淫羊藿總黃酮提取工藝研究

楊永東，羅 川，徐 廣，任星宇，羅 舜，鄧才富

（重慶市藥物種植研究所，重慶 408435）

淫羊藿屬于傳統(tǒng)中藥，能夠起到祛除風(fēng)濕、健骨強(qiáng)筋、補(bǔ)腎壯陽的作用，廣泛用于麻木痙攣、遺精陽痿、腎虛、風(fēng)濕痹痛等病癥的治療中[1]。淫羊藿中具有多種化學(xué)成分，如酚苷類、多糖類、黃酮類、木質(zhì)素類等，其最主要的活性成分是8 位異戊烯基[2～4]。本文綜述了近年來的淫羊藿總黃酮提取工藝，旨在為淫羊藿總黃酮的相關(guān)研究提供參考。

一、淫羊藿總黃酮提取工藝

1、熱水提取法

熱水提取法又名煎煮法，將藥物粉碎后放置煎煮容器中，加入適量水將藥物浸沒浸泡后加熱煮沸，然后濾出藥液，通常重復(fù)2～3 次，將每次濾出的藥液混合，達(dá)到濃縮目的。

王昌利等通過正交試驗(yàn)研究了淫羊藿提取工藝的相關(guān)因素，500 g 淫羊藿葉使用該方法可提取總黃酮2.67 g，有效成分含量達(dá)0.55%[5]。陳封政等通過新提取工藝研究了淫羊藿總黃酮的抗氧化劑量、時間與溶劑，結(jié)果顯示通過淫羊藿藥材量10倍劑量的0.3%濃度Na2S2O5蒸餾水進(jìn)行提取，微沸0.5 h，可從100 g 淫羊藿全草干粉中提取總黃酮量4.15 g[6]。

此方法使用的溶劑安全，成本低且操作簡單，適合工業(yè)化生產(chǎn)，但效率較低，且無法選擇性提取黃酮類成分。

2、醇加熱回流提取法

醇加熱回流提取法是提取黃酮類化合物應(yīng)用最廣泛的技術(shù)，通常使用乙醇為提取溶劑。馬慧萍等采取該方法進(jìn)行提取，通過正交試驗(yàn)優(yōu)化了提取工藝，最終使淫羊藿苷和總黃酮都達(dá)到較高提取率，分別為83.75%、81.03%，并且工藝的重復(fù)性較好[7]。

該方法成本低廉，對環(huán)境造成的污染較小，適合在工業(yè)化生產(chǎn)中推廣。但采取該方法提取同種黃酮化合物，其相關(guān)工藝參數(shù)及醇最佳濃度并不一致，可能是由于藥材中主要黃酮的含量不同。以該方法提取淫羊藿總黃酮，若選擇乙醇作為提取溶劑，濃度以50%～70%為宜。

3、超聲波輔助提取法

超聲波輔助提取法通過熱效應(yīng)、機(jī)械效應(yīng)與空化效應(yīng)破碎藥材的細(xì)胞膜及細(xì)胞壁，使化學(xué)成分進(jìn)入到細(xì)胞外或使溶劑從細(xì)胞外進(jìn)入到細(xì)胞內(nèi)，更好地溶出中原料中的有效成分。

張俊生等對淫羊藿的提取工藝進(jìn)行了考察，采用正交試驗(yàn)法進(jìn)行優(yōu)化，通過分析數(shù)據(jù)，最終確定其提取最優(yōu)工藝：選取適量藥材，加入30 倍藥材量的70%乙醇，進(jìn)行0.5 h 超聲提取，超聲溫度50℃，得到淫羊藿提取物中總黃酮質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2.246%[8]。侯瑩瑩等選用超聲波法提取淫羊藿總黃酮，采用響應(yīng)面法進(jìn)行優(yōu)化，得到最終提取工藝為加入32 倍量68%乙醇，超聲提取23 min，淫羊藿苷提取率約0.66%，接近理論提取率[9]。

