陳家锃/天津瑞普生物技術(shù)股份有限公司
筆者在養(yǎng)豬一線走訪中發(fā)現(xiàn),豬場(chǎng)在非洲豬瘟防控中存在諸多消毒問題,比如要么過度或者無(wú)效,究其原因是對(duì)消毒作用機(jī)理的認(rèn)知不足。筆者撰寫此文,旨在希望大家盡快走出或避免進(jìn)入消毒誤區(qū),同時(shí)為豬場(chǎng)制定科學(xué)消毒程序提供一些參考。
消毒主要分為物理和化學(xué)兩種方式。物理消毒指用熱蒸汽、紫外線、過濾和超聲波等物理方式對(duì)病原微生物進(jìn)行殺滅;化學(xué)消毒指通過消毒劑與病原體發(fā)生化學(xué)反應(yīng)從而殺滅病原微生物。
無(wú)論是物理還是化學(xué)消毒,其消毒效果都受多重因素影響,任何消毒條件的缺失都有可能進(jìn)入消毒誤區(qū)。化學(xué)消毒最為常用和普遍,本篇文章重點(diǎn)論述化學(xué)消毒存在的誤區(qū)。
化學(xué)消毒,消毒劑與病原體需發(fā)生化學(xué)反應(yīng),其反應(yīng)過程必然受環(huán)境溫度、配比濃度、作用時(shí)間和溶劑性質(zhì)等條件影響,這些條件決定了消毒劑的適用范圍。
1.1 從消毒劑作用機(jī)理講,有七大因素會(huì)影響消毒效果
1.1.1 消毒劑的濃度消毒劑對(duì)于適用的病原微生物都有最小殺滅濃度,多種消毒劑是濃度越大殺滅效果越好,但并不是所有的消毒劑都是這樣,有些濃度高了消毒效果反而下降。比如戊二醛或過硫酸氫鉀復(fù)合物粉類消毒劑濃度越高消毒效果越好,而福爾馬林和乙醇則不然,甲醛含量為20%時(shí)的福爾馬林固定效果最好,乙醇濃度在75%時(shí)殺菌效果最好,因?yàn)榇祟愊緞┻^高的濃度可導(dǎo)致其緩沖液不能達(dá)到最佳的作用條件,反而出現(xiàn)降低作用效果的情況,所以此類消毒劑濃度并不是濃度越高消毒效果越好。
消毒劑的作用機(jī)理,決定了每種消毒劑對(duì)于適用病原體都存在最適的殺滅濃度,不適的濃度會(huì)影響消毒效果。
1.1.2 消毒作用時(shí)間無(wú)論哪種消毒劑,在有效殺滅濃度下都有最短殺滅時(shí)間,消毒作用時(shí)間必須等于或大于最短殺滅時(shí)間才能達(dá)到殺滅病原微生物的目的。比如殺滅非洲豬瘟病毒,哈獸研測(cè)得的數(shù)據(jù)是20ppm 的臭氧水最短殺滅時(shí)間是10min;1:800 的復(fù)合過硫酸氫鉀溶液最短殺滅時(shí)間是30min;1:200 的復(fù)方戊二醛苯扎溴銨溶液最短殺滅時(shí)間是30min 等。
除了強(qiáng)酸和強(qiáng)堿之外,大多數(shù)消毒劑所需的消毒時(shí)間是較長(zhǎng)的,如酚類、醇類、醛類等都需要30分鐘以上的消毒時(shí)間,氧化類、含氯類也需要一定的消毒時(shí)間。
消毒劑的作用機(jī)理,決定了每種消毒劑對(duì)于適用病原體,在其殺滅濃度范圍都有最短殺滅時(shí)間,作用時(shí)間低于最短殺滅時(shí)間是無(wú)法殺滅病原體,嚴(yán)重影響殺滅效果。
1.1.3 消毒環(huán)境溫度每種消毒劑同樣存在最適消毒溫度,低于和高于最適溫度都會(huì)影響消毒效果。比如戊二醛,環(huán)境溫度低于20℃時(shí)消毒效果逐漸下降,這類消毒劑溫度高會(huì)提升消毒效果;比如臭氧,環(huán)境溫度高于42℃時(shí)臭氧會(huì)加速分解,氯制劑同樣受環(huán)境溫度影響,溫度越高用于殺滅病原體的氯揮發(fā)越快,殺毒效果也隨之降低,這類消毒劑溫度升高會(huì)降低消毒效果。
