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      食品中殘留農(nóng)藥檢測技術的新進展

      2021-11-27 06:46:24張靜恒
      現(xiàn)代農(nóng)業(yè)研究 2021年12期
      關鍵詞:抗原農(nóng)藥抗體

      張靜恒

      (成都市動物疫病預防控制中心 四川,成都 610000)

      1 農(nóng)藥的概述

      農(nóng)藥是一種特殊的藥物,主要是指在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)活動中主要用于治理蟲害、消除雜草、幫助農(nóng)作物生長的一種藥物。有目的的調節(jié)植物和病蟲生長的一種化學劑,能夠有效地控制病蟲災害給人們帶來的損失。根據(jù)原料的不同,主要分為有機農(nóng)藥、物及農(nóng)藥、植物性農(nóng)藥、微生物農(nóng)藥等。對幫助農(nóng)業(yè)的整體收入增長有一定的作用,是當前我國在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)過程中經(jīng)常會使用到的一種作業(yè)方式。

      農(nóng)藥的使用給農(nóng)作物帶來一定的優(yōu)勢的同時,我們也需要正確審視其帶來的壞處。當前,在很多地區(qū)的農(nóng)業(yè)發(fā)展過程中,由于農(nóng)藥的廣泛以及不合理使用方式,給生態(tài)環(huán)境造成了極大的污染,同時農(nóng)藥的殘留問題也受到了世界的廣泛關注。目前,世界所使用的化學農(nóng)產(chǎn)品成百上千,隨著人們對于食品安全的重視,對于食品中農(nóng)藥殘留的標準越來越高,給相關的農(nóng)藥檢測部門的管理和監(jiān)督工作提出了更高的要求,如何控制農(nóng)藥殘留在食品中的含量,對其進行檢測已經(jīng)成為一項迫在眉睫的工作,因此相關部門應急需開展精簡、快捷、有效的分析方法。

      2 農(nóng)藥殘留的主要危害

      目前,農(nóng)藥被廣泛運用于農(nóng)作物的生產(chǎn)中,主要用于防止病蟲危害,為農(nóng)作物的生長環(huán)境提供更加舒適的空間。但長期使用會導致農(nóng)作物表面殘留大量的農(nóng)藥,影響食品安全,為了避免農(nóng)藥殘留對人體造成的間接傷害,需要采取一些有效的化學措施對其進行檢測。通常農(nóng)藥進入人體主要有三個途徑:皮膚、呼吸道和消化道。

      2.1 通過皮膚進入人體

      這種情況的發(fā)生往往是不經(jīng)意間皮膚沾染農(nóng)藥進入人體,多數(shù)的農(nóng)藥可以通過不傷害皮膚直接進入到人體,尤其是天熱時人體大量出汗,汗腺的呼吸能夠促進農(nóng)藥的吸收,一旦人體沾染農(nóng)藥,殘留物達到一定程度時,對于人體的危害是較大的。

      2.2 經(jīng)過呼吸道進入人體

      一般帶有粉末性和熏蒸劑的藥物非常容易發(fā)生揮發(fā),通過空氣的傳播從口鼻被吸入到人體內,人們在勞作時,近距離接觸到這些農(nóng)藥殘留,會導致呼吸道受到傷害,因此農(nóng)戶在勞作時應當注意這種無色無味的藥物,這類的農(nóng)藥毒性較大,比較容易被人們忽視。

      2.3 通過消化道進入人體

      日常生活中比較常見的中毒為誤食農(nóng)藥或者附著大量農(nóng)藥殘留的食物,農(nóng)藥殘留在食物上是最不容易被人們發(fā)覺的,同時這種殘留方式也是最為常見的,人們使用農(nóng)藥殘留過多地食物經(jīng)過消化道進入人體內的農(nóng)藥一般很難清理,危險性較大。長期使用帶有農(nóng)藥殘留的食物對人體生長發(fā)育造成嚴重危害。

      3 食品中農(nóng)藥殘留檢測的作用

      化學農(nóng)藥能夠促進植物的生長、減少有害病蟲對食物的侵害已經(jīng)成為家喻戶曉的事,人們在長期的農(nóng)作物生產(chǎn)過程中都會使用農(nóng)藥幫助除害,幫助農(nóng)作物更好的生長。目前農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留檢測只有《GB 2763-2016 食品安全國源家標準食品中農(nóng)藥最大殘留限量》供參考。在農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)過程中使用農(nóng)藥已經(jīng)不再是閉口不談的事了,如何正確的規(guī)避因農(nóng)藥殘留超標給人們帶來的風險,在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)種植過程中,農(nóng)藥的用量和使用方法是非常重要的,如果沒有按照標準給農(nóng)作物進行使用,超標的農(nóng)藥殘留就會附著在農(nóng)產(chǎn)品上,人們在不知情的情況下食用這些農(nóng)產(chǎn)品,日積月累下來會給人們的身體造成巨大的傷害,輕者會產(chǎn)生消化不良的情況,嚴重會導致食物中毒,給人們的生命安全帶來隱患。因此,加大對于農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留檢測是我國科研學者十分重視的一件大事。

