黃山市3225例孕婦外周血胎兒游離DNA無創(chuàng)產(chǎn)前檢測結(jié)果分析

盧惠蘭

摘要：目的：了解黃山市無創(chuàng)產(chǎn)前檢測技術（noninvasive prenatal test，NIPT）各分類指征開展情況和陽性驗證，探討其在胎兒產(chǎn)前檢測中應用價值。方法：回顧性選擇2015年1月—2019年12月我院產(chǎn)前篩查中心接受NIPT檢測的3231例孕婦為觀察對象，NIPT結(jié)果高風險的孕婦建議行羊膜腔穿刺行胎兒核型分析，并對檢測結(jié)果進行分析;經(jīng)電話隨訪獲知孕婦妊娠期結(jié)局。結(jié)果：分指征統(tǒng)計選擇NIPT檢測人數(shù)依次是血清學篩查異常組39.90%（1289/3231），高齡組35.59%（1150/32310），本人要求組24.51%（792/3231），檢測共提示高風險42例，陽性率1.30%（42/3231）。.結(jié)論：NIPT技術有助于我市產(chǎn)前篩查水平，減少直接產(chǎn)前診斷人數(shù)，對21三體的篩查有較高的陽性預測值，對18三體，性染色體非整倍體異常篩查項較好，但避免不了假陽性情況，因此對NIPT高風險的孕婦有必要進行侵入性產(chǎn)前診斷。

關鍵詞：產(chǎn)前篩查;非整倍體;核型分析;孕婦;三體性

【中圖分類號】R828.2 【文獻標識碼】A 【文章編號】2107-2306（2020）01-076-02

染色體非整倍體異常是導致胎兒出生缺陷的常見原因 之一，多數(shù)無有效治療方法，在新生兒中發(fā)病率為0.1%-0.2%，（1）其中以唐氏綜合征（21三體），愛德華綜合征（18三體），帕陶氏綜合征（13三體）以及性染色體非整倍體疾病最為常見。中孕期血清學檢查是最常用的檢測方法，其準確率60-70%，漏診率30-40%，存在較高假陽性和假陰性。本研究回顧性分析了黃山市婦幼保健院產(chǎn)篩門診自2015年1月至2019年12月共3231例自愿行NIPT孕婦的產(chǎn)前篩查，產(chǎn)前診斷結(jié)果及妊娠結(jié)局，探討分析NIPT技術在胎兒非整倍體染色體疾病中的應用價值，現(xiàn)匯報如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2015年1月28日至2019年12月31日在黃山市婦幼保健院產(chǎn)前篩查中心自愿接受NIPT檢測的孕婦3231例。孕婦年齡在19至50歲，孕周15至22周之間

1.2納入標準1：妊娠孕周經(jīng)B超校準后實際孕周在15周到22周之間。2：單活胎3：近期未接受過細胞治療，移值手術 異體輸血等;4：體質(zhì)量低于100kg.4：通過B超初篩，有軟指標異常者首選羊穿，充分遺傳學咨詢后要求做的也納入。5：所有參與檢測孕婦充分咨詢后，簽書面同意書。

1.2排除標準：1：孕婦為染色體異常者。2懷多胎者。3孕婦接受過細胞治療，移值手術，一年內(nèi)輸過異體血制品4兩次及兩次以上自然流產(chǎn)史5：四周內(nèi)接受過免疫治療

1.3：方法：選用乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝的采血管采集孕婦外周血10ml，0-4攝氏度低溫保存 ，24小時內(nèi)送第三方基因檢測機構(gòu)進行基因組測序。最后生物信息學分析不同染色體水平差異識別胎兒染色體異常，并計算出每條染色體的Z值 ，檢測結(jié)果Z值在-3-3之間為正常，超出此范圍為高風險，高風險者建議行羊水穿刺做染色體核型分析。

1.4統(tǒng)計學分析：采用SPSS16.0軟件進行統(tǒng)計學分析。定量資料用均數(shù)+.—標準差（x+-s）表示，組間比較采用t檢驗;定性資料用率（%）表示。

2 結(jié)果

2.1NIPT檢測原因分析：行無創(chuàng)產(chǎn)前篩查的中孕期孕婦有3231例，其中血清學篩查異常組有1289例，占總比39.89%.高齡組1150例，占總比35.59%。最后是無明確指征本人要求做的（本人要求組）孕婦數(shù)792例，占總比24.51%。本研究歸類顯示無創(chuàng)DNA檢測數(shù)逐年提高，2019年總數(shù)是2018年的（1691/746）2.27倍

2.2回訪情況：所有NIPT高風險的都給予充分遺傳學咨詢，其中30例行羊水穿刺，羊水行染色體核型分析。14例21三體的孕婦行羊水穿刺11例，確診10例，陽性預測值90.90%.3例未行羊水穿刺的一胎羊穿失敗，血性羊水未培養(yǎng)出染色體，拒絕再次羊水穿刺，懷孕中。一例無創(chuàng)DNA未出報告時B超提示胎兒全身水腫胸腔大量積液，行引產(chǎn)，另一例未行進一步檢查直接引產(chǎn)。4例18三體高風險孕婦，行羊水穿刺3例，確診一例引產(chǎn)，陽性預測值33.33%.不相符2例，回訪至寶寶出生正常。還有一例未進一步檢查直接引產(chǎn)。2例13三體高風險羊穿都排除，回訪寶寶出生正常。9例性染色體體異常的羊穿數(shù)8例，確診3例陽性預測值37.75%，另5例回訪至寶寶出生，寶寶正常。其他染色體異常13例，行羊水穿刺6例，確診2例陽性預測值33.33%，11例寶寶回訪活產(chǎn)正常

