朱雅文，許博文，趙碩琪，郭錦晨

安徽中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)學(xué)院（合肥 230038）

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）是一種因免疫系統(tǒng)功能異常而導(dǎo)致以關(guān)節(jié)滑膜持續(xù)性炎癥，骨與軟骨進(jìn)行性、持續(xù)性破壞等為主要特征的自身免疫性疾病，一般發(fā)病率較高，占全球總?cè)丝诘?%，其中女性較男性更易發(fā)病，且難治療、難痊愈，須終身服藥治療[1-3]。RA 一直備受人們關(guān)注，但發(fā)病機(jī)制仍尚未完全清楚，目前認(rèn)為主要與遺傳基因、激素水平、情志等因素有關(guān)[4-7]。在臨床診斷上主要靠類風(fēng)濕蛋白因子等血清標(biāo)志物確診RA，治療上幾乎無特效藥，多用非甾體抗炎藥、糖皮質(zhì)激素等延緩病情。

近年來，由于生物科學(xué)技術(shù)的飛速發(fā)展，有研究者發(fā)現(xiàn)長(zhǎng)鏈非編碼RNA（long non-coding RNA，lncRNA）的表達(dá)異常對(duì)自身免疫性疾?。╝utoimmune diseases，AD）的發(fā)病至關(guān)重要。過去lncRNA被稱為“垃圾”RNA，不具有生物功能，但目前隨著對(duì)lncRNA研究的深入，有實(shí)驗(yàn)表明lncRNA可通過某些復(fù)雜的關(guān)系調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄機(jī)制的募集、轉(zhuǎn)錄后的修飾與表達(dá)以及表觀遺傳學(xué)[8]。此外，lncRNA 參與RA的免疫應(yīng)答、細(xì)胞分化等功能已成共識(shí)，可見lncRNA 的表達(dá)異常與RA 密切相關(guān)，這也意味著lncRNA在未來可能作為診斷或治療RA的重要依據(jù)。本文將近年來lncRNA 以及其與RA 之間的相關(guān)性與發(fā)病機(jī)制的研究進(jìn)展進(jìn)行論述，以期對(duì)RA 的發(fā)病機(jī)制闡明與治療提供參考價(jià)值。

1 lncRNA的概述

lncRNA 最初發(fā)現(xiàn)于1989 年的一小鼠H19 基因上，Brannan 等人[9]通過克隆人類H19 基因并進(jìn)行檢測(cè)，提出H19 RNA 不屬于經(jīng)典mRNA，但當(dāng)時(shí)并未對(duì)這未知RNA 做具體的研究。直到21 世紀(jì)初，人們對(duì)長(zhǎng)鏈非編碼RNA 的認(rèn)識(shí)愈發(fā)清晰，但仍未對(duì)lncRNA 進(jìn)行系統(tǒng)全面的定義與分類，目前普遍認(rèn)同的概念是lncRNA 是一類長(zhǎng)度大于200 核苷酸的RNA，主要存在于細(xì)胞核中，與mRNA 相似，但lncRNA穩(wěn)定性和保守性均較低，但具有更強(qiáng)的特異性，因缺少開放閱讀框，幾乎不具有編碼蛋白質(zhì)功能[10-11]。lncRNA 的分類多種多樣，若根據(jù)lncRNA 來源的不同，主要可分為以下幾類：①轉(zhuǎn)錄：由RNA 聚合酶II（RNA polymerase II，RNAPLL）催化脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)錄形成；②斷裂：在蛋白編碼基因的過程中，若其密碼子發(fā)生錯(cuò)位等情況，則轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物發(fā)生斷裂，從而形成一段長(zhǎng)鏈非編碼RNA；③重組：若染色質(zhì)發(fā)生了重組，會(huì)引起基因座（locus，loci）通讀，從而會(huì)產(chǎn)生一段含外顯子的lncRNA；④轉(zhuǎn)座：人體一些特定遺傳基因如轉(zhuǎn)座子等，在非編碼基因的復(fù)制時(shí)通過移位等效應(yīng)產(chǎn)生；⑤重復(fù)：部分基因組間串聯(lián)后存在重復(fù)的基因組序列，通過這一重復(fù)序列可獲得[12-13]。

2 lncRNA的生物學(xué)功能

盡管lncRNA的形成機(jī)制沒有相似之處，但學(xué)者通過研究發(fā)現(xiàn)lncRNA 主要以信號(hào)、誘餌、引導(dǎo)以及支架四類功能的形式參與人體生理病理變化[14]。

