奶牛亞臨床酮病相關(guān)血液指標(biāo)變化和治療方案的經(jīng)濟(jì)分析

曹浩，龐喜岳，宋玉溪，白云龍，夏成，徐闖

（黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，大慶 163319）

在我國(guó)經(jīng)濟(jì)不斷進(jìn)步飛躍的情況下，我國(guó)人民對(duì)生活品質(zhì)的要求逐漸提高，乳制品漸漸打開(kāi)了市場(chǎng)，進(jìn)入人們的生活。正因?yàn)閷?duì)乳制品的需求不斷加大，我國(guó)奶牛集約化及規(guī)?；翀?chǎng)得到了很大發(fā)展，同時(shí)一些生產(chǎn)疾病呈現(xiàn)升高的趨勢(shì)。泌乳早期奶牛由于能量代謝負(fù)平衡容易發(fā)生SCK[1]。SCK是一種以酮體濃度異常升高的病理綜合征[2-3]。被診斷患有SCK的奶?；加衅渌a(chǎn)后疾?。ㄈ缯嫖缸笠坪妥訉m炎）等疾病的風(fēng)險(xiǎn)增加，離群的風(fēng)險(xiǎn)增加，泌乳早期的產(chǎn)奶量下降，奶牛的淘汰率增加[3]。Brunner等[4]研究了世界范圍內(nèi)SCK的患病率，中國(guó)為32.9%、澳大利亞為9.6%、哥倫比亞為8.3%、烏克蘭為39%、新西蘭為40.1%，由此可以看出SCK在世界各地的奶牛場(chǎng)都會(huì)造成十分嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。

奶牛的產(chǎn)奶量增加會(huì)導(dǎo)致新陳代謝的顯著變化，當(dāng)奶牛的采食需求還未恢復(fù)時(shí)，奶牛產(chǎn)奶與日常代謝的活動(dòng)得不到足夠的飼料供給能量，就會(huì)消耗奶牛體內(nèi)的大部分脂肪以補(bǔ)充機(jī)體所需要的能量，這就造成了能量的負(fù)平衡[5]。由于糖異生過(guò)程中會(huì)生成除了丙酸以外的其他兩種揮發(fā)性脂肪酸——乙酸和丁酸[6]，當(dāng)奶牛的飼料中精飼料的比列過(guò)高，會(huì)導(dǎo)致乙酸和丁酸增多而丙酸減少，Dufield等[7]的報(bào)道中表示產(chǎn)犢后患有酮病的奶牛真胃左移的發(fā)生幾率是健康奶牛的2.6倍?；加型〉哪膛．a(chǎn)奶量會(huì)下降，淘汰率增加，同時(shí)由于酮病的發(fā)生奶牛機(jī)體的免疫功能下降，使子宮炎的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)增加。由于奶牛的產(chǎn)奶量下降、飼料成本、飼料效率以及產(chǎn)后疾病的增加、死牛以及病牛的治療費(fèi)用，都將為牧場(chǎng)的經(jīng)濟(jì)效益帶來(lái)巨大損失。

試驗(yàn)通過(guò)對(duì)奶牛血清中各項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行比較，驗(yàn)證與奶牛亞臨床酮病相關(guān)的指標(biāo)。通過(guò)使用丙二醇的方式對(duì)奶牛進(jìn)行治療，將患病奶牛分為四組，分別采用四種不同的治療方案，分別為：（1）300 mL，灌服1 d；（2）300 mL，灌服2 d；（3）500 mL，灌服1 d；（4）500 mL，灌服2 d。試驗(yàn)對(duì)奶牛集約化養(yǎng)殖中奶牛亞臨床酮病問(wèn)題的研究和預(yù)防提供一定的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

研究選取黑龍江省大慶市某奶牛場(chǎng)產(chǎn)后10~30 d荷斯坦奶牛40頭，試驗(yàn)?zāi)膛Ｗ杂娠曃狗绞较嗤?，自由飲水?/p>

1.2 試驗(yàn)?zāi)膛７纸M

試驗(yàn)通過(guò)奶牛血酮分析儀使用全血測(cè)定奶牛血液BHBA水平，血液BHBA結(jié)果基于≥1.2 mmol·L-1的切點(diǎn)進(jìn)行判定，奶牛一次血液測(cè)試的結(jié)果超過(guò)相應(yīng)的臨界切點(diǎn)，該奶牛判定為SCK。根據(jù)檢測(cè)結(jié)果，試驗(yàn)設(shè)置SCK組（n=16）和對(duì)照組CON組（n=24），兩組所有奶牛均采用舍飼，自由的采食和自由的飲水。

