草莓脫毒種苗兩段繁育技術

田宗軒，汪洪清

（1.重慶市巫溪縣農業(yè)委員會，重慶 405899；2.巫溪縣溪月果蔬種植專業(yè)合作社，重慶 405899）

草莓在長期的無性繁殖過程中，自身會感染和積累各種病毒，非常會引發(fā)草莓病毒，輕者植株生長勢減弱，果實變小，產量降低；重者會出現葉片皺縮、植株矮小、果實奇形，品質低劣、產量下降，給種植戶帶來嚴重的經濟損失。目前還沒有有效的藥劑防治病毒病。莖尖脫毒、原原種苗在組培室進行，原原種苗的馴化在馴化溫室進行，繁殖原種苗、良種苗在生產基地進行。整個過程劃分兩段：原原種苗——原原種苗的馴化在巫溪縣脫毒組培中心進行，原種苗、良種苗繁殖在高山露地良種苗圃進行。

1 組培室莖尖脫毒

1.1 配制培養(yǎng)基

初代培養(yǎng)基以MS培養(yǎng)基成分為基礎，添加細胞分裂素每升1.0mg，吲哚丁酸每升0.1～0.2mg，赤霉素每升0.1～0.2mg，蔗糖每升30g，瓊酯每升5～7g。

大量無素：硝酸銨1650mg，硝酸鉀1900mg，磷酸二氫鉀170mg，氯化鈣440mg，硫酸鎂370mg，硫酸錳223mg，硫酸鋅8.6mg，硼酸6.2mg。

微量元素：碘化鉀0.83mg，硫酸銅0.025mg，氯化鈷0.025mg，鉬酸鈉0.25mg。

鐵鹽：乙二銨四乙酸二鈉37.3mg，硫酸亞鐵27.8mg，肌醇100mg，甘氨酸2mg。

有機成分：鹽酸吡哚醇0.5mg，鹽酸磺胺素0.1mg，煙酸0.5mg，蔗糖342.31mg。

PH：6.6～7.0

1.2 選取莖尖，莖尖處理，莖尖接種

應在長勢良好，沒有病蟲害的生產田進行，不適宜選擇種苗田，選擇匍匐莖長的莖尖，選取時間應在匍匐莖旺盛生長期。選擇方法：先進行株選，選擇植株健壯苗，結果多，果形大，并具有品種典型性狀的植株，再匍匐莖長勢進行選擇，莖尖葉片完全沒有展開的匍匐莖，莖粗2～4mm，選好的匍匐莖指前端4～5cm的芽段，先用洗潔精進行沖洗，用自來水反復沖洗干凈，接種前先將室內紫外殺燈打開，同時將超凈工作臺紫外殺菌燈打開，殺菌30～40min，空間消毒，操作人員用75%的消毒酒精棉對操作臺面全面消毒。將洗凈的莖尖倒入瓶中，加75%的酒精浸泡殺菌2～3min，再用0.1%升汞溶液浸泡5～10min，將升汞溶液倒出后，用無菌水反復沖洗3～5次，再用無菌水浸泡5min，將水倒出，用鑷子將酒精棉夾起點著，快速擦洗所有的器具，殺菌消毒，并將周圍的工作臺面徹底消毒殺菌，為了消毒徹底，要反復多擦洗幾遍，最后將鑷子和解剖刀，在酒精燈上火燒消毒。緊接著，用鑷子取出莖尖，剝去外面的包葉，露出生長點時，用解剖刀的尖部，將大小在0.2～0.3mm剝莖尖生長點剝出，迅速置入瓶中的培養(yǎng)基上，每個瓶中可以接種4～5莖尖，馬上將瓶封上，寫上品種和接種日期，培養(yǎng)室內溫度20～25℃，光照2000～3000個勒克斯，初代培養(yǎng)誘導莖尖形成預傷組織，并分化長出莖葉，每天保證光照14～16h，前20～30d，莖尖產生預傷組織，開始分化新芽，以后新芽不斷增加，形成小芽叢，經過30d的生長，芽叢長出莖葉，長成茂密的葉叢。初代培養(yǎng)中就是要解決雜菌污染問題，要及時將雜菌污染的瓶檢出。

1.3 繼代培養(yǎng)

