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      規(guī)?;i養(yǎng)殖場豬偽狂犬病的流行特點和凈化措施

      2021-11-28 04:59:40霍瑋林森馨陳發(fā)明呂殿紅陳飛陳明望李天宇溫肖會
      中國動物保健 2021年11期
      關(guān)鍵詞:流行凈化防控

      霍瑋 林森馨 陳發(fā)明 呂殿紅 陳飛 陳明望 李天宇 溫肖會

      doi:10.3969/j.issn.1008-4754.2021.11.006

      摘要:豬偽狂犬病是由偽狂犬病毒引起豬感染的一種急性動物傳染病。被感染豬多以發(fā)熱、奇癢和腦脊髓炎癥為主要臨床特征,其中仔豬神經(jīng)癥狀較為明顯,病死率可達100%。近年來,隨著非洲豬瘟疫情蔓延,規(guī)?;i養(yǎng)殖場生物安全防控逐步升級,但部分中小規(guī)模養(yǎng)殖場仍存在生物安全意識不強、免疫效果不佳以及引種檢疫不規(guī)范等因素,導(dǎo)致豬偽狂犬病持續(xù)保持較高的野毒感染率,給養(yǎng)豬行業(yè)帶來了巨大的經(jīng)濟損失。本文將對豬偽狂犬病的病原特點、流行情況及規(guī)?;B(yǎng)殖場豬偽狂犬病的凈化措施等研究進展進行綜述,為該病的有效防控和凈化提供參考。

      關(guān)鍵詞:豬偽狂犬病;流行;防控;凈化

      1 偽狂犬病毒(pseudorabies virus,PRV)的生物學(xué)特性

      1.1 PRV的形態(tài)學(xué)和理化特點

      PRV屬于皰疹病毒科,皰疹病毒亞科,α-皰疹病毒屬,病毒粒子呈圓形,直徑約為150~180nm,最外層有囊膜包裹,囊膜表面有呈放射性狀緊密排列的纖突。PRV的基因組為線性DNA雙鏈結(jié)構(gòu),長度為150kbp,在低溫或潮濕環(huán)境下抵抗力較強,pH 6~8時可長期存活。在干燥或高溫環(huán)境下,特別是處于光照條件下易失活,對有機溶劑較為敏感。

      1.2 PRV的基因組和編碼蛋白

      PRV基因組由長區(qū)段、短區(qū)段、末端重復(fù)序列和內(nèi)部重復(fù)序列組成。PRV含有70個基因片段,編碼約100種病毒蛋白,有11種(gB、gC、gD、gE、gG、gH、gI、gK、gL、gM和gN)偽狂犬病毒糖蛋白被成功破譯并被定位于對應(yīng)的囊膜上,如圖1所示。PRV根據(jù)編碼糖蛋白是否是病毒復(fù)制所必需,分為必需糖蛋白和非必需糖蛋白。gE糖蛋白由US8基因編碼,其中位于第125位纈氨酸和第126位半胱氨酸對PRV的生物學(xué)功能具有重要作用。PRV對神經(jīng)系統(tǒng)的影響與gI和gE糖蛋白密切相關(guān),gI和gE糖蛋白通過形成異源二聚體復(fù)合物,存在于感染細胞膜和病毒包膜中,參與PRV對神經(jīng)系統(tǒng)的侵襲及其傳播過程。

      2 豬偽狂犬病的流行病學(xué)特點

      2.1 傳染源

      豬是自然宿主,而其他動物,如牛、綿羊、狗、貓、山羊和兔,也可能受到感染。該病主要傳染源是隱性感染PRV的豬和體內(nèi)帶毒的鼠。其中,被感染豬可表現(xiàn)為長期帶毒排毒,帶毒豬的口鼻分泌物、尿道和生殖道分泌物和乳汁中的病毒均可排出體外,且排毒時間可持續(xù)1年。

      2.2 傳播途徑

      PRV可通過動物呼吸道黏膜、消化道或損傷的皮膚等多種途徑傳播。其中,以直接接觸性傳播較為常見,由帶毒豬通過直接接觸感染易感豬,易感豬還可通過接觸到帶毒豬的排泄物感染豬偽狂犬病。此外,PRV可在空氣中傳播數(shù)公里,且在低溫潮濕的環(huán)境中,PRV的毒力更強。