1.3 試驗(yàn)牛場(chǎng)的日糧組成

日糧組成：玉米21.40%、豆粕6.44%、羊草20.50%、玉米青貯47.70%、濃縮料3.20%、磷酸氫鈣0.15%、小蘇打0.33%、食鹽0.28%；

營(yíng)養(yǎng)水平：干物質(zhì)75.60%、粗蛋白質(zhì)11.65%、粗脂肪4.10%、粗纖維21.42%、鈣0.52%、磷0.43%、鉀0.81%、鎂0.40%、泌乳凈能20.32 MJ·kg-1。

1.4 血樣采集

血樣的采集：根據(jù)場(chǎng)內(nèi)管理系統(tǒng)的記錄，選取產(chǎn)后10~30 d的奶牛于尾根靜脈無(wú)菌采集試驗(yàn)牛血液10 mL，4 000 r·min-1離心5 min，分離血清-80℃保存，待測(cè)。采集的血液立即在4℃保存，血清和血漿在-20°C保存，直至測(cè)量。

對(duì)奶牛體況信息、肝功指標(biāo)、能量代謝指標(biāo)和礦物質(zhì)元素水平的指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)，以上指標(biāo)除了體況情況使用觀察法，其他檢測(cè)均按照其試劑盒中說(shuō)明書(shū)的具體步驟進(jìn)行或送至檢測(cè)公司檢測(cè)。

1.5 檢測(cè)項(xiàng)目及方法

奶牛體況，使用BCSCowdition軟件根據(jù)奶牛5分制體況測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)定；

β-羥基丁酸（BHBA），單位mmol·L-1，使用奶牛血酮分析儀，采集全血進(jìn)行測(cè)量。

非酯化脂肪酸（NEFA），單位mmol·L-1，委托吉大四院使用NEFA試劑盒通過(guò)比色法進(jìn)行測(cè)量。

葡萄糖（GLU），單位mmol·L-1，委托吉大四院使用GLU試劑盒通過(guò)葡萄糖氧化酶法進(jìn)行測(cè)量。

球蛋白（GLB），單位g·L-1，委托吉大四院使用GLB試劑盒通過(guò)ELISA進(jìn)行測(cè)量。

甘油三酯（TG），單位mmol·L-1，委托吉大四院使用TG試劑盒通過(guò)酶法進(jìn)行測(cè)量。

門(mén)氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST），單位U·L-1，委托艾迪康公司使用AST試劑盒通過(guò)速率法進(jìn)行測(cè)量。

丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT），單位U·L-1，委托艾迪康公司使用ALT試劑盒通過(guò)速率法進(jìn)行測(cè)量。

白蛋白（ALB），單位g·L-1，委托吉大四院使用ALB試劑盒通過(guò)比色法進(jìn)行測(cè)量。

堿性磷酸酶（ALP），單位U·L-1，委托艾迪康公司使用ALP試劑盒通過(guò)速率法進(jìn)行測(cè)量。

總蛋白（TP），單位g·L-1，委托吉大四院使用TP試劑盒通過(guò)雙縮脲法進(jìn)行測(cè)量。

鈣（Ca），單位mmol·L-1，委托上海勁馬使用Ca試劑盒通過(guò)偶氮胂Ⅲ比色法進(jìn)行測(cè)量。

鎂（Mg），單位mmol·L-1，委托上海勁馬使用Mg試劑盒通過(guò)偶氮胂Ⅲ比色法進(jìn)行測(cè)量。

磷（P），單位mmol·L-1，委托上海勁馬使用P試劑盒通過(guò)紫外線終點(diǎn)法進(jìn)行測(cè)量。

鐵（Fe），單位μg·L-1，委托上海勁馬使用硒檢測(cè)試劑盒通過(guò)原子吸收法進(jìn)行測(cè)量。

1.6 治療方法

以丙二醇的方式對(duì)奶牛進(jìn)行治療，并通過(guò)將患病奶牛分為四組，分別采用四種不同的治療方案，分別為：（1）300 mL，灌服1 d；（2）300 mL，灌服2 d；（3）500 mL，灌服1 d；（4）500 mL，灌服2 d。之后是其治療后3 d的BHBA和產(chǎn)奶量數(shù)據(jù)，統(tǒng)計(jì)治療費(fèi)用及3 d平均產(chǎn)奶量變化造成的影響，對(duì)不同治療方案的療效和經(jīng)濟(jì)效益進(jìn)行評(píng)估，以確定出比較優(yōu)秀的治療方案。

1.7 統(tǒng)計(jì)分析

使用IBM SPSS 20.0軟件對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)與分析，各組的樣品獨(dú)立樣本T檢驗(yàn)分析。數(shù)據(jù)的結(jié)果以“均值±標(biāo)準(zhǔn)差”進(jìn)行表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 奶?；拘畔?/h3>