消毒劑的作用機(jī)理,決定了每種消毒劑的最適作用溫度,消毒環(huán)境溫度低于或高于最適溫度時(shí)會(huì)影響消毒效果。
1.1.4 消毒溶劑的性質(zhì)消毒最常用的溶劑就是水,而各地稀釋用水的pH 存在一定差異,稀釋用水pH 變化會(huì)影響消毒劑的電離度或打破絡(luò)合平衡。
pH 偏高的堿性水會(huì)打破碘酸平衡,提升氯制劑、復(fù)合過硫酸氫鉀、有機(jī)酸等酸性的消毒液的pH,導(dǎo)致消毒效果下降;
pH 偏低的酸性水,會(huì)降低燒堿、戊二醛(戊二醛最適pH7.5~8.5)類需要堿性環(huán)境起消毒作用的消毒劑殺滅效果。
我們需要了解每種消毒劑對(duì)溶劑最適pH,特別是最適溶劑pH 范圍比較窄的消毒劑,需要對(duì)溶劑進(jìn)行預(yù)處理,進(jìn)行pH 測(cè)試并調(diào)配至最適pH。比如稀釋過硫酸氫鉀復(fù)合物粉時(shí),需對(duì)堿性的消毒稀釋用水過濾堿性顆粒物;當(dāng)稀釋用水呈酸性時(shí),稀釋泡沫清洗劑或戊二醛時(shí)可適當(dāng)加入碳酸氫鈉調(diào)節(jié)稀釋用水的pH 值,以達(dá)到最佳殺滅條件。而堿性稀釋用水對(duì)戊二醛消毒效果影響不大。
1.1.5 有機(jī)物的干擾氧化類、氯制劑、醛制劑都會(huì)受到有機(jī)物(油脂、蛋白等)的干擾,包括常用的過硫酸氫鉀復(fù)合粉也會(huì)受到干擾。因?yàn)橛袡C(jī)物會(huì)作為底物與此類消毒劑發(fā)生反應(yīng),從而會(huì)使消毒劑效果降低,嚴(yán)重者甚至失效。
1.1.6 硬水的影響硬水中含有可溶性固體或過高的鈣、鎂離子等,這些物質(zhì)可與部分消毒劑的有效成分發(fā)生絡(luò)合或螯合反應(yīng),從而降低了消毒劑的殺滅效果。比如當(dāng)有機(jī)酸遇到來(lái)自喀斯特地貌的硬水時(shí),可以生成沉淀并降低殺滅效果。
1.1.7 拮抗作用多種消毒劑之間存在拮抗作用,他們聯(lián)用或混合時(shí)會(huì)降低殺滅效果,最常見的就是堿性和酸性消毒劑之間的拮抗現(xiàn)象。比如在日常消毒操作中,由于沖洗不徹底導(dǎo)致相鄰環(huán)節(jié)中存在拮抗作用兩種消毒劑發(fā)生相互干擾,降低了本環(huán)節(jié)的消毒效果。因此要重視存在拮抗作用兩個(gè)環(huán)節(jié)之間的沖洗和瀝水操作,以求避免或降低消毒劑之間的拮抗現(xiàn)象出現(xiàn)。
表1 化學(xué)類消毒劑的作用機(jī)制
消毒劑按消毒譜又可分為低效、中效和高效消毒劑。高效消毒劑是指可殺滅一切病原體的消毒劑;中效消毒劑是指能殺滅分枝桿菌、真菌、病毒和細(xì)菌繁殖體等微生物的消毒劑;低效消毒劑是指只能殺滅細(xì)菌繁殖體和親脂病毒的消毒劑。其優(yōu)劣勢(shì)見表2。
表2 不同消毒劑的優(yōu)劣勢(shì)分析
由于細(xì)菌和病毒主要成分是蛋白和脂質(zhì)等有機(jī)成分,對(duì)于有機(jī)質(zhì)敏感的氧化劑類、鹵素類、氯制劑、醛制劑類等消毒劑而言都能起殺滅病毒和細(xì)菌的作用,因此上述消毒劑均屬于高效消毒劑。季銨鹽的消毒機(jī)理是改變細(xì)胞膜的通透性,繼而發(fā)生溶胞作用,引起細(xì)胞溶解或壞死。因此對(duì)細(xì)菌更有效,對(duì)病毒相對(duì)較差,屬于低效消毒劑。
