董玉瑋,周立輝,沙爽,張浩赟,陳學(xué)紅,曹修春
(1.徐州工程學(xué)院食品與生物工程學(xué)院,江蘇 徐州 221018;2.徐州山崎農(nóng)產(chǎn)品技術(shù)研發(fā)有限公司,江蘇 徐州 221000)
蘆筍(Asparagus officinalis L.),屬于百合科、天門冬屬,富含有纖維素、木質(zhì)素、蛋白質(zhì)、礦物質(zhì)等營養(yǎng)成分[1],還含有多酚、皂苷、多糖等功效成分[2],具有抗癌[3]、抗衰老、抗紫外線[4]等作用。平菇(Pleurotus ostreatus),從屬側(cè)耳科、側(cè)耳屬,氨基酸種類豐富[5],含有人體所必需的8種氨基酸,礦物質(zhì)元素含量高[6],營養(yǎng)均衡[7],其具有的多糖能調(diào)節(jié)人體免疫能力[8],抵抗結(jié)腸癌細(xì)胞的侵襲[9],也有利于預(yù)防腸胃、心腦血管等疾病[10]。
平菇人工栽培時(shí)間較長,限制了其營養(yǎng)價(jià)值的充分利用。隨著食用菌發(fā)酵技術(shù)的不斷進(jìn)步,可以通過液體發(fā)酵方式獲得食用菌菌絲體和活性成分。常規(guī)液體發(fā)酵培養(yǎng)基多以化學(xué)試劑配制而成,加大了后續(xù)發(fā)酵液再利用、活性物質(zhì)提取純化等工序的難度。一些植物例如蘆筍、牛蒡中除富含纖維素和木質(zhì)素外[11],還含有豐富的蛋白質(zhì)、維生素、礦物質(zhì)等營養(yǎng)成分[12],因?yàn)槠焦骄哂蟹纸?、利用纖維素和木質(zhì)素的能力,因此可以利用蘆筍、牛蒡作為液體發(fā)酵的原料。因此以蘆筍為培養(yǎng)基液體發(fā)酵平菇,利用其發(fā)酵液進(jìn)一步制備飲料,則融合了植物和食用菌的優(yōu)勢,有利于發(fā)揮蘆筍和平菇的價(jià)值。目前國內(nèi)外市場暢銷的飲料中,對(duì)人體健康有益的發(fā)酵飲料、食用菌飲料占比較小,且局限于直接采用子實(shí)體為原料[13],不利于食用菌營養(yǎng)和功能的全面發(fā)揮。因此植物-食用菌發(fā)酵型飲料還具有很廣闊的開發(fā)和應(yīng)用空間。
本文以蘆筍為主要原料,平菇為發(fā)酵菌種,采用液體深層發(fā)酵技術(shù),制備蘆筍-平菇發(fā)酵型飲料,能很好地保持平菇的營養(yǎng),同時(shí)蘆筍中的一些營養(yǎng)成分被降解,形成新的有效成分和風(fēng)味物質(zhì),為提升蘆筍和平菇深加工產(chǎn)品的科技含量和市場競爭力提供技術(shù)支撐。
1.1.1 試驗(yàn)材料和試劑
蘆筍:徐州山崎農(nóng)產(chǎn)品研發(fā)有限公司;平菇菌種:江蘇省高校食品資源開發(fā)與質(zhì)量安全重點(diǎn)建設(shè)實(shí)驗(yàn)室保存;檸檬酸、蔗糖、蜂蜜:蘭溪市鴻香生物科技有限公司;酵母浸膏、瓊脂、羧甲基纖維素鈉(sodium carboxymethyl cellulose,CMC-Na)、黃原膠、β-環(huán)狀糊精:江蘇佰耀生物科技有限公司;單糖標(biāo)準(zhǔn)品(鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、巖藻糖、半乳糖)、17種氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品、乙腈(色譜純):國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。
1.1.2 試驗(yàn)儀器
XFS-260高壓蒸汽滅菌鍋、HC-1016離心機(jī):浙江中友實(shí)業(yè)有限公司;THZ-98AB恒溫?fù)u床、HH-1電熱恒溫水浴鍋、DHP-420S電熱恒溫培養(yǎng)箱:宜邦科析儀器有限公司;721G可見分光度計(jì):上海譜元儀器有限公司;1 200液相色譜儀:美國安捷倫科技有限公司;iCAPQ電感耦合等離子體質(zhì)譜儀:美國Thermo公司。
1.2.1 馬鈴薯葡萄糖瓊脂(potato dextrose agar,PDA)培養(yǎng)基