      帶毒妊娠母豬可經(jīng)胎盤感染胎兒,造成新生仔豬發(fā)病,其窩發(fā)病率為100%,15日齡仔豬發(fā)病死亡率為100%。

      由于受到帶毒豬的污染,養(yǎng)殖場內(nèi)工作人員和場內(nèi)器具常作為間接病毒攜帶載體,在場內(nèi)進行病毒傳播。

      2.3 季節(jié)性和流行性

      豬偽狂犬病一年四季均可發(fā)病,以寒冷潮濕的春、冬季尤為多發(fā),產(chǎn)仔旺季多發(fā)。根據(jù)其傳播特點,常呈現(xiàn)散發(fā)性和地方流行性。

      3 豬偽狂犬病的臨床表現(xiàn)

      3.1 新生仔豬感染PRV臨床癥狀

      新生仔豬主要表現(xiàn)為高熱不退,可高達41℃,精神萎靡,并伴有嘔吐和腹瀉[2]。發(fā)病后第一天,神經(jīng)癥狀比較明顯,表現(xiàn)為肌肉抽搐、震顫、麻痹繼而出現(xiàn)共濟失調(diào),呈劈叉姿勢,四肢劃動,口吐白沫,最終因呼吸困難引起昏迷直至死亡,新生仔豬死亡率可達100%。

      3.2 斷奶仔豬感染PRV臨床癥狀

      感染PRV的斷奶仔豬通常表現(xiàn)為神經(jīng)抽搐、嘔吐、腹瀉或頭頸歪斜,發(fā)病率通常為20%~40%,死亡率低于20%。如果受到胸膜肺炎放線菌和巴氏桿菌等細菌的繼發(fā)感染,通常會造成斷奶仔豬死亡。

      3.3 母豬感染PRV臨床癥狀

      妊娠母豬感染PRV后常發(fā)生流產(chǎn)、產(chǎn)木乃伊胎或產(chǎn)死胎。后備母豬感染PRV后通常也表現(xiàn)為神經(jīng)癥狀、厭食、驚厥、視覺消失或眼部炎癥等癥狀。此外,后備母豬還表現(xiàn)為不發(fā)情、配不上種,反復(fù)配種多次均無法配上,而延誤配種期。

      3.4 生長肥育感染PRV臨床癥狀

      生長肥育豬感染PRV后臨床上表現(xiàn)為精神萎靡、體溫升高、食欲減退或廢絕、增重減慢,并出現(xiàn)不同程度的呼吸道癥狀,如呼吸減弱、打噴嚏或咳嗽。

      4 豬偽狂犬病的診斷

      4.1 病毒分離與電鏡鑒別

      PRV分離鑒定是診斷豬偽狂犬病的黃金標準??捎帽茄适米印⑿怪城皇米踊蚪M織病料(如腦、心、肝、脾、肺、腎或扁桃體等器官)接種敏感細胞,在接種后72h內(nèi)可觀察細胞生長情況,若無細胞病變,可繼續(xù)盲傳分離病毒,并進一步在電鏡下觀察其形態(tài)繼而判定病毒種類[3],但是因所用儀器設(shè)備價格昂貴,操作人員需要經(jīng)過專業(yè)培訓(xùn)、操作步驟復(fù)雜且難度大等缺點,因此在臨床中運用較少。

      4.2 PCR檢測診斷

      早在1989年,國外學(xué)者Belak S等就成功建立PRV的PCR檢測方法。通常采集動物的分泌物或組織病料進行PRV基因擴增(PCR技術(shù)),以此來判斷患病動物的感染情況。相比較于病毒分離鑒定,PCR技術(shù)具有快速、敏感性高、特異性好、費用較省和樣品通量大等特點。

      4.3 血清學(xué)檢測診斷

      血清學(xué)診斷是豬偽狂犬病診斷中最常見方法之一,包括中和試驗、酶聯(lián)免疫吸附試驗和乳膠凝集試驗、膠體金免疫層析技術(shù)等。其中,微量血清中和試驗的特異性和敏感性最好,但由于技術(shù)條件要求高、試驗耗時長,常不被采用。因酶聯(lián)免疫吸附試驗快速、簡便,故常選為實驗室血清學(xué)檢測的重要手段,適用于較大樣品量的檢測。乳膠凝集試驗因其操作簡單、耗時最短,如今也被應(yīng)用在豬偽狂犬病的臨床診斷中[4]。膠體金免疫層析技術(shù)因具有較好的敏感性,且成本低、操作簡單、檢測下限低、快速等優(yōu)點,臨床上常用于血液、唾液、尿液等樣品的檢測[5]