初代苗只有莖葉，沒有根。一般情況下，初代苗長到3～5cm時，就可以轉瓶，專瓶后的培養(yǎng)就叫繼代培養(yǎng)，也叫增殖培養(yǎng)，主要是為了擴繁初代苗，繼代培養(yǎng)殖需要更換培養(yǎng)基，在MS培養(yǎng)基的基礎上，附加細胞分裂素0.3～0.5mg/L，吲哚丁酸0.1mg/L，赤霉素0.1mg/L，蔗糖30g/L，瓊酯5～7g/L。細胞分裂素主要促進形成愈傷組織和芽，吲哚丁酸主要是促進形成根，赤霉素主要是促進形成莖葉，繼代轉瓶接種時，消毒方法同莖尖接種。打開培養(yǎng)瓶用鑷子將脫毒苗輕輕夾出，用剪刀將小苗葉片剪掉，只留0.5cm長的葉柄，將單株分開，將葉柄朝上放到繼代培養(yǎng)基上，每瓶放4～5個，將瓶口封住，放到培養(yǎng)室中，光照溫度同初代培養(yǎng)。在繼代培養(yǎng)過程中，莖基部不斷分生，最后形成4～6個小芽叢，長成4～6個小苗，經過20～30d培養(yǎng)，當小苗長到3～5cm時，又可以再進行轉瓶增殖，以后每20～30d可以轉瓶一次，一般可以轉接4～5次，每轉接一次，小苗的數量榀以增加4～6倍，繼代培養(yǎng)的苗叫繼代苗，一般沒有根，緊接著要進行生根培養(yǎng)，促進繼代苗萌發(fā)出根系，長出根莖葉都暗有的完整苗。這一環(huán)節(jié)需要更換培養(yǎng)基，在MS培養(yǎng)基的基礎上，要添加吲哚丁酸0.2～0.3mg/L，蔗糖15～20mg/L，瓊酯5～7g/L，溫度光照和管理同前面初代培養(yǎng)，多數品種經過15～20d，就可以生出4～5條新根，生根率可以達到100%，這時原原種苗就培育好了。

2 溫室馴化原原種苗

2.1 原原種苗圃地塊要求

在地塊的選擇上要遠離草莓生產區(qū)500m以上，前薦要求沒種過草莓，盡量不要選擇老蔬菜基地，要注意蚜蟲的防治工作。

2.2 種苗圃

馴化原原種苗的溫室也叫種圃，種圃要遠離草莓區(qū)，建防蟲網，澆水保溫生產設施，馴化過程中所有的措施，都要圍繞草莓植株不遭到病毒、蚜蟲感染，移栽選用72孔的穴盤，必須做到專用，營養(yǎng)土要用病菌含量少的山土加草炭，同時用棉隆土壤消毒劑，殺菌消毒處理，裝盤用木板刮平，用70%的百菌清可濕性粉劑600倍液澆水，用鑷子將根理順，順插入泥土，然后再澆一次水，用溯料膜覆蓋。

2.3 種苗圃管理

移栽后小棚內的溫度15～20℃，相對濕度前5～7d80%，以后降至50%，經過2個星期的時間，就可以拆去溯料膜覆蓋，馴化期間，溫室內溫度控制在15～20℃，穴盤保持濕潤，一般1～2d噴一次水，注意防蟲防病，及時拔出病葉雜草，每隔10d噴施一次蚍蟲啉防治蚜蟲，每隔20d噴施一次多菌靈防治百粉病，當小苗長到3～5葉，原原種苗就培育好了。繁殖原種苗除了要做防治工作，更重要的是要防治病毒感染。

3 高山繁育原種苗、良種苗

高山繁育原種苗、良種苗有利于減少病毒積累，高山土壤清潔，病原感染少，蟲害少；晝夜溫差大，培育健壯種苗保持脫毒種性。

3.1 繁育圃地選建

地塊宜選在水源條件好，地塊土壤肥沃、通氣、排水的砂壤土，前作未種植煙、馬鈴薯、蔬菜（西紅柿）、草莓等。

原種苗、良種苗繁育圃選在紅池壩風景區(qū)，海拔1400～1600m，5～9月氣溫15～25℃，降雨量充沛，（平均氣溫23～24℃以下）和短日照 （日照12.5～13.5小時之內）的條件經 10～15d的誘導開始花芽分化。繁育圃周邊種植生物帶隔離。

