COVID-19康復者恢復期血漿單采應急方案的探討

李 軍，謝 菁，程丹鳳

重慶市血液中心，重慶 400015

新型冠狀病毒肺炎(COVID-19)的主要傳播途徑為經(jīng)呼吸道飛沫傳播和接觸傳播，目前尚無特效治療方法，主要以隔離和對癥支持治療為主[1]?！缎滦凸跔畈《靖腥镜姆窝自\療方案(試行第五版)》[2]提出,在重型、危重型病例的治療中，可采用康復者恢復期血漿(CP)。根據(jù)《新冠肺炎康復者恢復期血漿救治工作方案》[3]，結合《新冠肺炎康復者恢復期血漿臨床治療方案(試行第二版)》[4](簡稱《血漿臨床治療方案》)的要求，血站將全面推進COVID-19康復者CP采集工作。我國采供血機構分為血站和單采血漿站，血漿采集是在單采血漿站完成的，各級血站(特別是血液中心)并未開展此項工作，也無相關質量體系文件支持，雖然有單采設備，但基本用于單采血小板，這給處于疫情期間的血站帶來了不小的困難。故本文對COVID-19康復者CP采集過程進行回顧，為突發(fā)事件中特殊血液采集的應急預案提供參考。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2020年2-3月重慶市血液中心收集的擬捐獻CP的COVID-19康復者9例，男女比為7∶2，平均年齡(39.2±9.1)歲，平均身高(169.0±7.6)cm，平均體質量(69.6±9.1)kg。

1.2CP采集應急方案

1.2.1質量體系文件 根據(jù)《血漿臨床治療方案》和《血站技術操作規(guī)程(2019版)》[5]，結合本中心情況制訂了《新冠肺炎康復者恢復期血漿采集制備方案》和《血漿采集標準操作規(guī)程》，以及《獻漿者健康征詢及獻漿登記表》《自愿捐獻新型冠狀病毒抗體血漿知情同意書》《恢復期獻血漿者臨床評估表》《采漿工作記錄》《獻漿不良反應觀測表》等相應的記錄表單。

1.2.2血液信息管理系統(tǒng)(Pass Spring System) COVID-19康復者CP捐獻相關信息通過本中心Pass Spring System錄入，新增CP單采模塊和產(chǎn)品標識條形碼。

1.2.3單采區(qū)域配置 啟用空置團體采血區(qū)域，改造為征詢體檢室、捐獻室和觀察室，人流、物流、醫(yī)療廢物分開，清潔區(qū)和污染區(qū)分離，通風良好，設備齊全。相關儀器、材料主要包括：MCS+血細胞分離機和Trima血細胞分離機各1臺、相應采漿一次性配套耗材、枸櫞酸鈉注射液、注射用生理鹽水、葡萄糖酸鈣口服溶液、醫(yī)用聚維酮碘、醫(yī)用棉簽、一次性采血護理包、環(huán)境清潔消毒劑、急救箱等。

1.2.4籌備工作小組 抽調(diào)6名技術全面的業(yè)務骨干組成COVID-19康復者CP采集應急小組。其中2名工作人員具體負責對捐獻者進行健康征詢、體檢、初篩和采集等工作。工作人員采用2級防護措施：(1)穿雙層工作服，即內(nèi)穿醫(yī)用工作服，外穿防護服；(2)戴雙層帽子，即內(nèi)戴醫(yī)用帽，外戴防護服連帶帽；(3)戴雙層手套，即于內(nèi)部將醫(yī)用工作服袖子扎緊并用彈力繃帶固定，于外部將防護服袖子扎緊并用彈力繃帶固定；(4)穿一次性隔離鞋套；(5)戴N95口罩；(6)戴防護鏡。采集前對小組成員進行Pass Spring System和穿脫防護服等防疫培訓，并實地進行模擬演練。

