李 達(dá)，代振江，馮文武，李 俊，張玲莉，盧志遠(yuǎn)

（1.貴陽(yáng)黔靈山公園動(dòng)物園，貴州貴陽(yáng) 550001；2.貴州省綠色食品發(fā)展中心，貴州貴陽(yáng) 550000；3.貴州省種畜禽種質(zhì)測(cè)定中心，貴州貴陽(yáng) 550021）

大熊貓是我國(guó)國(guó)寶，也是我國(guó)獨(dú)特的稀有瀕危動(dòng)物，擁有非常高的觀賞價(jià)值及研究?jī)r(jià)值。為有效保護(hù)大熊貓，監(jiān)測(cè)、評(píng)估大熊貓實(shí)際健康狀況，對(duì)大熊貓進(jìn)行相關(guān)血液生理指標(biāo)利于相關(guān)疾病的診治、健康監(jiān)測(cè)[1]。經(jīng)血液指標(biāo)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，性別差異或年齡增長(zhǎng)可明顯部分指標(biāo)水平。這一研究結(jié)果有利于獸醫(yī)準(zhǔn)確評(píng)估大熊貓的相關(guān)健康狀態(tài)，第一時(shí)間發(fā)現(xiàn)患病大熊貓，為日常飼養(yǎng)管理提供真實(shí)、可靠的實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。

1 研究方法

選取圈養(yǎng)的70只大熊貓相關(guān)血常規(guī)及生化指標(biāo)進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，其中雌性熊貓30只（12只亞成年熊貓、14只成年熊貓、4只老年熊貓）；雄性熊貓40只（15只亞成年熊貓、21只成年熊貓、4只老年熊貓），包括貴陽(yáng)某大熊貓館的2只雄性大熊貓。投喂的食物包括蘋果、精飼料、竹筍、胡蘿卜、竹子以及營(yíng)養(yǎng)添加劑等[2]。

1.1 樣本采集及制備

經(jīng)過(guò)長(zhǎng)時(shí)間的行為訓(xùn)練，使大熊貓主動(dòng)伸出右上肢，借助靜脈采血針采集血液。所獲血樣保存于低溫環(huán)境，于60 min內(nèi)開(kāi)展生化指標(biāo)檢測(cè)。

1.2 測(cè)定方法

1.2.1 血液生理生化檢測(cè)

儀器采用COBASC501全自動(dòng)化分析儀。試劑及校準(zhǔn)品都采取原裝的配套試劑，對(duì)15項(xiàng)血液生化指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定。

1.2.2 血常規(guī)參數(shù)檢測(cè)

借助原裝的配套試劑以及BC5390全自動(dòng)血液分析儀開(kāi)展自動(dòng)檢測(cè)及探究，對(duì)18項(xiàng)血常規(guī)指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定。

1.2.3 數(shù)據(jù)處理

采取SPSS22.0軟件與Excel軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)開(kāi)展統(tǒng)計(jì)分析。

2 研究結(jié)果

2.1 大熊貓生理生化指標(biāo)

肌酐（CREA）、血清總膽汁酸（TBA）、間接膽紅素（I-BIL）、尿素（UREA）、直接膽紅素（D-BIL）、尿酸（UA）以及總膽紅素（T-BIL）7項(xiàng)中，UA為 29.0～ 96.0 μmol/L，TBA為 35.1～ 144.8 μmol/L，CREA為73.0～201.0 μmol/L，其余4項(xiàng)為0.00～15.14 μmol/L。

白蛋白（ALB）、球蛋白（GLB）、堿性磷酸 酶（ALP）以及總蛋白（TP）4項(xiàng) 中，TP為53.5～78.2 g/L，ALP為 66.5～368.7 g/L，其余2項(xiàng)為18.0～43.0 g/L。采取單因素方法進(jìn)行探究，從性別來(lái)看，大熊貓各生化指標(biāo)都沒(méi)有呈現(xiàn)極大的差異（P＞0.05）。

根據(jù)年齡分組對(duì)大熊貓的生化指標(biāo)之間的差異進(jìn)行對(duì)比，采取單因素方差分析，ALP與ALT區(qū)別明顯（P＜0.05）；ALP亞成組相對(duì)很高，ALT老年組明顯很低，其余生化指標(biāo)沒(méi)有明顯區(qū)別（P＞0.05）。

2.2 大熊貓的血常規(guī)指標(biāo)

依次比較血液參數(shù)間年齡差異與性別差異，采取Kolmogorov-Smirnov檢驗(yàn)，與正態(tài)分布相符，借助one-wayANOVA開(kāi)展年齡與性別檢驗(yàn)，顯著水平是P＜0.05。大熊貓血常規(guī)參數(shù)值以（±s）表示。

性別之間的各項(xiàng)參數(shù)通過(guò)檢驗(yàn)明確發(fā)現(xiàn)，在性別之間PDW參數(shù)指標(biāo)區(qū)別明顯（P＜0.05，*標(biāo)注），雌性組的均值進(jìn)一步高于雄性組，其余指標(biāo)區(qū)別不大。

采取單因素方差分析（P＜0.05，*標(biāo)注），對(duì)比年齡之間的區(qū)別。PLT的均值隨年齡上升呈快速下降的核心趨勢(shì)，在年齡間其他指標(biāo)差異顯著。

借助于雙因素方差分析充分對(duì)比大熊貓的血常規(guī)指標(biāo)在年齡以及性別方面的差異，獲得愈發(fā)詳細(xì)的結(jié)果，數(shù)據(jù)以（±s）表示，發(fā)現(xiàn)MCH、LYMPH#、PLT、NEUT%、P-LCR以及MCV指標(biāo)都有明顯的差異（P＜0.05，*標(biāo)注），見(jiàn)表1。

表1 不同性別、不同年齡大熊貓血液血常規(guī)指標(biāo)含量

3 討論

血液生化值可以將動(dòng)物的新陳代謝狀況以及生理機(jī)能更好地反映出來(lái)。血液生理指標(biāo)及血液學(xué)對(duì)大熊貓疾病的有效診治擁有關(guān)鍵價(jià)值[3～6]。檢測(cè)結(jié)果進(jìn)一步顯示，TP3、ALT以及ALP項(xiàng)指標(biāo)在大熊貓性別與年齡多組兩兩對(duì)比都有明顯區(qū)別；性別之間對(duì)比差異都不大；按照年齡分組則ALT以及ALP差異明顯[7]。

血常規(guī)實(shí)驗(yàn)中按照大熊貓性別以及年齡多組兩兩比較明確發(fā)現(xiàn)，MCH、LYMPH#、PLT、NEUT%、P-LCR以及MCV指標(biāo)有明顯的區(qū)別；根據(jù)性別分組可以得知，在性別之間PDW均值含量區(qū)別很大，雄性組比雌性組低，其余指標(biāo)在性別之間區(qū)別不大；根據(jù)年齡進(jìn)行分組，PLT均值含量的區(qū)別明顯，呈如下趨勢(shì)，即亞成年組＞成年組＞老年組。

本研究所獲得的最終結(jié)果可為大熊貓健康情況的準(zhǔn)確判斷、疾病診治提供參考數(shù)據(jù)，利于實(shí)現(xiàn)對(duì)大熊貓的有效保護(hù)。