2.1 信號(hào)分子

一般情況下，部分lncRNA在人體生長(zhǎng)發(fā)育的特定時(shí)間與地點(diǎn)才能進(jìn)行轉(zhuǎn)錄，在特異性轉(zhuǎn)錄這一過程中，lncRNA 可以作為一種信號(hào)分子用于調(diào)節(jié)、控制其它基因的轉(zhuǎn)錄與表達(dá)，同時(shí)，調(diào)控的過程中減少了蛋白質(zhì)翻譯的參與，因而顯著地提高了lncRNA的調(diào)節(jié)與控制的速度。如Xist基因，在真哺乳亞綱哺乳動(dòng)物（Eutherian mammal）X 染色體失活時(shí)屬于關(guān)鍵起始基因，Xist可與經(jīng)歷核糖核酸重塑、染色體修飾等其它途徑獲得的蛋白質(zhì)結(jié)合組成“Xist RNA-蛋白質(zhì)”顆粒，利用該復(fù)合物作為一類信號(hào)分子來判斷X染色體是否處于失活狀態(tài)[15]。

2.2 誘餌分子

該類lncRNA又被稱為“分子海綿”，作為分子誘餌通過發(fā)揮“海綿作用”吸附受體或其它結(jié)構(gòu)與自身結(jié)合，以達(dá)到激活或抑制的作用使特定目標(biāo)基因的轉(zhuǎn)錄受到調(diào)控，以此調(diào)節(jié)基因的表達(dá)。如生長(zhǎng)特異性轉(zhuǎn)錄因子5（growth arrest-special transcript 5，GAS5）是一類細(xì)胞在應(yīng)激和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)時(shí)生存的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子，其轉(zhuǎn)錄出的部分產(chǎn)物的二級(jí)結(jié)構(gòu)與腎上腺皮質(zhì)激素的反應(yīng)元件相似，當(dāng)腎上腺皮質(zhì)激素發(fā)揮作用的時(shí)候，GAS5借助自身和腎上腺皮質(zhì)激素相似的結(jié)構(gòu)與激素相應(yīng)的效應(yīng)元件結(jié)合，同時(shí)GAS5 作為誘餌可與腎上腺皮質(zhì)激素的DNA 結(jié)構(gòu)域進(jìn)行結(jié)合，從而共同抑制腎上腺皮質(zhì)激素受體的功能[16-17]。

2.3 引導(dǎo)分子

具有引導(dǎo)作用的lncRNA 介導(dǎo)復(fù)合蛋白到特定DNA序列，再通過順式或反式機(jī)制調(diào)節(jié)靶基因的表達(dá)。一個(gè)典型的例子是HOXA 轉(zhuǎn)錄本遠(yuǎn)端（HOXA transcript at the distal tip，HOTTIP）可將信號(hào)從高階染色體構(gòu)型傳輸?shù)饺旧|(zhì)編碼中起作用。HOTTIP首先與WDR5蛋白直接結(jié)合，再通過HOXA位點(diǎn)招募該復(fù)合物進(jìn)入HOXA 特定的區(qū)域，發(fā)生H3K4 甲基化和HOXA 基因轉(zhuǎn)錄的激活[18]。再如lncRNA TINCR，胃癌（gastric cancer，GC）患者體內(nèi)具有誘導(dǎo)TINCR 轉(zhuǎn)錄作用的轉(zhuǎn)錄因子E2F1 異常表達(dá)，使得TINCR 能與STAU1（staufen1）蛋白結(jié)合從而影響CAKN2B mRNA的穩(wěn)定性與表達(dá)[19]。

2.4 支架分子

某些lncRNA類似“中央平臺(tái)”，因具有可與不同的蛋白或其它轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合的結(jié)合域，能精確調(diào)控生物體內(nèi)信號(hào)的傳遞。如INK4基因座中反義非編碼RNA（antisense non-coding RNA in the INK4 locus，ANRIL）可作為分子支架促進(jìn)WDR5 與HDAC3 結(jié)合形成“WDR5-HDAC3”復(fù)合物，再通過組蛋白修飾調(diào)節(jié)NOX1等靶基因的表達(dá)，上調(diào)ROS水平，促進(jìn)人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞（human aortic smooth muscle cells，HASMC）表型的轉(zhuǎn)變[20]。

