TCT聯(lián)合HPV、P16檢測(cè)對(duì)早期宮頸癌病變?cè)\斷效能的影響

李瑞青（河南省安陽(yáng)市衛(wèi)生計(jì)生監(jiān)督局,河南 安陽(yáng) 455000）

宮頸癌為子宮陰道部或?qū)m頸管出現(xiàn)惡性腫瘤，目前發(fā)病機(jī)制尚未明確，我國(guó)宮頸癌發(fā)病及死亡人數(shù)約占全世界的1/3。相關(guān)研究表明，早期宮頸癌治愈率高達(dá)80%-90%，因此，及早發(fā)現(xiàn)、診斷對(duì)患者治療及防治具有重要意義[1]。宮頸液基薄層細(xì)胞學(xué)檢測(cè)（TCT）、人乳頭狀瘤病毒（HPV）檢測(cè)在宮頸癌檢測(cè)中具有重要價(jià)值，而P16蛋白免疫組化染色異常表達(dá)與HPV感染及宮頸癌均關(guān)系密切[2]。基于此，本研究探討TCT聯(lián)合HPV、P16檢測(cè)對(duì)早期宮頸癌病變?cè)\斷效能的影響，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我門(mén)診收治的324例疑似早期宮頸癌患者（2017年3月-2019年3月），年齡20-68歲，平均（43.16±9.10）歲。

1.2 納入及排除標(biāo)準(zhǔn) ①納入：均行TCT、HPV、P16檢查；均行陰道鏡下組織活檢；存在宮頸潰瘍、糜爛、接觸性出血等病情；簽署知情同意書(shū)。②排除：宮頸癌病史；子宮切除史；妊娠期婦女。

1.3 方法

1.3.1 TCT檢查 患者均禁止性生活、陰道塞藥，3d后先使用棉球清潔陰道，擦拭過(guò)多分泌物，再使用特制毛刷緊貼宮頸口與黏膜交界處，順同一方向旋轉(zhuǎn)5圈，采集毛刷上細(xì)胞置于保存液中備用。采用TCT檢測(cè)儀（寧波美生公司），嚴(yán)格按照操作說(shuō)明進(jìn)行制片。由本院2名經(jīng)驗(yàn)豐富婦科醫(yī)師按照國(guó)際癌癥協(xié)會(huì)制定的TBS分類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行診斷。其中陰性：正?；蜓装Y（NILM）；陽(yáng)性：意義不明非典型鱗狀細(xì)胞（ASC-US）、低密度鱗狀上皮內(nèi)瘤變（LSIL）、高度鱗狀上皮內(nèi)瘤變（HSIL）、鱗狀細(xì)胞癌（SCC）。剩余標(biāo)本置于-20℃冰箱中保存。

1.3.2 HPV檢查 取TCT樣本，采用美國(guó)Digene公司第二代雜交捕獲技術(shù)行HPV技術(shù)檢查，結(jié)果顯示標(biāo)本熒光度值（RLU）/陽(yáng)性定標(biāo)閾值（CO）≥1.0pg/ml即為陽(yáng)性。

1.3.3 P16免疫組化檢查 P16免疫組化使用鼠抗人單克隆抗體P16（上海酶聯(lián)生物研究所提供）與SP免疫組化試劑盒（上海研卉生物科技有限公司提供）檢測(cè)，將TCT、HPV檢測(cè)剩余標(biāo)本制成細(xì)胞薄片，經(jīng)95%乙醇固定30min、蒸餾水漂洗后，抗原熱修復(fù)。P16蛋白表達(dá)定位于細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞核，黃色或棕黃色染色為免疫組化陽(yáng)性檢出結(jié)果，后通過(guò)陽(yáng)性細(xì)胞占比及分布情況分級(jí)。細(xì)胞染色數(shù)為單個(gè)，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)＜5%為陰性；細(xì)胞染色數(shù)呈散狀或小細(xì)胞團(tuán)，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)5%-24%為弱陽(yáng)性；細(xì)胞染色數(shù)呈片狀或簇狀，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)25%-50%為陽(yáng)性；細(xì)胞染色數(shù)呈彌散性細(xì)胞著色，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)＞50%為強(qiáng)陽(yáng)性。

1.3.4 陰道鏡檢查與宮頸活檢 對(duì)患者宮頸疑似病變位置檢查，若鏡下無(wú)明顯病灶或圖像不滿意，可再取宮頸組織檢查，所有病理學(xué)檢查均由本院2名經(jīng)驗(yàn)豐富的病理醫(yī)生進(jìn)行診斷。

1.4 觀察指標(biāo) ①觀察TCT、HPV與陰道鏡活檢病理診斷情況。②對(duì)比P16蛋白表達(dá)與陰道鏡活檢病理診斷結(jié)果。③以陰道鏡活檢病理診斷結(jié)果為“金標(biāo)準(zhǔn)”，比較TCT、HPV、P16蛋白及三者聯(lián)合診斷宮頸癌病變準(zhǔn)確率、敏感性、特異度。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS22.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料以n（%）表示，χ2檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 TCT、HPV與病理檢查診斷情況 本組324例疑似早期宮頸癌患者經(jīng)陰道鏡活檢病理檢查陰性102例，陽(yáng)性222例（CIN Ⅰ 111例，CIN Ⅱ 82例，CIN Ⅲ 20例，SCC 9例）；TCT檢查真陰性89例，真陽(yáng)性（CIN Ⅰ、CIN Ⅱ、CIN Ⅲ、SCC）共157例；HPV檢查真陰性90例，真陽(yáng)性（CIN Ⅰ、CIN Ⅱ、CIN Ⅲ、SCC）共163例，見(jiàn)表1。