      截至當前,我國相關政府部門已經(jīng)結合第三方檢測部門對農(nóng)藥殘留檢測予以高度重視,積極開展各各種工作加強檢測工作,這些第三方檢測機構通過各種化學檢測技術檢測食品中農(nóng)藥殘留的含量,對于這些農(nóng)藥含量制定標準,給食品監(jiān)管部門進行反饋,在制定出相應的整改措施,以此加強政府監(jiān)管部門對食品安全的管控,杜絕不合格的農(nóng)產(chǎn)品流向市場,保證了人們的餐桌安全,同時也為我國的農(nóng)業(yè)食品按照提供更加全面的保障措施。

      4 常用檢測農(nóng)殘的方法

      4.1 色譜法

      色譜法(chromatography)又稱“色譜分析”、“色譜分析法”、“層析法”,是一種分離和分析方法,主要運用在分析化學、有機化學、生物化學等領域。是我國當前在農(nóng)藥殘留檢測方面使用較為普遍的一種化學分析方法。

      色譜法是一種化學分離分析方法,它是利用各種物質在兩相中具有不同的分配系數(shù)進行多次反復的分配來達到分離的目的。這種方法具有容易操作、高效分離,吸附性強、迅速分析及應用層面廣等特點。在很多的化學分析領域被人們廣泛使用,其中最為普遍的使用方式就是吸附色譜。

      4.2 波譜解析法

      波譜解析法,是很多化學研究過程中不可缺少的一部分內容,主要幫助分析有機化合物,指結合農(nóng)藥當中特征官能團,在特定情況下產(chǎn)生化學反應,形成一定波長的顏色反應,因此對它進行檢測,常見的檢測限度處于pg級水平?;瘜W發(fā)光通過發(fā)光物質魯米諾和農(nóng)藥發(fā)生特定的化學反應而形成。AOAC 要求通過使用分光光度法對對硫磷、馬拉硫磷進行檢測, 把紅外光譜法用于檢測甲拌磷、敵敵畏。近紅外衰減全反射光譜與表面增強拉曼光譜提升光譜分析靈敏度,這項技術具有快速且直接的特點,僅需要非常少的樣品,更多地應用在檢測當中。

      5 食品中農(nóng)藥殘留檢測新方法

      5.1 免疫分析法

      免疫分析法免疫分析法是基于抗體與抗原或半抗體之間的高選擇性反應而建立起來的一種生物化學分析法,高選擇性和低檢出限,將可溶性的抗原和抗體融合,形成不溶性抗原抗體復合物沉淀,將其進行標記,由此可以判斷出被檢測物中含有的農(nóng)藥殘留的數(shù)量,是當前農(nóng)藥殘留檢測中常使用的一種化學檢測方法之一。

      農(nóng)藥一般是小分子化合物,只能作為半抗原體進行使用。當抗體使機體發(fā)生抗藥作用時,需把農(nóng)藥分子與大分子蛋白質整合到一起,他們之間產(chǎn)生的物質具有抗原性,產(chǎn)生的抗體主要是為讓動物產(chǎn)生特異性抗體和免疫??乖墓δ鼙憩F(xiàn)為識別與結合,和抗原進行選擇性結合,具有非常強大的選擇性,十分靈敏,能夠快速的檢測出食品中農(nóng)藥殘留的成分,對其進行相應的評價。

      酶聯(lián)免疫吸附法(又稱酶聯(lián)免疫法),其主要原理是讓抗體與酶復原物結合,然后通過顯色來檢測。目前主要應用在農(nóng)藥檢測當中,主要分為兩種方法:一種是直接競爭ELISA 法,另外一種是間接競爭ELISA 法。間接競爭RLISA 法是目前檢測抗體最常用的方法之一,它的原理是利用酶標記的抗體以檢測已與固相結合的受檢抗體,故稱為間接法。具體操作步驟為:將特異性抗原與固相載體連接,形成固相抗原:去除抗原產(chǎn)生的雜質;加稀釋的受檢血清:其中的特異抗體與抗原結合,形成固相抗原抗體復合物;加酶標抗抗體:與固相復合物中的抗體結合,從而使該抗體間接地標記上酶,加入酶反應的底物后,底物被酶催化成有色底物,以此進行相關的定量分析。通過以上的比色可以對農(nóng)藥進行測定。

