劉國(guó)梁
(日照市東港區(qū)檢驗(yàn)檢測(cè)中心,山東 日照 276800)
金黃色葡萄球菌隸屬于葡萄球菌屬,是革蘭氏陽(yáng)性菌代表,金黃色葡萄球菌會(huì)寄生于人以及其他動(dòng)物的皮膚、鼻腔和腸胃之中,同樣也存在于空氣以及污水等自然環(huán)境當(dāng)中,是一種常見的食源性致病微生物。正如大眾所熟知的,金黃色葡萄球菌會(huì)威脅飲食質(zhì)量,可導(dǎo)致食品中毒。
金黃色葡萄球菌呈現(xiàn)出球形這一形態(tài),在實(shí)驗(yàn)室中的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)時(shí),呈現(xiàn)出圓形這一菌落特征,金黃色葡萄球菌顏色為無色或者是金黃色,其具有無擴(kuò)展生長(zhǎng)特點(diǎn)。在顯微鏡下對(duì)金黃色葡萄球菌菌落進(jìn)行觀察,我們可以發(fā)現(xiàn)其在顯微鏡下排列成葡萄串這一形狀,這也是稱其為金黃色葡萄球菌的原因之一。金黃色葡萄球菌不具有芽孢和鞭毛,且大多數(shù)金黃色葡萄球菌都無莢膜。
金黃色葡萄球菌具有一定的高溫耐受能力,如若想將其徹底殺死,需在80℃以上的高溫下持續(xù)30 分鐘才可。除此之外,金黃色葡萄球菌可以存活于鹽度較高的環(huán)境之中,只要是濃度低于15%的氯化鈉溶液,它都可以存活。金黃色葡萄球菌的最適生長(zhǎng)溫度是37℃,代謝類型為兼性厭氧型或者是需氧型,金黃色葡萄球菌對(duì)其存活環(huán)境的要求較低,可以在許多種惡劣的環(huán)境中存活。
金黃色葡萄球菌是一種致病細(xì)菌,它的感染能力極強(qiáng),會(huì)造成多種類型的感染。首先,如果我們的身體受到了金黃色葡萄球菌的感染,體內(nèi)白細(xì)胞的數(shù)量會(huì)有所下降,這就造成我們的機(jī)體的抵抗力下降,患病的風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)一步加大。除此之外,金黃色葡萄球菌會(huì)影響我們的皮膚狀態(tài),會(huì)造成皮膚潰爛感染,進(jìn)而導(dǎo)致身體出現(xiàn)炎癥。如若人體感染了葡萄球菌,也可能會(huì)產(chǎn)生腸炎、肺炎等炎癥,情況更嚴(yán)重些,可能會(huì)導(dǎo)致敗血癥。在變質(zhì)的食物中存在著大量的金黃色葡萄球菌,一旦人食用這些食物,會(huì)出現(xiàn)食物中毒,會(huì)造成機(jī)體的惡心、嘔吐、頭暈等反應(yīng),甚至?xí)霈F(xiàn)暈厥、休克等情況。
首先,當(dāng)?shù)叵嚓P(guān)食品安全監(jiān)督部門需要加強(qiáng)對(duì)市場(chǎng)上所售賣的食品的監(jiān)管,加大對(duì)這些食品的生產(chǎn),加工以及流通環(huán)節(jié)的監(jiān)管力度,并針對(duì)金黃色葡萄球菌帶來的食物中毒問題,制定詳細(xì)的綜合性防控方案,防患于未然,預(yù)防食源性疾病以及食物中毒事件的發(fā)生。同時(shí),相關(guān)部門應(yīng)當(dāng)積極開展食品安全、食品健康相關(guān)的教育活動(dòng),讓更多的居民們認(rèn)識(shí)到金黃色葡萄球菌的危害,知道居民在日常生活中如何防范此類食物中毒事件的發(fā)生。
