接種PCV2/PRRSV 疫苗對(duì)豬瘟免疫效果的影響

李艷平 嚴(yán)玉霖 黃建新 陳富珍 程鵬飛 王喬花*

（1，大理農(nóng)林職業(yè)技術(shù)學(xué)院 671003；2，云南農(nóng)業(yè)大學(xué) 650201）

豬圓環(huán)病毒2 型(PCV2) 是導(dǎo)致斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征的重要病原之一，該病原可感染不同發(fā)育階段豬群，但對(duì)仔豬危害更為嚴(yán)重，可導(dǎo)致病畜出現(xiàn)淋巴結(jié)腫大、呼吸困難等癥狀，引起豬群發(fā)生免疫抑制病[1]。豬藍(lán)耳病（PRRSV）是由豬繁殖與綜合征病毒感染引起的以呼吸系統(tǒng)和繁殖系統(tǒng)病狀為主癥的豬傳染病，對(duì)養(yǎng)豬行業(yè)危害極大[2]，該病傳播速度快，仔豬發(fā)病率可達(dá)100%，死亡率可達(dá)35%以上，母豬流產(chǎn)可達(dá)35%，中大豬感染率、死亡率較高[3]。豬瘟（CSF）是由豬瘟病毒（CSFV）引起的一種以高熱稽留和廣泛性出血為主要特征的高度傳染性疾病，為國(guó)家一類(lèi)動(dòng)物疫病，嚴(yán)重危害我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)[4]。該病原感染豬群后可引發(fā)嚴(yán)重的臨床癥狀，其中包括體溫升高、皮膚發(fā)紺、腹瀉或便秘，且懷孕母豬可出現(xiàn)繁殖障礙性疾?。ㄈ缌鳟a(chǎn)、死胎等），特征性病理變化則包括脾臟腫大等[5]。疫苗免疫可以減少臨床發(fā)病和病理?yè)p傷，減少病豬排毒90%以上，改善生產(chǎn)性能、降低發(fā)病率、死亡率[6]。近年來(lái)，我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)普遍應(yīng)用PRRSV、PCV2 疫苗免疫，對(duì)緩解臨床癥狀、控制疫病的疫情不失為主要應(yīng)對(duì)措施之一。而接種PCV2、PRRSV 疫苗是否會(huì)對(duì)豬瘟疫苗免疫效果產(chǎn)生影響還存在較多爭(zhēng)議。因此，本研究在現(xiàn)有的免疫程序基礎(chǔ)上，擬在某規(guī)?；i場(chǎng)開(kāi)展PCV2 和PRRSV 疫苗對(duì)母豬豬瘟免疫效果的綜合評(píng)估，以及對(duì)仔豬母源抗體水平的影響，研究結(jié)果對(duì)優(yōu)化豬場(chǎng)免疫程序提供理論數(shù)據(jù)，對(duì)防控豬場(chǎng)的3 種免疫抑制性疾病提供技術(shù)支持，具有一定的現(xiàn)實(shí)意義。

1 材料與方法

1.1 疫苗、試驗(yàn)動(dòng)物及分組

高致病性豬藍(lán)耳病(TJM-F92 株) 弱毒疫苗、豬圓環(huán)2 型疫苗、豬瘟活疫苗，青島易邦生物工程有限公司產(chǎn)品。本試驗(yàn)以大理周邊某規(guī)?；i場(chǎng)為研究對(duì)象，選擇月齡相近的60 頭母豬及60 頭仔豬作為試驗(yàn)樣本。將60 頭母豬分成4 組，每組15 頭，分別為對(duì)照組（豬瘟疫苗），PCV2 組（豬瘟+圓環(huán)疫苗），PRRS 組（豬瘟+藍(lán)耳疫苗）和PCV2+PRRS 組（豬瘟+圓環(huán)+藍(lán)耳疫苗），60 頭仔豬分組方法同上。60 頭母豬按表1免疫程序進(jìn)行免疫后按時(shí)間采集血液，豬全血樣品3～5ml，3000 r/min 離心10 min，分離出血清，并標(biāo)注試驗(yàn)編號(hào)后利用ELISA 抗體檢測(cè)試劑盒檢測(cè)血清中的抗體。

表1 免疫程序設(shè)計(jì)

1.2 生產(chǎn)性能測(cè)定

在母豬分娩時(shí)記錄母豬總產(chǎn)仔數(shù)、產(chǎn)活仔數(shù)、產(chǎn)健仔數(shù)及出生窩重，測(cè)定母豬生產(chǎn)性能。

1.3 仔豬母源抗體水平檢測(cè)

60 頭仔豬按分組在1、7、10、14、21、28 日齡時(shí)分別采集血樣檢測(cè)母源抗體水平。

2 結(jié)果與分析

2.1 PCV2、PRRS 疫苗對(duì)CSFV 疫苗免疫效果的影響

2.1.1 PCV2、PRRS 疫苗對(duì)CSFV 疫苗抗體陽(yáng)性率的影響

根據(jù)豬瘟ELISA 試劑盒說(shuō)明書(shū)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)抗體結(jié)果進(jìn)行陽(yáng)性率評(píng)定。由表2 可知，第一次采血時(shí)，4 個(gè)組豬瘟抗體陽(yáng)性率均為0%，表明該豬場(chǎng)此前未接種過(guò)豬瘟疫苗及未被野毒感染，說(shuō)明試驗(yàn)動(dòng)物所產(chǎn)生的抗體均為疫苗免疫效果。第二次采血，即PCV2 疫苗、PRRS 疫苗及CSFV 疫苗均接種后，對(duì)照組及PCV2 組抗體陽(yáng)性率均為100%，PCV2+PRRS 組抗體陽(yáng)性率略低為93%，而PRRS 組抗體陽(yáng)性率最低，為86%。

