侯敏娜，侯少平，楊楓玉，胡亞茹

(陜西國(guó)際商貿(mào)學(xué)院，陜西 咸陽 712046)

黃芪，又名綿芪，載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，是人們熟知的一類藥食同源植物，在我國(guó)山西、內(nèi)蒙、東北、甘肅、陜西等地均有人工栽培[1-3]，具有補(bǔ)氣升陽、固表止汗、利水消腫、生津養(yǎng)血、排毒排膿等功效。黃芪含有多糖類、黃酮類、皂苷類、氨基酸、葉酸等化合物及硒、鋅、銅等多種微量元素[1-2]?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究[4-9]表明，黃芪有提高免疫力、抗菌、抗腫瘤、抗病毒等作用，而黃芪中的多糖、皂苷均有一定的補(bǔ)氣作用，是其提高免疫力的主要成分。為闡明黃芪的補(bǔ)氣藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，作者采用紫外可見分光光度法對(duì)山西、陜西和甘肅等3個(gè)產(chǎn)地的10批次蒙古黃芪中的補(bǔ)氣主成分多糖和皂苷的含量進(jìn)行分析比較，以期為黃芪藥材基源考證奠定基礎(chǔ)，為黃芪藥材的深加工提供參考。

1 實(shí)驗(yàn)

1.1 藥材、試劑與儀器

蒙古黃芪(產(chǎn)地：山西、陜西、甘肅)，購(gòu)于陜西省西安市，經(jīng)陜西國(guó)際商貿(mào)學(xué)院中藥教研室雷國(guó)蓮教授鑒定為豆科植物蒙古黃芪屬的干燥根。

葡萄糖對(duì)照品(批號(hào)100080-201811)、齊墩果酸對(duì)照品(批號(hào)110709-201206)，中國(guó)藥品生物制品鑒定所；香草醛，天津天力化學(xué)試劑有限公司；苯酚，天津河?xùn)|區(qū)紅巖試劑廠；所用試劑均為分析純。

TU-1810型紫外可見分光光度計(jì)，北京普析；CP225D型電子分析天平，賽多利斯；MH-1000型電熱套，北京科偉；KQ5200DE型數(shù)控超聲波清洗器，昆山超聲儀器有限公司；2500C型多功能粉碎機(jī)，永康艾澤拉電器有限公司；HG-9075L型立式鼓風(fēng)干燥箱，北京亞太。

1.2 藥材預(yù)處理

取蒙古黃芪藥材，置于60 ℃恒溫干燥箱中干燥，粉碎，過10目篩，密封，備用。

1.3 蒙古黃芪提取物的制備

準(zhǔn)確稱取山西、陜西、甘肅等3個(gè)產(chǎn)地的蒙古黃芪粗粉各5.000 g，分別置于具塞錐形瓶中，加入60 mL純水，在60 ℃下超聲提取40 min，抽濾，濾液緩緩蒸發(fā)至干，于60 ℃恒溫干燥箱中干燥，即得蒙古黃芪提取物，稱重。

1.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

1.4.1 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制[10]

準(zhǔn)確稱取5 mg葡萄糖對(duì)照品，置于50 mL容量瓶中，用純水定容至刻度，得到濃度為0.1 mg·mL-1的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液。分別移取0.1 mL、0.2 mL、0.3 mL、0.4 mL、0.5 mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液于試管中，以純水為空白對(duì)照；加入1 mL 5%苯酚溶液，搖勻；再加入5 mL濃硫酸，沸水浴加熱30 min；迅速取出，冷卻至室溫；測(cè)定溶液在490 nm處的吸光度。以吸光度(A)為縱坐標(biāo)、濃度(c)為橫坐標(biāo)，繪制葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線，擬合得回歸方程A=170.3c+0.0149(R2=0.9993)，在0.004～0.005 mg·mL-1濃度范圍內(nèi)，葡萄糖濃度與吸光度線性關(guān)系良好。

1.4.2 齊墩果酸標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制[11-12]

