pH、氨氮和亞硝酸鹽對(duì)單環(huán)刺螠稚螠耗氧率和排氨率的影響

張賽賽，董美艷，田斌，孫陽，陳穎，周竹君，宋曉陽，楊婷婷，劉彤，陳文博

（1.大連市現(xiàn)代農(nóng)業(yè)生產(chǎn)發(fā)展服務(wù)中心，遼寧 大連 116023；2.瓦房店市漁業(yè)事務(wù)服務(wù)中心，遼寧 瓦房店 116300）

單環(huán)刺螠Urechis unicinctus 俗稱海腸，屬螠蟲動(dòng)物門Echiuroide、螠綱Echiuride、無管螠目Xenopneusta、刺螠科Urechidae[1]，分布范圍較廣，如俄羅斯、日本、朝鮮和我國(guó)的環(huán)渤海沿岸，主要生活在泥沙岸潮間帶下區(qū)及潮下帶淺水區(qū)，主要濾食水中有機(jī)質(zhì)和浮游生物。單環(huán)刺螠口感鮮美，營(yíng)養(yǎng)和藥用價(jià)值高，價(jià)格不斷攀升，成為我國(guó)北方新興的海水養(yǎng)殖種類。近年來，野生單環(huán)刺螠資源明顯下降，人工繁育應(yīng)運(yùn)而生，相關(guān)研究日漸增多。目前對(duì)單環(huán)刺螠的人工繁育技術(shù)[2]、營(yíng)養(yǎng)成分[3]、基礎(chǔ)生物學(xué)[4,5]和分子生物學(xué)[6,7]等已有較多研究。

耗氧率和排氨率是生物能量代謝的主要指標(biāo)，能夠反映養(yǎng)殖生物對(duì)環(huán)境的適應(yīng)性和養(yǎng)殖特性，為人工養(yǎng)殖和生態(tài)學(xué)研究提供重要的數(shù)據(jù)支持。水生生物能量代謝受內(nèi)外兩方面因素的影響，即種類、規(guī)格、發(fā)育階段等生物自身因素和光照、溫度、鹽度、pH 等外部環(huán)境因素[8]。張志峰等[9]研究了不同硫化物濃度下單環(huán)刺螠的呼吸代謝酶類活性的變化；王愛敏等研究了不同氨氮濃度及鹽度下單環(huán)刺螠的耗氧率[10]；孫濤等研究了不同pH 下單環(huán)刺螠耗氧率和排氨率的變化[11]。但是，單環(huán)刺螠在pH 和氨氮脅迫下呼吸排泄、規(guī)格和氨氮濃度的影響等還有待完善。本研究采用靜水密封法，探討了6 個(gè)pH梯度、5 個(gè)氨氮和亞硝酸鹽濃度下體質(zhì)量（1.52±0.12）g 的單環(huán)刺螠呼吸代謝的適應(yīng)情況，并為工廠化養(yǎng)殖環(huán)境的管理提供數(shù)據(jù)參考。

1 材料和方法

1.1 材料

試驗(yàn)用單環(huán)刺螠系人工繁育培養(yǎng)，帶水運(yùn)輸?shù)綄?shí)驗(yàn)室暫養(yǎng)在底部鋪細(xì)沙的50 L 塑料方槽內(nèi)。一周暫養(yǎng)期間，每天上午投喂一次，下午換水1/2，細(xì)沙上方懸掛氣石，保持溶氧充足。

暫養(yǎng)用海水為經(jīng)沉淀、砂濾的潔凈自然海水，水溫14.5～17.0℃，鹽度32.17～32.28，pH7.88～8.15，氨氮1.058×10-2～4.338×10-2mg/L，亞硝酸鹽1.68×10-3～2.79×10-3mg/L，符合海水水質(zhì)一類標(biāo)準(zhǔn)。