表1顯示，本組奶牛年齡、胎次、體況等數(shù)據(jù)并無(wú)顯著差異。

表1 奶?；拘畔able 1 Cow basic information

2.2 能量代謝指標(biāo)

表2數(shù)據(jù)顯示，SCK組BHBA、NEFA水平顯著（P＜0.05）高于CON組，SCK組TG水平顯著（P＜0.05）高于CON組，其他數(shù)據(jù)并無(wú)明顯差異。

表2 能量代謝指標(biāo)Table 2 Energy metabolism index

表3顯示，SCK組的AST和ALB水平極顯著 （P＜0.01）高于CON組，其他數(shù)據(jù)并無(wú)明顯差異。

表3 肝功指標(biāo)Table 3 Liver function index

2.3 礦物質(zhì)元素水平

表4顯示，被測(cè)牛群礦物質(zhì)元素水平無(wú)明顯差異。

表4 礦物質(zhì)元素水平Table 4 Mineral element level

2.4 丙二醇灌服治療對(duì)亞臨床酮病的影響

表5數(shù)據(jù)顯示，所有的酮病奶牛都被治愈，但是1組有一頭奶牛復(fù)發(fā)酮病，2組治療效果較好，無(wú)復(fù)發(fā)，相比3、4組損失較少，3、4組治療效果也不錯(cuò)，但是相比較而言3組產(chǎn)奶量損失較大，而四組的花費(fèi)最多。

表5 灌服丙二醇的治療情況及花費(fèi)金額Table 5 Propylene glycol treatment and cost

3 討論

3.1 體況對(duì)亞臨床酮病的影響

體況的評(píng)分是衡量奶牛機(jī)體體脂含量的指標(biāo)，評(píng)分高的患有產(chǎn)后疾病的概率會(huì)下降，產(chǎn)奶量也會(huì)更高，與生產(chǎn)性能有直接關(guān)系。在前人的研究中，體況是圍產(chǎn)期奶牛生理狀態(tài)的重要評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)之一，體況過(guò)高相比于低體況奶牛酮病患病率較高，而低體況相比于適中體況奶牛酮病患病率較高，奶牛體況也在一定程度上影響其血液生化指標(biāo)。在試驗(yàn)中選取體況相近的奶牛，排除奶牛體況對(duì)酮病以及一系列血液生化指標(biāo)的影響，BCS和血液分析的結(jié)果顯示，產(chǎn)后BCS評(píng)分SCK組與對(duì)照組無(wú)顯著差異（P>0.05）。

3.2 能量代謝指標(biāo)對(duì)亞臨床酮病的影響

試驗(yàn)中得到的數(shù)據(jù)中顯示兩組奶牛BHBA有差異性，患有SCK的奶牛血液中BHBA的含量要比健康奶牛的要高。奶牛是反芻動(dòng)物，無(wú)法直接從食物中攝取葡萄糖，需要糖異生作用，當(dāng)飼喂奶牛的精料過(guò)多的時(shí)候，乙酸與丁酸的含量升高，被瘤胃上皮細(xì)胞吸收，轉(zhuǎn)化成大量的BHBA[8]。同時(shí)高產(chǎn)奶牛干物質(zhì)攝入減少，而泌乳等能量支出增加，導(dǎo)致能量負(fù)平衡，引發(fā)高非酯化脂肪酸（NEFA）血癥，肝臟能夠大量吸收NEFA，適量的NEFA能夠在肝臟完全氧化以供能，但過(guò)量NEFA則發(fā)生不完全氧化生成大量酮體（β-羥丁酸（BHBA）、乙酰乙酸（AA）和丙酮），以及發(fā)生酯化并引起肝脂蓄積，進(jìn)而引發(fā)酮病和脂肪肝[9]，試驗(yàn)中的數(shù)據(jù)與上述結(jié)果一致。血漿中的NEFA和BHBA會(huì)促使奶牛食欲減退與廢絕，進(jìn)一步加劇亞臨床酮病的發(fā)生[10]。

數(shù)據(jù)顯示，患有SCK的奶牛血液中的Glu較低于健康奶牛組，Glu含量低表明奶牛體內(nèi)你能量水平不足，血糖濃度低，而TG、GLB含量高于健康奶牛組，TG含量顯著（P<0.05）升高說(shuō)明了酮病奶牛整體的能量水平低于健康奶牛，導(dǎo)致其體脂動(dòng)用過(guò)多[11]，GLB含量較高表明酮病奶牛體內(nèi)發(fā)生一定的機(jī)體損傷，從而導(dǎo)致血液球蛋白濃度升高。研究結(jié)果與前人研究結(jié)果相同。