準(zhǔn)確稱取5 mg齊墩果酸對(duì)照品，置于50 mL容量瓶中，用純水定容至刻度，得到濃度為0.1 mg·mL-1的齊墩果酸標(biāo)準(zhǔn)溶液。分別移取0.1 mL、0.2 mL、0.3 mL、0.4 mL、0.5 mL齊墩果酸標(biāo)準(zhǔn)溶液于試管中，以純水為空白對(duì)照；加入1 mL 8%香草醛溶液，搖勻；再加入5 mL濃硫酸，62 ℃水浴中保溫20 min；迅速取出，冷卻至室溫；測(cè)定溶液在544 nm處的吸光度。以吸光度(A)為縱坐標(biāo)、濃度(c)為橫坐標(biāo)，繪制齊墩果酸標(biāo)準(zhǔn)曲線，擬合得回歸方程A=1.653c+0.0215(R2=0.9982)，在0.004～0.005 mg·mL-1濃度范圍內(nèi)，齊墩果酸濃度與吸光度線性關(guān)系良好。

1.5 蒙古黃芪補(bǔ)氣主成分含量測(cè)定

取蒙古黃芪提取物，用純水配制樣品溶液，按1.4方法測(cè)定樣品溶液的吸光度，依據(jù)回歸方程計(jì)算樣品溶液中多糖/皂苷的濃度，按下式計(jì)算蒙古黃芪中多糖/皂苷的含量(Y，%)。

式中：c為樣品溶液中多糖/皂苷的濃度，mg·mL-1；V為樣品溶液的體積，mL；n為稀釋倍數(shù)；m為蒙古黃芪提取物質(zhì)量，mg。

2 結(jié)果與討論

2.1 蒙古黃芪多糖的含量

山西、陜西、甘肅等3個(gè)產(chǎn)地的10批次蒙古黃芪中的多糖含量測(cè)定結(jié)果見表1。

由表1可知，3個(gè)產(chǎn)地10批次蒙古黃芪中的多糖含量大小順序?yàn)椋焊拭C(31.34%)>陜西(30.96%)>山西(27.44%)。

表1 不同產(chǎn)地10批次蒙古黃芪中的多糖含量

2.2 蒙古黃芪皂苷的含量

山西、陜西、甘肅等3個(gè)產(chǎn)地的10批次蒙古黃芪中的皂苷含量測(cè)定結(jié)果見表2。

由表2可知，3個(gè)產(chǎn)地10批次蒙古黃芪中的皂苷含量大小順序?yàn)椋焊拭C(47.57%)>山西(43.30%)>陜西(38.77%)。

表2 不同產(chǎn)地10批次蒙古黃芪中的皂苷含量

綜上，甘肅蒙古黃芪中的多糖和皂苷含量均高于山西和陜西的，質(zhì)量較好；山西蒙古黃芪中的皂苷含量高于陜西的，而陜西蒙古黃芪中的多糖含量高于山西的。這與蒙古黃芪藥材的生長(zhǎng)環(huán)境，包括土壤、氣候、緯度、光照、水肥等多種因素有關(guān)，說明蒙古黃芪在甘肅能較好生長(zhǎng)，能更好地發(fā)揮其補(bǔ)氣功效。

3 結(jié)論

對(duì)山西、陜西、甘肅等3個(gè)產(chǎn)地的蒙古黃芪補(bǔ)氣主成分含量進(jìn)行分析比較，不同產(chǎn)地10批次蒙古黃芪中的多糖含量大小為：甘肅(31.34%)>陜西(30.96%)>山西(27.44%)，皂苷含量大小為：甘肅(47.57%)>山西(43.30%)>陜西(38.77%)。甘肅蒙古黃芪中的多糖和皂苷含量均最高，山西蒙古黃芪中的皂苷含量高于陜西的，而陜西蒙古黃芪中的多糖含量高于山西的。黃芪在甘肅能較好生長(zhǎng)，能更好地發(fā)揮其補(bǔ)氣功效。而蒙古黃芪中的多糖和皂苷除了補(bǔ)氣功效外，還有抗氧化性、提高免疫力等[13-15]特殊活性。本研究為補(bǔ)氣作用蒙古黃芪的產(chǎn)地優(yōu)選以及藥材深加工提供了參考。