1.2 方法

實(shí)驗(yàn)用容積500 mL 瓶子，每瓶4 只單環(huán)刺螠，采用靜水密封法測(cè)量生物呼吸，1 個(gè)空白對(duì)照組和3 個(gè)實(shí)驗(yàn)組。實(shí)驗(yàn)處理3 h，開始前后按標(biāo)準(zhǔn)操作取水樣。采用《海洋監(jiān)測(cè)規(guī)范第4 部分：海水分析GB17378.4-2007》碘量法和次溴酸鈉氧化法測(cè)定耗氧率和排氨率。

實(shí)驗(yàn)用NaOH 和HCL 溶液調(diào)配，設(shè)5 個(gè)pH 梯度（6、7、8、9、10），以相隔10 min 測(cè)量?jī)纱谓Y(jié)果不超過0.05 為穩(wěn)定pH。暫養(yǎng)1 周后，對(duì)單環(huán)刺螠稚螠進(jìn)行pH 馴化后開始實(shí)驗(yàn)。根據(jù)自然海水和工廠化養(yǎng)殖中可能出現(xiàn)的氨氮和亞硝酸鹽濃度設(shè)置梯度，使用氯化銨和亞硝酸鈉配置的100 g/L 母液配置相應(yīng)濃度海水后，根據(jù)實(shí)測(cè)濃度為準(zhǔn)，設(shè)氨氮濃度0.0699 mg/L、0.0736 mg/L、0.1560 mg/L、0.6150 mg/L 和1.0200 mg/L，亞硝酸鹽濃度0.0198 mg/L、0.0256 mg/L、0.0502 mg/L、0.0738 mg/L 和0.4960 mg/L。每個(gè)梯度設(shè)置三個(gè)平行和一個(gè)空白對(duì)照組。

實(shí)驗(yàn)設(shè)置持續(xù)5 h 的耗氧率變化。設(shè)置五個(gè)實(shí)驗(yàn)組，每組三個(gè)平行，均使用正常海水，每瓶放置4只單環(huán)刺螠，同時(shí)開始實(shí)驗(yàn)，隔1 h 結(jié)束一組，測(cè)定實(shí)驗(yàn)前后水樣中的溶解氧量，計(jì)算單環(huán)刺螠耗氧率。

1.3 數(shù)據(jù)計(jì)算與處理

采用下式計(jì)算耗氧量、耗氧率和排氨量、排氨率：

式中：DO0、DOt分別為實(shí)驗(yàn)組起始和t 時(shí)的溶解氧量（mg/L）；C0、Ct分別為空白對(duì)照組始、末溶氧量（mg/L）；V 為呼吸瓶體積，0.5 L；m 為單環(huán)刺螠的體質(zhì)量（g）；t 為實(shí)驗(yàn)持續(xù)時(shí)間（h）。

RNN是單位體質(zhì)量排氨量[mg/（g·h）]；N0、Nt表示實(shí)驗(yàn)組始、末氨氮含量（mg/L）；CN0、CNt分別為空白對(duì)照組始末氨氮含量（mg/L）。

氧氮比O/N=R00/RNN，單環(huán)刺螠耗氧與排氨的克原子比值[12]。

能量代謝率M=QOX·OR，式中M 為單環(huán)刺螠單位質(zhì)量的能量代謝率[J/（g·h）]，為氧卡系數(shù)，其值采用13.54 J/mg[11]。

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行ANOVO-單因素方差分析；組間差異用Duncan 法作多重比較；顯著水平設(shè)置為P＜0.05。

2 結(jié)果與分析

2.1 溶解氧量對(duì)單環(huán)刺螠代謝的影響

單環(huán)刺螠在密封呼吸瓶中的耗氧量和耗氧率隨時(shí)間的變化見圖1。由圖1 可知：耗氧量和耗氧率隨時(shí)間的延長(zhǎng)而逐漸減少，在前2 h 內(nèi)，耗氧量和耗氧率緩慢降低，第2～4 h 內(nèi)，耗氧量和耗氧率快速下降，第4 h 以后，耗氧量和耗氧率下降變化不明顯，達(dá)到最低值。第1～2 h 的耗氧率差異不顯著（P＞0.05），顯著高于第3 h、4 h、5 h 的耗氧率（P＜0.05），后兩者差異不顯著（P＞0.05），顯著低于第3 h（P＜0.05）。