3 lncRNA與RA發(fā)病的關(guān)系

RA主要與免疫系統(tǒng)的表達(dá)異常有關(guān)，其病理特點(diǎn)為滑膜細(xì)胞發(fā)生病變，包括血管翳的產(chǎn)生、成纖維細(xì)胞樣滑膜細(xì)胞（fibroblast-like synoviocytes，F(xiàn)LS）的增生以及免疫細(xì)胞的浸潤(rùn)等，再以骨和軟骨發(fā)生不可逆損害、出現(xiàn)功能喪失為最終結(jié)局[21]。lncRNA作為參與免疫調(diào)節(jié)的重要因子，有研究經(jīng)過lncRNA微列陣鑒定表明，RA患者的FLS與正常的成纖維滑膜細(xì)胞內(nèi)的lncRNA 相比差異較大，可能與RA 密切相關(guān)[22]。目前在臨床上治療與診斷RA仍具有很大的局限性，所以探求lncRNA 在RA 發(fā)病與發(fā)展過程中扮演的角色對(duì)未來探討RA的發(fā)病機(jī)制、治療以及預(yù)防有重要價(jià)值。

3.1 lncRNA與滑膜細(xì)胞增殖以及炎癥的關(guān)系

RA 的滑膜組織中存在于成纖維細(xì)胞樣滑膜細(xì)胞、單核/巨噬細(xì)胞（monocyte/giant eosinophilic cells，M?）、淋巴細(xì)胞以及炎性細(xì)胞等細(xì)胞，其中成纖維細(xì)胞樣滑膜細(xì)胞是滑膜組織中致病的關(guān)鍵細(xì)胞，存在于關(guān)節(jié)腔內(nèi)，具有維持關(guān)節(jié)正常平衡、基質(zhì)重塑以及調(diào)控關(guān)節(jié)炎癥反應(yīng)的功能。研究表明，若FLS過度增殖，可致血管新生、關(guān)節(jié)內(nèi)的骨與軟骨從而發(fā)生損害[23-24]。

Yue 等[25]研究發(fā)現(xiàn)Lnc-ITSN1-2的表達(dá)增加影響RA活動(dòng)性；RA患者的FLS中l(wèi)nc-ITSN1-2與正常人相比表達(dá)增加，核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域2（nucle?otide-binding oligomerization domain2，NOD2）是樹突狀細(xì)胞（dendritic cell，DC）、M?等細(xì)胞內(nèi)表達(dá)的一類模式識(shí)別受體，在調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答中起到了重要作用，該受體與lnc-ITSN1-2 的表達(dá)呈正相關(guān)。通過介導(dǎo)NOD2 的信號(hào)傳導(dǎo)途徑可使lnc-ITSN1-2 的表達(dá)下調(diào)，RA患者體內(nèi)的FLS分泌白介素17、INF-γ等炎癥因子進(jìn)而得到抑制，RA-FLS 炎癥反應(yīng)得到了緩解。Wu 等[26]通過大鼠研究進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)，PVT1 升高可抑制RA-FLS 凋亡，從而促進(jìn)增殖和炎癥反應(yīng)。在患RA大鼠的FLS中l(wèi)ncRNA PVT1增高，該基因可抑制具有緩解RA關(guān)節(jié)功能、減輕炎癥反應(yīng)作用的sirt6的轉(zhuǎn)錄與表達(dá)，故隨著sirt6的表達(dá)受到抑制，大鼠體內(nèi)FLS 的凋亡數(shù)量發(fā)生減少、滑膜細(xì)胞的增殖增加以及炎癥反應(yīng)加重。另有Yan 等[27]通過試驗(yàn)證明了ln?cRNA HIX003209 的增加可促進(jìn)RA 炎癥的進(jìn)展，通過RA 患者與正常人體內(nèi)PMBC 對(duì)比發(fā)現(xiàn)：RA 患者PMBC 中l(wèi)ncRNA HIX003209 的表達(dá)升高，一方面隨著該基因的表達(dá)增加，C-反應(yīng)蛋白、紅細(xì)胞沉降率以及類風(fēng)濕因子的數(shù)值出現(xiàn)升高，提示lncRNA HIX003209 與RA 的發(fā)病有關(guān)；另一方面，該基因的表達(dá)和與RA 滑膜炎有關(guān)的TLR2、TLR4 呈正相關(guān)，說明lncRNA HIX003209可通過提高M(jìn)?的炎癥反應(yīng)參與RA的發(fā)病。除此之外，已知轉(zhuǎn)錄因子核基因κB（NF-κB）信號(hào)通路通過介導(dǎo)釋放IL-6、IL-1β、TNF等因子從而參與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎發(fā)病的作用已被證實(shí)，lncRNA HIX003209 還可通過該信號(hào)通路提高M(jìn)?的數(shù)量與活性以調(diào)節(jié)關(guān)節(jié)內(nèi)的滑膜炎癥[28-29]。Yang 等[30]首次研究發(fā)現(xiàn)FLS 內(nèi)lncRNA 鋅指結(jié)構(gòu)反義轉(zhuǎn)錄本1（zinc finger antisense 1，ZFAS1）的沉默可降低RA 患者FLS 的侵襲與轉(zhuǎn)移，更有研究表明ln?cRNA ZFAS1 可通過抑制miR-27a 從而促進(jìn)RA-FLS 中細(xì)胞的遷移和侵襲功能，表明了lncRNA ZFAS1 對(duì)RA 的炎癥反應(yīng)至關(guān)重要。此外，Wang等[31]用微陣列分析法對(duì)比正常人與RA 患者血清中l(wèi)n?cRNA 的分布探析lncRNA uc.477 是否與RA 有關(guān)的研究發(fā)現(xiàn)，與正常人相比RA 患者血清中出現(xiàn)ln?cRNA uc.477上調(diào)和miR-19b下調(diào)的情況，再通過對(duì)RA 患者衍生的FLS 進(jìn)行定量實(shí)時(shí)PCR 分析進(jìn)一步證實(shí)了這項(xiàng)異常結(jié)果的存在，之后研究者發(fā)現(xiàn)ln?cRNA uc.477 可通過干擾pri-miR-19b 發(fā)揮促炎的作用從而參與RA的發(fā)病。綜上可見，lncRNA之所以與RA等自身免疫性疾病的發(fā)生有密切關(guān)系，與患者自身正常的組織發(fā)生了特殊反應(yīng)有關(guān)，如lncRNA與部分啟動(dòng)子接觸并與其轉(zhuǎn)錄出的激活物作用于基因敏感位，最后可導(dǎo)致RA等自身免疫性疾病發(fā)生。