      5.2 膠體金法

      膠體金法是主要免疫主要標記技術之一,是由氯金酸(HAuCl4)在還原劑如白磷、抗壞血酸、枸櫞酸鈉、鞣酸等作用下,可聚合成一定大小的金顆粒,并由于靜電作用成為一種穩(wěn)定的膠體狀態(tài),形成帶負電的疏水膠溶液,由于靜電作用而成為穩(wěn)定的膠體狀態(tài),故稱膠體金法。

      膠體金常見使用方法為:免疫膠體金法快速檢測試紙利用層析原理、雙抗體夾心法或免疫競爭法或間接法,應用被檢測物質的特異性和能與其發(fā)生特異反應的抗原或抗體,并以金顆粒為顯色劑達到快速檢測目的。使用快速檢測產(chǎn)品時,在卡的加樣孔加入待測樣,利用層析原理不斷的向另一端層析,隨著層析的進行,樣本中的待測成分固定于測試線(T線)并以顏色變化顯示,并以對照線(即控制線,C線)確保檢測的有效性。

      5.3 酶抑制法

      酶抑制法是受酶的某種物質影響,而導致酶活力降低或喪失作用的現(xiàn)象就行檢測的方法。該物質即稱為酶抑制劑。酶抑制劑對酶有選擇性,是研究酶作用機理的重要工具。農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥檢測主要利用有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對動物體內乙酰膽堿酶(AChE)具有抑制作用的原理,在農(nóng)產(chǎn)品檢測中加入樣品,用觀察顏色的變化和吸光度值,計算出抑制率,就可以判斷出樣品中農(nóng)藥殘留的情況。AChE 屬于絲氨酸為中心的酶類,羧酸酯酶與AChE類似,同樣以絲氨酸殘基作為活動中心。酶抑制法同樣還分為競爭性抑制作用和反競爭性抑制作用,競爭性抑制作用在檢測中是經(jīng)常會出現(xiàn)的一種現(xiàn)象,相反,反競爭性抑制作用的出現(xiàn)頻率較低。

      通常酶抑制快速檢測農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留有以下幾種方法:

      試紙法在很多的化學檢測實驗中都被廣泛的使用,目前為止試紙法在檢測農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留中非常常用,具體使用就是將等待檢測的物品同試劑同時放到試紙上,之后等待觀察反應。對于產(chǎn)品內部農(nóng)藥殘留的檢測速度較快,這種方法操作簡單便捷,結果也較為明顯,是很多機構使用的方法之一,也是它的優(yōu)勢所在。

      比色法主要生成有色化合物的顯色反應為基礎,通過比較或測量有色物質溶液顏色深度來確定待測組分含量的方法,選擇比色法進行試驗主要是其具有較高的選擇性、穩(wěn)定性較好、靈敏度較高等,在適宜的溫度下能夠快速的產(chǎn)生反應。但是在選擇比色法進行檢測的同時還需要正確的審視其帶來的缺點,需要與顯色劑進行對比,兩者之間存在的顏色差異較大,顯色反應的控制是關鍵。常見方法有:目視比色法和光電比色法,這兩種方法能夠有效提高比色的精準度。

      農(nóng)藥化學殘留檢測過程中,除了以上的幾種常見的檢測方式,相關檢測部門在實施檢測的過程中應當注重它的缺點所在,酶抑制法只能檢測對AChE具有抑制作用的有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥,對于其他類型的農(nóng)藥的辨識程度較低,為了提升檢測的效果不能將酶抑制法用作除有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥以外的藥物檢測。

      6 結束語

      目前隨著經(jīng)濟技術和人們的健康意識不斷增高,原有的檢測產(chǎn)品已經(jīng)不再能夠滿足人們的日常需求和基礎發(fā)展的要求。因此,相關的檢測部門應當在農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留的檢測技術上需要做到不斷更新,結合原有的檢測技術的同時做到創(chuàng)新。經(jīng)過數(shù)年間的不斷發(fā)展,我們所使用的檢測技術逐漸得到改善,但是相比較一些發(fā)達國家的農(nóng)藥檢測還存在一定的差距,需要充分結合當前的各種處理方法和檢測儀器的優(yōu)勢,取長補短,結合本國農(nóng)業(yè)發(fā)展趨勢開發(fā)檢測種類多、適用范圍廣、靈敏度高、速度快、安全有效的技術是未來的發(fā)展趨勢,為我國國民的食品安全提高有效保障。

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