馬恒甲，馮曉宇，謝楠，王宇希，劉新軼，黃輝

(1.杭州市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院，浙江 杭州310024；2.大宗淡水魚產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系杭州綜合試驗站，浙江 杭州310024)

近年來，我國水產(chǎn)養(yǎng)殖集約化程度不斷提升，池塘循環(huán)水跑道養(yǎng)殖、集裝箱養(yǎng)殖、工廠化養(yǎng)殖等一批新型養(yǎng)殖模式發(fā)展迅猛。在長期高密度擁擠養(yǎng)殖環(huán)境中，魚長期處于應(yīng)激狀態(tài)，容易產(chǎn)生密度脅迫應(yīng)激，引起生理功能紊亂、免疫能力下降等問題，對漁業(yè)經(jīng)濟發(fā)展和養(yǎng)殖生態(tài)環(huán)境產(chǎn)生負面影響。因此本試驗針對大規(guī)格三角魴魚種，研究不同養(yǎng)殖密度對三角魴應(yīng)激水平、消化酶活力及抗氧化能力的影響，從而為進一步研究和養(yǎng)殖三角魴提供幫助。

一、材料與方法

1.試驗設(shè)計與飼料

試驗在杭州市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院水產(chǎn)研究所養(yǎng)殖池塘(10畝)中進行。試驗共采用9個網(wǎng)箱，網(wǎng)箱規(guī) 格1.8米×1.5米×1.8米；設(shè) 計 低(L)、中(M)、高(H)3種密度條件，分別放養(yǎng)三角魴10、20、50尾/箱，每組3個重復(fù)；試驗魚平均規(guī)格(108.39±4.04)克/尾，開展為期8周的養(yǎng)殖試驗。本試驗以商品配合飼料作為試驗用飼料，營養(yǎng)組成見表1。

表1 實驗飼料營養(yǎng)組成 克/千克

2.試驗魚與養(yǎng)殖管理

試驗用三角魴來自杭州的國家三角魴原種場，試驗開始前在大水泥池中暫養(yǎng)1周，投喂試驗用商品飼料。試驗前將暫養(yǎng)的魚饑餓24小時，然后挑選大小相近的三角魴300尾進行分組。試驗期間，采用表觀飽食投喂試驗魚。池塘水溫27～30℃，溶氧5.0毫克/升，氨氮0.03毫克/升，光照周期為自然光照，養(yǎng)殖試驗持續(xù)56天。

3.樣品采集及指標(biāo)測定

養(yǎng)殖試驗結(jié)束后，試驗魚禁食24小時，再將每個養(yǎng)殖桶中的魚依次捕出、計數(shù)、稱重，計算飼料投喂量。然后隨機取5尾魚，測量魚體重、體長，并用1毫升一次性針管抽血，立即低溫離心(4 000轉(zhuǎn)/分)15分鐘，取血清；抽血后的魚進行解剖稱肝臟重、內(nèi)臟重。同時取肝臟、腸道、腎臟、脾臟等在-20℃條件下保存?zhèn)錅y，消化酶活力、抗氧化酶活力及皮質(zhì)醇、血糖、生長激素等指標(biāo)采用南京建成試劑盒測試。

4.數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

試驗數(shù)據(jù)采用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示，利用SPSS軟件(版本26.0)進行統(tǒng)計分析，采用單因素方差分析(One-way ANOVA)方法進行檢驗，用Duncan’s多重比較方法檢驗處理間差異。取P＜0.05為差異顯著性水平。

二、試驗結(jié)果與分析

1.不同密度條件對三角魴血糖、皮質(zhì)醇及腦生長激素含量的影響(表2)

表2 不同密度條件下三角魴血糖、皮質(zhì)醇及腦生長激素含量

表2試驗結(jié)果顯示，高密度條件下三角魴血清葡萄糖含量顯著提高(P＜0.05)，各組皮質(zhì)醇含量無顯著性差異(P＞0.05)，高密度條件下三角魴大規(guī)格魚種腦生長激素含量顯著降低(P＜0.05)。

2.不同密度條件對三角魴肝臟和腸道消化酶活性的影響(表3、表4)

表4 不同密度條件下三角魴腸道消化酶活力

由表3所示不同養(yǎng)殖密度條件下三角魴大規(guī)格魚種肝臟蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶活力可知，中密度條件下，三角魴肝臟胰蛋白酶活力顯著高于高密度組(P＜0.05)，與低密度組無顯著性差異。中密度脂肪酶顯著高于低密度與高密度組(P＜0.05)。各組肝臟淀粉酶活力隨著密度的增高顯著提升(P＜0.05)。

表3 不同密度條件下三角魴肝臟消化酶活力

表4試驗結(jié)果顯示，不同密度條件下三角魴腸道胰蛋白酶、脂肪酶活力無顯著性差異(P＞0.05)。與肝臟淀粉酶活力相似，各組腸道淀粉酶活力隨著密度的增高顯著提升(P＜0.05)。

3.不同密度條件對三角魴抗氧化指標(biāo)的影響

本試驗對三種密度條件下三角魴大規(guī)格魚種血清、肝臟、腎臟及脾臟的抗氧化指標(biāo)進行比較分析，測定分析不同組織的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)、過氧化氫酶(CAT)、總抗氧化物酶(T-AOC)及丙二醛(MDA)含量。具體結(jié)果見表5～表8。

表5 不同密度條件下三角魴血清抗氧化指標(biāo)

表8 不同密度條件下三角魴脾臟抗氧化指標(biāo)

從表5可以看出，高密度條件對三角魴血清抗氧化能力產(chǎn)生顯著的影響(P＜0.05)，且隨著密度的增高抗氧化能力呈現(xiàn)降低的趨勢；高密度條件下三角魴血清MDA含量顯著升高(P＜0.05)。

表6中，高密度條件下三角魴肝臟SOD活力、GSH-PX活力顯著降低(P＜0.05)，MDA含量明顯高于L組和M組(P＜0.05)。各組之間CAT活力和TAOC活力統(tǒng)計分析無顯著差異(P＞0.05)，但高密度組的均值較低。

表6 不同密度條件下三角魴肝臟抗氧化指標(biāo)

高密度條件對三角魴腎臟抗氧化能力產(chǎn)生顯著的負面影響。表7試驗結(jié)果顯示，高密度條件下三角魴腎臟SOD活力、GSH-PX活力、CAT活力顯著降低；同時MDA含量顯著升高(P＜0.05)。低密度與中密度條件下，三角魴腎臟抗氧化指標(biāo)無顯著性差異。

表7 不同密度條件下三角魴腎臟抗氧化指標(biāo)

表8中，高密度條件下三角魴脾臟抗氧化指標(biāo)中SOD活力、GSH-PX活力及T-AOC活力顯著降低(P＜0.05)，同時MDA含量顯著升高(P＜0.05)。

三、小結(jié)

綜上試驗結(jié)果來看，高密度條件下三角魴血糖和皮質(zhì)醇指標(biāo)升高、淀粉酶活性升高；高密度養(yǎng)殖對三角魴抗氧化能力產(chǎn)生明顯的負面影響。