綜上可見，lncRNA 對(duì)RA 患者的滑膜細(xì)胞增殖與炎癥反應(yīng)的作用尤為重要。

3.2 lncRNA在診斷與治療RA的應(yīng)用

RA的臨床診斷主要依靠血細(xì)胞沉降率（erythro?cyte sedimentation rate，ESR）、抗鏈球菌溶血素O（anti streptolysin O，ASO）、類風(fēng)濕因子（rheumatoid factor，RF）以及抗角蛋白抗體（anti keratin antibody，AKA）等作為標(biāo)志物，但一些指標(biāo)檢測(cè)時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)假陰性或只有在一些特定的情況下才能有數(shù)據(jù)的可靠性，更重要的是，這些標(biāo)志物的出現(xiàn)往往代表著RA患者的關(guān)節(jié)已經(jīng)出現(xiàn)了損害，大多患者已錯(cuò)過了最佳的治療時(shí)期[32-33]。在臨床治療上缺乏治愈RA 的特效藥，多用一些常見鎮(zhèn)痛藥（analgesics）、非甾體抗炎藥（nNonsteroidal antiinflammatory drugs，NSAIDs）和糖皮質(zhì)激素（glucocorticoid）等緩解病情，且該類藥物副作用多，長(zhǎng)久使用對(duì)人體損害較大。近年來隨著測(cè)序技術(shù)的進(jìn)步，專業(yè)研究者逐漸發(fā)現(xiàn)在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎疾病中一些上調(diào)或下調(diào)的LncRNA起到了至關(guān)重要的作用，并且有些可以用于RA的疾病的診斷與治療。

3.2.1 lncRNA作為RA的生物學(xué)標(biāo)志物 隨著科學(xué)技術(shù)的不斷提高，有學(xué)者通過轉(zhuǎn)錄組測(cè)序等技術(shù)發(fā)現(xiàn)在患有RA 患者體內(nèi)有很多異常表達(dá)的lncRNA，這一發(fā)現(xiàn)為今后尋找治療RA特效藥物的道路提供了匪淺的幫助。