      5 國內(nèi)外豬偽狂犬病凈化策略

      5.1 法國關(guān)于豬偽狂犬病凈化策略

      上世紀90年代,法國開始實施豬偽狂犬病凈化制度。首先,完備豬群檔案,限制豬群流動;其次,針對不同地區(qū),采用不同凈化策略;最后,禁止使用疫苗。一旦發(fā)生感染,采取3種措施:①撲殺;②部分撲殺;③接種疫苗。經(jīng)過近10年的嚴格執(zhí)行凈化制度,基本上達到無豬偽狂犬病的標準。

      5.2 美國豬偽狂犬病凈化策略

      針對豬偽狂犬病,美國的凈化措施分五個階段實施:①制定豬偽狂犬病凈化方案;②進行大范圍的抗體普查,對陽性個體進行控制;③對感染豬偽狂犬病并確診的豬進行撲殺;④嚴密監(jiān)控,做好檢測,嚴禁接種疫苗;⑤制定實施15年無豬偽狂犬病規(guī)劃,堅持做到陽性撲殺、禁用疫苗的長期階段。最終,美國在2003年正式宣布成功凈化豬偽狂犬病。

      5.3 中國現(xiàn)階段豬偽狂犬病凈化策略

      ①加強免疫接種并建立完善的免疫程序以控制種豬及仔豬的發(fā)病率;②對陽性感染豬進行撲殺并做好無害化處理,淘汰產(chǎn)有豬偽狂犬病仔豬的母豬;③建立無豬偽狂犬病毒感染的健康豬群并做到全進全出的飼養(yǎng)模式;④建立嚴格的衛(wèi)生消毒制度和人員出入場管理制度;⑤嚴格種豬引種檢疫,做好隔離篩查工作。

      6 豬偽狂犬病的防控措施

      6.1 合理制定免疫接種程序

      1) 豬偽狂犬疫苗種類 豬偽狂犬疫苗可以分為三類,即豬偽狂犬滅活疫苗、豬偽狂犬減毒活疫苗和豬偽狂犬基因缺失苗[6]。

      豬偽狂犬滅活疫苗安全性較好,不但不會向外界環(huán)境排毒,并且注射該疫苗后,毒力幾乎不會返強,減少隱性感染的可能性;此外,滅活疫苗的免疫原性較好,能有效提高母豬的特異性抗體水平,使仔豬一出生便獲得較高的母源抗體,抵抗PRV的感染。但由于其免疫效力差、需要多次免疫、作用時間短和成本較高等因素,生產(chǎn)應(yīng)用選擇性較低。

      減毒活疫苗具有免疫效果好,免疫作用時間長等特點,但生物安全性較差,易出現(xiàn)毒力返強的現(xiàn)象,在豬偽狂犬野毒抗體檢測中常難于與野毒感染區(qū)分。

      豬偽狂犬基因缺失疫苗同時具有免疫效力強、作用時間長和生物安全性強等優(yōu)勢,并利用檢測標記蛋白抗體的方法,將疫苗免疫株與野毒感染株進行區(qū)分,此方法已在豬養(yǎng)殖業(yè)中被普遍推廣。

      2) 仔豬的免疫接種程序 新生仔豬可考慮在出生后3日齡內(nèi)采用滴鼻法或噴霧法注入基因缺失疫苗0.5頭份,在30日齡時采用肌注法免疫gE基因缺失疫苗1頭份,而后在70日齡時再進行肌肉注射gE基因缺失疫苗1頭份。

      3) 母豬的免疫接種程序 后備母豬通常采用配種前接種基因缺失疫苗,繁殖母豬則采用跟胎免疫,安排在產(chǎn)前20~40d或在配種后75~95d進行基因缺失疫苗的免疫接種。針對疫情較為嚴重的養(yǎng)殖場,可接種基因缺失疫苗,每年免疫3~4次。

