年齡以外，遺傳、環(huán)境、職業(yè)、文化、性生活年限以及微生物共感染等因素也與HPV 感染及宮頸細(xì)胞病變有關(guān)［14-16］。

有隨訪數(shù)據(jù)顯示，伴有HPV感染的ASCUS異常，在3年內(nèi)進(jìn)展為CIN Ⅰ+者超過47.20%［17］。因而TCT 初篩結(jié)果為異常者應(yīng)積極做進(jìn)一步的檢查，如可行陰道鏡檢查或活檢等。同時，對HPV陽性而TCT正常者應(yīng)定期進(jìn)行隨訪檢測，從而達(dá)到早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療的防控目的。