在設(shè)計(jì)消毒程序時(shí),不僅要考慮滅活病毒,也要?dú)缂?xì)菌,就需要不同功能的消毒劑聯(lián)合使用。
知曉消毒劑作用機(jī)理才能對(duì)消毒程序進(jìn)行科學(xué)設(shè)計(jì),避免造成消毒誤區(qū)出現(xiàn)。
2.1 誤區(qū)一:以殺滅細(xì)菌作為消毒評(píng)價(jià)指標(biāo)從表1 可以了解到,季銨鹽類的作用機(jī)理是改變細(xì)菌外膜的通透性,使細(xì)菌失水而死亡。因此季銨鹽、表面活性劑類消毒劑對(duì)細(xì)菌更高效,但這種作用機(jī)制對(duì)囊膜病毒的效果較差。由于細(xì)菌和病毒是兩類不同的微生物,其殺滅機(jī)制也是不同的。在評(píng)估消毒劑時(shí)以細(xì)菌作為底物評(píng)價(jià)消毒劑的優(yōu)劣,并不適用于病毒。比如過硫酸氫鉀復(fù)合粉殺滅細(xì)菌的效力低,當(dāng)其對(duì)比測(cè)試的消毒劑中存在季銨鹽類等低效消毒劑成分時(shí),往往會(huì)導(dǎo)致消毒劑評(píng)價(jià)結(jié)果失真。
2.2 誤區(qū)二:使用不可降解核酸的消毒劑,卻以PCR 檢測(cè)作為效果評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)過氧化物(如過氧乙酸)、含氯消毒劑(如次氯酸、二氧化氯)可與核酸發(fā)生氧化還原反應(yīng),降解核酸;火堿、堿性的泡沫清洗劑也可以與病毒核酸發(fā)生中和作用從而降解核酸。戊二醛、酚制劑等消毒劑只能固定病原體的蛋白,但卻無(wú)法降解核酸,反而使用戊二醛后有可能使核酸降解更慢(因?yàn)榭諝庵泻薪到夂怂岬腄NA 酶,酶也是蛋白質(zhì),醛制劑可以使這些核酸酶失活,從而影響自然環(huán)境下核酸降解)。
注:在降解核酸方面,次氯酸的效果優(yōu)于過硫酸氫鉀復(fù)合粉,過硫酸氫鉀復(fù)合物粉的效果優(yōu)于火堿。降解核酸需要時(shí)間,上述制劑可以短時(shí)間將核酸裂解為小段(此時(shí)病毒已經(jīng)失活),若降解成不能被熒光定量PCR 檢測(cè)到的小片段(<100bp)需要幾個(gè)小時(shí)的時(shí)間,一般建議消毒12h 后再進(jìn)行采樣檢測(cè)。
2.3 誤區(qū)三:未經(jīng)充分清洗或無(wú)法洗凈情況下混用酸性和堿性消毒劑
在常見的洗消程序中,室內(nèi)消毒前會(huì)用火堿浸潤(rùn),然后再用過硫酸氫鉀復(fù)合物粉消毒。雖然操作過程有沖洗環(huán)節(jié),但實(shí)際上滲入墻壁縫隙中的堿水很難被沖洗干凈,當(dāng)再用酸性的過硫酸氫鉀復(fù)合粉消毒時(shí),消毒劑難免在一定程度被堿中和,而沒有發(fā)揮應(yīng)有的消毒作用。這種現(xiàn)象屢見不鮮,解決辦法就是充分沖洗并做pH 類殘留監(jiān)測(cè),盡量避免或減少酸堿混用等拮抗情況出現(xiàn)。