1.3方法

1.3.1COVID-19康復者招募 招募對象符合《血漿臨床治療方案》相關要求。主要包括：(1)距首發(fā)癥狀時間不少于3周；(2)符合最新版診療方案中解除隔離和出院標準；(3)符合《獻血者健康檢查要求》(GB18467-2011)；(4)兩次采漿時間間隔不少于14 d。有條件的地區(qū)應進行新型冠狀病毒核酸和抗體檢測。患者康復出院時由定點醫(yī)院工作人員對其進行捐獻血漿招募，將有捐獻意愿的康復者告知本中心。本中心也對外公示預約途徑及電話。捐獻前再由本中心工作人員對有意愿的捐獻者進行電話問詢和審核(包括年齡、既往病史、首發(fā)癥狀時間、出院時間、核酸復查結果、出院后有無癥狀、有無確診或疑似患者接觸史)。與符合條件的捐獻者確定捐獻時間和地點，并告知其注意事項。

1.3.2捐獻者初篩 捐獻者在捐獻當日由專車接送至本中心(護送人員、駕駛員均采用2級防護措施)，并由專人引導經(jīng)單獨通道進入血漿捐獻區(qū)域。捐獻者填寫登記表及知情同意書。根據(jù)《血站技術操作規(guī)程(2019)》要求，工作人員對捐獻者進行健康征詢、一般健康檢查和血液檢測。

1.3.3CP采集 根據(jù)捐獻者的初篩檢查結果和血管條件等選擇適合的血細胞分離機，主要有MCS+血細胞分離機和Trima血細胞分離機。MCS+血細胞分離機無單采血漿的程序，可使用血小板收集程序進行采集，但是需要工作人員在每個循環(huán)采集至淘洗階段手動按下停止鍵阻止血小板的收集，然后回輸除血漿外的其他血液成分至捐獻者體內(nèi)，主要適用于女性或者體質量較低男性捐獻者。使用Trima血細胞分離機前與工程師聯(lián)系，增加單采血漿的程序，其優(yōu)勢在于采集過程無須手動干預且時間短，適用于體質量大、血管充盈的男性捐獻者。血細胞分離機耗材正確安裝完成后，在初始化期間，核對捐獻者身份信息，根據(jù)捐獻者體質量及其自身意愿選擇血漿捐獻劑量200/300/400 mL，對體檢初篩結果及捐獻劑量沒有任何疑問后，請捐獻者簽署知情同意書。初始化完成后輸入捐獻者相關信息并設定血漿采集程序。根據(jù)捐獻者選擇的捐獻量進行采集，穿刺成功后，留取1管血清學檢測標本，再留取2管核酸檢測標本，最后留取2管促凝標本。告知捐獻者若有任何不適立即提出。采集中需密切觀察以下內(nèi)容：(1)捐獻者有無獻血不良反應的發(fā)生。若捐獻者出現(xiàn)不適，如面色蒼白、頭暈、口麻等需根據(jù)質量體系文件的要求進行處理，暫?；蚪K止采集，并填寫《獻漿不良反應觀測表》。(2)產(chǎn)品袋中血漿外觀質量。觀察產(chǎn)品袋中是否出現(xiàn)紅細胞溢出或者乳糜等不符合血漿質量要求的情況，及時調(diào)整血細胞分離機設置參數(shù)。若上述情況無明顯改善，采集結束后需對關鍵指標進行質量檢測。

1.3.4產(chǎn)品和標本交接 產(chǎn)品和標本運輸采用3層包裝，由內(nèi)到外分別為主容器、防滲漏包裝和外包裝。在相對獨立的區(qū)域保存，標識明確，由專人負責。常規(guī)消毒，并在交接血漿標本過程中及開啟、關閉轉運箱蓋前后用2 000 mg/L含氯消毒液噴灑。若血液滲漏時立即用5 500 mg/L含氯消毒液進行噴灑消毒。

1.3.5數(shù)據(jù)收集 通過Pass Spring System收集重慶地區(qū)COVID-19康復者捐獻前初篩結果和采集過程的信息。捐獻前初篩結果包括一般健康檢查和血液檢查的結果；采集過程信息包括捐獻者的全血處理量、抗凝劑使用量和采集時間。

2 結 果

2.1COVID-19 CP捐獻者一般情況 重慶地區(qū)COVID-19康復者中共9例擬捐獻CP。捐獻者體溫、脈搏和血壓均無異常。血液檢測結果如下：血紅蛋白合格率為100.0%，乙型肝炎病毒抗原/梅毒螺旋體抗體檢測無反應性為100.0%，丙氨酸氨基轉移酶為(33.7±13.6) U/L，合格率為77.8%。捐獻前初篩合格7例(男5例、女2例)，合格率為77.8%。

