孫劍華，高小文，趙 艷，王浩挺

生物農(nóng)藥短穩(wěn)桿菌防治楊梅果蠅試驗(yàn)研究

孫劍華1，高小文2，趙 艷1，王浩挺1

（1. 鎮(zhèn)江應(yīng)用生物科技開發(fā)研究所，江蘇 鎮(zhèn)江 212009；2. 鎮(zhèn)江市潤(rùn)宇生物科技開發(fā)有限公司，江蘇 鎮(zhèn)江 212009）

【目的】楊梅果蠅是為害楊梅果實(shí)的主要害蟲，其發(fā)生危害期接近楊梅果實(shí)成熟期，不易使用化學(xué)農(nóng)藥防治。為尋求用于楊梅果蠅防治的生物農(nóng)藥，進(jìn)行了生物農(nóng)藥短穩(wěn)桿菌防治楊梅果蠅試驗(yàn)研究?！痉椒ā吭囼?yàn)采用慕衛(wèi)等“胃毒觸殺聯(lián)合毒力測(cè)定法”進(jìn)行室內(nèi)生物活性測(cè)定，田間藥效試驗(yàn)和農(nóng)藥對(duì)楊梅的安全性評(píng)價(jià)試驗(yàn)依照農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《NY/T 1464.68—2018》、《NY/T 1965.1—2010》實(shí)施。【結(jié)果】生物農(nóng)藥100億孢子/mL短穩(wěn)桿菌懸浮劑對(duì)楊梅果蠅有較高的生物活性，LC50值為1.663 6億孢子/L；且對(duì)楊梅安全，安全系數(shù)大于4.0；對(duì)楊梅果蠅具有較好的防治效果，在楊梅果蠅發(fā)生初期或楊梅果實(shí)硬核轉(zhuǎn)色期使用一次，使用劑量為稀釋300～700倍液，平均防效86.36%?？稍跅蠲饭壏乐沃型茝V應(yīng)用?！疽饬x】為楊梅果蠅的防治提供了一個(gè)生物農(nóng)藥品種，解決了楊梅果蠅在楊梅成熟期不能使用化學(xué)農(nóng)藥防治的難題，促進(jìn)綠色水果生產(chǎn)，提高了楊梅果實(shí)的質(zhì)量、品質(zhì)和果農(nóng)的經(jīng)濟(jì)效益。

生物農(nóng)藥；短穩(wěn)桿菌；楊梅果蠅；防治效果

【研究意義】楊梅果蠅（Meigen）是為害楊梅果實(shí)的主要害蟲，為雙翅目果蠅科，主要有黑腹果蠅、擬果蠅、伊米果蠅、高橋果蠅等，其中黑腹果蠅、擬果蠅為為害楊梅的優(yōu)勢(shì)種[1-2]。全球溫帶及熱帶氣候區(qū)均有分布，以腐爛的水果或植物體為食，不但為害楊梅，還為害桃、櫻桃、柑橘、西瓜、食用菌等。一般從楊梅果實(shí)轉(zhuǎn)色時(shí)開始為害，接近成熟的果實(shí)上蟲口數(shù)量逐漸增加，發(fā)生較重的楊梅園，果實(shí)危害率高達(dá)80%以上[1]。成蟲產(chǎn)卵于肉柱間，孵化的幼蟲在果肉間蛀食，致使被害果凹凸不平，果汁外溢，極易被病菌感染，直至霉?fàn)€、脫落，完全失去商品價(jià)值，嚴(yán)重影響楊梅的產(chǎn)量和品質(zhì)[1-4]?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】楊梅樹是我國(guó)的特產(chǎn)水果樹之一，果色鮮艷，酸甜適中，風(fēng)味獨(dú)特，在國(guó)內(nèi)外享有盛譽(yù)[5]，也是國(guó)內(nèi)城鄉(xiāng)居民喜食的優(yōu)質(zhì)鮮果。楊梅果實(shí)為裸果，食用安全是楊梅果蠅防治的關(guān)鍵，楊梅果實(shí)成熟期與果蠅為害期基本同步，防治中不易使用化學(xué)農(nóng)藥，因此，尋找安全有效的生物農(nóng)藥防治是生產(chǎn)上的迫切需求?！颈狙芯壳腥朦c(diǎn)及擬解決的關(guān)鍵問題】100億孢子/mL短穩(wěn)桿菌懸浮劑是鎮(zhèn)江市潤(rùn)宇生物科技開發(fā)有限公司生產(chǎn)的新型生物殺蟲劑，其有效成份為昆蟲病源生物細(xì)菌。該產(chǎn)品已在防治蔬菜小菜蛾、斜紋夜蛾、水稻稻縱卷葉螟、茶樹茶尺蠖、煙草煙青蟲、芋頭斜紋夜蛾上取得登記，對(duì)害蟲有較高的防治效果，且殺蟲速度快，防治效果好，對(duì)人畜和其他非靶標(biāo)生物安全[6-11]，為了進(jìn)一步摸清短穩(wěn)桿菌對(duì)楊梅果蠅的作用效果和對(duì)楊梅的安全性，特進(jìn)行了試驗(yàn)研究。

1 材料與方法

1.1 供試藥劑

100億孢子/mL短穩(wěn)桿菌懸浮劑（鎮(zhèn)江市潤(rùn)宇生物科技開發(fā)有限公司生產(chǎn)并提供）；60 g/L乙基多殺菌素（美國(guó)陶氏益農(nóng)公司生產(chǎn)，市售）；0.5%伊維菌素乳油（順毅股份有限公司生產(chǎn)，市售）。