2.4 誤區(qū)四:不去污、不瀝水除了有機(jī)酸和堿(堿會(huì)受到血清影響,但不受油污影響)外,絕大多數(shù)消毒劑都會(huì)受到油污的干擾。油脂包裹后的病毒除了能顯著延長(zhǎng)病毒的存活時(shí)間外,也會(huì)讓氧化類消毒劑先與油脂發(fā)生氧化還原反應(yīng),從而在作用時(shí)間內(nèi)不能殺滅病毒。
不瀝水,除了有可能會(huì)導(dǎo)致洗消程序中相鄰環(huán)節(jié)消毒劑拮抗問題的出現(xiàn),也會(huì)使消毒劑濃度降低,從而降低殺滅效果。瀝水不足,影響最大的是烘干環(huán)節(jié)(導(dǎo)致烘干時(shí)水分蒸發(fā),由于水的熱熔比高,降低了烘干房的升溫速度,從而縮短了達(dá)到殺滅溫度的作用時(shí)間,導(dǎo)致烘干消毒效果降低或失?。?。
2.5 誤區(qū)五:水質(zhì)差,影響消毒效果堿性水質(zhì)會(huì)影響酸性消毒劑作用外,水中溶解性固體總量(TDS)也會(huì)消耗酸性消毒劑的有效成分。比較常見的是,鹽堿地的地下水堿性較高或含鹵素較高時(shí),會(huì)影響過硫酸氫鉀復(fù)合物粉的效果。戊二醛最適作用pH 是7.5~8.5,用自來(lái)水(往往偏酸性)配置戊二醛消毒劑需要測(cè)定并調(diào)節(jié)(加入碳酸氫鈉)pH。
除了水質(zhì)之外,比較常見的還有作用時(shí)間不足,如車體上噴灑戊二醛,在晴天時(shí)很快即揮發(fā),達(dá)不到30min 的有效作用時(shí)間。
2.6 誤區(qū)六:不考慮消毒劑的時(shí)效性過氧乙酸需要現(xiàn)用現(xiàn)配,火堿也需現(xiàn)用現(xiàn)配,稀釋后長(zhǎng)時(shí)間存放的火堿會(huì)與空氣中的二氧化碳生成碳酸氫鈉,從而失去殺菌能力。
此外過硫酸氫鉀復(fù)合物粉,也不是稀釋后馬上就能使用的。遇水后過硫酸氫鉀復(fù)合物粉會(huì)發(fā)生鏈?zhǔn)窖h(huán)反應(yīng),室溫下需要至少10min 后,才能發(fā)揮其消毒作用。
2.7 誤區(qū)七:不關(guān)注消毒劑的有效濃度及其殘留無(wú)論用漂白粉處理水源還是用含氯類消毒劑處理蔬菜,都需要使水中的有效氯含量少于1ppm 后,才能飲用或食用,否則會(huì)引起豬只和人員的消化道問題,建議豬場(chǎng)購(gòu)買余氯計(jì),測(cè)定每種程序的消毒劑殘留的安全周期。
臭氧消毒需要達(dá)到20ppm 后才有效,建議豬場(chǎng)購(gòu)買臭氧濃度儀測(cè)定熏蒸間的最低點(diǎn)臭氧濃度(往往最高處是臭氧濃度最低點(diǎn))。由于臭氧密度大,加裝風(fēng)扇和加濕器有利于臭氧進(jìn)行物品的表面消毒。
3.1 堿性消毒劑(火堿、生石灰和泡沫清洗劑)適用于室外消毒,不適用于豬舍內(nèi)部消毒堿類物質(zhì)用于室外消毒有幾大優(yōu)點(diǎn):(1)廣譜,不僅對(duì)病毒和細(xì)菌都有效,對(duì)芽孢和寄生蟲卵也有效;(2)殺毒迅速,幾分鐘內(nèi)可殺滅非洲豬瘟病毒;(3)受溫度影響較小?;饓A不適用于室內(nèi)消毒的原因?yàn)椋海?)強(qiáng)腐蝕性,對(duì)電子元器件也有很大的腐蝕;(2)可能造成酸堿混用;(3)清洗不干凈時(shí),對(duì)豬可能會(huì)產(chǎn)生嚴(yán)重灼傷。