表2 PCV2、PRRS 疫苗對(duì)CSFV 疫苗抗體陽(yáng)性率的影響

2.1.2 PCV2、PRRS 疫苗對(duì)CSFV 疫苗抗體水平的影響

由表3 可知，各組間抗體水平差異不顯著（＞0.05），但相較于對(duì)照組，PRRS 組抗體水平最低，以及PCV2+PRRS 組抗體水平也略低，因此，推測(cè)免疫PRRS 疫苗對(duì)豬瘟免疫效果有影響。

表3 PCV2、PRRS 疫苗對(duì)CSFV 疫苗抗體水平（OD 值）的影響

2.2 母豬生產(chǎn)性能的影響

表4 PCV2、PRRS 疫苗對(duì)母豬生產(chǎn)性能的影響

2.3 PCV2、PRRS 疫苗對(duì)仔豬母源抗體水平的影響

2.3.1 仔豬豬瘟母源抗體陽(yáng)性率

從表5 看，仔豬抗體陽(yáng)性率相較于對(duì)照組，除PCV2 組陽(yáng)性率為100%外，其他兩試驗(yàn)組抗體陽(yáng)性率均低于100%。

表5 仔豬母源抗體陽(yáng)性率

2.3.2 仔豬豬瘟母源抗體檢測(cè)結(jié)果

分別檢測(cè)了1、7、10、14、21、28 日齡仔豬的母源抗體水平，從檢測(cè)結(jié)果看，母源抗體呈現(xiàn)出逐漸消退的規(guī)律。由于0日齡還未吮吸母乳，所以母源抗體應(yīng)為0，1 日齡母源抗體水平達(dá)到最高，往后逐漸降低。在21 日齡時(shí)，由于仔豬斷奶的原因，母源抗體水平下降迅速，但在28 日齡時(shí)，母源豬瘟抗體對(duì)仔豬還有保護(hù)，少部分在35 日齡也還有保護(hù)。由附圖可知，PRRS 組及PCV2+PRRS 組相較于對(duì)照組和PCV2 組，母源抗體水平整體略低。

附圖 仔豬母源抗體水平

3 討論

近年來(lái)，我國(guó)普遍應(yīng)用疫苗作為預(yù)防和控制疫病的主要措施，PCV2 疫苗、PRRS 疫苗和CSFV 疫苗的免疫已被列入豬場(chǎng)的常規(guī)免疫計(jì)劃，而PRRS 疫苗和PCV2 疫苗是否會(huì)對(duì)豬瘟抗體產(chǎn)生干擾還需進(jìn)一步驗(yàn)證[3]。有研究表明，由PCV2 病毒感染引起的免疫抑制病，如呼吸道病綜合征等會(huì)明顯降低豬瘟疫苗的特異性抗體產(chǎn)生，甚至造成豬瘟疫苗免疫失敗，出現(xiàn)免疫空白等現(xiàn)象，大大增加了臨床上豬瘟病毒感染的概率[7]。本次試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，單獨(dú)接種PCV2 疫苗對(duì)豬瘟疫苗免疫效果無(wú)明顯影響，而接種PRRS 疫苗及PCV2 疫苗+PRRS 疫苗對(duì)母豬豬瘟抗體水平及陽(yáng)性率均有一定的影響。從母豬生產(chǎn)性能分析，各組差異不明顯。仔豬母源抗體水平分析發(fā)現(xiàn)，單獨(dú)接種PRRS 疫苗及接種PCV2 疫苗+PRRS 疫苗的試驗(yàn)組其抗體水平均有一定程度的下降。結(jié)合本次試驗(yàn)結(jié)果認(rèn)為，PRRS 疫苗對(duì)豬瘟疫苗免疫有一定的干擾作用。候艷麗等[8]通過(guò)從體液免疫和細(xì)胞免疫2 個(gè)方面分析豬藍(lán)耳病陽(yáng)性場(chǎng)豬藍(lán)耳病弱毒疫苗對(duì)豬瘟疫苗免疫應(yīng)答的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，豬藍(lán)耳陽(yáng)性場(chǎng)豬藍(lán)耳弱毒疫苗并不干擾豬瘟疫苗的免疫反應(yīng)，與本試驗(yàn)結(jié)果有差異，存在的原因可能是由于疫苗、接種時(shí)間及豬場(chǎng)抗體情況有差異，還有待驗(yàn)證。而朱華賢[3]等認(rèn)為，PRRS 弱毒活疫苗對(duì)豬瘟疫苗免疫有較大的干擾作用，這與本試驗(yàn)結(jié)果基本相同。提示在養(yǎng)豬生產(chǎn)過(guò)程中，應(yīng)對(duì)豬群PRRS 抗體進(jìn)行及時(shí)監(jiān)測(cè)，一旦發(fā)現(xiàn)感染，合理調(diào)整豬瘟免疫程序，以及在使用PRRS 疫苗和其他疫病疫苗時(shí)要嚴(yán)格控制免疫接種間隔，以免造成重大的經(jīng)濟(jì)損失。除此之外，仔豬首免日齡也非常重要，有研究表明，母源抗體的存在也是導(dǎo)致仔豬豬瘟疫苗免疫效果不好的一個(gè)重要因素，因此，確定正確的首免日齡至關(guān)重要。結(jié)合試驗(yàn)結(jié)果，應(yīng)于28～35 日齡對(duì)仔豬進(jìn)行首免，可獲得比較合格的免疫保護(hù)率。