雷東風,王松,彭峰,劉佳,3,黃奕,趙云煥,3,王俊鋒,3*
(1.河南省正陽種豬場,河南 駐馬店464000;2.信陽農林學院牧醫(yī)工程學院/信陽市動物健康養(yǎng)殖營養(yǎng)工程技術研究中心/信陽市畜禽生態(tài)養(yǎng)殖與環(huán)境控制重點實驗室,河南 信陽 464000;3.河南省大別山區(qū)生態(tài)畜禽健康生產工程研究中心,河南 信陽 464000;4.河南宏展畜牧科技有限公司,河南 信陽 464000)
在動物生產中氧化應激現(xiàn)象十分普遍,給動物健康和生產性能帶來不良影響。母豬是多胎動物,機體代謝比較旺盛,再加上營養(yǎng)、環(huán)境和飼養(yǎng)管理等諸多因素的影響,機體容易產生過量的氧自由基引發(fā)氧化應激,尤其是妊娠后期和哺乳期母豬氧化應激現(xiàn)象更為嚴重7[1]。據報道,在母豬飼糧中添加外源抗氧化劑以提高母豬自身抗氧化能力和完善抗氧化系統(tǒng)功能可有效緩解母豬氧化應激[2]。硒和茶粉均具有抗氧化作用,前者主要通過硒蛋白、與維生素E協(xié)同等抑制脂質過氧化、催化還原機體內有毒的過氧化物(包括過氧化氫的反應),消除過多自由基,保護生物體的膜結構與功能,從而提高母豬的抗氧化能力[3]。后者是通過提高機體抗氧化酶含量及活性,降低氧化代謝產物和自由基水平,保護機體抗氧化防御體系,從而提高機體抗氧化能力,進而減小母豬氧化應激造成的損害,其中發(fā)揮主導作用的是茶多酚(其中兒茶素約占80%)[4]?,F(xiàn)有研究表明,母豬飼糧中添加硒[5-6]、茶多酚[7]或兒茶素[8]等能夠不同程度地提高其血清中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性和總抗氧化能力(T-AOC),降低丙二醛(MDA)含量,同時還可改善母豬繁殖性能。然而,富硒發(fā)酵茶葉粉的添加對母豬抗氧化性能和繁殖性能的研究報道甚少。為此,本試驗通過在妊娠后期母豬飼糧中添加富硒發(fā)酵茶葉粉,探索富硒發(fā)酵茶葉粉對母豬繁殖性能及抗氧化性能的影響,以期為茶飼料資源的開發(fā)及其在母豬健康生產中的科學應用提供理論依據。
富硒發(fā)酵茶葉粉是將茶葉粉(信陽毛尖,購自當地普通市場,干燥后粉碎,過0.45 mm孔篩,40目;)與1%亞硒酸鈉粉(黃驊市津驊添加劑有限公司生產)以400∶1的比例通過三維運動混合機(浙江華聯(lián)制藥機械股份有限公司)進行混合,混勻后用二級菌種液(益生菌種為安徽科的生物科技有限公司生產)與其拌勻,其濕度約到手抓成形即可,然后裝入聚乙烯塑料袋中,壓實密封。待發(fā)酵完成后,將其發(fā)酵物于自然條件下晾曬,然后再在65℃恒溫條件下烘干,裝袋備用。
本試驗采用單因子試驗設計,選用膘情、預產期、胎次(2~5胎次)相近的健康且處于妊娠85±5 d的長大二元雜交母豬48頭,隨機分為4組,每組12個重復,每個重復1頭。對照組飼喂基礎飼糧,試驗組Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ在母豬基礎飼糧中分別添加3、6、9 g/頭·天富硒發(fā)酵茶葉粉。
妊娠母豬單欄飼喂,每天定時飼喂2次,分娩前7 d轉入分娩舍。試驗從母豬妊娠85±5 d開始至母豬分娩前1 d結束。富硒發(fā)酵茶葉粉分別于早上母豬喂料時將其拌入飼料中,確保吃完。母豬基礎飼糧均由河南宏展畜牧科技有限公司提供,其基礎飼糧營養(yǎng)水平(均為計算值)為消化能13.78 MJ/kg,粗蛋白18.15%,鈣0.24%,總磷0.45%,賴氨酸0.92%,蛋氨酸+半胱氨酸0.58%。其它日常管理(如免疫、驅蟲和消毒等)均按照豬場正常管理程序進行。