3.2 復(fù)方戊二醛可用于豬舍內(nèi)空舍消毒,但不適用室外消毒復(fù)方戊二醛結(jié)合了季銨鹽和戊二醛的優(yōu)勢(shì),季銨鹽的正電子會(huì)聚集到病原體表面,改變病原體的通透性,從而使戊二醛更快地固定病原體內(nèi)膜中的蛋白,效果更佳。復(fù)方戊二醛室內(nèi)消毒的優(yōu)勢(shì)在于:(1)室內(nèi)溫度條件相對(duì)可控,利于發(fā)揮消毒作用;(2)對(duì)細(xì)菌和病毒均有效;(3)腐蝕性小,有利于保護(hù)舍內(nèi)設(shè)備尤其是電子元器件;(4)性價(jià)比高。
3.3 過硫酸氫鉀復(fù)合物粉+有機(jī)酸可用于緊急情況下的帶豬消毒過硫酸氫鉀復(fù)合物粉+有機(jī)酸對(duì)于豬的影響相對(duì)較小,并且二者都是酸性物質(zhì),無(wú)拮抗作用,受有機(jī)物干擾小,可用于帶豬消毒和舍內(nèi)除塵。此外,過硫酸氫鉀復(fù)合物粉和機(jī)酸同樣適用于對(duì)蔬菜和豬場(chǎng)水線的消毒。
3.4 物品可用臭氧熏蒸或放置處理對(duì)于進(jìn)場(chǎng)物資用臭氧熏蒸是可靠的消毒方式,臭氧具有強(qiáng)氧化作用,在濕度>60%時(shí),臭氧濃度達(dá)到20ppm 時(shí)并維持1h,對(duì)空間內(nèi)的物品具有廣泛、并可靠的消殺效果,可用于物資的表面消毒和個(gè)人物品的全方位消毒。
物品在室溫下放置5d,病毒可自然失活(數(shù)據(jù)源自2015年文獻(xiàn)《Survival of African Swine Fever Virus in Excretions from Pigs Experimentally Infected with the Georgia 2007/1 Isolate》,翻譯內(nèi)容見表3)。對(duì)于不便于徹底消毒的物品如飼料可建設(shè)恒溫的儲(chǔ)存室,經(jīng)放置后物資的風(fēng)險(xiǎn)也可大大降低。
表3 非洲豬瘟病毒的存活時(shí)間
通過查閱非洲豬瘟相關(guān)文獻(xiàn),非洲豬瘟病毒并沒有我們想象的那么可怕,比如說在21℃時(shí)糞便和尿液中的病毒,不經(jīng)過任何消毒措施病毒可以在5.1d 內(nèi)完全失活。因此,在掌握非洲豬瘟病原學(xué)特性的基礎(chǔ)上,我們不但需要熟知消毒劑的作用機(jī)理,也需要關(guān)注環(huán)境溫度、配比濃度、作用時(shí)間、稀釋用水等作用條件對(duì)消毒劑消毒效果的影響,如此才能做好生物安全、防控好非洲豬瘟。
專家點(diǎn)評(píng):在養(yǎng)豬一線生產(chǎn)中,多數(shù)豬場(chǎng)經(jīng)常將生物安全和消毒混為一談,認(rèn)為生物安全就是消毒,消毒就是在做生物安全,究其原因還是防控認(rèn)知出了問題!
非洲豬瘟防控,我們不但需要提高認(rèn)知,明確消毒與生物安全的辯證關(guān)系,更要熟知消毒劑正確使用方法,唯有如此才有可能獲得防控成功。
雖然消毒只是生物安全系統(tǒng)防控的一個(gè)點(diǎn),但是在生物安全防控中承擔(dān)著畫龍點(diǎn)睛的作用,其操作是否科學(xué)和規(guī)范,直接影響著防控結(jié)果走向。
在非洲豬瘟防控中,由于病毒看不見、摸不著,多數(shù)豬場(chǎng)消毒又缺乏操作標(biāo)準(zhǔn)和驗(yàn)證方法,導(dǎo)致消毒劑使用存在過度或無(wú)效等種種誤操作情況,嚴(yán)重影響了豬場(chǎng)的非洲豬瘟防控。