稱取葡萄糖10 g,瓊脂5 g~10 g,土豆100 g,加入500 mL純水,pH值為自然,高壓滅菌后使用。
1.2.2 液體發(fā)酵培養(yǎng)基
稱取1%酵母膏和1%粉碎后的蘆筍,裝入250 mL三角瓶中,高壓滅菌后使用。
在無菌操作臺(tái)內(nèi)將平菇菌種接入PDA斜面培養(yǎng)基中,28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)6d~8d。挑選長勢好的菌種,接種在液體發(fā)酵培養(yǎng)基中,28℃,120r/min搖床培養(yǎng)7d~9d。
培養(yǎng)好的發(fā)酵菌液放入液體攪拌機(jī),攪拌10 min,混合液4 000 r/min離心10 min,取上清液備用。
1.4.1 β-環(huán)狀糊精的添加量
向上清液中分別加入0.20%、0.30%、0.40%、0.50%、0.60%的β-環(huán)狀糊精,充分溶解靜止12 h以上,計(jì)算沉淀率,每次試驗(yàn)重復(fù)3次取其平均值。
1.4.2 CMC-Na的添加量
向上清液中分別加入0.05%、0.10%、0.15%、0.20%、0.25%的CMC-Na,充分溶解靜止12 h以上,計(jì)算沉淀率,每次試驗(yàn)重復(fù)3次取其平均值。
1.4.3 黃原膠的添加量
向上清液中分別加入0.04%、0.05%、0.06%、0.07%、0.08%的黃原膠,充分溶解靜止12 h以上,計(jì)算沉淀率,每次試驗(yàn)重復(fù)3次取其平均值。
1.4.4 沉淀率的測定
將加入不同比例的穩(wěn)定劑發(fā)酵液倒入離心管,在離心機(jī)中4 000 r/min離心20 min,去上清液,將離心管與沉淀物放入電熱鼓風(fēng)干燥器中烘干至恒重,稱量質(zhì)量,按照公式(1)計(jì)算每組沉淀率。
以蔗糖、蜂蜜、檸檬酸3種調(diào)味劑作為3個(gè)單因素,進(jìn)行感官評(píng)價(jià),重復(fù)3次,取平均值。
1.5.1 蜂蜜的添加量
將1.0%、1.5%、2.0%、2.5%、3.0%的蜂蜜加入含有穩(wěn)定劑的發(fā)酵液中,溶解后滅菌冷卻,品嘗并評(píng)分。
1.5.2 蔗糖的添加量
將6%、7%、8%、9%、10%的蔗糖加入含有穩(wěn)定劑的發(fā)酵液中,溶解后滅菌冷卻,品嘗并評(píng)分。
1.5.3 檸檬酸的添加量
將0.15%、0.20%、0.25%、0.30%、0.35%的檸檬酸加入含有穩(wěn)定劑的發(fā)酵液中,溶解后滅菌冷卻,品嘗并評(píng)分。
采用Design-Expert 8軟件,選取三因素和感官評(píng)價(jià)得分較高的3個(gè)水平,進(jìn)行試驗(yàn)。設(shè)計(jì)方案見表1。
表1 試驗(yàn)的因素與水平Table 1 Response surface experiment
感官評(píng)價(jià)表見表2。
表2 蘆筍-平菇發(fā)酵飲料感官評(píng)價(jià)表Table 2 Sensory evaluation of Asparagus officinalis L.-Pleurotus ostreatus fermented beverage
感官評(píng)價(jià)分值=25%甜度評(píng)分+25%酸度評(píng)分+25%香味評(píng)分+25%色澤評(píng)分。邀請(qǐng)15位具有一定食品感官評(píng)定基礎(chǔ)的食品專業(yè)人士組成評(píng)定小組[14],依照評(píng)分指標(biāo)對(duì)飲料進(jìn)行感官評(píng)定。
1.8.1 粗多糖的提取
將發(fā)酵液4000r/min離心10min,取上清置于50℃烘箱中烘至原體積五分之一,再加入5倍體積95%乙醇,4℃冰箱中過夜醇沉后,4 000 r/min離心5 min,取沉淀于50℃烘箱烘干,得粗多糖。
1.8.2 粗多糖純化