于母豬分娩12~24 h之內,分別記錄每頭母豬的窩產仔數和產活仔數,同時準確稱量仔豬初生個體重和初生窩重等。
1.5.1 血樣的采集與分析 試驗結束時,每組隨機選5頭母豬,前腔靜脈采血10 mL/頭,室溫避光靜置30 min后,4000 r/min離心15 min,吸取上清液,即血清,將之分裝于EP管中,置于-20℃冷凍保存?zhèn)溆?。按照試劑盒說明測定母豬血清T-AOC及MDA、GSH含量,試劑盒購自南京建成生物工程研究所。
1.5.2 乳樣的采集與分析 每組選取5頭母豬,在分娩后第3天,分別從前、中、后3個部位的乳頭采集乳樣,采樣前用干凈的毛巾沾溫水將乳房洗凈。每頭母豬共收集樣品約10 mL,-20℃保存。按照試劑盒說明測定SOD活性、T-AOC及MDA、谷胱甘肽(GSH)含量,試劑盒購自南京建成生物工程研究所。
試驗數據經Excel軟件初步處理后,采用SPSS11.5統(tǒng)計軟件進行單因素方差分析(one-way ANOVA),使用Duncan’s法進行多重比較,試驗結果用“平均值±標準差”表示。
由表1可知,各組母豬的窩產仔數無顯著差異(P>0.05)。與對照組相比,試驗組Ⅱ的母豬產活仔數和仔豬初生窩重均顯著增加(P<0.05),試驗組Ⅰ和Ⅲ的母豬 產 活 仔 數 和 仔 豬 初 生 窩 重 無 顯 著 差 異(P>0.05);試驗組Ⅰ的仔豬初生個體重最高,顯著高于對照組0.08 kg(P<0.05),但試驗組Ⅱ和Ⅲ的仔豬初生個體重無顯著差異(P>0.05)。
表1 富硒發(fā)酵茶葉粉對妊娠母豬繁殖性能的影響
由表2可知,各組母豬的血清MDA 含量和GSH含量均無顯著差異(P>0.05)。與對照組相比,試驗組Ⅰ和Ⅱ的母豬血清T-AOC活性均顯著增高(P<0.05),但試驗組Ⅲ的母豬血清T-AOC活性無顯著差異(P>0.05)。
表2 富硒發(fā)酵茶葉粉對妊娠母豬抗氧化性能的影響
由表3可知,各組母豬的初乳MDA 含量無顯著差異(P>0.05)。與對照組相比,各試驗組的母豬初乳T-AOC活性均顯著增高(P<0.05),但各試驗組組間差異不顯著(P>0.05);試驗組Ⅱ的母豬初乳GSH含量顯著增高(P<0.05),但試驗組Ⅰ和Ⅲ的母豬初乳GSH含量無顯著差異(P>0.05)。
表3 富硒發(fā)酵茶葉粉對妊娠母豬初乳抗氧化特性的影響
母豬的繁殖性狀通常包括總產仔數、產活仔數、初生重、初生窩重、21日齡窩重、斷奶仔數、斷奶重等指標,其中產仔數和初生重是衡量母豬產仔性能的重要指標。目前有關茶葉及其副產物在母豬上的應用報道較少。張幸彥等在后備母豬飼糧中添加100 mg/kg茶多酚后,母豬窩產仔數、窩產活仔數和21日齡斷奶仔豬數分別顯著提高了1.46頭、1.76頭和1.1頭,母豬斷奶7 d和21 d內發(fā)情率分別顯著提高了24.68%和7.14%,而斷奶10 d內發(fā)情間隔顯著縮短了1.45 d,但仔豬初生個體重和仔豬初生窩重均無明顯變化。同樣,肖勇[8]研究發(fā)現(xiàn),在妊娠前期母豬飼糧中添加200 mg/kg和300 mg/kg兒茶素均能顯著提高母豬窩產活仔數和健仔數,顯著降低母豬窩死胎數,但對仔豬初生重無顯著影響。本試驗通過在妊娠后期母豬飼糧添加富硒發(fā)酵茶葉粉后,結果顯示,6 g/頭·天富硒發(fā)酵茶葉粉組母豬產活仔數也顯著高于對照組1.5頭,同樣對仔豬初生重無顯著影響,但本試驗條件下仔豬初生窩重則顯著高于對照組2.65 kg,這與張幸彥等和肖勇的研究結果不同,可能是由于母豬品種、飼養(yǎng)環(huán)境、添加劑的成分等不同所導致。