微小RNA 在甲狀腺乳頭狀癌中的異常表達(dá)和研究進(jìn)展

婁永慶，陳紅躍，楊萌萌，武紅園，段祥凱

（1.河南中醫(yī)藥大學(xué)，河南 鄭州 450002；2.河南省中醫(yī)院 甲狀腺乳腺科，河南 鄭州 450002）

0 引言

甲狀腺癌（TC）是一種起源于甲狀腺濾泡或?yàn)V泡旁細(xì)胞的惡性腫瘤，也是內(nèi)分泌系統(tǒng)和頭頸部腫瘤中最常見的惡性腫瘤之一[1]。近年來，全球范圍內(nèi)TC 的發(fā)病率呈迅速增長(zhǎng)趨勢(shì)，在韓國(guó)等國(guó)家甚至已成為發(fā)病率最高的惡性腫瘤[2]。在我國(guó)城市地區(qū)，甲狀腺癌發(fā)病率居所有女性惡性腫瘤的第四位，目前仍以每年20%的速度持續(xù)增長(zhǎng)[3]，以此趨勢(shì)，預(yù)計(jì)該疾病將成為全球第四大主要癌癥[4]。甲狀腺癌根據(jù)起源部位及分化情況可分為：甲狀腺乳頭狀癌（papillary thyroid carcinoma，PTC）、甲狀腺濾泡狀癌（follicular thyroid carcinoma，F(xiàn)TC）、甲狀腺髓樣癌（medullary thyroid carcinoma，MTC）和未分化型甲狀腺癌（anaplastic thyroidc arcinomas，ATC），其中PTC 約占所有TC 的90%，盡管大多數(shù)PTC 在生物學(xué)行為上表現(xiàn)良好，但是由于其發(fā)病率和復(fù)發(fā)率均較高，死亡人數(shù)仍占全部甲狀腺癌死亡人數(shù)的50%以上[5]。目前，醫(yī)學(xué)上對(duì)于甲狀腺癌的產(chǎn)生、復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移的分子作用機(jī)制尚無統(tǒng)一認(rèn)知，仍需進(jìn)一步深入探索研究。

1 MiRNA 研究現(xiàn)狀

MicroRNAs（miRNAs）是一類小的內(nèi)源性、非編碼RNA，由21-25 個(gè)核苷酸組成[6]，它們主要功能是在信使 RNA（messenger RNA,mRNA）翻譯或降解的過程中，充當(dāng)負(fù)性調(diào)節(jié)劑的作用，這一點(diǎn)在動(dòng)植物生長(zhǎng)發(fā)育中極為重要[7]。目前研究報(bào)道的1000 多種miRNAs，共同參與調(diào)節(jié)所有基因的三分之一[8]。MiRNAs的表達(dá)具有組織特異性，在包括肺癌，胰腺癌，乳腺癌和結(jié)腸直腸癌在內(nèi)的多種腫瘤中，miRNAs 的表達(dá)失調(diào)已有報(bào)道[9-12]。而近來的研究結(jié)果也表明，多種miRNAs 在甲狀腺乳頭狀癌中出現(xiàn)表達(dá)失調(diào)。筆者就miRNAs 在甲狀腺乳頭狀癌中的相關(guān)研究進(jìn)行綜述。

2 MiRNA 在甲狀腺癌發(fā)展中的作用

近十幾年來，通過眾多科研人員和學(xué)者長(zhǎng)期不斷的探索，研究發(fā)現(xiàn)多種miRNAs 與甲狀腺癌的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移和預(yù)測(cè)的關(guān)系密切。這些異常表達(dá)的miRNAs 有的發(fā)揮致癌基因的作用，有的充當(dāng)抑癌基因的角色，也有的則會(huì)直接或間接影響甲狀腺癌的轉(zhuǎn)移等。

Castagna 等[13]通過細(xì)針穿刺細(xì)胞學(xué)檢查（FNA）的方法研究分析了168 例甲狀腺結(jié)節(jié)患者的174 FNAC 的11 種miRNAs（miRNA197;-187;-181b-3p;-181b-5p;-224;-181a;146b;-221;-222;-155 和miRNA-183）與良性病變相比在癌癥組織中表達(dá)出現(xiàn)上調(diào)，其中僅在miRNA-146b，miRNA-221 和miRNA-222 中表達(dá)倍數(shù)變化≥5。提示這3 種miRNAs很可能與PTC 的發(fā)生、發(fā)展相關(guān)，并有可用于難診斷的FNA 組織的輔助鑒別方法及不確定性病變分類的潛力。

Mancikova 等[14]對(duì)127 例甲狀腺腫瘤及17 個(gè)正常組織樣本進(jìn)行了microRNA 深度測(cè)序研究，結(jié)果顯示：在78 例PTC 中miR-146b、miR-221 和miR-222表達(dá)上調(diào)，而miR-1179 則出現(xiàn)了下調(diào)，這對(duì)新型分子預(yù)測(cè)靶標(biāo)的鑒定為轉(zhuǎn)化的濾泡細(xì)胞的增殖潛力提供了不同的觀點(diǎn)。同時(shí)，在BRAF 突變的陽性樣本中miR-7 和miR-204 出現(xiàn)極度下調(diào)，miR-204 在PTC 和FTC 癌組織中的結(jié)果是一致的，因此研究人員推測(cè)該miRNA 的靶標(biāo)會(huì)破壞幾個(gè)細(xì)胞過程，例如維持上皮細(xì)胞的生理過程，用以解釋這些患者在臨床上出現(xiàn)預(yù)后相對(duì)較差的問題。另一個(gè)腫瘤組織標(biāo)志物miR-7，該研究組確定其在BRAF 突變的腫瘤中被特異性地低甲基化并與基因表達(dá)相關(guān)，通過上述機(jī)制該分子可以被特異性地在BRAF 陽性甲狀腺乳頭狀腫瘤中表達(dá)上調(diào)。最后，通過將臨床隨訪信息與microRNAs 表達(dá)整合分析，提出了預(yù)測(cè)疾病復(fù)發(fā)的新模型。