      6.2 嚴格做好種豬引種檢疫

      豬養(yǎng)殖場需建立嚴格的引種制度,爭取做到自繁自養(yǎng)。若必要引種,應(yīng)堅持做好引種前的豬偽狂犬病各項病原學(xué)檢測,檢測結(jié)果為陰性的種豬方可引種[7];但對購買的種豬要實行2個月隔離養(yǎng)殖,在隔離期間無疫病發(fā)生方可與其他豬群混養(yǎng)。

      6.3 強化飼養(yǎng)管理,定期淘汰陽性豬

      豬養(yǎng)殖場應(yīng)建立人員進出管理制度,封閉化管理養(yǎng)殖場。除場內(nèi)工作人員外,嚴禁其他人隨意進出養(yǎng)殖區(qū)域。工作人員進入養(yǎng)殖廠區(qū)前需更換工作服并做好自身消毒工作。在飼養(yǎng)方面,應(yīng)實行早期斷奶、全進全出的飼養(yǎng)方法。并定期進行防疫檢測,對檢測結(jié)果陽性豬和發(fā)病豬,要控制移動并將其早期隔離進行治療[8]。同時,對其他陰性豬群采用緊急免疫接種,并加強飼養(yǎng)管理,做好對易感動物的免疫保護。逐步在養(yǎng)殖場中實現(xiàn)用陰性種豬替代陽性個體,定期檢測淘汰野毒抗體陽性的種豬,為豬偽狂犬病的養(yǎng)殖場凈化打下基礎(chǔ)。

      6.4 加強養(yǎng)殖場內(nèi)消毒滅源工作

      建立養(yǎng)殖場內(nèi)消毒工作制度,對場內(nèi)進行嚴格消毒。當檢測出陽性個體或發(fā)生疫病時,隔離或撲殺陽性豬,并加強對圈舍、食槽、飲水器和各個通道的消毒工作。針對病死豬,及時進行無害化處理,對其接觸過的器具進行消毒,切實做到消滅傳染源和切斷傳播途徑[9]。此外,由于鼠是豬偽狂犬病毒的主要攜帶者,豬易食用被鼠污染的飼料而患病,因而應(yīng)當加強養(yǎng)殖場內(nèi)的滅鼠工作。

      參考文獻:

      [1] Pomeranz Lisa E, Reynolds Ashley E, Hengartner Christoph J. Molecular biology of pseudorabies virus: impact on neurovirology and veterinary medicine[J]. Microbiology and molecular biology reviews : MMBR,2005,69(3):462-500.

      [2] 江濤.豬偽狂犬病的流行病學(xué)、臨床癥狀、診斷與防控措施[J].現(xiàn)代畜牧科技,2021(4):102-103.

      [3] 彭金美,安同慶,趙鴻遠.豬偽狂犬病病毒新流行株的分離鑒定及抗原差異性分析[J].中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報,2013,35(1):l-4.

      [4] 馬玉玲,陶軍,殷方芝.豬偽狂犬病野毒感染檢測的意義[J].上海畜牧獸醫(yī)通訊,2010(6):65.

      [5] 牛穎穎.宿主蛋白GBP1在豬偽狂犬病病毒感染過程中的作用[D].西北農(nóng)林科技大學(xué),2020.

      [6] Xu Shaolan, Zhang Ganggang, Fang Bolong, et al. Lateral Flow Immunoassay Based on Polydopamine-Coated Gold Nanoparticles for the Sensitive Detection of Zearalenone in Maize[J]. ACS applied materials & interfaces,2019,11(34):31283-31290.

      [7] 王榮湖,楊建斌.豬偽狂犬病的綜合防治[J].中國畜牧獸醫(yī),2009 (3):204-205.

      [8] 李紀平,邵世義,朱海明,等.偽狂犬病高感染率豬群控制措施[J].當代畜牧,2005(12):18-19.

      [9] 劉孝剛,于金玲,吳寶君.豬偽狂犬病的病理學(xué)診斷與防治[J].中國獸醫(yī)雜志,2006,42(3):22-23.

      基金項目:廣東省重點研發(fā)項目(2019B020217002);中山市社會公益科技研究項目基金(2018B1012)。

      作者簡介:溫肖會(1982— ),女,副研究員,主要從事動物傳染病研究工作,E-mail:wenxiaohui@gdaas.cn;李天宇(1986— ),碩士,主要從事動物疫病防控和凈化研究,E-mail:lipai513@163.com。

      *通訊作者。

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