本試驗是在夏季持續(xù)高溫條件下進行的。據報道,高溫熱應激會對試驗母豬產生不良影響,如降低母豬產活仔數和死胎數[9]。因此,本試驗條件下母豬產活仔數的顯著增高,說明富硒發(fā)酵茶葉粉可能是改善母豬機體抗氧化功能、從而減少妊娠后期發(fā)生胚胎死亡的主要因素,本試驗中母豬血清抗氧化性能的升高進一步證實了這一點;仔豬初生窩重的增加,可能是由于富硒發(fā)酵茶葉粉增強了母豬對飼糧中營養(yǎng)物質的吸收和消化利用,優(yōu)化了腸道環(huán)境。研究表明,茶多酚和硒能有效提高動物的飼料轉化率[10],改善畜禽腸道主要微生物環(huán)境[11],其具體作用機制仍需進一步深入研究。
氧化應激,即機體自由基生成增加或(和)清除能力降低,引起機體氧化和抗氧化系統(tǒng)平衡紊亂,導致自由基在體內積累而引起的氧化損傷過程。母豬是多胎動物,營養(yǎng)代謝效率和機體動員頻率較高,機體會產生大量的自由基,極易誘發(fā)氧化應激,尤其是妊娠后期和泌乳期母豬氧化應激現(xiàn)象更為嚴重。生產中,在母豬飼糧中添加外源抗氧化劑以提高母豬機體自身的抗氧化能力和完善抗氧化系統(tǒng)功能是目前緩解母豬氧化應激的有效根本方式[12]。茶多酚是一類氧化還原電位很低的抗氧化劑,可通過提高機體抗氧化酶含量及活性,降低氧化代謝產物和自由基水平,保護機體抗氧化防御體系,從而提高機體抗氧化能力,進而減小母豬氧化應激造成的損害。硒是動物機體所必需的微量元素之一,可通過硒蛋白、與維生素E協(xié)同等提高母豬的抗氧化能力。此外,也有研究發(fā)現(xiàn),硒與茶多酚互作對提高機體抗氧化性能有協(xié)同作用[13-14]。本試驗在妊娠后期母豬飼糧中添加富硒發(fā)酵茶葉粉,結果表明母豬血清T-AOC活性顯著提高,這與張幸彥等和肖勇的試驗結果一致,說明富硒發(fā)酵茶葉粉在一定程度上可有效提高母豬血清抗氧化水平,這可能是茶葉活性成分茶多酚以及微量元素硒等共同作用的結果。但本試驗條件下,母豬血清MDA和GSH含量均無顯著變化,而是分別呈降低和升高趨勢,這與以上研究結果存在差異,原因可能與本試驗的環(huán)境條件(夏季持續(xù)高溫)、添加時間(母豬妊娠85±5 d至分娩前1 d)以及試驗母豬個體差異等因素有關。
母乳作為胎兒營養(yǎng)的主要來源,能否為胎兒提供充足的抗氧化物質顯得尤為重要。目前,關于富硒發(fā)酵茶葉粉對母豬初乳抗氧化性能影響的研究還未見報道,但關于其它天然抗氧化劑的研究已有報道。杜會堂等[15]在妊娠后期和哺乳前期母豬日糧中添加茴香,結果母豬初乳中T-SOD含量顯著提高,MDA含量則顯著降低,但GSH含量無顯著變化。這與本試驗結果不盡一致,本試驗中富硒發(fā)酵茶葉粉顯著提高母豬初乳T-AOC活性和GSH含量,而MDA含量無明顯變化,這種差異可能是試驗母豬群體數量小或添加時間短等因素所致,但總體來看,富硒發(fā)酵茶葉粉提高了母豬初乳抗氧化水平,其具體機理有待進一步研究。
妊娠后期母豬飼糧添加富硒發(fā)酵茶葉粉能改善母豬的繁殖性能和抗氧化能力,對仔豬初生窩重和仔豬初生重、分娩母豬的血清和初乳中T-AOC活性均有顯著影響。在本試驗條件下,從母豬產仔性能來看,富硒發(fā)酵茶葉粉的添加量為3~6 g/頭·天較好;從母豬血清和初乳抗氧化能力來看,富硒發(fā)酵茶葉粉的添加量為6 g/頭·天較好。