圖1 單環(huán)刺螠耗氧率隨時(shí)間的變化Fig.1 Changes in oxygen consumption rate of echiuran worm with the time

隨時(shí)間延長(zhǎng)呼吸瓶中氧濃度下降，能量代謝率與耗氧量和耗氧率變化規(guī)律有相似的結(jié)果，即隨時(shí)間的增加，能量代謝率總體下降。第1 h 和第2 h、第4 h 和第5 h 的能量代謝率差異不顯著（P＞0.05）。第1 h 和第2 h 的能量代謝率顯著高于第3 h、4 h 和5 h（P＜0.05）；第3 h 顯著高于第1 h 和第5 h（P＜0.05）（圖2）。

圖2 單環(huán)刺螠能量代謝率隨時(shí)間的變化規(guī)律Fig.2 Changes in energy metabolism rate of echiuran worm with the time

2.2 pH 變化對(duì)單環(huán)刺螠代謝的影響

pH 對(duì)單環(huán)刺螠耗氧量和耗氧率的影響見圖3。由圖3 可知，隨著pH 升高，耗氧量和耗氧率先升高后降低。當(dāng)pH 為8 時(shí)，耗氧量和耗氧率達(dá)到峰值，顯著高于pH 為6、7、10（P＜0.05）；pH 為6 時(shí)耗氧率顯著小于pH 為8、9 時(shí)（P＜0.05）；pH 為7、9、10 時(shí)，耗氧率差異不顯著（P＞0.05）。回歸分析顯示，單環(huán)刺螠pH 和耗氧率兩者呈二次多項(xiàng)式關(guān)系：Y=-0.008X2+0.0543X-0.0141（R2=0.8833，X=pH，Y=耗氧率）。

圖3 pH 對(duì)單環(huán)刺螠耗氧量和耗氧率的影響Fig.3 Effects of pH on oxygen consumption and oxygen consumption rate of echiuran worm

pH 對(duì)單環(huán)刺螠排氨量和排氨率的影響見圖4。由圖4 可知，排氨量和排氨率呈先升高后降低的趨勢(shì)。當(dāng)pH 超過7 時(shí)，排氨量和排氨率顯著減小（P＜0.05）。單環(huán)刺螠排氨率與pH 的回歸方程為二次多項(xiàng) 式：Y=-0.0002X2+0.0005X+0.0081（R2=0.6287，X表示pH，Y 表示排氨率）。

圖4 pH 對(duì)單環(huán)刺螠排氨量和排氨率的影響Fig.4 Effects of pH value on amount and rate of ammonia excretion of echiuran worm

pH 對(duì)單環(huán)刺螠氧氮比（O/N）和能量代謝率的影響見圖5 和圖6。由圖5 和圖6 可知，氧氮比和能量代謝率呈明顯的先升高后降低趨勢(shì)，當(dāng)pH=8 時(shí)，氧氮比和能量代謝率均達(dá)最大值（P＜0.05）。

圖5 不同pH 下單環(huán)刺螠的氧氮比Fig.5 The oxygen nitrogen ratio（O/N）of echiuran worm exposed to various pH values

圖6 不同pH 下單環(huán)刺螠的能量代謝率Fig.6 The energy metabolic rate of echiuran worm exposed to various pH values

2.3 氨氮含量的變化對(duì)單環(huán)刺螠代謝的影響

由圖7 可知：隨著氨氮濃度的升高，單環(huán)刺螠的耗氧量和耗氧率先下降后趨平穩(wěn)（圖7）。氨氮為0.0699 mg/L 時(shí)，耗氧量和耗氧率最高，分別為0.6700 mg/h 和0.1100 mg/g·h。氨氮為0.0736～1.0200 mg/L時(shí)，耗氧率之間無顯著差異（P＞0.05）。對(duì)單環(huán)刺螠氨氮濃度和耗氧率的回歸關(guān)系呈冪函數(shù)：Y=0.1101X-0.487（R2=0.7153，X 為氨氮濃度，Y 為耗氧率）。

