廣東肇慶柑橘木虱田間種群對(duì)常用藥劑的抗藥性

宋曉兵，崔一平，彭埃天，凌金鋒，陳 霞

(廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所，廣東省植物保護(hù)新技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣州 510640)

柑橘木虱DiaphorinacitriKuwayama是柑橘黃龍病的重要傳播蟲(chóng)媒(Bové, 2006; Cenetal., 2012)，當(dāng)前對(duì)柑橘黃龍病尚無(wú)有效的防治藥劑和抗病品種(宋曉兵等, 2016)，加強(qiáng)柑橘木虱的防控，對(duì)于遏制柑橘黃龍病的擴(kuò)散蔓延具有重要意義(Qureshietal., 2013; 宋曉兵等, 2018)。針對(duì)柑橘木虱的防控需要綜合運(yùn)用多種防治措施，包括農(nóng)業(yè)防治、化學(xué)防治、物理誘控、生物防治、基因沉默等多種方法(姚廷山等, 2018)，方能取得較好的控制效果。長(zhǎng)期以來(lái)單純使用化學(xué)藥劑造成天敵昆蟲(chóng)大量死亡、柑橘木虱產(chǎn)生抗藥性、果園生態(tài)環(huán)境遭到破壞，并帶來(lái)農(nóng)藥殘留、環(huán)境污染等諸多問(wèn)題(宋曉兵等, 2019)，殺蟲(chóng)劑抗藥性已成為防治柑橘木虱的重要障礙之一。

目前，防治柑橘木虱的主要?dú)⑾x(chóng)劑包括有機(jī)磷類、有機(jī)氯類、新煙堿類、氨基甲酸酯類、阿維菌素類和擬除蟲(chóng)菊酯類等(田發(fā)軍等, 2018)，其中機(jī)磷類、有機(jī)氯類由于其高毒性、高殘留性正逐步退出市場(chǎng)。大量多次和過(guò)量使用殺蟲(chóng)劑均會(huì)導(dǎo)致柑橘木虱抗藥性水平的增加，在重復(fù)使用相同作用方式的一種或多種殺蟲(chóng)劑的選擇壓力下，世界各地的柑橘木虱對(duì)有機(jī)磷類、擬除蟲(chóng)菊酯類、新煙堿類、氨基甲酸酯類藥劑產(chǎn)生了不同程度的抗藥性(Tiwarietal., 2011a; 鄧學(xué)明等, 2012b; Tianetal., 2018)。

柑橘木虱抗藥性的產(chǎn)生一方面增加了種植成本，另一方面過(guò)度使用殺蟲(chóng)劑造成柑橘果實(shí)農(nóng)藥殘留超標(biāo)和環(huán)境污染等問(wèn)題。本研究選擇廣東地區(qū)廣泛使用且作用機(jī)制不同的6種柑橘木虱殺蟲(chóng)劑，其中吡蟲(chóng)啉、噻蟲(chóng)嗪、啶蟲(chóng)脒屬于新煙堿類農(nóng)藥，高效氯氰菊酯屬于擬除蟲(chóng)菊酯類農(nóng)藥，阿維菌素、甲維鹽屬于生物源農(nóng)藥，以明確廣東肇慶柑橘木虱田間種群對(duì)主打藥劑的敏感性及抗藥性，旨在為柑橘木虱的田間防治及抗性管理提供參考，為農(nóng)藥減量化和精準(zhǔn)化使用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試?yán)ハx(chóng)

柑橘木虱敏感種群于2018年4月采自廣東省廣州市五山大豐街九里香，于養(yǎng)蟲(chóng)籠內(nèi)用九里香繼代飼養(yǎng)多代，期間未施用殺蟲(chóng)劑。柑橘木虱田間種群于2019年7月從廣東省肇慶市懷集縣中洲鎮(zhèn)砂糖橘上采集，在養(yǎng)蟲(chóng)籠內(nèi)用九里香飼養(yǎng)1代后，第2代用于抗藥性測(cè)定。

1.2 供試藥劑

目前廣東柑橘產(chǎn)區(qū)使用比較廣泛的6種藥劑：1.8%阿維菌素乳油(濟(jì)南中科綠色生物工程有限公司)、10%高效氯氰菊酯乳油(美國(guó)仙農(nóng)有限公司)、70%吡蟲(chóng)啉水分散粒劑(拜耳作物科學(xué)(中國(guó))有限公司)、25%噻蟲(chóng)嗪水分散粒劑(江蘇綠葉農(nóng)化有限公司)、20%啶蟲(chóng)脒可溶液劑(山西德威生化有限責(zé)任公司)、3%甲維鹽(甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽)微乳劑(北京三浦百草綠色植物制劑有限公司)。