表1 TCT、HPV與病理檢查診斷情況

2.2 P16蛋白表達(dá)與陰道鏡活檢病理診斷結(jié)果 P16蛋白表達(dá)檢查真陰性92例，真陽(yáng)性129例（弱陽(yáng)性、陽(yáng)性、強(qiáng)陽(yáng)性CIN Ⅰ、CIN Ⅱ、CIN Ⅲ、SCC），見(jiàn)表2。

表2 P16蛋白表達(dá)與陰道鏡活檢病理診斷結(jié)果

2.3 診斷效能 TCT+HPV+P16診斷早期宮頸癌準(zhǔn)確率93.21%、敏感性96.85%高于TCT的75.93%、70.72%，HPV的78.09%、73.42%，P16的68.21%、58.11%（P＜0.05）；TCT+HPV+P16診斷早期宮頸癌特異度85.29%與TCT的87.25%、HPV的88.24%、P16的90.20%比較，差異不顯著（P＞0.05），見(jiàn)表3。

表3 不同檢查方式的診斷效能比較(%)

3 討論

宮頸癌為常見(jiàn)惡性腫瘤，其死亡率居于我國(guó)女性癌癥第2位，嚴(yán)重影響人們生活質(zhì)量，宮頸癌為漸進(jìn)性癌前病變過(guò)程，因此及早診斷、早治療對(duì)提高患者治愈率尤為重要[3]。

TCT為典型宮頸癌細(xì)胞學(xué)檢測(cè)技術(shù)，具有無(wú)創(chuàng)、迅速等特點(diǎn)，相較于病理活檢等有創(chuàng)檢查，更易被患者接受。然而，據(jù)相關(guān)研究統(tǒng)計(jì)，TCT檢測(cè)宮頸癌及癌變情況準(zhǔn)確率僅51%，與病理活檢結(jié)果檢測(cè)準(zhǔn)確率70%-80%存在差異[4]。本研究結(jié)果顯示，TCT檢測(cè)早期宮頸癌準(zhǔn)確率75.93%、敏感性70.72%，與上述結(jié)果一致?？赡芤騎CT屬形態(tài)學(xué)檢查，雖能有效分辨不同時(shí)期宮頸癌，但易受取樣、制片、染色及醫(yī)師閱片水平等主觀因素影響，且由于宮頸癌屬多中心病變，僅采用TCT篩查則易降低檢測(cè)準(zhǔn)確率、敏感性，導(dǎo)致漏診、誤診率較高。HPV為宮頸癌病變主要病原體，因此采用HPV檢測(cè)早期宮頸癌病變?yōu)橛行ШY查方式。本研究結(jié)果顯示，HPV檢測(cè)早期宮頸癌準(zhǔn)確率78.09%，敏感性73.42%?，F(xiàn)代分子生物學(xué)研究表明，高危型HPV檢測(cè)宮頸癌病變較為敏感，但僅高危型HPV持續(xù)性感染才可導(dǎo)致宮頸癌及病變情況發(fā)生，且多數(shù)患者為一過(guò)性感染，與宮頸癌關(guān)聯(lián)性較弱，因此，HPV單獨(dú)檢測(cè)早期宮頸癌具有一定局限性，尚不能應(yīng)用于初篩工作中[5]。P16基因?yàn)镹K4家族重要成員，其編碼產(chǎn)物為P16蛋白，而P16基因突變?cè)谠S多腫瘤產(chǎn)生、發(fā)展中起重要作用，相關(guān)研究報(bào)道，P16表達(dá)陽(yáng)性率可伴隨病變程度增加而升高，表達(dá)強(qiáng)度也呈逐漸遞增式，因此，P16可作為診斷宮頸癌前病變及宮頸癌的重要指標(biāo)[6-9]。本研究結(jié)果顯示，P16檢測(cè)早期宮頸癌準(zhǔn)確率68.21%、敏感性58.11%，可見(jiàn)伴隨病變程度增加，P16陽(yáng)性表達(dá)率逐漸升高。相對(duì)于單種方式診斷而言，TCT+HPV+P16聯(lián)合診斷早期宮頸癌準(zhǔn)確率93.21%、96.85%高于單一診斷，三者聯(lián)合可有效提高檢測(cè)準(zhǔn)確率、敏感性，取長(zhǎng)補(bǔ)短，利于及早制定治療措施。

綜上所述，TCT聯(lián)合HPV、P16蛋白免疫組化利于提高臨床篩查早期宮頸癌準(zhǔn)確率、敏感性，可有效降低漏診情況發(fā)生，有助于早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療宮頸病變，具有較高臨床價(jià)值，值得臨床應(yīng)用推廣。