1.2 供試作物

楊梅：早薺蜜梅、荸薺種、東魁。

1.3 供試害蟲

果蠅（）。

1.4 試驗(yàn)方法

1.4.1 室內(nèi)活性測(cè)定 參照慕衛(wèi)等“胃毒觸殺聯(lián)合毒力測(cè)定法”。將待測(cè)藥劑和對(duì)照藥劑分別用自來(lái)水稀釋成5個(gè)濃度，以自來(lái)水為清水對(duì)照，在培養(yǎng)皿底部鋪一濾紙，用移液槍準(zhǔn)確吸取稀釋好的藥液0.4 mL，緩慢滴加在濾紙表面，使之正好濕潤(rùn)。將蘋果切成2 cm×2 cm×1 cm大小，分別在不同稀釋好的藥液中浸1 min，取出移入相對(duì)應(yīng)的處理培養(yǎng)皿中，接入2日齡幼蟲10頭，重復(fù)4次，放入溫度為（25±1）℃、光周期為14 h:10 h（L:D）的培養(yǎng)箱內(nèi)，48 h檢查結(jié)果，以毛筆輕觸蟲體不動(dòng)為死亡標(biāo)準(zhǔn)。

1.4.2 作物安全性試驗(yàn) 試驗(yàn)設(shè)100億孢子/mL短穩(wěn)桿菌懸浮劑300倍液（3.33 mL/L）；150倍液（6.67 mL/L）；75倍液（13.33 mL/L）；清水對(duì)照，計(jì)4個(gè)處理。

供試楊梅樹為東魁、荸薺種、早薺蜜梅3個(gè)品種。以栽培地現(xiàn)有楊梅樹為單位，一棵楊梅樹為一個(gè)處理，每品種選擇樹勢(shì)相近，且便于試驗(yàn)操作的楊梅樹各16株編碼標(biāo)注，不同處理間留1株楊梅樹作隔離，4次重復(fù)，隨機(jī)區(qū)組排列。施藥時(shí)楊梅果實(shí)處于膨大期。用3WBD-20L型智能背負(fù)式電動(dòng)噴霧器施藥，每處理（株樹）的施藥液量為3 000 mL，對(duì)供試楊梅樹進(jìn)行均勻噴霧，確保供試楊梅樹冠均勻受藥。

調(diào)查方法：施藥前，每棵樹固定新梢10根，藥前和藥后21 d對(duì)固定新梢進(jìn)行長(zhǎng)度的測(cè)量，計(jì)算生長(zhǎng)速率與生長(zhǎng)速率抑制率；每棵樹在東、南、西、北4個(gè)方位各固定一根掛果的枝條藥前和藥后14 d調(diào)查楊梅果實(shí)的數(shù)量，計(jì)算落果率與落果率增長(zhǎng)率；藥前和藥后1，3，5，14 d對(duì)楊梅樹葉片變色、萎蔫、壞死、葉色進(jìn)行逐株目測(cè)調(diào)查。

1.4.3 田間藥效試驗(yàn) 田間藥效試驗(yàn)由南京農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)應(yīng)用技術(shù)中心、浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全與營(yíng)養(yǎng)研究所、福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所3單位承擔(dān)，2021年實(shí)施。3個(gè)單位試驗(yàn)劑量均設(shè)：100億孢子/mL短穩(wěn)桿菌SC700倍液、500倍液、300倍液3個(gè)劑量，0.5%伊維菌素乳油600倍液，清水對(duì)照，共5個(gè)處理，重復(fù)4次，隨機(jī)區(qū)組排列，每小區(qū)3株楊梅樹。于楊梅硬核轉(zhuǎn)色期按稀釋倍數(shù)兌水用電動(dòng)噴霧器均勻噴霧，施藥1次。南京農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)應(yīng)用技術(shù)中心供試驗(yàn)楊梅樹的品種為荸薺種，浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全與營(yíng)養(yǎng)研究所和福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所供試驗(yàn)楊梅樹的品種均為東魁。

調(diào)查方法：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)應(yīng)用技術(shù)中心，每小區(qū)調(diào)查3株，每株在東、南、西、北、中5個(gè)方位各摘取5顆相對(duì)一致的成熟楊梅。將各小區(qū)楊梅分別放入盛有5%食鹽水溶液的器皿中，20 min后調(diào)查器皿中漂浮的幼蟲數(shù)。

浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全與營(yíng)養(yǎng)研究所，每小區(qū)調(diào)查2株，每株按東、南、西、北、中固定5個(gè)方位各摘取5顆成熟度相對(duì)一致的楊梅，將每小區(qū)的楊梅放置裝有30%（V/V）乙醇水溶液的一次性杯中，浸泡2 h后撈出楊梅，調(diào)查杯中果蠅幼蟲數(shù)。

福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所，每小區(qū)調(diào)查3株樹，每株在東、南、西、北、中5個(gè)方位各摘取10顆相對(duì)一致的成熟楊梅，將各小區(qū)楊梅分別放入盛有5%鹽水溶液的容器中，浸泡20 min后調(diào)查器皿中漂浮的幼蟲數(shù)。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

1.5.1 室內(nèi)毒力測(cè)定 利用EXCEL編制的農(nóng)藥毒力測(cè)定數(shù)據(jù)處理程序進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計(jì)算平均死亡率、校正死亡率、回歸方程、LC50值及95%置信限。

1.5.2 作物安全性試驗(yàn)按下列公式計(jì)算