Sevag法脫蛋白:將1 g粗多糖加入10 mL純水溶解,加入2.5 mL Sevag試劑(氯仿∶正丁醇體積比=5∶1),將混合溶液裝入分液漏斗中振蕩18 min~20 min,取上層溶液4 000 r/min離心15 min,棄下層液體,上清液再次加入Sevag試劑,重復(fù)脫蛋白操作,至無蛋白質(zhì)層,合并上清液備用。透析:取截流分子量為6 000 Da~8 000 Da的半透膜袋,沸水水浴5 min,純水將其沖開,封住一端,將上述得到的上清液倒入后封住開口的另一端,置于裝有純水的燒杯中,用磁力攪拌器進(jìn)行透析,每2 h換一次水,2 d后得到烘干樣品即為精制多糖。
1.8.3 多糖測定
將1 g粗多糖加入100 mL蒸餾水充分溶解,取2 mL多糖溶液,加1 mL 6%苯酚,5 mL濃硫酸,混勻,100℃水浴15 min,冷卻至室溫(25℃),于490 nm處測定吸光度值,對(duì)照組為蒸餾水。經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算多糖含量。
1.8.4 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線制作
精密稱取105℃干燥至恒重的葡萄糖0.1 g于100 mL容量瓶中,加蒸餾水定容。分別吸取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6、1.8、2.0 mL 的葡萄糖溶液于試管中,并編號(hào)為1~9,加蒸餾水定容到2.0 mL,再在試管中加入1 mL 6%的苯酚溶液與5 mL的濃硫酸,充分混勻后放入100℃的水浴鍋中水浴15 min,冷卻后于波長490 nm處測量各個(gè)試管中溶液的吸光度值。標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為y=0.015 3x+0.014 5,R2=0.990 2。
1.9.1 完全酸水解
先向多糖樣品中加入0.5 mL濃度為2 mol/L的三氟乙酸溶液,然后在120℃下進(jìn)行100 min的水解,最后用氮吹儀將其吹干即得到單糖樣品。
標(biāo)準(zhǔn)品處理:配制10 mg/mL的單糖標(biāo)準(zhǔn)品,吸取5 mL于密封的玻璃管中,搖勻后向其中加入0.5 mL濃度為2 mol/L的三氟乙酸溶液,與樣品一起在120℃下進(jìn)行100 min的水解,使用空氣泵吹干。
1.9.2 1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(1-phenyl-3-methyl-5-pyrazolone,PMP)衍生化
向單糖樣品中加入0.5 mL濃度為0.5 mol/L的PMP試劑以及0.5 mL濃度為0.3 mol/L的NaOH溶液,將其搖勻后放進(jìn)60℃的水浴鍋中水浴20 min,冷卻到室溫(25℃)后加入0.5 mL濃度為0.3 mol/L的HCl和0.5 mL的氯仿,充分振蕩萃取后在5 000 r/min的離心機(jī)中離心5 min,去除氯仿層后再進(jìn)行兩次萃取。最后得到的水層用0.22 μm的濾膜進(jìn)行過濾后使用高效液相色譜儀進(jìn)行測定。
1.9.3 儀器條件
柱溫25℃,流速1.0 mL/min,波長245 nm,進(jìn)樣量10 mL,流動(dòng)相是0.1 mol/L pH 6.8磷酸鹽緩沖液∶乙腈為82∶18(體積比),色譜柱是 SHISEIDO C18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm)。
Mg、Fe、Se、Ca、Zn 等元素含量采用電感耦合等離子體-質(zhì)譜法(inductively coupled plasma mass spectrometry,ICP-MS)[15]。取適量飲料樣品放入聚四氟乙烯消解罐中,加入5 mL硝酸。靜置,反應(yīng)完結(jié)后,蓋蓋密封,放入微波消解儀,溫度冷卻到50℃以下,取出消解罐放入通風(fēng)櫥中,打開消解罐,用超純水潤洗,轉(zhuǎn)移至50 mL容量瓶中,潤洗3次~4次,用超純水稀釋、定容至刻度,待測??瞻讓?duì)照同法處理。ICP-MS儀器參數(shù):射頻功率為1 550 W,泵速為40 r/min,霧化室溫度為2.7℃,采樣深度5 mm,冷卻氣流速14 L/min,輔助氣流速為0.8 L/min,霧化氣流速為1.122 L/min。
