玖玟枳椇純露對CCl4致小鼠急性肝損傷的預(yù)防作用

谷崇高 周亞偉

[摘? ? ? ? ? ?要]? 目的：采用腹腔注射0.12 %的四氯化碳玉米油溶液0.1 mL/10g，造成小鼠急性肝損傷模型，觀察玖玟枳椇純露對四氯化碳致小鼠急性肝損傷的預(yù)防作用。方法：60只小鼠隨機(jī)分組，分為空白組、模型組、雙環(huán)醇片組（200 mg/kg）及玖玟枳椇純露高劑量組（6 g生藥/kg）、中劑量組（3 g生藥/kg）、低劑量組（1.5 g生藥/kg），每組10只，0.2 mL/10g灌胃給藥雙環(huán)醇，0.3 mL/10 g灌胃給藥玖玟枳椇純露，每天一次，連續(xù)6天，第6天給藥后的8 h進(jìn)行建模，腹腔注射0.12 %四氯化碳玉米油溶液0.1 mL/10g，建模后禁食15 h，再給藥一次，藥后1 h取血，分離血清測定ALT和AST。結(jié)果：與空白組比較，模型組小鼠血清ALT和AST顯著升高。與模型組比較，雙環(huán)醇片組和玖玟枳椇純露高劑量組小鼠血清中ALT和AST顯著降低，有效。結(jié)論：玖玟枳椇純露具有預(yù)防四氯化碳引起小鼠急性肝損傷的作用。

[關(guān)? ? 鍵? ?詞]? 玖玟枳椇純露;實(shí)驗(yàn);預(yù)防作用

[中圖分類號]? G642? ? ? ? ? ? ? ? ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)志碼]? A? ? ? ? ? ? ? ? ? [文章編號]? 2096-0603（2021）42-0235-02

一、實(shí)驗(yàn)材料

（一）藥物與試劑

玖玟枳椇純露，規(guī)格：10g生藥/50mL，批號：20181125，有效期至：20201125，廠家：山西保仁堂生物科技有限責(zé)任公司。

CCl4，規(guī)格：500 mL，批號：20181102，有效期至：無，廠家：北京化學(xué)試劑廠。

雙環(huán)醇片，規(guī)格：25 mg/片×18片，批號：20190514，有效期至：2022.04，廠家：北京協(xié)和藥廠。

谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）試劑盒，規(guī)格：R1：60 mL×4，R2：60 mL×2，批號：20191127，有效期至：20201126，廠家：中生北控生物科技股份有限公司。

谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）試劑盒，規(guī)格：R1：60 mL×4，R2：60 mL×2，批號：20191016，有效期至：20201015，廠家：中生北控生物科技股份有限公司。

（二）實(shí)驗(yàn)動物

昆明種小鼠60只，SPF級，雌雄各半，體重18～22 g。購自斯貝福（北京）生物科技有限公司，許可證號：SCXK（京）2019-0010。

（三）實(shí)驗(yàn)儀器

半自動生化儀，型號：威圖300，廠家：荷蘭威圖公司。

離心機(jī)，型號：TDL-5-A，廠家：上海安亭科學(xué)儀器廠。

電子天平，型號：DT-500A，廠家：中國輕工業(yè)總公司常熟市衡器廠。

分析天平，型號：FAE100，廠家：梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司。

二、實(shí)驗(yàn)方法

（一）藥物劑量設(shè)置依據(jù)

玖玟枳椇純露劑量設(shè)置依據(jù)

根據(jù)藥品說明書，人的臨床用量：2瓶/日，即100 mL/日。計算出人臨床劑量為：20 g生藥/70 kg=0.3 g生藥/kg。

根據(jù)《中藥新藥研究指南》中規(guī)定，小鼠劑量為人臨床量的5～20倍。所以小鼠采用人臨床劑量的20倍，10倍，5倍設(shè)置為高，中，低劑量組，因此，高劑量為0.3 g生藥/kg×20=6 g生藥/kg，中劑量為3 g生藥/kg，低劑量為1.5 g生藥/kg。