其次,居民在制作食物時(shí),應(yīng)當(dāng)合理的選擇食品的原料以及配料,選擇安全符合標(biāo)準(zhǔn)的飲用水以及食物的原料,在操作過程中始終保持清潔衛(wèi)生,避免在操作過程中受到金黃色葡萄球菌的污染。在存放食物時(shí)也要注意,將生食與熟食分開放置,且放置在適宜溫度,盡量不要讓飯菜過夜。但凡在食用前可以采用熱處理來殺滅細(xì)菌,如若飯菜放置時(shí)間過長(zhǎng),應(yīng)當(dāng)及時(shí)處理,不再食用。
傳統(tǒng)分離鑒定法是檢測(cè)食品中金黃色葡萄球菌的最基礎(chǔ)的方法手段之一,該過程主要分為定性檢測(cè)和定量檢測(cè)兩部分。首先,我們需要在無菌的條件下將金黃色葡萄球菌接種到肉湯中進(jìn)行增殖,在增殖完成之后,對(duì)培養(yǎng)物進(jìn)行接種劃線,之后依據(jù)生物化學(xué)鑒定方法對(duì)其進(jìn)行血清學(xué)檢驗(yàn)。這一方法所花費(fèi)的成本較低、且不需要繁雜的技術(shù)操作,是目前最常使用的食品中金黃色葡萄球菌的檢測(cè)方法之一。
抗體免疫檢測(cè)法根本依據(jù)在于免疫學(xué)理論研究,主要是通過檢測(cè)人工設(shè)計(jì)的抗原和抗體的結(jié)合,以及最終免疫細(xì)胞所分泌的細(xì)胞因子,來實(shí)現(xiàn)檢測(cè)金黃色葡萄球菌這一目的。檢測(cè)的主要步驟是指利用能夠識(shí)別金黃色葡萄球菌全細(xì)胞或特征性蛋白等物質(zhì)的抗體,運(yùn)用特異性分子標(biāo)記技術(shù),來對(duì)食品內(nèi)的金黃色葡萄球菌進(jìn)行檢測(cè)。該檢測(cè)方法包括,酶聯(lián)免疫法、免疫熒光法、免疫膠體金法等多種方法。
酶聯(lián)免疫法是指,在識(shí)別金黃色葡萄球菌全細(xì)胞或特征性蛋白等物質(zhì)的抗體與抗原結(jié)合完畢后,加入帶有特殊標(biāo)記的酶,這一酶會(huì)與抗原、抗體結(jié)合,這就形成了特殊標(biāo)記物,可以用其對(duì)抗原或抗體進(jìn)行追蹤。在此之后,加入酶反應(yīng)顯色底物,根據(jù)顯色情況分析計(jì)量得出樣品中金黃色葡萄球菌的含量。與酶聯(lián)免疫法不同,免疫熒光法沒有借助酶這一中介物,而是在實(shí)驗(yàn)開始之前直接運(yùn)用熒光色素對(duì)抗體或者說抗原進(jìn)行標(biāo)記,在抗體與抗原結(jié)合之后,依照熒光信號(hào)的強(qiáng)度來對(duì)食物中的金黃色葡萄球菌進(jìn)行定性定量的檢測(cè)。
基因分子檢測(cè)法主要包括聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)、核酸探針技術(shù)等,在金黃色葡萄球菌檢測(cè)中也有著十分廣泛的應(yīng)用。聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)是依據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)這一原則,以模板DNA 鏈為主鏈,為其提供一段引物,游離的脫氧核糖核酸在DNA 聚合酶的作用之下,快速地?cái)U(kuò)增為DNA 的雙螺旋結(jié)構(gòu)。聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)特異性更強(qiáng),且具有較高的敏感度,與其他檢測(cè)方法相比,穩(wěn)定性更強(qiáng)。但是聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)也有著一定的局限性,在該方法使用之前,我們需要對(duì)樣本進(jìn)行一定的預(yù)處理,需要對(duì)食品成分進(jìn)行初步分析,其次需要提前對(duì)樣品進(jìn)行增菌。除此之外,聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)的成本較高,對(duì)設(shè)備儀器的要求也較嚴(yán)格,還未得到全方面的推廣普及。