3討論

3.1自我要求NIPT檢測的孕婦構(gòu)成比：無明確指征本人要求組絕對數(shù)從每年39人遞增到2019年的篩查數(shù)503人，占年篩查NIPT比例越來越高。此組NIPT陽性率1.26%，比唐篩異常組高，估計跟有異常妊娠史珍貴兒的孕婦納入此組有關，異常妊娠史珍貴兒孕婦更愿意直接選擇NIPT.一直以來NIPT是作為血清學篩查序貫檢測的，而現(xiàn)在越來越多的無明確指征的孕婦選擇直接無創(chuàng)DNA檢測跟估計跟如下原因有關：首先NIPT對21三體的準確性90%以上是得到業(yè)界認可的，本研究21三體18三體.陽性預測值是90.91%，33.33%.21三體是最常見的染色體非整倍體疾病，21三體孩子生命周期長，家庭經(jīng)濟和心理負擔重。其次：近年一些大型基因檢測公司在全國各地對NIPT技術進行推廣，檢測費用相對減少，使得很多孕婦對此檢測技術的接受度大幅度提高.2019年檢測數(shù)1691例，占五年來總數(shù)的52.34%。檢測數(shù)大幅度提高，帶來的規(guī)范咨詢，指征正確把握，檢測高風險準確處理，低風險的回訪等等給臨床帶來一定挑戰(zhàn)，怎么規(guī)范系統(tǒng)的管理是下步研究的問題。

3.2：高齡問題：本研究中，高齡占總NIPT數(shù)的35.34%，高風險率占總風險率的45.24%，其發(fā)生主要是由于高齡孕婦長期受內(nèi)外因素的影響，卵巢漸趨老化，減數(shù)分裂時發(fā)生染色體不分離的機率逐漸增高。羊膜腔穿刺采集羊水（絨毛 / 臍血） 進行核型分析的方式一直視為產(chǎn)前診斷金標準，目前≥ 35 歲的孕婦按照法律規(guī)定是直接進行產(chǎn)前診斷的指征，產(chǎn)前診斷手術有創(chuàng)同時流產(chǎn)風險等，往往孕婦在面對產(chǎn)前診斷時極易產(chǎn)生焦慮與恐懼降低產(chǎn)前診斷依從性，這部分高齡孕婦在知情同意需做產(chǎn)前診斷的情況下，更愿意選擇先進行無創(chuàng)DNA檢測，同時無創(chuàng) DNA 會為每位進行檢測的孕婦購買保險，即使無創(chuàng)檢測為高風險，后續(xù)再做羊水穿刺時還能報銷費用，也緩解了一部分因為費用而放棄產(chǎn)前診斷檢測的孕婦例數(shù)。

3.3：血清學檢測和NIPT關系：目前的血清學標志物篩查陽性率較高（約為6% ）左右，本研究中 1245例血清學篩查異常選擇NIPT 檢測，結(jié)果共12例陽性，陽 性 率 為 0.96%，避免了絕大多數(shù)孕婦進行不必要的有創(chuàng)性產(chǎn)前診斷操作。本研究中用 NIPT 檢 測出14 例 T21、4 例 T18、2 例 T13、8 例性染色體異 常，13例其他染色體異常，經(jīng)羊水染色體核型分析證實 10例 T21、1 例 T18、3 例性染色體異常，故NIPT 檢測存在 5 例假陽性，（有2例13三體全是假陽問題，估計跟樣本量小有關性。

綜上所述，產(chǎn)前無創(chuàng)篩查技術在靈敏度和特異度上比傳統(tǒng)的血清唐氏篩查要高。隨著高通量測序技術的進步和檢測成本的降低，NIPT 的臨床應用前景可觀，NIPT 有望成為我國廣泛開展的產(chǎn)前篩查方法之一。從目前資料顯示，假陽問題在目前技術條件下不可避免，所以NIPT陽性仍需要經(jīng)羊膜腔穿刺術等侵入性產(chǎn)前診斷進一步驗證，這也是NIPT定位為產(chǎn)前篩查的重要原因。

參考文獻：

[1]王海 周蓉等 大規(guī)模平行測序基因檢測用于胎兒染色體非整倍體異常產(chǎn)前診斷的臨床價值 浙江醫(yī)學，2018，40（1）（13-14）

[2]第八版婦產(chǎn)科學 第十四章 遺傳咨詢、產(chǎn)前篩查、產(chǎn)前診斷與胎兒干預162頁

[3]郭彩茹 等胎兒染色體非整倍體無創(chuàng)檢測在高危孕婦產(chǎn)前診斷中的應用 中國生育健康雜志2019 30（5）485-486

（安徽省黃山市婦幼保健院 245000）