吳燕丹 治桂茹 王 臣

(北京市順義區(qū)醫(yī)院檢驗科，北京 101300)

乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus，HBV)感染率較高，據(jù)統(tǒng)計，全球攜帶HBV病毒的人約有4億左右[1]。HBV對人類危害較大，感染后可能發(fā)展為肝纖維化、肝硬化甚至肝癌，每年因感染HBV病死的人數(shù)達到78萬人[2]?？梢?，應及時篩查和診斷乙肝，對防治乙肝具有重要意義。乙肝兩對半是目前臨床常用于診斷乙肝的檢查方式之一，也是對HBV傳染性進行判斷和分析的重要依據(jù)[3]。乙肝兩對半的檢測方式多樣，包括酶聯(lián)免疫吸附法、電化學發(fā)光法(Electro-chemiluminescence immunoassay，ECLIA)等，其中酶聯(lián)免疫吸附法較為常見，具有成本低、速度快等優(yōu)勢，但在檢查中易受操作、環(huán)境等因素的影響，靈敏度有待提升[4]。近年來，電化學發(fā)光法逐漸應用于各個科室的醫(yī)學檢驗，具有較高的特異度、靈敏度，且反應速度快、重復性好，特別是在乙肝兩對半的檢測中具有較高的準確度[5]。羅氏Cobas E601、雅培I200、邁瑞全自動發(fā)光分析儀CL-6000i等是使用ECLIA檢測乙肝兩對半的常用儀器，其中，邁瑞全自動發(fā)光分析儀CL-6000i是邁瑞公司的一種新型化學發(fā)光儀[6]?；诖?，本研究旨在評價邁瑞全自動發(fā)光分析儀CL-6000i檢測乙肝兩對半結(jié)果性能，以提升乙型肝炎診斷準確性，從而指導乙肝防控措施的制定。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2017年3月～2019年11月醫(yī)院87例門診就診乙肝患者的血清標本。男57例，女30例；年齡20～58歲，平均年齡44.05±6.53歲；體重指數(shù)18.26～24.77kg/m2，平均體重指數(shù)22.33±0.45kg/m2。

1.2 儀器與試劑

儀器為邁瑞全自動發(fā)光分析儀CL-6000i；乙肝兩對半相關(guān)指標(乙肝表面抗原、乙肝表面抗體、乙肝e抗原、乙肝e抗體、乙肝核心抗體試劑盒；校準品均為邁瑞原裝的試劑盒；校準品。

1.3 檢測方法

實驗參與人員需具備檢測資質(zhì)且經(jīng)過專業(yè)訓練，按照儀器的操作規(guī)程(對儀器進行校準、質(zhì)控與保養(yǎng))、試劑盒的說明書進行操作，根據(jù)ISO15189《醫(yī)學實驗室質(zhì)量和能力認可準則》[7]的要求進行質(zhì)量控制，保證室內(nèi)質(zhì)量控制在允許范圍內(nèi)進行標本檢測。

1.4 觀察與評價指標

1.4.1精密度

1.4.2 分析測量范圍

ECLIA的結(jié)果由電化學發(fā)光免疫分析儀來測定，陽性結(jié)果范圍為：HBsAb≥10mIU/mL 、HBsAg≥0.2ng/mL、HBeAg≥0.5PEI U/mL、HBcAb≥0.9PEI U/mL以及 HBeAb≥0.2PEI U/mL為陽性，否則為陰性。

1.5 統(tǒng)計學方法

2 結(jié)果

2.1 邁瑞全自動發(fā)光分析儀CL-6000i檢測乙肝兩對半結(jié)果

邁瑞全自動發(fā)光分析儀CL-6000i檢測乙肝兩對半結(jié)果可測出12種模式，即2陽性、245陽性、145陽性、全陰性、15陽性、135陽性、25陽性、24陽性、5陽性、4陽性、125陽性、45陽性，其中，2陽性所占比重最大，為32.18%(28/87),結(jié)果見表1。

表1 邁瑞全自動發(fā)光分析儀CL-6000i檢測乙肝兩對半結(jié)果

2.2 邁瑞全自動發(fā)光分析儀CL-6000i檢測HBsAg線性范圍

邁瑞全自動發(fā)光分析儀CL-6000i檢測HBsAg所得系列濃度與稀釋比例呈線性關(guān)系，線性范圍較寬；ECLIA檢測HBsAg為陽性的標準是≥1COI，邁瑞全自動發(fā)光分析儀CL-6000i檢測HBsAg的最低濃度是1.04COI。見表2。

