劉懷彬,閔婕,潘耀,郝琳
(徐州醫(yī)科大學(xué)附屬徐州兒童醫(yī)院,江蘇 徐州 221000)
支氣管哮喘目前是常見發(fā)生在兒童群體中的慢性呼吸道疾病,且臨床發(fā)生率有不斷趨于增加的態(tài)勢(shì)。支氣管哮喘的發(fā)病由T淋巴細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和肥大細(xì)胞等多因素參與,氣道慢性炎癥是主要病變表現(xiàn),喘息、咳嗽、氣促以及胸悶等癥狀常伴且反復(fù)發(fā)生。據(jù)目前臨床研究,在哮喘疾病的發(fā)生中,T淋巴細(xì)胞活化后的效應(yīng)T細(xì)胞有重要參與,更是啟動(dòng)、造成氣道廣泛炎癥反應(yīng)的直接原因??梢?,T細(xì)胞亞群功能異常與支氣管哮喘疾病發(fā)生有密切關(guān)聯(lián)。輔助性T細(xì)胞有兩個(gè)主要亞型:Th1細(xì)胞與Th2細(xì)胞,Th1/Th2細(xì)胞失衡參與支氣管哮喘病程始終[1]。白細(xì)胞介素-12、干擾素γ是Th1細(xì)胞分泌的主要細(xì)胞因子,白細(xì)胞介素-6則是Th2細(xì)胞分泌的主要細(xì)胞因子。本文主要就對(duì)支氣管哮喘患兒白細(xì)胞介素-6、白細(xì)胞介素-12、干擾素γ水平與其病情的相關(guān)性展開分析和討論,以期為有關(guān)臨床診治提供參考借鑒。
1.1 一般資料?;仡櫺苑治鲈?018年7月至2020年7月,在徐州醫(yī)科大學(xué)附屬徐州兒童醫(yī)院呼吸科就診的支氣管哮喘患兒臨床資料,篩選以下符合條件:①與《兒童支氣管哮喘診斷與防治指南》(2008版)中有關(guān)支氣管哮喘診斷內(nèi)容相符合[2];②均行肺功能檢查;③近兩個(gè)月并無激素、抗生素使用史;④患兒家屬知情、同意。排除有以下情況者:①同時(shí)患有貧血、佝僂病等影響實(shí)驗(yàn)指標(biāo)觀察的情況;②先天呼吸道急性、肺發(fā)育不良等呼吸系統(tǒng)疾病患兒;③肺部影像提示間質(zhì)性肺疾病或重癥肺炎。納入患兒79例,根據(jù)病情劃歸入組:A組患兒20例,男12例、女8例,年齡2~12歲、平均(7.1±0.7)歲;B組患兒30例,男17例、女13例,年齡3~12歲、平均(7.4±0.8)歲;C組患兒29例,男17例、女12例,年齡3~13歲、平均(7.9±0.9)歲。另以同期我院常規(guī)體檢的健康兒童30例作為對(duì)照組,男18例、女12例,年齡2~14歲、平均(8.1±0.9)歲。組間基本資料符合可比性前提(P>0.05)。
1.2 方法。采集79例患兒及30例健康兒童清晨空腹靜脈血0.5 mL,放入乙二胺四乙酸二鉀真空抗凝管,使用多重微球流式免疫熒光發(fā)光法檢測(cè)細(xì)胞因子(含白細(xì)胞介素-6、白細(xì)胞介素-12以及干擾素γ):向校準(zhǔn)品管中分別加入25 uL基質(zhì)B及25 uL校準(zhǔn)品,向樣本管中加入25 uL試驗(yàn)緩沖液及25 uL樣品,向所有管中加入25 uL捕獲微球抗體(按2.1充分混合均勻),室溫(25±1℃)避光震蕩孵育2小時(shí)(400~500 r/min),向所有管中加入25 uL SA-PE,室溫(25±1℃)避光震蕩孵育0.5小時(shí)(400-500 r/min),向所有管中加入500 uL 1×洗滌緩沖液,渦旋數(shù)s,300~500 g 離心5 min,緩慢傾倒出液體,倒扣于吸水紙上,根據(jù)流式細(xì)胞儀上樣需求,向每管中加入150-300 uL洗滌緩沖液,渦旋10s將微球重懸,立即上機(jī)檢測(cè),記錄檢測(cè)結(jié)果。
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。血清白細(xì)胞介素-6、白細(xì)胞介素-12以及干擾素γ水平檢測(cè)數(shù)據(jù)均表達(dá)為均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差的計(jì)量數(shù)據(jù)形式,采用t方法檢驗(yàn);以檢驗(yàn)結(jié)果P<0.05作為差異值顯著、有意義的判定依據(jù)。于SPSS 25.0軟件中完成數(shù)據(jù)驗(yàn)算。
與對(duì)照組健康體檢兒童比較,A、B、C組支氣管哮喘患兒血清干擾素、白細(xì)胞介素-12明顯更低,白細(xì)胞介素-6明顯更高(P<0.05)。