核酸探針技術(shù)是一種核酸雜交技術(shù),它是運(yùn)用基因特異性核苷酸序列作為探針來與我們的目的DNA 進(jìn)行雜交,通過檢測(cè)特異性標(biāo)記物,來進(jìn)一步判斷和估計(jì)目標(biāo)為生物的存在與否。這一方法靈敏度也很高,且具有很強(qiáng)的特異性。但是核酸探針技術(shù)需要花費(fèi)大量時(shí)間,實(shí)驗(yàn)周期過長(zhǎng),操作較為繁雜,且容易出現(xiàn)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的偏差。
除了以上我們提到的傳統(tǒng)分類鑒定法、抗體免疫檢測(cè)法以及基因分子檢測(cè)法之外,在對(duì)食品中金黃色葡萄球菌進(jìn)行檢測(cè)時(shí),我們也可采取其他方法,比如說試劑盒法與測(cè)試片法。試劑盒法是指將十多種甚至是幾十多種培養(yǎng)基或成分集中在一個(gè)特定的微型裝置之中,在這一特定微型裝置內(nèi)進(jìn)行金黃色葡萄球菌的培養(yǎng),對(duì)微生物的生長(zhǎng)以及代謝過程中產(chǎn)出的產(chǎn)物以及現(xiàn)象的觀察與分析。在傳統(tǒng)的試驗(yàn)中,需要進(jìn)行多次試驗(yàn),才能得出檢測(cè)結(jié)果。但是試劑盒法將多次試驗(yàn)綜合到一次試驗(yàn)之中,這使得金黃色葡萄球菌檢測(cè)時(shí)間大大縮短,節(jié)約時(shí)間成本。這種方法可以在24 小時(shí)內(nèi),甚至4 小時(shí)內(nèi)得出最終的檢測(cè)結(jié)果,與傳統(tǒng)試驗(yàn)方法相比,這種方法更加迅速。
測(cè)試片法是指在紙膜、紙片或者說膠片上,附著或者涂抹相關(guān)培養(yǎng)結(jié)合特定的顯色液,將這樣這一紙片、膠片作為本次金黃色葡萄球菌的培養(yǎng)載體,在培養(yǎng)完成之后,通過觀察金黃色葡萄球菌的培養(yǎng)狀況以及最終的顯色情況,來衡量估計(jì)食品中金黃色葡萄球菌的含量。測(cè)試片法與其他方法相比操作簡(jiǎn)便,不需要繁雜的技術(shù),但是這種方法最終結(jié)果的準(zhǔn)確性不夠或者說最終檢測(cè)結(jié)果的精確度不高。
物理性防控手段是指使用巴斯滅菌、超高溫或者說高壓滅菌、輻照滅菌、紫外線以及微波和超聲波滅菌等技術(shù)手段,來保障食品安全,這也是當(dāng)前世界視頻產(chǎn)業(yè)防腐保鮮的主要方式。巴斯滅菌,是指利用一般細(xì)菌致死點(diǎn)均為68℃,耐受30 分鐘以內(nèi)的普遍性特點(diǎn),將食物加熱到68~70℃,并在此溫度范圍保持30 分鐘,在此之后,將溫度急速冷卻到4~5℃,這一急速的冷熱交替,會(huì)促使細(xì)菌死亡。這一方式一般適用于液體食品,可以殺滅食品中所包含的金黃色葡萄球菌。超高溫滅菌是指在短時(shí)間內(nèi)將食品迅速加熱到135~150℃,并維持該溫度3~4 秒,之后迅速冷卻到30~40℃,運(yùn)用高溫殺死微生物,這一防控方法也更多的是用于液體食品,可殺死食品中的金黃色葡萄球菌在內(nèi)的多種致病性細(xì)菌。