圖7 氨氮對(duì)單環(huán)刺螠耗氧量和耗氧率的影響Fig.7 Effects of ammonia nitrogen on oxygen consumption and oxygen consumption rate of echiuran worm

氨氮對(duì)單環(huán)刺螠排氨量和排氨率的影響見圖8。在氨氮為0.0699～1.0200 mg/L 時(shí)，各組單環(huán)刺螠的排氨率沒有顯著差異（P＞0.05）。

圖8 氨氮對(duì)單環(huán)刺螠排氨量和排氨率的影響Fig.8 Effects of ammonia nitrogen on amount and rate of ammonia excretion of echiuran worm

氨氮對(duì)單環(huán)刺螠呼吸代謝的氧氮比和能量代謝率的影響見圖9 和圖10。由圖9 和圖10 可知：隨著氨氮濃度升高，氧氮比波動(dòng)式變化，最后下降，當(dāng)氨氮為0.0699 mg/L 時(shí)，氧氮比最高28.66。隨著氨氮濃度升高，單環(huán)刺螠的能量代謝率先下降，后平穩(wěn)。氨氮為0.0699 mg/L 時(shí)，能量代謝率最大1.48 J/g·h（P＜0.05）。

圖9 不同氨氮濃度下單環(huán)刺螠的氧氮比Fig.9 The oxygen nitrogen ratio of echiuran worm exposed to different ammonia nitrogen concentrations

圖10 不同氨氮濃度下單環(huán)刺螠的能量代謝率Fig.10 The energy metabolic rate of echiuran worm exposed to different ammonia nitrogen concentrations

2.4 亞硝酸鹽含量的變化對(duì)單環(huán)刺螠代謝的影響

亞硝酸鹽含量對(duì)單環(huán)刺螠耗氧量和耗氧率的影響見圖11。由圖11 可知，隨著亞硝酸鹽濃度的增加，單環(huán)刺螠的耗氧量和耗氧率先升高后下降。當(dāng)亞硝酸鹽濃度為0.0502 mg/L 時(shí)，耗氧量和耗氧率達(dá)最大峰值；當(dāng)亞硝酸鹽濃度為0.4960 mg/L 時(shí)，耗氧量和耗氧率值最低，最低和最高的耗氧率差異顯著（P＜0.05）。亞硝酸鹽濃度與單環(huán)刺螠耗氧率呈二次多項(xiàng)式關(guān)系：Y=-0.0066X2+0.0357X+0.0361（R2=0.9289，X 為亞硝酸鹽濃度，Y 為耗氧率）。

圖11 亞硝酸鹽濃度對(duì)單環(huán)刺螠耗氧量和耗氧率的影響Fig.11 Effects of nitrite concentration on amount and rate of oxygen consumption in echiuran worm

亞硝酸鹽含量對(duì)單環(huán)刺螠的排氨量和排氨率的影響見圖12。由圖12 可知，亞硝酸鹽濃度為0.0256 mg/L 和0.0738 mg/L 時(shí)，單環(huán)刺螠的排氨量和排氨率高于其他三組，各組間差異不顯著（P＞0.05）。亞硝酸鹽濃度為0.4960 mg/L 時(shí)，排氨量和排氨率最低。

圖12 亞硝酸鹽對(duì)單環(huán)刺螠排氨量和排氨率的影響Fig.12 Effects of nitrite concentration on amount and rate of ammonia excretion in echiuran worm

亞硝酸鹽對(duì)單環(huán)刺螠呼吸氧氮比和能量代謝率的影響見圖13 和圖14。由圖13 和圖14 可知：隨著亞硝酸鹽濃度的升高，氧氮比先升高后下降，當(dāng)亞硝酸鹽濃度為0.0502 mg/L 時(shí)，氧氮比最高，且與硝酸鹽為0.0256 mg/L 時(shí)差異顯著（P＜0.05）。隨著亞硝酸鹽濃度的增加，單環(huán)刺螠的能量代謝率先升高后下降。亞硝酸鹽濃度為0.0502 mg/L 時(shí)，能量代謝率最高，與亞硝酸鹽為0.4960 mg/L 時(shí)差異顯著（P＜0.05）。