A、B、C組支氣管哮喘患兒各細(xì)胞因子比較:干擾素γ、白細(xì)胞介素-12水平從低到高排序?yàn)椋篊組病情中重度<B組病情輕度<A組病情間歇;白細(xì)胞介素-6水平從低到高排序?yàn)椋篈組病情間歇<B組病情輕度<C組病情中重度;差異比有顯著意義(P<0.05),見表1。
表1 各組血清干擾素γ、白細(xì)胞介素-6、白細(xì)胞介素-12比較(±s,pg/mL)
表1 各組血清干擾素γ、白細(xì)胞介素-6、白細(xì)胞介素-12比較(±s,pg/mL)
注:與A、B、C組比較,★P<0.05;與A、B組比較,★★P<0.05;與A組比較,#P<0.05。
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在兒科常見病中,支氣管哮喘的發(fā)生率愈漸提高,作為慢性、呼吸系統(tǒng)疾病,該病的發(fā)生病理機(jī)制復(fù)雜,可能與支氣管炎性細(xì)胞浸潤、黏膜纖毛功能障礙、支氣管平滑肌痙攣、氣道黏膜水腫等相關(guān),且涉及多種炎癥介質(zhì)與細(xì)胞因子[4-5]。
在由干擾素γ、白細(xì)胞介素-2、白細(xì)胞介素-6、白細(xì)胞介素-12等構(gòu)成的復(fù)雜細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)中,它們互為誘導(dǎo)、制約、影響或協(xié)同,通過與炎性細(xì)胞的互為作用,參與氣道炎癥的調(diào)節(jié),在支氣管哮喘疾病的發(fā)生和進(jìn)展中全程參與[6]。
Th1、Th2分屬于Th不同的兩個(gè)群,其中Th1主要是通過分泌Ⅰ型細(xì)胞因子(如干擾素γ、白細(xì)胞介素-12等)參與到由細(xì)胞毒性T細(xì)胞所介導(dǎo)的細(xì)胞免疫反應(yīng)當(dāng)中,起到抵抗細(xì)胞感染的作用;而Th2分泌的Ⅱ型細(xì)胞因子(如白細(xì)胞介素-6等)則是參與介導(dǎo)體液免疫。Th1/Th2失衡與支氣管哮喘疾病發(fā)生有密切關(guān)聯(lián)。
干擾素γ作為Th1細(xì)胞分泌的代表性細(xì)胞因子,上文研究發(fā)現(xiàn),與健康的兒童相比,支氣管哮喘患兒干擾素γ水平明顯降低,同時(shí)隨著病情程度的嚴(yán)重,患兒干擾素γ水平愈漸降低;當(dāng)Ⅰ型細(xì)胞因子的代表干擾素γ水平降低時(shí),便會(huì)造成Th2向Th1細(xì)胞類型分化轉(zhuǎn)化減弱,隨著干擾素γ分泌不足,Th2優(yōu)勢(shì)被激活,具體表現(xiàn)在Th2分泌的Ⅱ型細(xì)胞因子-白細(xì)胞介素-6細(xì)胞因子過度上升,造成Th1/Th2失衡。上文研究發(fā)現(xiàn),與健康的兒童相比,支氣管哮喘患兒白細(xì)胞介素-6均更高,且隨著病情程度的嚴(yán)重,病情中重度者白細(xì)胞介素-6更高于輕度者、間歇病情者;白細(xì)胞介素-6致炎癥反應(yīng)發(fā)生的原因可能是在Th2細(xì)胞分化過程中會(huì)刺激白細(xì)胞介素-4的活化與增殖,分泌大量的炎癥介質(zhì)。白細(xì)胞介素-12是具有生物活性的細(xì)胞因子,對(duì)T細(xì)胞分化成Th1細(xì)胞因子能產(chǎn)生促進(jìn)作用,起到抑制Th1細(xì)胞因子的作用;哮喘疾病狀態(tài)下,隨著白細(xì)胞介素-10與前列腺素E2水平的升高,能通過下調(diào)白細(xì)胞介素-12水平而促進(jìn)Th2應(yīng)答;上文研究結(jié)果表明,患支氣管哮喘疾病的三組患兒白細(xì)胞介素-12水平皆要更低于對(duì)照組健康兒童,且隨著病情的趨于嚴(yán)重,白細(xì)胞介素-12水平愈低。提示隨著干擾素γ、白細(xì)胞介素-12水平的降低,Ⅱ型細(xì)胞因子功能變強(qiáng),發(fā)生慢性氣道炎性反應(yīng)[3]。
通過以上對(duì)支氣管哮喘患兒細(xì)胞因子參數(shù)的分析可知,支氣管哮喘患[7-8]兒以分泌白細(xì)胞介素-6的Th2細(xì)胞功能活動(dòng)為主,而分泌白細(xì)胞介素-12、干擾素γ的Th1細(xì)胞則相對(duì)不足。Th1與Th2細(xì)胞失衡而致哮喘疾病發(fā)生,同時(shí)隨著白細(xì)胞介素-12、干擾素γ水平越低、白細(xì)胞介素-6水平越高,患兒病情相應(yīng)就越嚴(yán)重??梢娡ㄟ^檢測(cè)白細(xì)胞介素-12、干擾素γ、白細(xì)胞介素-6水平可用于評(píng)估支氣管哮喘病情。
綜上所述,支氣管哮喘患兒血清白細(xì)胞介素-6水平的增加,白細(xì)胞介素-12、干擾素γ降低,可作為評(píng)估病情的嚴(yán)重程度的依據(jù)。