Liu 等[34]研究發(fā)現(xiàn)lncRNA-CASC2 和IL-17 水平呈顯著的負(fù)相關(guān)，RA患者血漿中l(wèi)ncRNA-CASC2下調(diào)、IL-17 上調(diào)，lncRNA-CASC2 的過表達(dá)可促進(jìn)患者FLS 凋亡，并且具有抑制FLS 中IL-17 表達(dá)的作用，而IL-17的治療對(duì)lncRNA-CASC2的表達(dá)沒有明顯影響，故lncRNA-CASC2 的下調(diào)與RA 有關(guān)，可推測(cè)其可作為診斷RA的潛在標(biāo)志物之一。

HOX轉(zhuǎn)錄反義RNA（hox transcript antisense RNA，Hotair）是一類具有反式轉(zhuǎn)錄調(diào)控能力的長(zhǎng)鏈非編碼RNA，2007年，Rinn等[35]在人體成纖維細(xì)胞內(nèi)首次發(fā)現(xiàn)并簡(jiǎn)稱其為Hotair；2015 年，Song 等[36]為確定lncRNA 信號(hào)在RA 中的預(yù)后價(jià)值，研究發(fā)現(xiàn)Ho?tair的表達(dá)在RA患者分化的骨細(xì)胞和滑膜細(xì)胞中出現(xiàn)下調(diào)，但在血液中明顯上調(diào)，且Hotair的高水平表達(dá)可引起活性巨噬細(xì)胞的遷移以及抑制基質(zhì)基礎(chǔ)蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMP）家族的MMP-2與MMP-13 的表達(dá)；2017 年，Zhang 等[37]通過大鼠實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，Hotair 的過表達(dá)可導(dǎo)致白細(xì)胞介素17和白細(xì)胞介素23等炎性因子表達(dá)下調(diào)，并且抑制由脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）誘導(dǎo)的細(xì)胞增殖，不僅如此，高水平表達(dá)的Hotair借助p65對(duì)細(xì)胞核的拮抗作用調(diào)控由脂多糖處理的NF-κB的活性，從而降低IL-1β與TNF-α的表達(dá)水平，可見Hotair可抑制患有RA 疾病大鼠的滑膜炎性反應(yīng)并且具有促進(jìn)大鼠細(xì)胞增殖的作用，同時(shí)在診斷RA疾病方面有廣闊的前景。

由此可見，lncRNAs雖復(fù)雜多樣，但其在機(jī)體某一階段的上調(diào)或下調(diào)都可能與RA密切相關(guān)，并且可以作為疾病的診斷標(biāo)志物之一，這對(duì)臨床上治療RA具有重要的參考意義。

3.2.2 lncRNA在治療中的作用 Lu等[38]通過應(yīng)用實(shí)時(shí)反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（real-time reverse transcrip?tion polymerase chain reaction）對(duì)比檢測(cè)RA患者與正常人T細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)RA患者T細(xì)胞中有10種異常表達(dá)的lncRNA，其中LOC100652951與LOC100506036表達(dá)上調(diào)，再對(duì)RA 患者使用生物制劑后，兩者發(fā)生了截然不同的變化，前者的表達(dá)水平下降而后者出現(xiàn)升高，并且目前研究已發(fā)現(xiàn)LOC100506036的高表達(dá)可抑制鞘磷脂磷酸二酯酶1（sphingomyelin phospho?diesterase 1，SMPD1）的表達(dá)，從而可能促進(jìn)RA的炎癥反應(yīng)，這表明LOC100652951 與LOC100506036 在未來研究治療RA方向有重要作用。

在Li等[39]探究長(zhǎng)鏈非編碼RNA轉(zhuǎn)移相關(guān)肺腺癌轉(zhuǎn)錄物1（metastasis associated lung adenocarcinoma transcript 1，MALAT1）與RA 關(guān)系的研究中，實(shí)驗(yàn)表明沉默的MALAT1具有刺激白細(xì)胞介素6、白細(xì)胞介素10 和腫瘤壞死因子-α等炎性細(xì)胞因子的分泌以及β-連環(huán)蛋白的成核作用。此外，MALAT1可通過促進(jìn)CTNNB1啟動(dòng)子甲基化和抑制Wnt信號(hào)通路從而發(fā)揮抑制RA-FLS 增殖和炎癥反應(yīng)的作用，此項(xiàng)研究為RA的治療提供了一個(gè)新的候選靶點(diǎn)。如Pan等[40]研究發(fā)現(xiàn)，lncRNA MALAT1的表達(dá)與具有調(diào)節(jié)磷酸肌醇3激酶（PI3K）/AKT信號(hào)通路功能的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶（cysteinyl aspartate specific proteinase，caspcase）家族的caspcase-3、caspase-9呈正相關(guān)，PI3K/AKT 通路又與細(xì)胞的增殖、凋亡有關(guān)，槲皮素可通過升高lncRNA MALAT1的表達(dá)水平抑制該通路的激活從而促進(jìn)FLS凋亡以達(dá)到調(diào)控炎癥反應(yīng)。