圖13 不同亞硝酸鹽濃度下單環(huán)刺螠的氧氮比Fig.13 The oxygen nitrogen ratio of echiuran worm exposed to different nitrite concentrations

圖14 不同亞硝酸鹽濃度下單環(huán)刺螠的能量代謝率Fig.14 The energy metabolic rate of echiuran worm exposed to different nitrite concentrations

3 討論

3.1 溶解氧濃度對(duì)單環(huán)刺螠代謝的影響

耗氧率和排氨率為生物體呼吸代謝水平的重要指標(biāo)。本實(shí)驗(yàn)中單環(huán)刺螠耗氧量和耗氧率隨時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸降低，前2 h 呼吸瓶中溶氧充足，耗氧量和耗氧率高于其他各組。2 h 后隨著單環(huán)刺螠的呼吸代謝耗氧，呼吸瓶中溶氧量降低，單環(huán)刺螠呼吸略受限，耗氧量和耗氧率滑坡式下降，表明其呼吸代謝機(jī)能減弱。4 h 以后單環(huán)刺螠的呼吸代謝進(jìn)一步受到氧濃度降低的限制，耗氧量和耗氧率達(dá)到最低值，且第4 h 和第5 h 的耗氧量和耗氧率無顯著變化（P＞0.05），說明4 h 后單環(huán)刺螠呼吸代謝受到顯著影響。

能量代謝率反映生物代謝能力，適宜條件下新陳代謝旺盛，活動(dòng)能力強(qiáng)，生長(zhǎng)快速。本實(shí)驗(yàn)也反映了在溶氧充足的條件下，單環(huán)刺螠活動(dòng)能力強(qiáng)，能量消耗率高，溶氧受限時(shí)抑制了呼吸代謝，活動(dòng)能力下降。因此在工廠化養(yǎng)殖中，為不影響單環(huán)刺螠生長(zhǎng)代謝需保持溶解氧充足，以利于單環(huán)刺螠生長(zhǎng)。

3.2 pH 對(duì)單環(huán)刺螠代謝的影響

3.2.1 pH 對(duì)單環(huán)刺螠耗氧率和排氨率的影響

pH 是水生動(dòng)物環(huán)境中重要的理化指標(biāo)之一，pH 變化會(huì)直接影響水生動(dòng)物的生理代謝，因此，pH是工廠化養(yǎng)殖所關(guān)注的重要水環(huán)境指標(biāo)。本實(shí)驗(yàn)中，隨著pH 的升高，單環(huán)刺螠的耗氧量和耗氧率呈先升高后下降的趨勢(shì)。pH 為8 時(shí)，耗氧量和耗氧率達(dá)到峰值；pH 為10 時(shí)，耗氧量和耗氧率較pH 為8顯著下降。推測(cè)這有兩種可能：其一，pH 升至8 時(shí)為單環(huán)刺螠適宜生存條件，代謝增強(qiáng)，pH 升至10時(shí)，單環(huán)刺螠不適應(yīng)，代謝下降；其二，pH 的升高單環(huán)刺螠耗氧量和耗氧率升高是為了獲得更多的能量，補(bǔ)償性提高呼吸代謝，對(duì)抗環(huán)境pH 升高對(duì)自身的傷害。研究發(fā)現(xiàn)，弱堿性環(huán)境下水生生物呼吸代謝能力增強(qiáng)。唐保軍等[13]研究發(fā)現(xiàn)，pH 為8 時(shí)，細(xì)角螺Hemifusus termatamus 的耗氧率最高，pH 升高或降低，細(xì)角螺耗氧率均顯著降低。pH 為7.1 和8.9時(shí)，田螺Viviparus.contectoides 出現(xiàn)耗氧率峰值，而pH 升高或降低，其耗氧率均下降[14]。日本沼蝦Macrobrachium nipponensis[15]等水生生物也有類似結(jié)果。許星鴻等[16]采用正交實(shí)驗(yàn)法研究了不同鹽度、pH 及溫度對(duì)單環(huán)刺螠腸消化酶活力的影響，發(fā)現(xiàn)鹽度25～35、pH6～9 為單環(huán)刺螠較適宜的環(huán)境條件，與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致。孫濤等[11]研究pH 對(duì)單環(huán)刺螠呼吸排泄的影響時(shí)得出，pH5～9 條件下，pH 值變化顯著影響單環(huán)刺螠的耗氧率和排氨率。單環(huán)刺螠的耗氧率隨pH 升高呈先上升后下降的趨勢(shì)，pH 為8 時(shí)出現(xiàn)最大值，此時(shí)單環(huán)刺螠呼吸代謝最旺盛。本實(shí)驗(yàn)中，pH 在6～10 條件下，單環(huán)刺螠的耗氧率隨pH 升高呈先上升后下降的趨勢(shì)，pH8 時(shí)為最大值，說明單環(huán)刺螠在弱堿性環(huán)境中代謝旺盛。