表2 邁瑞全自動發(fā)光分析儀CL-6000i檢測HBsAg線性范圍

2.3 邁瑞全自動發(fā)光分析儀CL-6000i檢測乙肝兩對半精密度

邁瑞全自動發(fā)光分析儀CL-6000i檢測HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb精密度良好。見表3。

表3 邁瑞全自動發(fā)光分析儀CL-6000i檢測乙肝兩對半精密度

3 討論

乙肝發(fā)病率較高，據(jù)統(tǒng)計，我國約有10%的HBV攜帶者[8]。HBV傳播途徑較廣，不及時治療不僅影響患者自身健康，且傳染途徑較廣，增加乙肝的發(fā)生風險[9]。因此，早期篩查和診斷乙肝較為重要。

乙肝五項俗稱“乙肝兩對半”，是HBV感染、免疫狀態(tài)的重要指標，包括HBsAg、HBsAb等，對乙肝病情判斷具有重要的意義[10，11]。酶聯(lián)免疫吸附法是乙肝兩對半常用檢測方法，但是容易受到溶血、鉤狀效應等因素的影響，可能出現(xiàn)假陽性，影響診斷結(jié)果[12]。ECLIA法檢測乙肝兩對半靈敏度和特異度均較高，且可經(jīng)全自動發(fā)光分析儀實施自動化檢測[13，14]。邁瑞全自動發(fā)光分析儀CL-6000i具有檢測速度快的特點，單機檢測速度高達480T/h[15]。同時，邁瑞全自動發(fā)光分析儀CL-6000i運用智能化模塊設計，不僅能實現(xiàn)儀器自動排序，自動完成清洗全過程，減少人工操作，為臨床檢驗提供便捷；而且通過儀器自動吸取反應廢液達到廢杯無殘留效果，顯著降低污染風險，提高生物安全水平。此外，邁瑞全自動發(fā)光分析儀CL-6000i還有與生化級聯(lián)成生化免疫流水線、支持急診樣本優(yōu)先插入等功能。本研究結(jié)果顯示，邁瑞全自動發(fā)光分析儀CL-6000i檢測乙肝兩對半結(jié)果可測出12種模式，即2陽性、245陽性、145陽性、全陰性、15陽性、135陽性、25陽性、24陽性、5陽性、4陽性、125陽性、45陽性。說明邁瑞全自動發(fā)光分析儀CL-6000i檢測乙肝兩對半靈敏度較高。究其原因為，邁瑞全自動發(fā)光分析儀CL-6000i可通過三聯(lián)吡啶釕這種特殊的標記物，以ECLIA法檢測乙肝兩對半[16]。在脈沖電壓的激發(fā)作用和三丙胺陽離子的催化作用下，三聯(lián)吡啶釕能持續(xù)、穩(wěn)定、高效發(fā)光，支持信號放大作用，從而準確測定[17，18]。而且，在三聯(lián)吡啶釕可循環(huán)利用的條件下，邁瑞全自動發(fā)光分析儀CL-6000i增大了反應面積，使發(fā)光時間延長，從而提升靈敏度[19]。在乙肝兩對半相關(guān)指標中，HBsAg較為重要，是可以直接反映受測者是否存在HBV病毒感染的重要指標[20]。本研究分析邁瑞全自動發(fā)光分析儀CL-6000i檢測HBsAg線性范圍發(fā)現(xiàn)，邁瑞全自動發(fā)光分析儀CL-6000i檢測HBsAg所得系列濃度與稀釋比例呈線性關(guān)系，線性范圍較寬。此外，儀器檢測指標的精密度較為重要，是驗證儀器性能的基礎，反映儀器檢測同種樣本在同一條件下是否可達到較高的一致性，能有效體現(xiàn)儀器檢測指標時隨機誤差的大小[21]。本研究結(jié)果顯示，邁瑞全自動發(fā)光分析儀CL-6000i檢測HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb精密度均良好，說明邁瑞全自動發(fā)光分析儀CL-6000i可有效應用于乙肝兩對半的診斷。然而，有研究表明，乙肝兩對半血清型不同的患者存在HBV-DNA復制不同的情況[22]。可見，邁瑞全自動發(fā)光分析儀CL-6000i檢測結(jié)合熒光定量PCR或可提高診斷準確性。本研究為對患者HBV-DNA復制情況進行分析，在日后應擴大樣本量，繼續(xù)深入研究。

綜上所述，邁瑞全自動發(fā)光分析儀CL-6000i檢測乙肝兩對半結(jié)果模式較多，準確度較高，精密度良好，檢測HBsAg線性范圍較寬。