與傳統(tǒng)方法相比，該提取方法更加優(yōu)異，能更好浸出藥材內(nèi)的化學(xué)成分，不僅操作更加簡單、安全，且提取率更高。

4、酸堿沉淀法

酸堿沉淀法多用于提取黃酮類化合物，提取原理為：黃酮類化合物存在弱酸性，能夠溶于堿水中。

劉茂順等在考察淫羊藿總黃酮提取工藝時，選用堿提酸沉淀法進(jìn)行提取，通過正交試驗(yàn)法優(yōu)化，根據(jù)數(shù)據(jù)分析結(jié)果，最終確定該提取工藝的最優(yōu)方法是：提取溶劑為0.3%NaOH溶液，回流提取2 次，料液比為1:40（g/mL），時間為2 h，濃縮比例1:4，鹽酸調(diào)節(jié)pH=3，朝鮮淫羊藿總黃酮提取率達(dá)6.67%[10]。

該方法不需要有機(jī)溶劑，不會對環(huán)境造成較大污染，但提取期間難以有效控制酸堿度，會對提取率造成一定影響。

5、微波輔助提取法

微波輔助提取法利用了微波輻射原理，通過電磁波作用于提取物，增加細(xì)胞內(nèi)部溫度，使細(xì)胞中的水分發(fā)生氣化，其所產(chǎn)生的壓力能夠破碎細(xì)胞壁，可更好地浸出細(xì)胞中的有效成分[11]。

周國保等在淫羊藿總黃酮提取中選用微波提取法進(jìn)行考察，提取物轉(zhuǎn)移率達(dá)到10.7%，提取物中淫羊藿苷含量達(dá)2.54%，淫羊藿總黃酮含量達(dá)29.7%[12]。

這種提取方法操作簡單且方便，用時較短。

6、超高壓提取法

超高壓提取法是指在常溫狀態(tài)下，通過流體靜壓力對料液進(jìn)行作用，通常為10～1000 MPa，保持一定時間預(yù)定壓力，當(dāng)內(nèi)壓與外壓平衡后立刻卸除壓力。通過該方法能使細(xì)胞中的內(nèi)外滲透壓急劇增加，進(jìn)而使細(xì)胞中的有效成分通過細(xì)胞膜進(jìn)入到提取液中，最終達(dá)到有效成分提取目的。

張翔等采用超高壓提取法對淫羊藿總黃酮進(jìn)行提取，并將超高壓提取法與傳統(tǒng)的熱水浸提法、超聲波提取法進(jìn)行了對比，結(jié)果表明：在淫羊藿標(biāo)志性黃酮類化合物含量和總黃酮提取率方面，超高壓提取法具有明顯優(yōu)勢[13]。

二、結(jié)語

淫羊藿總黃酮的提取工藝較多，本文對熱水提取法、醇加熱回流提取法、超聲波輔助提取法、酸堿沉淀法、微波輔助提取法以及超高壓提取法的具體操作方法及原理進(jìn)行了介紹。這幾種提取工藝均有各自的缺點(diǎn)及優(yōu)勢，其中醇提法提取率較高，但使用的乙醇不僅會對環(huán)境造成污染，同時容易發(fā)生爆炸與火災(zāi)，安全隱患較大。水提法更適合工業(yè)化生產(chǎn)，能夠提高提取規(guī)模，雖然提取率相對較低，但能夠通過超濾技術(shù)、增加水量等方法改善。酸堿沉淀法在提取期間不需要有機(jī)溶劑，不會對環(huán)境造成較大污染，但需對酸堿值進(jìn)行控制，控制難度較大。超聲波輔助提取和微波輔助提取均比傳統(tǒng)提取法更加優(yōu)異，能夠更好地浸出藥材的化學(xué)成分，具有安全性高、操作簡單、提取率高的優(yōu)勢。超高壓提取法在黃酮類化合物含量和總黃酮提取率方面有明顯優(yōu)勢。