李 楨，趙珊珊，潘慶杰

（青島農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院，山東青島 266109）

種公馬配種可靠性評定（breeding soundness evaluation,BSE）最早于1975年正式用于種公馬繁殖力的評定。評定標(biāo)準(zhǔn)：一匹合格的種公馬在自然交配的情形下，一個配種期可使40 匹及以上的母馬中的75%的母馬受孕，或者在人工授精的情形下可使120匹母馬受孕；并且種公馬要表現(xiàn)出正常的性欲，陰莖外觀與功能正常，無生殖道感染，睪丸外觀與功能正常，間隔1 h 連續(xù)兩次采精，第二次采精的精液中直線運動、形態(tài)與功能正常的精子（progressively motile, morphologically normal sperm,PMMNS）數(shù)不低于10 億個。自從該標(biāo)準(zhǔn)公布以來，PMMNS 數(shù)一直是種公馬配種可靠性評定的最重要指標(biāo)[1]。

種公馬配種可靠性評定的目的，是確定種公馬的精神狀態(tài)與生理狀況是否能夠保證將充滿活力的精子、沒有傳染病原的精液輸送到母馬的生殖道或人工采集到假陰道。評定結(jié)果主要用于以下三個方面：一是對種公馬未來的繁殖力進(jìn)行估計，二是用于種公馬交易前的常規(guī)評估，三是確定導(dǎo)致種公馬繁殖力低下的因素[2]。評定人員不僅評估精子的質(zhì)量和數(shù)量（以及精子承受低溫或冷凍儲存的能力），還測定種公馬的性欲和交配能力，鑒別那些可能會遺傳給后代或會降低種公馬生育能力的先天缺陷、可能通過性傳播途徑傳染的傳染病及其他任何可能會降低種公馬使用壽命的物理因素[3]。同時，該方法也用于預(yù)測在標(biāo)準(zhǔn)的飼養(yǎng)管理條件下一匹種公馬的配種力與繁育效益[4]。

種公馬配種可靠性評定的指標(biāo)越多，涉及到的影響因素也會越多，對評定結(jié)果的影響也會越大，例如種公馬的價值、評定的目的（如買賣、臨床診斷）、常規(guī)的發(fā)情季評定等。但任何對種公馬配種可靠性的評定至少要包括對種公馬全面的體況檢查與精液品質(zhì)評定。一般來說，主要包括種公馬的歷史背景調(diào)查、身體外觀、生殖器、性欲和精液評定。評定者根據(jù)上述指標(biāo)對種公馬做出合格（satisfactory）、存疑（questionable）或不合格（unsatisfactory）的判定。種公馬精液質(zhì)量的合格標(biāo)準(zhǔn)：第一，種公馬相隔1 h兩次采精，第2次采集的精液中PMMNS 至少要有10 億個；第二，有兩個睪丸且睪丸的直徑最低要達(dá)8.0 cm；第三，產(chǎn)生與睪丸大小對應(yīng)的正常數(shù)量的精子[5]。

1 種公馬的歷史背景調(diào)查

評定之初，要確認(rèn)種公馬的身份，包括名字、年齡、品種、注冊號、體表形態(tài)學(xué)標(biāo)記、品種標(biāo)記以及毛旋；完整的種公馬背景信息應(yīng)包括使用現(xiàn)狀、血統(tǒng)、以往的配種表現(xiàn)、先前的繁殖力檢查結(jié)果、患病情況、受傷、藥物使用、疫苗接種、繁育管理（當(dāng)前與之前）以及現(xiàn)有的健康管理方案。

2 常規(guī)檢查

常規(guī)的體檢主要包括種公馬的體況評分，是否存在任何影響交配成功的缺陷或損傷（背部或腿部受傷），以及遺傳缺陷（隱睪癥、鸚鵡嘴、搖擺綜合征）。除了常規(guī)的實驗室檢查（如馬傳貧、血常規(guī)、血清、尿液分析、糞便蟲卵計數(shù)）外，循環(huán)系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)等更應(yīng)詳細(xì)檢查。

在常規(guī)檢查時，應(yīng)特別注意馬的被毛和皮膚質(zhì)量、蹄和腿的品相、眼睛及其他身體部位。此外，應(yīng)徹底評估馬是否存在遺傳缺陷，例如，在美國，所有可能用于繁殖的種公馬正式配種前都要測定是否患有遺傳性局部皮膚功能退化（HERDA）和多糖貯積性肌肉萎縮（PSSM）。

3 生殖器官檢查

主要包括對種公馬生殖系統(tǒng)，包括外部和內(nèi)部生殖器官進(jìn)行評估。

陰莖必須能完全縮回體內(nèi)，各外生殖器官不應(yīng)有任何異常腫脹或增生的現(xiàn)象。外生殖器官包括陰莖、陰囊和睪丸等都應(yīng)該觸診正常。一種觀點認(rèn)為，種公馬必須有兩個睪丸，只有一個睪丸的公馬不應(yīng)該用于配種。

如果可能的話，應(yīng)該評估種公馬的內(nèi)生殖器官。有時候由于種公馬的性情、非常規(guī)的保定手段、設(shè)備等原因，可能會導(dǎo)致內(nèi)生殖器官的檢查難以進(jìn)行，此時絕不應(yīng)該以犧牲種公馬與檢查人員的安全為代價而冒險進(jìn)行內(nèi)生殖器官檢查。直腸觸診和超聲檢查都可用于評估內(nèi)部生殖器官結(jié)構(gòu)，包括腹股溝內(nèi)環(huán)和各種附屬器官（如膀胱、尿道球腺和前列腺）的異常情況。