適量飲料樣品中加入20 mL鹽酸,干燥,110℃水解,降溫,比色管中定容。取1 mL在85℃下吹干,加水1 mL,吹干。加入10 mL 0.02 mol/L鹽酸,振蕩。分別取500 μL,加 250 μL 0.1 mol/L 異硫氰酸苯酯乙腈和250 μL 1mol/L三乙胺乙腈,衍生1 h。加2 mL正己烷,振蕩,靜置,取下層,過0.45 μm有機(jī)膜上機(jī)。SHISEIDO C18色譜柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流動(dòng)相為:0.1 mol/L 無水乙酸鈉:乙腈=97:3(調(diào) pH 6.5);流速1.0 mL/min;柱溫 40℃;進(jìn)樣量 10 μL,波長 245 nm。用外標(biāo)法測定氨基酸種類,并計(jì)算質(zhì)量百分比。
采用Origin 9.0軟件處理數(shù)據(jù)并作圖,所有數(shù)據(jù)用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。
2.1.1 黃原膠添加量的確定
在黃原膠添加量不同時(shí),發(fā)酵液的沉淀率結(jié)果見圖1。
圖1 不同黃原膠添加量下發(fā)酵液的沉淀率Fig.1 Sedimentation rate of fermentation broth with different amounts of xanthan gum
如圖1所示,當(dāng)黃原膠添加量為0.06%時(shí)有最小沉淀率0.09%。馬鵬利等[16]研究珍珠油杏杏汁發(fā)現(xiàn),當(dāng)黃原膠用量為0.06%時(shí)最為穩(wěn)定,與本文研究結(jié)果基本一致。
2.1.2 CMC-Na添加量的確定
在CMC-Na添加量不同時(shí),發(fā)酵液的沉淀率結(jié)果見圖2。
圖2 不同CMC-Na添加量下發(fā)酵液的沉淀率Fig.2 Sedimentation rate of fermentation broth with different addition of sodium carboxymethyl cellulose
如圖2所示,當(dāng)CMC-Na添加量為0.15%時(shí)有最小沉淀率0.12%。秦丹丹等[17]黑木耳黑枸杞復(fù)合飲料發(fā)現(xiàn),當(dāng)CMC-Na用量為0.08%時(shí)最為穩(wěn)定,與本文研究結(jié)果基本一致。
2.1.3 β-環(huán)狀糊精添加量的確定
在β-環(huán)狀糊精添加量不同時(shí),發(fā)酵液的沉淀率結(jié)果見圖3。
圖3 不同β-環(huán)狀糊精添加量下發(fā)酵液的沉淀率Fig.3 Sedimentation rate of fermentation broth with different amounts of β-cyclodextrin
如圖3所示,當(dāng)β-環(huán)狀糊精添加量為0.40%時(shí)有最小沉淀率0.11%。苗敬芝等[18]研究靈芝、金針菇混合發(fā)酵飲料發(fā)現(xiàn),當(dāng)β-環(huán)狀糊精用量為0.50%時(shí)最為穩(wěn)定,與本文研究結(jié)果基本一致。
采用上述單因素試驗(yàn)最佳工藝:黃原膠的添加量為0.06%,CMC-Na添加量為0.15%,β-環(huán)狀糊精添加量為0.40%,進(jìn)行穩(wěn)定劑復(fù)配試驗(yàn),測得發(fā)酵液沉淀率為0.09%。
2.3.1 蜂蜜添加量
添加不同量的蜂蜜時(shí),飲料感官鑒評(píng)的結(jié)果如圖4所示。
圖4 不同蜂蜜添加量下的飲料感官評(píng)分結(jié)果Fig.4 Sensory score of beverage with different honey content
從圖4可知,當(dāng)蜂蜜添加量是2.0%時(shí)評(píng)分最高,為92分。楊晶晶等[19]研究玫瑰花、玫瑰茄復(fù)合飲料發(fā)現(xiàn),當(dāng)蜂蜜用量為2.1%時(shí)效果最佳,與本文研究結(jié)果基本一致。
2.3.2 蔗糖添加量
在蔗糖的添加量不同時(shí),飲料感官鑒評(píng)的結(jié)果如圖5所示。