2.2COVID-19 CP捐獻者采集情況 共7例達到捐獻要求。采集過程中血細胞分離機采集程序運行正常，無報警提示。捐獻者狀態(tài)良好，未述不適。捐獻者采集情況如下：捐獻者均捐獻CP 400 mL，平均全血處理量(2 132.6±504.9)mL，平均抗凝劑使用量(238.6±39.0)mL，平均采集時間(47.4±8.9)min，男、女CP捐獻者的相關指標見表1。

表1 CP捐獻者的全血處理量、抗凝劑使用量和采集時間比較

3 討 論

CP治療利用康復者血漿中一定滴度的病毒特異性抗體來識別和清除患者體內(nèi)病毒，是一種被動免疫的治療方法[6]。將CP用于重癥感染患者的治療已有相關報道，如埃博拉病毒[7]、嚴重急性呼吸綜合征冠狀病毒[8]、甲型H5N1流感病毒[9]等引起的感染。近幾年也有使用CP治療病毒性急性呼吸道感染后明顯降低患者病死率的報道[10]。

疫情發(fā)生后，本中心接到通知迅速安排部署CP采集應急方案，成立COVID-19康復者CP采集應急小組。隨即開展相關工作，按照“獨立空間、獨立流程、獨立產(chǎn)品通道、獨立信息通道”等原則，完善相關質量體系文件及硬件設施的改造。CP的采集與單采血小板的操作很接近，均通過血細胞分離機進行分離。其原理是通過離心將捐獻者血液分離至不同層面，在探測器的識別下對不同成分進行提取，之后將剩余血液回輸給捐獻者，經(jīng)多次循環(huán)后得到所要產(chǎn)品。對捐獻者獻血不良反應和血漿外觀質量不符合要求的處理與單采血小板一致，可直接使用原有質量體系文件。這有利于血液中心快速熟練掌握CP采集的操作流程并開展工作。此次，重慶市共成功招募COVID-19康復者9例，男女比例為7∶2，平均年齡(39.2±9.1)歲。捐獻前均進行了健康征詢、一般檢查和血液檢測。其中2例男性捐獻者丙氨酸氨基轉移酶不符合捐獻條件，分別為54.4 U/L和53.3 U/L。在采集過程中，筆者發(fā)現(xiàn)女性捐獻者平均全血處理量為(1 475.5±299.1)mL，平均抗凝劑使用量為(190.0±9.9)mL，明顯少于男性捐獻者，其捐獻體驗優(yōu)于男性捐獻者[11]。但男女性平均采集時間相差不明顯，女性為(53.0±17.0)min，男性為(45.2±5.0)min。因本研究樣本量較小，故未進行統(tǒng)計學處理。目前已有COVID-19患者采用CP治療的報道，該方法具有一定的療效[12-13]，因此未來還可以進一步研究COVID-19康復者血漿中IgG抗體的免疫應答規(guī)律并制備人免疫球蛋白制劑[14]，以實現(xiàn)對COVID-19更好的治療和預防。

CP采集也與單采血小板存在諸多不同之處[15]：(1)捐獻者身份。日常工作中面對的捐獻者都身體健康且有多次獻血經(jīng)歷，而CP采集面對的是大病初愈且無獻血經(jīng)歷的COVID-19康復者,需工作人員對其加強獻漿知識宣教和心理引導。(2)工作場所和工作流程[16-17]。CP是在獨立場所完成采集，全過程存在感染源暴露風險。工作人員采用2級防護，增加了操作的難度。(3)CP捐獻者需提前預約時間，由專車專人接送。捐獻者全程佩戴一次性外科口罩，工作人員在獻血過程的護理，以及捐獻后的注意事項的講解應該更加仔細。(4)享受的榮譽和待遇。捐獻CP 200 mL視為捐獻1次全血，并發(fā)放獻血證、獻漿專屬紀念品和感謝狀。

綜上所述，此次COVID-19康復者CP采集工作順利、安全完成，可為完善突發(fā)事件中特殊血液采集的應急預案提供參考。