紫外滅菌,是指運(yùn)用紫外線對(duì)視頻進(jìn)行照射,紫外線會(huì)造成食品表面致病,微生物細(xì)胞中的DNA 或者是RNA 分子結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,受到破壞,進(jìn)而造成微生物細(xì)胞的死亡。這一方法主要用于肉類以及貝類食品,可殺死肉類以及貝類食品中的金黃色葡萄球菌。物理防控技術(shù)是當(dāng)前最常用的食品安全防控技術(shù),對(duì)于金黃色葡萄球菌在內(nèi)的致病微生物有著極強(qiáng)的防控力,但是物理防控會(huì)更加要求技術(shù)操作的準(zhǔn)確性,需要耗費(fèi)更多的成本,除此之外,物理防控會(huì)在一定程度上對(duì)食品本身的風(fēng)味以及品質(zhì)造成一定的損害。
化學(xué)性防控是指通過運(yùn)用化學(xué)藥品來鏟除食品中所包含的金黃色葡萄球菌等多種致病微生物?;瘜W(xué)性防控主要包括山梨酸及其鉀鹽、苯甲酸及其鈉鹽、亞硝酸鈉等。山梨酸及其鉀鹽在添加到食品中之后,能夠與微生物細(xì)胞中的酶系的疏水基相結(jié)合,進(jìn)而破壞酶的活性,同時(shí)也會(huì)干擾微生物,細(xì)胞內(nèi)信息等要素的傳遞,不利于微生物的生長(zhǎng)。在山梨酸及其鉀鹽的作用之下,食品內(nèi)所包含的金黃色葡萄球菌生長(zhǎng)以及繁殖會(huì)受到抑制,可以應(yīng)用于加工食品之中。
苯甲酸及其鈉鹽可以穿透細(xì)胞膜,干擾細(xì)菌的細(xì)胞膜通透性,進(jìn)而阻礙細(xì)胞膜對(duì)氨基酸的吸收。與此同時(shí),苯甲酸分子會(huì)進(jìn)入到微生物細(xì)胞之中,會(huì)酸化細(xì)胞內(nèi)所儲(chǔ)存的堿,進(jìn)而壓制微生物細(xì)胞內(nèi)呼吸酶的活性,抑制微生物的生長(zhǎng)與繁殖。目前,化學(xué)性防控在食品制造產(chǎn)業(yè)中應(yīng)用較少,主要是由于當(dāng)前化學(xué)藥劑的安全性以及必要性還有待商榷,化學(xué)藥劑在食品中的添加可能會(huì)給食品安全帶來新的風(fēng)險(xiǎn),在一定程度上影響食用者的健康。
生物性防控是指應(yīng)用生物性材料對(duì)金黃色葡萄球菌在內(nèi)的致病微生物進(jìn)行防控。目前最常用的是抗菌肽材料,除此之外,還有殼聚糖以及乳酸鏈球菌素等。殼聚糖這一生物性材料主要通過破壞微生物細(xì)胞膜的通透性,擾亂微生物細(xì)胞內(nèi)DNA 的復(fù)制以及轉(zhuǎn)錄進(jìn)程,進(jìn)而影響金黃色葡萄球菌在內(nèi)的致病微生物的生長(zhǎng)以及繁殖,該生物性防控手段常被應(yīng)用于西式火腿以及肉灌腸類食品的防控過程當(dāng)中。
乳酸鏈球菌素主要是干擾微生物細(xì)胞膜正常功能的發(fā)揮,乳酸鏈球菌素會(huì)導(dǎo)致微生物細(xì)胞膜發(fā)生滲透,微生物細(xì)胞內(nèi)養(yǎng)分的流失,微生物缺少能量來源,除此之外,乳酸鏈球菌素會(huì)導(dǎo)致膜電位下降以及其他功能紊亂現(xiàn)象的出現(xiàn),進(jìn)而抑制金黃色葡萄球菌在內(nèi)的致病微生物的生長(zhǎng)以及繁殖,這一生物性防控手段主要用于加工食品的安全防控。
小結(jié):金黃色葡萄球菌致食物中毒十分常見,食品中金黃色葡萄球菌檢測(cè)及防控技術(shù)的發(fā)展關(guān)系著百姓們的食品健康、食品安全問題。相信隨著化學(xué)科技的進(jìn)步,以及針對(duì)食品中金黃色葡萄球菌研究的進(jìn)一步深入,會(huì)有更加有效且精細(xì)化的食品中金黃色葡萄球菌檢測(cè)及防控技術(shù)的出現(xiàn)。