（二）實(shí)驗(yàn)方法

取清潔級昆明種小鼠60只，雌雄各半，體重18～22 g，隨機(jī)分為空白對照組、模型對照（CCl4）組、雙環(huán)醇片（200 mg/kg）組、玖玟枳椇純露高（6 g生藥/kg）、中（3 g生藥/kg）、低（1.5 g生藥/kg）劑量組，共6組，每組10只。每天按照0.2 mL/10 g灌胃相應(yīng)受試物，空白組和模型組灌胃相應(yīng)體積蒸餾水。給藥第6天給藥后8 h，除空白對照組外，其余各組小鼠按0.1 mL/10 g體積腹腔注射0.12 %的CCl4玉米油溶液造模，空白組給相應(yīng)體積生理鹽水，造模后禁食不禁水，造模后15 h進(jìn)行末次給藥，給藥后1 h后眼眶取血，血液靜置30 min，在3000 r/min離心15 min，取上清測定血清ALT、AST酶的含量。

（三）測定方法

1.試劑準(zhǔn)備

雙液體試劑，使用前室溫穩(wěn)定30min。

2.檢測步驟

（1）基本操作步驟：（如下表1）

（2）用威圖300半自動生化儀測定：開機(jī)→清洗→試劑空白→校準(zhǔn)→質(zhì)控→樣品檢測。

（3）校準(zhǔn)：建議使用試劑盒配套的校準(zhǔn)品，使用線性法校準(zhǔn)，校準(zhǔn)周期為2天。

（4）檢測結(jié)果的計算：生化分析儀會自動給出檢測結(jié)果。

（四）統(tǒng)計學(xué)方法

數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±SD）表示，方差齊性檢驗(yàn)運(yùn)用F檢驗(yàn)，組間比較運(yùn)用t檢驗(yàn)或方差分析。

與空白組比較，模型組小鼠血清中ALT顯著升高，與模型組比較，雙環(huán)醇片組小鼠血清中ALT顯著降低。與模型組比較，玖玟枳椇純露高、中、低劑量組小鼠血清中ALT顯著降低。

與空白組比較，模型組小鼠血清中AST顯著升高，與模型組比較，雙環(huán)醇片組小鼠血清中AST顯著降低。與模型組比較，玖玟枳椇純露高、中、低劑量組小鼠血清中AST顯著降低。

三、結(jié)論

玖玟枳椇純露具有預(yù)防四氯化碳引起小鼠急性肝損傷的作用。

參考文獻(xiàn)：

[1]邢彥超，鄭彧，劉刈，等.大棗多糖與柴胡疏肝散聯(lián)用對四氯化碳所致小鼠急性肝損傷治療作用[J].遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2016（11）：29-31.

[2]胡恒龍，馬連虎.D-氨基半乳糖誘導(dǎo)肝損傷的過氧化機(jī)理和鋅的保護(hù)作用[J].中國藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志，1993，7（2）：81-86.

[3]黎旸，李瑾翡，蔣忠軍，等.CCl4致小鼠急性肝損傷模型的研究[J].熱帶醫(yī)學(xué)雜志，2010，10（6）.

[4]張倩，游云.聯(lián)苯雙酯的藥理作用機(jī)制研究綜述[J].中國藥物評價，2017（4）.

[5]胡鳳嬌，宋文杰，王張，等.四氯化碳致小鼠急性肝損傷模型造模要素及中醫(yī)藥防治的數(shù)據(jù)挖掘研究[J].中藥與臨床，2018，9（5）：38-41+48.

[6]時濤，王曉玲，陳振德，等.枳椇子化學(xué)成分及其藥理活性研究進(jìn)展[J].中藥材，2006，29（5）：510-513.

[7]徐博，田晶，馬寧，等.肝損傷動物模型的研究進(jìn)展[J].中國當(dāng)代醫(yī)藥，2019（14）.

◎編輯 張 慧