本實(shí)驗(yàn)中，單環(huán)刺螠的排氨量和排氨率隨pH的升高先升高后降低，pH 為7 時(shí)達(dá)峰值。pH 超過7以后，排氨率顯著下降，8～10 之間差異不顯著（P＞0.05）。排氨量和排氨率變化趨勢(shì)與耗氧量和排氨率接近，表明pH 為7～8 時(shí)為單環(huán)刺螠呼吸和代謝的適宜條件。

3.2.2 pH 對(duì)單環(huán)刺螠氧氮比和能量代謝率的影響

氧氮比（O/N）表示生物體內(nèi)蛋白質(zhì)、脂肪和碳水化合物分解代謝之間的關(guān)系。O/N 大表明動(dòng)物消耗的能量主要由脂肪和糖提供。Mayza-lld[17]提出：O/N 約為7 時(shí)，生物體能量完全由蛋白質(zhì)氧化提供；Ikeda[18]認(rèn)為，O/N 約為24 時(shí)，生物體所需能量由蛋白質(zhì)和脂肪氧化提供。當(dāng)能量物質(zhì)主要為脂肪或碳水化合物時(shí)，O/N 將變?yōu)闊o窮大[19]。本實(shí)驗(yàn)中，隨著pH 的升高，氧氮比先升高后緩慢降低，pH8 時(shí)最大，pH9 時(shí)略有降低但不顯著（P＞0.05）。pH7 以后氧氮比均大于7，pH8 時(shí)氧氮比最大為10.48，說明在pH 小于8 時(shí)，單環(huán)刺螠主要消耗蛋白質(zhì)提供能量。pH8 及以后，代謝能源物質(zhì)由蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)為蛋白質(zhì)和脂肪。

當(dāng)pH 為8 時(shí)能量代謝率達(dá)到峰值，pH 為7、9、10 時(shí)，三組的能量代謝率差異不顯著（P＞0.05），說明pH 為8 左右時(shí)，單環(huán)刺螠生活條件適宜。