3.2 土壤培育

選建好的地塊合理設計苗床，根據原原種苗數量規(guī)劃地塊大小，做成廂寬1.5m的苗床、苗床高5～10cm，走道0.2m。精細整好的苗床無石塊，無異物，土壤疏松，酸性土壤用生石灰調酸，保證土壤酸堿度微酸致中性，并且用高效低毒農藥多菌靈消毒、辛硫磷殺滅地下蟲。畝用腐熟有機肥2000～3000kg，磷礦粉50kg、硫酸鉀15kg、復合肥10～15kg做基肥，全面撒施，將肥土扦細拌勻。苗床做好后，用塑料薄膜蓋好，讓有機肥充分腐熟，保溫保墑保肥，防雨水淋失。

3.3 條件控制，抑制花芽生長，防現蕾早花

草莓花芽分化好，開花結果早、成熟早、上是早、產量高、品質好。反之，草莓花芽分化差，晚開花晚結果，敗花畸形多、產量品質差。首先調理好土壤濕度件；培育適齡健壯苗；調控好溫度，用好低溫短日照誘導花芽分化；適量斷根、摘除老葉，摘除早蕾、早花；使用赤霉素控制花芽的分化和生長。防治病蟲害和雜草保證健壯生長。

3.4 小溫棚覆蓋控制過多雨水和遮陽網防強光照

高山降水多，三天兩日雨。當肥團手捏出水時，必須加蓋小拱棚遮擋雨水，防止只長苗、不長根，濕度80%以下。光照過強時要加蓋遮陽網。

3.5 原種苗

由原原種苗出來的第一代種苗叫原種苗，一般在露地進行生產，移栽氣溫達到10℃以上，定植緩苗后，可以進行第一次藥劑防治，以后每隔半個月防治一次，防治藥劑可以用蚍蟲啉。草莓苗從根莖部能夠抽生出多條匍匐莖，當匍匐莖長到20cm時，頂端出現小葉，形成子苗，子苗遇土生根又可以長出多條葡伏莖，形成孫苗，這些子苗、孫苗就是繁殖下一代的種苗。為繁育出更多的優(yōu)質原種苗，要做好以下工作

3.5.1 定植

要保持一定的株行距，行距1.5m，株距0.4～0.6m，帶土移栽（肥團），栽植深不埋心，淺不露根，澆透水。定植半個月左右為了控制花芽的分化和生長，促進植株莖葉生長，早抽生多抽生匍匐莖，形成較多的子苗，要進行赤莓素處理，噴施濃度為每升水兌50ml赤莓素，對著心葉噴施，每株噴施5～10ml，一般品種噴施一次就可以了，對于匍匐莖萌發(fā)較少的品種，可間隔7～10d再噴施一次，到后還要及時摘掉花果，促進多萌發(fā)匍匐莖。

3.5.2 肥水管理

抽蔓盛期，可追施一次NPK復合肥，畝施15kg，也可以結合打藥追施千分之3～5的磷酸二氫鉀，促進子苗生長，澆水要適當控制，以培養(yǎng)殖壯苗。當匍匐莖都抽生出以后，要及時進行引蔓整理，使其分布均勻，不交叉，避免匍匐莖纏繞一起，匍匐莖長到一定長度時出現子苗時，用潮土將子苗緊緊壓住，促進子苗生根，引蔓壓土要隨著子苗的發(fā)生，經常進行；要及時進行變異異株處理，嚴格去雜去劣，清除變異株，以保持種苗的純真，與品種正常植株性狀不符合的要嚴格去除。在冬季，要用塑料薄膜進行覆蓋，以免凍傷根莖部，春季隨著溫度的上升，草莓苗開始反青，萌發(fā)出新葉，去年的一株原原種苗繁殖出50株以的脫毒苗，當達到4葉1心時，就可以出土了。好的原種苗標準為：4葉1心，莖粗壯，根系發(fā)達。

3.6 良種苗

用原種苗繁殖出第一代種苗就叫良種苗。良種苗就是我們直接用來生產的種苗，良種苗的生產在計劃選擇上要求與草莓生產區(qū)有50m以上的間隔距離，上年沒種植草莓的露地，其它管理同原種苗生產的要求一樣，主要防病毒感染，增加繁殖系數，除雜去劣。不同的是在當年夏秋季節(jié)，可以根據栽培時間的需要分別出葡，滿足生產需要。