劉 晨，杜建軍，秦 雯，劉中華，楊 光，孫 平

（沈陽(yáng)沈化院測(cè)試技術(shù)有限公司安評(píng)中心 110000）

對(duì)家兔進(jìn)行灌胃給藥是藥理學(xué)或毒理學(xué)研究中常用的給藥方法。傳統(tǒng)方法一般將家兔直立位保定，用中間帶有小孔的開(kāi)口器固定于兔口腔中，將8號(hào)導(dǎo)尿管或胃管從小孔插入食道，完成給藥。但是該方法極易發(fā)生誤操作將藥物給入肺中，造成動(dòng)物肺部感染甚至死亡。在傳統(tǒng)方法的基礎(chǔ)上，不斷有科研工作者對(duì)其進(jìn)行改良完善。例如，根據(jù)家兔解剖學(xué)特點(diǎn)，家兔保定時(shí)將兔頭向腹側(cè)屈曲[1-2]，壓迫會(huì)厭軟骨關(guān)閉喉門(mén)，改用6號(hào)半硅膠管代替8號(hào)硅膠管[3]，從而提高插管準(zhǔn)確率與動(dòng)物順應(yīng)性。或者不使用開(kāi)口器，直接使用大鼠灌胃針，在動(dòng)物口腔中利用家兔自主吞咽進(jìn)行給藥[4-5]。然而，在實(shí)際工作中，進(jìn)行兔致畸實(shí)驗(yàn)采用經(jīng)口灌胃給藥時(shí)，由于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為孕兔，對(duì)動(dòng)物采用固定器或雙腿夾住兔髖骨進(jìn)行直立位保定時(shí)，容易造成動(dòng)物流產(chǎn)。如果不加以保定，動(dòng)物掙扎又極易蹬傷操作人員。并且在進(jìn)行農(nóng)藥化學(xué)品毒理學(xué)安全評(píng)價(jià)時(shí)，受試物往往存在一定刺激性氣味或者有存在腐蝕性的風(fēng)險(xiǎn)，所以受試物必須直達(dá)胃內(nèi)，利用家兔自主吞咽在口腔內(nèi)完成給藥不適用于實(shí)際工作中。因此本著安全、適用，高效的原則，本實(shí)驗(yàn)摸索出了一種家兔灌胃給藥新方法，以供廣大科研工作者參考。

家兔放入固定器中進(jìn)行固定，動(dòng)物軀體呈水平狀態(tài)，操作人員一手虎口捏住兔嘴，使動(dòng)物頭部保持水平或稍稍上揚(yáng)，一手將灌胃軟管（28cm×3mm）從兔門(mén)牙旁塞入口腔中，沿口腔上壁繼續(xù)推入20～25 cm，直至灌胃管到達(dá)胃內(nèi)，如圖（a）與（b）所示。插管過(guò)程要輕柔緩慢，并注意觀察動(dòng)物反應(yīng)，如果動(dòng)物劇烈掙扎或打噴嚏，立即拔出灌胃管，重新操作。插管完成后將留在口腔外的灌胃管放入清水中，無(wú)連續(xù)起泡產(chǎn)生，證明操作正確。連接好抽取藥液的注射器，進(jìn)行回抽，若注射器自動(dòng)回彈，說(shuō)明呈負(fù)壓狀態(tài)，證實(shí)在胃內(nèi)，推注藥液，完成給藥。

圖 家兔灌胃給藥操作

本方法優(yōu)勢(shì)在于使用固定器將動(dòng)物水平狀態(tài)固定，無(wú)需輔助人員，不使用開(kāi)口器，捏住兔嘴，直接延口腔上壁推入灌胃管，此過(guò)程如果操作正確，動(dòng)物不掙扎，順應(yīng)性良好，減少動(dòng)物應(yīng)激，更為符合動(dòng)物福利。實(shí)驗(yàn)選用200只日本大耳白孕兔（10個(gè)致畸實(shí)驗(yàn)的溶媒對(duì)照組）在其妊娠后第6d至第18d連續(xù)給藥13d，實(shí)驗(yàn)期間未出現(xiàn)因操作失誤造成的動(dòng)物死亡，給藥成功率達(dá)100%，平均灌胃速度為1.5min/只。

給藥過(guò)程中有以下幾點(diǎn)注意事項(xiàng)：一是軀體呈水平狀態(tài)固定后，用手捏住兔嘴使兔頭盡量保持水平或稍稍上揚(yáng)即可，不可將兔頭過(guò)于抬高，否則容易造成插管錯(cuò)誤。二是一定要將兔嘴捏緊，使之在插管過(guò)程中無(wú)法進(jìn)行咀嚼，以免咬斷灌胃管。三是經(jīng)解剖發(fā)現(xiàn)，家兔食管比氣管要細(xì)，所以在插管過(guò)程中存在一定阻力。如果插管過(guò)程非常順暢，插管15cm左右遇到較大阻力，動(dòng)物劇烈掙扎伴有打噴嚏癥狀，則說(shuō)明插管錯(cuò)誤，進(jìn)入了肺內(nèi)。四是3kg左右家兔，插管20～25cm才能保證灌胃管到達(dá)胃內(nèi)。插管成功后回抽注射器，阻力大，呈負(fù)壓狀態(tài)。插管過(guò)程動(dòng)作要輕柔，密切關(guān)注動(dòng)物反應(yīng)，為了保險(xiǎn)起見(jiàn)，可以在插管時(shí)就將灌胃管一端置于清水中，若有大氣泡產(chǎn)生則證明插管錯(cuò)誤。

本實(shí)驗(yàn)對(duì)家兔灌胃給藥方法進(jìn)行了優(yōu)化，體現(xiàn)了動(dòng)物福利中的“3R”原則，方法切實(shí)安全、高效，值得推廣。