3.3 氨氮對(duì)單環(huán)刺螠代謝的影響

3.3.1 氨氮對(duì)單環(huán)刺螠耗氧率和排氨率的影響

游離氨NH3不帶電荷，易通過細(xì)胞膜，毒性比銨鹽大幾十倍[20]。氨氮影響單環(huán)刺螠、日本沼蝦和河蚌Anodonta woodiana 耗氧率[21]。本實(shí)驗(yàn)中，單環(huán)刺螠稚螠隨氨氮濃度增加耗氧量和耗氧率的變化呈先下降，后相對(duì)平穩(wěn)，又下降的趨勢(shì)。氨氮為0.0699 mg/L 時(shí)，耗氧量和耗氧率值最高；氨氮為1.0200 mg/L 時(shí)，耗氧量和耗氧率值最低。說明單環(huán)刺螠有一定的適應(yīng)氨氮濃度變化的能力，以至于當(dāng)氨氮為0.0736～0.6150 mg/L 時(shí)，可以維持耗氧量和耗氧率的相對(duì)平穩(wěn)。隨著氨氮濃度繼續(xù)升高，耗氧量和耗氧率值再次下降。但氨氮在0.0736～1.0200 mg/L 范圍時(shí)，各組耗氧率差異不顯著（P＞0.05），這可能是其對(duì)海底環(huán)境長(zhǎng)期適應(yīng)的結(jié)果。海洋底層溶解氧量較低，浮游植物分布少，氨氮難以吸收，底層氨氮含量普遍高于表層[22]，單環(huán)刺螠經(jīng)過長(zhǎng)期的進(jìn)化與環(huán)境相適應(yīng)，具備相應(yīng)生態(tài)位生物的生理結(jié)構(gòu)功能，適應(yīng)其特殊的生長(zhǎng)環(huán)境。

本實(shí)驗(yàn)設(shè)定的氨氮梯度下，各組單環(huán)刺螠的排氨率沒有顯著差異（P＞0.05），說明氨氮0.0699～1.0200 mg/L 對(duì)單環(huán)刺螠排氨率影響較小。

3.3.2 氨氮濃度對(duì)單環(huán)刺螠氧氮比和能量代謝率的影響

Widdows[23]認(rèn)為，盡管尚未證明O/N 差異值對(duì)機(jī)體的生長(zhǎng)速率和個(gè)體生長(zhǎng)狀況有直接影響，但很多跡象表明，O/N 的變化與機(jī)體所受的壓力有密切的聯(lián)系，O/N 可以作為生物對(duì)環(huán)境適應(yīng)程度的一項(xiàng)指標(biāo)。本實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，當(dāng)氨氮濃度為1.0200 mg/L時(shí)，O/N 超過24.0，能量物質(zhì)由脂肪和碳水化合物組成；度繼續(xù)升高后O/N 下降，但均大于7.0，能量代謝物由脂肪和碳水化合物轉(zhuǎn)變成蛋白質(zhì)和脂肪，脂肪占比增大、代謝產(chǎn)能量升高，維持正常的生理代謝，這可能是單環(huán)刺螠感受到環(huán)境中氨氮毒性壓力，改變代謝來加大能量消耗，抵御環(huán)境中氨氮的毒性對(duì)身體的傷害。

3.4 亞硝酸鹽含量對(duì)單環(huán)刺螠代謝的影響

隨著集約化水產(chǎn)養(yǎng)殖模式的發(fā)展，殘餌、養(yǎng)殖動(dòng)物代謝廢物長(zhǎng)期積累，導(dǎo)致養(yǎng)殖水環(huán)境和底泥環(huán)境不斷惡化。亞硝酸鹽含量超標(biāo)是集約化養(yǎng)殖容易出現(xiàn)的問題。亞硝酸鹽長(zhǎng)期超標(biāo)會(huì)使動(dòng)物血液載氧能力下降，輕者影響生長(zhǎng)，重則導(dǎo)致養(yǎng)殖動(dòng)物中毒死亡，因此必須重視[24]。本實(shí)驗(yàn)中，單環(huán)刺螠的耗氧量和耗氧率隨亞硝酸鹽濃度的增加先升高后下降。前四組的耗氧率無顯著差異（P＞0.05），而最后一組的耗氧率又與前兩組沒有顯著差異（P＞0.05）。這說明單環(huán)刺螠對(duì)水環(huán)境中亞硝酸鹽濃度耐受范圍較寬。

在本實(shí)驗(yàn)設(shè)定的亞硝酸鹽濃度下，O/N 大于24，且各組的氧氮比無顯著差異（P＞0.05），表明代謝供能主要是消耗脂肪和碳水化合物，適應(yīng)不同亞硝酸鹽濃度的變化，以維持機(jī)體正常代謝。