1.3 試驗(yàn)方法

分別取供試藥劑制成母液，再加蒸餾水將各母液稀釋至設(shè)定濃度，每個(gè)配比設(shè)5個(gè)濃度梯度。室內(nèi)毒力測(cè)定采用浸葉法(王吉鋒等, 2019)，剪取長(zhǎng)勢(shì)一致的九里香嫩梢，插入裝滿水的1.5 mL離心管內(nèi)，用脫脂棉塞緊離心管口以固定九里香嫩梢。將九里香嫩梢浸入按梯度稀釋的藥液約5 s后取出，待自然晾干后放入50 mL離心管中，管內(nèi)裝有10頭柑橘木虱成蟲(chóng)，然后用紗布封口。每處理3次重復(fù)，移入人工氣候箱，溫度27℃、相對(duì)濕度70%、光周期L∶D=14 h∶10 h，處理后24 h后分別統(tǒng)計(jì)各處理的死亡蟲(chóng)數(shù)。

1.4 數(shù)據(jù)處理

計(jì)算各處理的死亡率，利用DPS 7.05軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行回歸分析。抗性倍數(shù)=田間種群的LC50/敏感種群的LC50?？剐詷?biāo)準(zhǔn)劃分：抗性倍數(shù)0～5.0倍為未產(chǎn)生抗性；5.0～10.0倍為低等抗性；10.0～40.0倍為中等抗性；40.0～160.0倍為高等抗性；160.0倍以上為極高抗性(肖漢祥等, 2018; 詹興堆, 2019)。

2 結(jié)果與分析

2.1 柑橘木虱敏感種群的毒力測(cè)定

室內(nèi)毒力測(cè)定結(jié)果表明，1.8%阿維菌素乳油、10%高效氯氰菊酯乳油、70%吡蟲(chóng)啉水分散粒劑、25%噻蟲(chóng)嗪水分散粒劑對(duì)柑橘木虱敏感種群具有較強(qiáng)的致死效果，LC50介于0.5926～0.8802 mg/L之間；3%甲維鹽微乳劑、20%啶蟲(chóng)脒可溶液劑對(duì)柑橘木虱敏感種群的致死效果較差，LC50分別為1.3102和2.1332 mg/L(表1)。

表1 柑橘木虱敏感種群的毒力測(cè)定

2.2 柑橘木虱田間種群對(duì)殺蟲(chóng)劑的抗藥性

室內(nèi)毒力測(cè)定結(jié)果表明，25%噻蟲(chóng)嗪水分散粒劑、10%高效氯氰菊酯乳油、1.8%阿維菌素乳油對(duì)柑橘木虱田間種群具有較強(qiáng)的致死效果，LC50介于0.9932～2.1988 mg/L之間；3%甲維鹽微乳劑、20%啶蟲(chóng)脒可溶液劑對(duì)柑橘木虱田間種群的致死效果較差，LC50分別為12.9188 mg/L和18.1865 mg/L；70%吡蟲(chóng)啉水分散粒劑對(duì)柑橘木虱田間種群的致死效果居中，LC50為5.1837 mg/L?？顾幮栽囼?yàn)結(jié)果表明，肇慶柑橘木虱對(duì)6種常用藥劑的3種產(chǎn)生了不同程度的抗藥性，該地區(qū)的柑橘木虱對(duì)20%啶蟲(chóng)脒可溶液劑、3%甲維鹽微乳劑產(chǎn)生較高的抗藥性，LC50抗性倍數(shù)分別為8.53倍和9.86倍，仍處于低等抗性水平；該地區(qū)的柑橘木虱對(duì)70%吡蟲(chóng)啉水分散粒劑產(chǎn)生較低的抗藥性，LC50抗性倍數(shù)為5.89倍。肇慶柑橘木虱對(duì)25%噻蟲(chóng)嗪水分散粒劑、10%高效氯氰菊酯乳油、1.8%阿維菌素乳油仍具有較強(qiáng)的敏感性，LC50抗性倍數(shù)分別為1.68倍、2.24倍和2.91倍(表2)。