圖5 不同蔗糖添加量下飲料感官的評(píng)分結(jié)果Fig.5 Sensory scoring results of beverages with different amounts of sucrose
從圖5可知,當(dāng)蔗糖添加量是8%時(shí)有最高評(píng)分93分。因此初步選擇7%、8%、9%作為蔗糖的添加量。張鋒等[20]研究蘋果-綠茶復(fù)合飲料發(fā)現(xiàn),當(dāng)蔗糖用量為8%時(shí)效果最佳,與本文研究結(jié)果基本一致。
2.3.3 檸檬酸添加量
在檸檬酸的添加量不同時(shí),飲料感官鑒評(píng)的結(jié)果如圖6所示。
圖6 不同檸檬酸添加量下飲料感官的評(píng)分結(jié)果Fig.6 Sensory score of beverage with different amount of citric acid
從圖6可知,當(dāng)檸檬酸添加量是0.30%時(shí)有最高評(píng)分91分。因此初步選擇0.25%、0.30%、0.35%作為檸檬酸的添加量。劉海燕等[21]研究人參植物飲品發(fā)現(xiàn),當(dāng)檸檬酸用量為0.33%時(shí)效果最佳,與本文研究結(jié)果基本一致。
根據(jù)響應(yīng)面軟件進(jìn)行分析處理得出方案,感官評(píng)分結(jié)果如表3所示。
表3 響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)和結(jié)果Table 3 Response surface experimental design and results
續(xù)表3 響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)和結(jié)果Continue table 3 Response surface experimental design and results
對(duì)表2中的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理,把X1蜂蜜、X2蔗糖、X3檸檬酸3個(gè)因素進(jìn)行回歸擬合,可以得出相關(guān)的回歸方程,見公式(2)。
方差分析及可靠性分析見表4。
表4 回歸模型方差分析Table 4 Analysis of variance in regression model
回歸模型P<0.01,達(dá)到了極顯著水平;失擬項(xiàng)P值大于0.05,不顯著,試驗(yàn)無失擬因素存在,能充分反映實(shí)際情況;決定系數(shù)R2為0.990 5,說明實(shí)際結(jié)果與模型預(yù)測結(jié)果的一致性良好;R2adj=0.978 2,試驗(yàn)結(jié)果有93.33%受試驗(yàn)因素影響。該模型擬合程度好,可以用該模型對(duì)蘆筍-平菇發(fā)酵型飲料制備工藝進(jìn)行分析和預(yù)測。由回歸方程和方差分析可知,模型中X1、X3、X12、X22、X32對(duì)蘆筍-平菇發(fā)酵型飲料多糖含量的影響為極顯著(P<0.01),X2對(duì)蘆筍-平菇發(fā)酵型飲料多糖含量的影響為顯著(P<0.05)。各因素對(duì)牛蒡茶多糖含量的影響依次為 X1>X3>X2,即蜂蜜>檸檬酸>蔗糖。
各影響因素兩兩作用對(duì)牛蒡茶多糖含量的交互影響見圖7。
圖7 響應(yīng)面分析圖和等高線圖Fig.7 Response surface analysis chart and contour map
在所選范圍內(nèi)各影響因素的相互作用存在極大值,既是響應(yīng)面的最高點(diǎn),同時(shí)也是等值線最小橢圓的中心點(diǎn)。由表4數(shù)據(jù)分析可知,蔗糖與檸檬酸兩兩交互作用顯著(P<0.05),蜂蜜與蔗糖、蜂蜜與檸檬酸兩兩交互作用不顯著(P>0.05)。