Ling 等[15]對(duì)正常甲狀腺、良性甲狀腺疾病與甲狀腺癌對(duì)比薈萃分析發(fā)現(xiàn)，在正常對(duì)照的甲狀腺癌中，miRNA-221/222 的合并計(jì)算合并的倍數(shù)變化（FC）為13.85 和13.75。對(duì)于miRNA-221/222，合并靈敏度為0.79（95%CI=0.73-0.85），特異性為0.84（95%CI=0.76-0.90）和曲線下面積（AUC）值為0.88（0.85-0.91）。因此，研究者認(rèn)為miRNA-221/222表達(dá)水平的差異可為探討甲狀腺癌的病因提供線索。此外，miRNA-221/222 還可作為診斷甲狀腺癌的分子生物標(biāo)志物，用以提高甲狀腺癌的診斷準(zhǔn)確率。

James 等[16]進(jìn)行臨床試驗(yàn)研究后發(fā)現(xiàn)，與沒有復(fù)發(fā)PTC 患者（NR-PTC）相比，復(fù)發(fā)PTC 患者（RCPTC），miRNA-222 和miR-146b 分別在RC-PTC 腫瘤中超過108 倍和8.9 倍之多；術(shù)前PTC 患者的血漿中，與來自健康志愿者的血漿水平相比，miR-222 和miR-146b 的水平相差較大；在進(jìn)行甲狀腺切除術(shù)后，患者血漿中miR-222 和miR-146b 的檢測(cè)水平分別出現(xiàn)了2.7 倍和5.1 倍的減少。因此，該研究組認(rèn)為miR-222 和miR-146b 的腫瘤水平與PTC 復(fù)發(fā)高度相關(guān)，并且循環(huán)中的miR-222 和miR-146b 的檢測(cè)水平可以預(yù)測(cè)PTC 的存在。miR-222 和miR-146b 非常具有作為腫瘤生物標(biāo)志物的潛力，以根據(jù)復(fù)發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)提高患者分層，值得作為PTC 監(jiān)測(cè)的循環(huán)生物標(biāo)志物進(jìn)行深層次研究。

Jahanbani 等[17]通過定量實(shí)時(shí)聚合酶鏈反應(yīng)，在PTC（經(jīng)典，包膜和濾泡），NIFTP 和增生病變的113 個(gè)甲狀腺組織中檢測(cè)了84 種miRNAs 的表達(dá)水平。結(jié)果顯示：不同組中miRNAs 的表達(dá)情況差異較大，miR-7-5p，miR-222-3p 和miR-146b-5p 可以高靈敏度和特異性區(qū)分不同的組。miR-144-3p，miR-15a-5p，miR-20a-5p，miR-32-5p miR-142-5p，miR-143-3p 和miR-20b-5p 的下調(diào)與PTC 中的攻擊行為密切相關(guān)。循環(huán)miR-146b-5p，miR222-3p，miR-155-5p 和miR-378a-3p 是PTC 的潛在診斷和后續(xù)治療的生物標(biāo)記。因此，該研究組認(rèn)為miR-7-5p 的表達(dá)水平下調(diào)可以用于區(qū)分NIFTP 與腺體增生；miR-222-3p 的表達(dá)水平上調(diào)則可用以區(qū)分NIFTP 中的PTC 濾泡變體；高水平的miR-146b-5p 是PTC 的獨(dú)特特征。這些miRNAs 在PTC 和NIFTP 的診斷中將發(fā)揮極為重要的作用，有助于臨床醫(yī)生避免不必要的甲狀腺切除術(shù)以及改善臨床管理。

3 總結(jié)與展望

綜上所述，不同miRNAs 在甲狀腺乳頭狀癌中的表達(dá)水平均相差較大，miRNA 作為一種新的異常生物標(biāo)志物用以腫瘤的鑒別診斷是完全可行的，例如：miR-146b、miR-221 和miR-222 在BRAF 突 變 型PTC中常常高表達(dá)，而miR-7 和miR-204 的表達(dá)水平卻出現(xiàn)極度下調(diào)。miRNAs 表達(dá)水平的高低與腫瘤的預(yù)后密切相關(guān)，因此，我們可以通過分析miRNAs 的表達(dá)水平來幫助我們對(duì)PTC患者的治療、管理進(jìn)行分層。由于miRNAs 可以調(diào)控腫瘤細(xì)胞的增殖、分化、侵襲和凋亡過程，因此可通過干擾PTC 中miRNAs 及其下游靶標(biāo)蛋白的表達(dá)，達(dá)到抑制癌癥的發(fā)生、發(fā)展的目的，miRNAs 極有可能成為TC 診斷的重要輔助手段及治療的新策略、新思路、新方法。但是，由于目前對(duì)miRNAs 進(jìn)行的臨床和實(shí)驗(yàn)室研究體量偏小，前瞻性研究不足，miRNA 對(duì)甲狀腺癌的作用機(jī)制尚不明確，醫(yī)學(xué)界仍無法達(dá)成統(tǒng)一共識(shí)，需要投入更多的研究來進(jìn)一步的討論。