表2 柑橘木虱田間種群對(duì)殺蟲(chóng)劑的抗藥性

3 結(jié)論與討論

柑橘木虱對(duì)殺蟲(chóng)劑抗藥性測(cè)定主要有藥膜法、點(diǎn)滴法、浸葉法等多種方法，其中浸葉法簡(jiǎn)便易行，與田間實(shí)際情況相接近，可用于柑橘木虱成蟲(chóng)和若蟲(chóng)的抗藥性測(cè)定(Naeemetal., 2016; 田發(fā)軍等, 2018)。鄧學(xué)明等(2012)通過(guò)藥膜法研究了廣西柑橘木虱對(duì)6種殺蟲(chóng)劑的抗藥性，柑橘木虱對(duì)毒死蜱的抗藥性最高為8.8倍，對(duì)高效氯氰菊酯和吡蟲(chóng)啉也產(chǎn)生了抗藥性，對(duì)高效氟氯氰菊酯和丁硫克百威處于敏感性下降階段，而對(duì)蟲(chóng)螨腈還處于敏感階段。Tiwarietal.(2011)用點(diǎn)滴法測(cè)定了佛羅里達(dá)5個(gè)地區(qū)田間柑橘木虱成蟲(chóng)種群對(duì)13種殺蟲(chóng)劑的敏感性，柑橘木虱對(duì)吡蟲(chóng)啉、毒死蜱、噻蟲(chóng)嗪、馬拉硫磷和甲氰菊酯已產(chǎn)生抗藥性，抗性倍數(shù)最高的地區(qū)對(duì)吡蟲(chóng)啉和噻蟲(chóng)嗪的抗性倍數(shù)分別為35.0倍和13.0倍。Tianetal.(2018)采用浸葉法測(cè)定了廣東增城、從化、惠州、清遠(yuǎn)4個(gè)柑橘木虱田間種群對(duì)9種藥劑的抗藥性，其中增城柑橘木虱種群對(duì)吡蟲(chóng)啉的抗藥性最高達(dá)到15.12倍，4個(gè)地區(qū)出現(xiàn)明顯抗藥性的藥劑為毒死蜱、呋蟲(chóng)胺、噻蟲(chóng)嗪、氯氟氰菊酯和聯(lián)苯菊酯。

本研究結(jié)果表明，肇慶柑橘木虱田間種群對(duì)25%噻蟲(chóng)嗪水分散粒劑、10%高效氯氰菊酯乳油、1.8%阿維菌素乳油仍具有較強(qiáng)的敏感性，LC50介于0.9932～2.1988 mg/L之間；肇慶柑橘木虱對(duì)70%吡蟲(chóng)啉水分散粒劑、20%啶蟲(chóng)脒可溶液劑、3%甲維鹽微乳劑處于低水平抗藥性，LC50抗性倍數(shù)分別為5.89倍、8.53倍和9.86倍。肇慶柑橘木虱田間種群對(duì)不同作用機(jī)理的3種殺蟲(chóng)劑均產(chǎn)生了不同程度的抗藥性，僅通過(guò)不同作用機(jī)理的藥劑交替使用延緩昆蟲(chóng)抗藥性的產(chǎn)生存在局限性，柑橘木虱的防控需要聯(lián)用其他防治措施，例如物理誘殺、蟲(chóng)生真菌侵染、釋放天敵等多種方法。

目前，我國(guó)已登記的柑橘木虱殺蟲(chóng)劑種類和數(shù)量偏少，本研究使用的6種藥劑多數(shù)可兼治蚜蟲(chóng)、潛葉蛾、紅蜘蛛等害蟲(chóng)，生產(chǎn)上應(yīng)用較為廣泛，其中高效氯氰菊酯、噻蟲(chóng)嗪、啶蟲(chóng)脒、阿維菌素已登記在柑橘木虱上。生產(chǎn)上單一藥劑的重復(fù)使用，極易造成害蟲(chóng)抗藥性的產(chǎn)生，因而有必要進(jìn)行柑橘木虱的抗藥性研究。首先，合理使用殺蟲(chóng)劑是延緩柑橘木虱抗藥性的重要措施之一(張麗陽(yáng)等, 2016)，不同作用機(jī)制的藥劑交替使用或混用，對(duì)已經(jīng)產(chǎn)生明顯抗性的殺蟲(chóng)劑限制使用等；其次，對(duì)柑橘木虱抗性水平進(jìn)行監(jiān)測(cè)和評(píng)估，開(kāi)展防治藥劑的篩選和新藥劑的研發(fā)，同時(shí)加強(qiáng)生物防治、物理防治等多種措施的運(yùn)用，減少殺蟲(chóng)劑的使用量；再者，開(kāi)展柑橘木虱對(duì)殺蟲(chóng)劑的抗性機(jī)理研究，為柑橘木虱的抗藥性治理提供理論依據(jù)。