本項檢查一定要確保安全，由于有些種公馬在檢查人員檢查其內(nèi)生殖道時會發(fā)生咬、踢等行為，必要的時候可使用鼻拘或者使用鎮(zhèn)靜藥物。

4 性欲與交配能力評估

對種公馬進(jìn)行采精的過程也是一個可以對種公馬性欲與交配能力進(jìn)行評估的機(jī)會。在采精之前可對種公馬執(zhí)行如下操作：第一步，對種公馬試情，為采精做準(zhǔn)備；第二步，用中性肥皂和溫水清洗種公馬陰莖，特別注意尿道憩室，檢查是否有垢粒（beans）；第三步，徹底沖洗陰莖，用濕棉布擦干。

種公馬的性欲判別可以使用發(fā)情母馬來試情，同時可以測試其勃起與保持勃起的能力。隨后，可以評定種公馬爬跨母馬或臺馬的能力、將陰莖插入母馬或人工陰道的能力、抽插及完全射精的能力。

5 精液的評價

對精液進(jìn)行評價主要是評定精子品質(zhì)。評定時要求所有設(shè)備用具在37 ℃且沒有任何殺傷精子的因素下進(jìn)行。相關(guān)指標(biāo)的評定標(biāo)準(zhǔn)如下。

5.1 活力

在精液稀釋之前，首先進(jìn)行精子運動性能檢測。正常精子應(yīng)該運動迅速，而且60%～70%的精子應(yīng)在進(jìn)行直線運動（或時而呈現(xiàn)大的環(huán)形運動），若低于該參考數(shù)的精液質(zhì)量需要進(jìn)一步分析。

5.2 形態(tài)

精子形態(tài)結(jié)構(gòu)完整，與精子的頭頸部相連的中段部分常略偏一側(cè)，故精子常呈大的環(huán)形運動狀態(tài)。

5.3 濃度

種公馬每毫升精液中通常有0.8～1.0 億個精子，但在某些情形下精子濃度范圍擴(kuò)至0.5～9.5 億個/mL。

5.4 精液量

根據(jù)美國的相關(guān)資料顯示，種公馬每次射精的精液量參考范圍是20～200 mL,但目前生產(chǎn)中測定的一匹種公馬一次射精量通常在30～60 mL。

5.5 精液的外觀

正常的精液呈現(xiàn)淡乳白色，不應(yīng)該有任何“棕色或灰色”，否則意味著精液中有污垢，清洗陰莖可以減少精液被污染的機(jī)會。

6 配種可靠性評定（BSE）的新發(fā)展

自1975 年以來，不斷有新技術(shù)引入種公馬配種可靠性的評估中，以提高評估精子濃度、活力和形態(tài)的客觀性和準(zhǔn)確性[6]。這些方法包括精子濃度的熒光測定、計算機(jī)輔助精子活力分析（computer-assisted sperm motility analysis,CASA）和用于評估精子形態(tài)的差異干涉對比（differential interference contrast,DIC）的顯微鏡技術(shù)。然而與傳統(tǒng)的技術(shù)相比較，在應(yīng)用這些新技術(shù)于種公馬配種可靠性的評定時出現(xiàn)了一些新的問題。例如，以10 億個/mL 精子的標(biāo)準(zhǔn)判定一匹種公馬合格、存疑或不合格時，新技術(shù)的使用導(dǎo)致評定合格的種公馬數(shù)量減少[7]；CASA 技術(shù)用于評定種公馬精液品質(zhì)時，相關(guān)參數(shù)在配種季和非配種季之間變化顯著，在非配種季的測定值更低[8]。精子染色質(zhì)結(jié)構(gòu)分析（sperm chromatin structure assay, SCSA）用于測定精子DNA在酸性溶液中經(jīng)過一個短期的培養(yǎng)后發(fā)生變性的易感性。該技術(shù)基于這樣一個假說，精子DNA 在酸性溶液中發(fā)生變性的可能性更高而變得不穩(wěn)定，結(jié)果會導(dǎo)致精子受精力的下降[9]。

此外，人們在生產(chǎn)實踐中發(fā)現(xiàn)，在基于使用鮮精或凍精的配種方案中，種公馬精液評估應(yīng)有一定的限制條件。許多種公馬在某農(nóng)場或者具體環(huán)境條件下表現(xiàn)出繁殖力與精液品質(zhì)非常優(yōu)秀，但保存精液（無論是凍精還是冷藏鮮精）繁殖力或精液質(zhì)量都難以令人滿意。因此，如果條件允許，這些種公馬需要進(jìn)行重新鑒定，并對精液的處理方法進(jìn)行改進(jìn)，以最大程度地發(fā)揮種公馬的繁殖力[4]。因此，人們在評定種公馬，特別在使用任何新技術(shù)時，對使用該技術(shù)得到的結(jié)果的解讀對種公馬配種可靠性的評定有重要影響。而且，母馬及飼養(yǎng)管理因素也應(yīng)該包括在種公馬配種可靠性的評定中。

7 結(jié)語

2020 年9 月，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部與國家體育總局聯(lián)合印發(fā)《全國馬產(chǎn)業(yè)發(fā)展規(guī)劃（2020—2025）》，規(guī)劃中明確提出要加強(qiáng)馬匹育種創(chuàng)新。種公馬選育、評定、使用的創(chuàng)新必然是馬匹育種創(chuàng)新的主要環(huán)節(jié)，因為種公馬的性能表現(xiàn)直接影響下一代的繁育效率與育種進(jìn)展。中國有眾多的地方馬種資源，每個品種的繁殖性能有屬于本品種的特點。因此，有必要對各地方品種種公馬的繁殖性能評價建立相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)，包括評價項目、技術(shù)路線、實施主體、新技術(shù)的運用等，為中國馬匹育種創(chuàng)新提供重要的技術(shù)保障。