Zhao 等[41]通過RNA 微陣列技術(shù)、建立RA 小鼠模型研究發(fā)現(xiàn)，過度表達(dá)的lncRNA LINC01197可改善RA-FLS 增殖和炎癥反應(yīng)，同時(shí)，LINC01197 可通過與miR-150的結(jié)合利用其“海綿作用”促進(jìn)THBS2的表達(dá)，從而使TLR4/NF-κB 信號(hào)通路失活以達(dá)到減輕RA炎癥的目的；但在RA模型小鼠的滑膜組織中LINC01197 表達(dá)水平較低，故從提高lncRNA LINC01197方面入手治療RA也是一個(gè)新的方向。

由上可見，在治療RA 等自身免疫性疾病時(shí)，可通過改變一些高表達(dá)的lncRNA 等針對(duì)性治療以影響該類lncRNA的表達(dá)來調(diào)節(jié)目標(biāo)蛋白，從而達(dá)到治療的效果。隨著研究的深入，越來越多的高表達(dá)ln?cRNA被發(fā)現(xiàn)具有作為識(shí)別RA標(biāo)志物的能力。

4 結(jié)語與展望

隨著測(cè)序技術(shù)的發(fā)展，部分lncRNA的結(jié)構(gòu)與功能逐漸清晰化，不再被稱為“垃圾”RNA，有研究者發(fā)現(xiàn)lncRNA與多種疾病密切相關(guān)，其中以Hotair等長(zhǎng)鏈非編碼RNA 為代表參與著RA 的發(fā)生發(fā)展，如促進(jìn)滑膜細(xì)胞的增殖、滑膜炎癥反應(yīng)、骨與軟骨的破壞等。此外，lncRNA 還可以用于診斷和治療RA，為臨床診治RA提供新的方向。但由于lncRNA數(shù)目繁多、結(jié)構(gòu)復(fù)雜、功能多樣，現(xiàn)存的問題還有很多，如：①ln?cRNA的命名：現(xiàn)如今越來越來的lncRNA被發(fā)現(xiàn)，但是在命名方面并未做到規(guī)范統(tǒng)一，并且人們約定俗成地認(rèn)為lncRNA 長(zhǎng)度大于200nt，不參與蛋白質(zhì)的編碼，近年來有研究者發(fā)現(xiàn)部分長(zhǎng)度不滿足200nt的RNA 也屬于長(zhǎng)鏈非編碼RNA 的隊(duì)伍，且有少數(shù)ln?cRNA具有較短的開放閱讀框，可參與一些小肽的編碼；②技術(shù)缺乏：即使近年來的測(cè)序技術(shù)已有較大的提高，人們對(duì)有些lncRNA 有一定的了解，但與ln?cRNA 的總數(shù)相比，我們發(fā)現(xiàn)與掌握的lncRNA 也只是總體的冰山一角，還有許多l(xiāng)ncRNA等待研究者們?nèi)ヌ剿骱土私?，并且就目前的技術(shù)而言，若想實(shí)時(shí)觀測(cè)體內(nèi)的lncRNA 仍無法實(shí)現(xiàn)，故針對(duì)lncRNA 的特點(diǎn)去創(chuàng)建專門的設(shè)備與研究體系也是未來研究方向；③潛在機(jī)制仍須探索：現(xiàn)已知某些lncRNA 異常表達(dá)與RA的發(fā)病有關(guān)，但其具體的因果關(guān)系仍需要研究者們?nèi)撔难芯??？偠灾?，lncRNA 的發(fā)現(xiàn)不僅為探究RA 的發(fā)病機(jī)制、診斷與治療作出了貢獻(xiàn)，同時(shí)在生命體分子機(jī)制方面也充當(dāng)著不可替代的角色，值得更多的研究者潛心探索。