3.3 肝臟功能指標(biāo)對(duì)亞臨床酮病的影響

患有SCK的奶牛血液中的AST與ALB較健康奶牛血液中的含量要高，數(shù)據(jù)顯示有較大差異，與前人研究一致[12]。AST和ALB是反映肝臟損傷的重要指標(biāo)，產(chǎn)后奶牛血液中AST、ALB的含量較高說(shuō)明由于患上酮病，奶牛肝臟周?chē)写罅恐疚镔|(zhì)蓄積，產(chǎn)生一定的肝損傷，也因此導(dǎo)致脂肪肝的發(fā)生概率比較高，同時(shí)存在肝臟慢性中毒的現(xiàn)象。高濃度NEFA和酮體也會(huì)造成機(jī)體產(chǎn)生一定程度的脂肪肝，同時(shí)具有脂毒性,能誘發(fā)肝臟的病理?yè)p傷和脂代謝紊亂[13]?；加兄靖蔚哪膛Ｑ逯械墓缺D(zhuǎn)氨酶和天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶的活性要比健康奶牛的多，也在另一方面表明患有脂肪肝的奶牛出現(xiàn)了不同程度上的肝臟損傷，這是患有脂肪肝的奶牛脂肪肝加劇浸潤(rùn)的必然結(jié)果。多種條件的作用下，奶牛機(jī)體產(chǎn)生應(yīng)激，造成了血液中AST、ALB等一系列生化指標(biāo)的變化[14]，試驗(yàn)得出了相同的數(shù)據(jù)趨勢(shì)。同時(shí)也證明了酮病奶牛發(fā)生了一定程度的肝損傷，對(duì)奶牛機(jī)體有較大的影響。

3.4 礦物質(zhì)元素對(duì)亞臨床酮病的影響

幾乎所有的圍產(chǎn)期奶牛在泌乳早期都處于鈣的負(fù)平衡，因此血清中的鈣濃度常常作為衡量奶牛鈣異常的重要指標(biāo)，低鈣的同時(shí)也伴隨著低磷的現(xiàn)象[15]。低磷血癥常出現(xiàn)于產(chǎn)后血紅蛋白和牛的生產(chǎn)癱瘓，還有日糧的攝入量不足與慢性消耗性疾病都會(huì)導(dǎo)致血磷水平的降低[16]。

在研究中，試驗(yàn)?zāi)膛５V物質(zhì)元素并無(wú)較大差異。通過(guò)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，該養(yǎng)殖場(chǎng)對(duì)奶牛產(chǎn)后微量元素補(bǔ)充及時(shí)，產(chǎn)后飼喂美佳達(dá)、博威鈣等保健制劑，對(duì)奶牛生產(chǎn)有極大的好處。

3.5 丙二醇灌服治療的經(jīng)濟(jì)分析

丙二醇可以治療酮病時(shí)因?yàn)樗且环N生糖前體，因此可以通過(guò)為患有SCK的奶牛灌服丙二醇提高血糖水平[17]，用來(lái)減少血漿中游離的脂肪酸[18-19]，丙二醇通過(guò)多種途徑進(jìn)行代謝，其中一部分發(fā)酵成丙酸和乳酸，另一部分直接被瘤胃壁吸收通過(guò)肝臟的糖異生作用生成葡萄糖，當(dāng)中的丙酸也會(huì)在肝細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)化為葡萄糖[20]。試驗(yàn)中第二組的方案與第三組方案都獲得了不錯(cuò)的成果，然而由于第三組的產(chǎn)奶量有較大的損失，所以認(rèn)為第二組為最具有經(jīng)濟(jì)效益的治療方案。由于是在集約化奶牛場(chǎng)進(jìn)行的試驗(yàn)，僅對(duì)產(chǎn)奶量和治療所花費(fèi)的費(fèi)用進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)，雖然數(shù)據(jù)可能還不足夠詳盡，但依舊具有一定的指導(dǎo)意義，根據(jù)前人的研究[21]，可能將對(duì)每小時(shí)的人工成本；每次BHBA測(cè)試的費(fèi)用；每小時(shí)測(cè)試的母牛數(shù)量；每頭奶牛的治療數(shù)據(jù)；PG的成本；PG治療時(shí)間；更換母牛的交換成本；牛奶價(jià)格、飼料成本等因素進(jìn)行綜合統(tǒng)計(jì)，以明確奶牛酮病治療的詳細(xì)成本變化。

4 結(jié)論

研究驗(yàn)證了酮病奶牛在患病過(guò)程中，血液生化指標(biāo)發(fā)生了較大改變，揭示了在該過(guò)程中，奶牛機(jī)體發(fā)生了較嚴(yán)重的能量負(fù)平衡，同時(shí)對(duì)體內(nèi)臟器造成了一定的損傷，不利于奶牛健康。治療方案幫助確定灌服丙二醇治療奶牛酮病較優(yōu)的方案，為集約化奶牛養(yǎng)殖場(chǎng)提供重要參考。