回歸模型確定的最佳制備工藝為蜂蜜、蔗糖、檸檬酸的最佳添加量分別為2.09%、8.11%、0.29%,此條件下對(duì)飲料最高的感官評(píng)分是94.88分。為了驗(yàn)證此最佳方案,根據(jù)實(shí)際操作情況將3種調(diào)味劑的添加量分別微調(diào)為蜂蜜2.0%、蔗糖8.0%、檸檬酸0.3%,此時(shí)飲料的最高感官評(píng)分是94分,與所預(yù)期的分值接近,說明通過響應(yīng)面設(shè)計(jì)方法對(duì)調(diào)配劑配方進(jìn)行優(yōu)化處理具有可靠性。
采用上述最佳工藝條件:黃原膠0.06%、CMC-Na 0.15%、β-環(huán)狀糊精0.4%、蜂蜜2.09%、蔗糖8.11%、檸檬酸0.29%,制備蘆筍-平菇發(fā)酵型飲料,測得飲料中多糖含量是6.40 mg/mL。
平菇多糖中單糖組分色譜圖見圖8,氨基酸組分見圖9,飲料中組分含量測定結(jié)果見圖10。
圖8 平菇多糖中單糖組分的高效液相色譜圖Fig.8 High performance liquid chromatogram of monosaccharide components in Pleurotus ostreatus polysaccharides
圖9 氨基酸組分高效液相色譜圖Fig.9 High performance liquid chromatography of amino acids
圖10 飲料成分檢測結(jié)果Fig.10 Detection results of beverage composition
從圖10可以看出,飲料多糖含葡萄糖、甘露糖等6種單糖,葡萄糖含量最高。Yang等[22]發(fā)現(xiàn)平菇多糖的單糖成分由葡萄糖、半乳糖、甘露糖、鼠李糖和阿拉伯糖組成,以葡萄糖為主;Daba等[23]研究平菇菌絲體中的多糖組成,發(fā)現(xiàn)除葡萄糖以外,還含有半乳糖、甘露糖、木糖和阿拉伯糖,其中葡萄糖占比最高。本研究飲料與Yang等相比,缺少鼠李糖,與Daba等相比,缺少木糖,其余組成成分則相同。
飲料中的礦物質(zhì)元素主要為Ca、Mg、Zn、Se等,Mg的含量高達(dá)160 mg/kg,Se元素含量最少為0.01mg/kg。關(guān)云靜等[24]對(duì)綠蘆筍進(jìn)行營養(yǎng)成分研究發(fā)現(xiàn)含有多種礦物質(zhì)元素,其中K、Ca、Mg、Fe等元素含量較高,賴姍姍等[25]研究不同平菇營養(yǎng)成分發(fā)現(xiàn)Ca、Zn含量較高,與本文研究結(jié)果基本一致。
飲料中富含精氨酸、絲氨酸、甘氨酸等17種氨基酸。其中絲氨酸含量最高,為3 040 mg/kg,呈鮮味氨基酸天冬氨酸、谷氨酸含量占3.48%,9種藥效氨基酸含量高達(dá)53.07%,必需氨基酸與非必需氨基酸的比值為58.49%,接近聯(lián)合國糧食和農(nóng)業(yè)組織和聯(lián)合國世界衛(wèi)生組織提出的理想蛋白質(zhì)(60%以上)標(biāo)準(zhǔn),必需氨基酸與氨基酸總量比值為36.90%,和理想蛋白質(zhì)(40%左右)較為接近,高于雞蛋(32.00%)、大豆(32.01%)、核桃(32.63%)和花生(34.93%),低于牛奶(40.17%),說明制備的蘆筍-平菇發(fā)酵型飲料口感鮮美,營養(yǎng)價(jià)值高。田穎剛[26]等研究蘆筍欠開發(fā)部位發(fā)現(xiàn)各部位必需氨基酸含量在27.56%至35.36%。與本文研究結(jié)果基本一致。
通過進(jìn)行穩(wěn)定劑單因素試驗(yàn),3種穩(wěn)定劑的最佳配方:黃原膠為0.06%,CMC-Na為0.15%,β-環(huán)狀糊精為0.4%。調(diào)味劑單因素和響應(yīng)面試驗(yàn)確定最佳配方:蜂蜜2.09%,蔗糖8.11%,檸檬酸0.29%,此時(shí)飲料感官鑒評(píng)評(píng)分最高,為94.88分;每兩個(gè)因素間的交互作用對(duì)飲料口感影響的大小為:蔗糖和檸檬酸>蜂蜜和檸檬酸>蜂蜜和蔗糖。
飲料多糖含量為6.4 mg/mL,其單糖組成為甘露糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖,葡萄糖含量最高,為282 579.42 mg/kg;飲料中含有鈣、鎂、鋅3種礦物質(zhì)元素,鎂元素含量最高,為160 mg/kg。氨基酸種類齊全,必需氨基酸與非必需氨基酸的比值為58.49%。